藏猪和长白猪对口蹄疫疫苗的免疫应答特性比较研究

目的 比较藏猪和长白猪接种口蹄疫O型灭活苗后免疫应答的差异,为研究藏猪的免疫遗传特性和抗逆性奠定基础.方法 分别用猪口蹄疫O型灭活苗肌注免疫8日龄藏猪和长白猪,在免疫前、免疫后1、2、4和6周采集抗凝血,计数血液中免疫细胞数量的变化,ELISA法测定血清中特异性抗体含量,定量RT-PCR分析免疫应答调控相关基因的表达水平.结果 疫苗免疫后4至6周,藏猪血液中白细胞数量和口蹄疫病毒特异性抗体的含量显著高于长白猪组(P<0.05),藏猪的TLR7和CD4基因表达水平也较长白猪明显升高(P<0.05),而长白猪的TLR4和TLR9基因的表达量在免疫后2至6周比藏猪有较明显的上升(P<0.05);藏猪的IL10基因的表达量在免疫后2周时显著低于长白猪组(P<0.05).结论 口蹄疫苗免疫后,藏猪的体液免疫应答水平和Th等免疫细胞数量显著高于长白猪,其TLR7基因表达水平也明显升高(P<0.05),而长白猪的IL10、TLR4和TLR9基因的表达量在免疫后不同时期较藏猪明显增多(P<0.05);说明免疫藏猪对口蹄疫的免疫应答反应显著强于长白猪,与其TLR7、CD4免疫基因的高表达和IL10基因较低水平表达相关.     

丙型肝炎的免疫应答及其疫苗研究

丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）是引起输血后肝炎和非甲非乙型肝炎的主要病原,它在世界范围内广泛流行,是慢性肝炎、肝硬化和肝癌的主要诱因。预防ＨＣＶ感染的关键是研制出有广泛反应性的疫苗,这就必须以ＨＣＶ在宿主体内引起的保护性免疫反应研究为基础。本文就近来对ＨＣＶ感染宿主后能否引起保护性免疫的实验证据及其对ＨＣＶ疫苗研究的意义等方面进行综述。     

核酸疫苗初免-蛋白疫苗加强的免疫策略提高日本血吸虫核酸疫苗免疫效果

为研制抗血吸虫疫苗提供实验依据,探讨了抗血吸虫SjGST-32核酸疫苗与蛋白疫苗联合免疫的免疫增强效应及免疫应答特征。将日本血吸虫DNA疫苗VR1012-SjGST-32与重组蛋白疫苗rSjGST-32分别在第0、2和4周免疫小鼠,在第6周攻击感染日本血吸虫尾蚴,攻击感染45 d后剖杀小鼠,计算减虫率、检卵率以及检测肝脏病理变化,观察免疫保护效果;检测小鼠血清中特异性IgG抗体滴度,T细胞增殖反应和抗原特异性CD4+IFN-γ+、CD4+IL-4+和CD4+IL-10+的数量,探讨免疫应答特征。结果显示,DNA初免-蛋白加强的联合免疫组的保护作用优于单独免疫组,显著提高了减虫率(42.3%)和减卵率(59.6%),并且能够显著减轻血吸虫虫卵对肝脏的病理损害;进一步发现,DNA疫苗和蛋白疫苗联合应用增强了机体T淋巴细胞增殖反应、抗体IgG滴度以及抗原特异性CD4+IFN-γ+的产生。这些研究为新型血吸虫疫苗的优化设计和合理应用提供了依据。     

两种不同类型无细胞百日咳疫苗诱导小鼠免疫应答分析

目的比较两种不同类型无细胞百日咳疫苗免疫小鼠后诱导体液免疫和细胞免疫应答的特点。方法将BALB/c小鼠分为3组(分别纯化Pa组、共纯化Pa组、PBS组),分别用稀释后的两种不同工艺生产的无细胞百日咳疫苗及PBS皮下接种,接种量0.5 m L/只,于第4周加强免疫,剂量与初免相同。于免疫后第1周、第4周和第5周取血,分离血清用于检测小鼠抗百日咳抗体Ig G水平(抗-PT和抗-FHA);同时于加强免疫后第7天,分离小鼠脾淋巴细胞,经刺激后,取其培养上清,用流式细胞微球芯片捕获法(cytometric bead array,CBA法)测定脾淋巴细胞经体外刺激后所产生的Th1、Th2和Th17型细胞因子的含量。结果对两种类型无细胞百日咳疫苗组检测的结果进行比较,在免后第4周,分别纯化Pa组和共纯化Pa组的抗-PT和抗-FHA Ig G水平差异无统计学意义(P0.05);但在免后第5周,分别纯化Pa组的抗-PT和抗-FHA Ig G水平均高于共纯化Pa组,差异均具有统计学意义(P0.05)。经PT刺激后诱导产生的细胞因子,分别纯化Pa组的IL-4含量高于共纯化Pa组,差异具有统计学意义(P0.05);分别纯化Pa组和共纯化Pa组的其他细胞因子差异均无统计学意义(P0.05)。结论两种类型的无细胞百日咳疫苗免疫小鼠后均能诱导产生体液免疫应答和细胞免疫应答。     

乙型肝炎疫苗与卡介苗、百白破、脊髓灰质炎疫苗联合免疫的免疫应答观察

本文报道在对婴幼儿实施基础免疹(BCC、DPT和TOPV)的同时,接种国产血源乙肝疫苗的免疫应答。对八月龄的婴儿血清学检测结果表明:乙肝疫苗接种组1(10μg)、2(20μg)抗-HBs达到临界保护(P/N≥10.0)的分别为80.65％,78.49％,未检出HBV感染标志物;未接种乙肝疫苗组的HBV感染率边10.5％。血清学检测还表明乙肝疫苗与BCG、DPT和TOPV等生物制品联合免疫应答是好的,各抗原间无干扰作用,提示乙肝疫苗可列入扩大免疫规划,并将有效地控制乙肝病毒感染。     

CpG ODN增强rHBsAg疫苗对小鼠免疫应答影响的研究

通过CpG寡核苷酸(CpG ODN)与重组HBsAg蛋白疫苗(rHBsAg)联合免疫C57BL/6BL/6小鼠,观察CpG ODN对小鼠免疫状况的影响。试验分对照、乙肝疫苗以及用乙肝疫苗加CpG三组,MTT法分别进行HBsAg特异性刺激淋巴细胞转化试验、HBsAg特异性刺激细胞毒性T细胞杀伤试验、自然杀伤细胞非特异性杀伤试验,以及ConA刺激淋巴细胞转化试验;ELISA测定HBsAb、INF-γ、IL-12和IL-4结果中,疫苗加CpG组抗原特异性转化试验指数为4.05±0.31;疫苗加CpG组抗原特异性CTL率为82.27±22.64,在统计学上差异显著(P<0.05);而HBsAb、INF-γ、IL-12的结果分别为51.85±14.41、802.25±104.25和373.62±66.58,与对照组及疫苗组比较,差异显著(P<0.05)。CpG ODN能作为一种新的免疫佐剂更好地增强重组乙肝表面抗原蛋白疫苗诱导小鼠产生高效的体液和细胞免疫应答。     

系统性白色念珠菌感染的免疫应答反应及疫苗研究进展

由于肿瘤化疗药物和免疫抑制剂的广泛应用,使系统性念珠菌感染的发病率明显升高,该病严重地威胁着住院患者的生命。在白色念珠菌感染过程中,特异性抗体、Th细胞和一些非特异性免疫细胞存在着复杂的调节机制。先天性免疫应答和获得性免疫应答机制的研究,对开发出有效的抗真菌疫苗具有重要意义。     

朝圣者接种四价脑膜炎球菌TT结合疫苗前后施用Tdap对脑膜炎球菌多糖抗体应答的影响

<正>朝圣者易受多重严重感染,需要接种多种疫苗。多糖蛋白结合疫苗含有破伤风类毒素(TT)、白喉类毒素或白喉类毒素突变体(CRM197)等载体蛋白。这些载体蛋白可能会与其他结合疫苗或含有破伤风或白喉的联合疫苗在同时或连续给药时发生相互作用。作者研究了在2015年参加朝圣前的澳大利亚成年朝圣者中单独和联合使用破伤风/白喉/无细胞百日咳(Tdap)疫苗与四价脑膜炎球菌TT结合疫苗(MCV4)与13价肺炎球菌CRM197结合疫苗(PCV13)联合使用时的免疫相互作用。将每个参     

破伤风类毒素减量的DTaP与Hib结合苗的联合疫苗免疫婴儿后的Hib抗体应答

正虽然联合疫苗有助于提高儿童对疫苗吸收率,但研究证明一些疫苗成分的免疫原性改变了。作者研究了改变DTaP和Hib联合疫苗中破伤风类毒素(TT)的量,是否会导致与分开而同时给药相似的免疫原性。作者评价了马萨诸塞州生物实验室(MBL)的白喉、破伤风和无细胞百日咳(mD TaP)疫苗联合b     

佐剂CpG-ODN与重组HBsAg疫苗联合免疫乙型肝炎病毒转基因小鼠的免疫应答研究

目的 以CpG-ODN为佐剂与重组HBsAg(rHBsAg)疫苗合用,研究其对乙型肝炎病毒转基因(HBV Tg)小鼠模型的免疫应答效果.方法 40只HBV Tg小鼠随机分为4组,每组小鼠分别注射rHBsAg疫苗(单用rHBsAg组)、rHBsAg疫苗+CpG-ODN(试验组)、rIFNα-2b(IFN组)、生理盐水(对照组).经多次免疫HBV转基因小鼠,于免疫前、后不同时间采血,动态观察各组小鼠血清中HBsAg量、抗-HBs阳性率和HBV DNA的变化,检测肝组织中HBsAg的表达.检测免疫小鼠的外周血T淋巴细胞亚群和白细胞介素2(IL-2)、IL-12(p70)以及γ干扰素(IFN-γ)的含量,分别检测免疫小鼠的脾细胞增殖和细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤功能并计算各组小鼠肝组织活性指数(HAI).结果 rHBsAg组和rHBsAg+CpG组在免疫小鼠后2周100%诱导抗-HBs;rHBsAg+CpG组能显著降低血清中的HBsAg量或使HBsAg转阴,rHBsAg+CpG组肝组织中HBsAg的表达量与血清中一样降低,并降低血清中HBV DNA的拷贝数.rHBsAg组的CD3+、CD4+、CD8+细胞在T细胞中所占百分比,IL-2、IL-12(p70)和IFN-γ的含量以及淋巴细胞特异性增殖和杀伤效应均明显高于对照组(P＜0.05).rHBsAg+CpG组与rHBsAg组比较,免疫小鼠产生更强的HBV特异性细胞应答(P＜0.05),且以Th1型细胞免疫应答为主.在rHBsAg+CpG组肝组织中出现大量淋巴细胞,肝脏的HAI在4个组中最高.结论 CpG-ODN作为佐剂可以增强重组HBsAg疫苗诱导HBV转基因小鼠产生抗病毒免疫应答,重组HBsAg疫苗辅以CpG ODN可作为免疫治疗慢性HBV感染的可行性途经.     

乙肝病毒RNA复制子疫苗与DNA疫苗对小鼠免疫效率的比较

为建立并获取更有效的乙肝疫苗,本实验通过将所构建的HBV RNA复制子疫苗和DNA疫苗分别免疫小鼠,检测细胞免疫与体液免疫的效果.结果表明,以pSFV为基础构建的疫苗载体免疫小鼠后采集的血清中抗体效价不随免疫剂量的增加而提高,在较低剂量免疫的时候,RNA复制子疫苗所产生的抗体效价优于DNA疫苗.并且RNA复制子疫苗在以较低剂量免疫后脾细胞CTL活性高于DNA疫苗.本研究证明HBV RNA疫苗比DNA疫苗表达效果更好,安全性更高,更具有应用前景.     

载体蛋白对多糖蛋白结合疫苗中多糖免疫应答的影响研究

多糖蛋白结合疫苗的研发及成功上市是预防细菌性传染病(bacterial infectious diseases)的突破,目前已批准上市的多糖蛋白结合疫苗主要有b型流感嗜血杆菌结合疫苗、肺炎球菌结合疫苗和脑膜炎球菌结合疫苗.载体蛋白的选择是多糖蛋白结合疫苗的免疫原性增强的关键因素,目前获批上市的疫苗主要使用的载体蛋白有破...     

CpG壳聚糖纳米颗粒对小鼠乙型肝炎疫苗免疫应答的影响

为探索高效安全的分子免疫增强剂,本实验设计合成含11个CpG基序的寡聚核苷酸(CpG ODN),制备壳聚糖纳米颗粒包裹CpG ODN,研究新型CpG ODN壳聚糖纳米颗粒(CpG-CNP)对人乙型肝炎疫苗的免疫佐剂效应.在肌注乙型肝炎疫苗免疫6周龄昆明小鼠的同时,肌注接种裸CpG ODN 30 pmol/只(A1组)和CpG-CNP 5 pmol/只(A2组),口服CpG-CNP 30 pmol/只(B组),并设生理盐水空白疫苗对照组(C组).在接种后每周采血,Sandwich ELISA检测实验小鼠IL-2、IL-4、IL-6、IgG、IgA和IgM水平以及特异性抗体(HbsAb)含量和免疫细胞数量的变化.结果 发现各实验组小鼠的白细胞介素、血清免疫球蛋白、乙肝特异抗体和外周血免疫细胞均较对照组显著增多(P<0.05);CpG-CNP肌注组小鼠血液的免疫球蛋白、特异性乙肝表面抗体和白细胞介素含量、淋巴细胞和单核细胞数量较A1组和B组显著增加(P<0.05).CpG-CNP口服组与裸CpG肌肉注射组无显著差异(P＞0.05).这些表明CpG-CNP不仅能高效诱导小鼠对乙肝疫苗的体液免疫应答,同时也显著增强其细胞免疫应答;CNP包裹可提高CpG的免疫刺激效应,减少CpG剂量,提示新CpG-CNP肌注或口服可用于HBV的免疫预防.     

两个NIH小鼠种群对不同种类的乙肝疫苗免疫应答效应的比较

目的比较两种不同的NIH小鼠种群基因组DNA中H-2q单倍型的百分比,对重组基因乙型肝炎疫苗（酿酒酵母）、重组基因乙型肝炎疫苗（CHO）、重组基因乙型肝炎疫苗（汉逊酵母）和治疗性乙型肝炎疫苗（乙克）免疫应答的影响。方法检测乙肝疫苗免疫效力用酶标法,测定乙肝疫苗的ED50值,再通过微量细胞毒法和PCR方法检测小鼠的H-2单倍型,计算不同品系小鼠H-2q的百分数,得出乙肝疫苗与不同动物种群的相关性。结果经验证,经1号NIH小鼠检测结果证实,重组基因乙型肝炎免疫效力依次为CHO〉汉逊〉酿酒,疗性乙型肝炎疫苗（乙克）效力检测合格,但经2号NIH小鼠检测结果显示除CHO疫苗合格外,其他三种疫苗检测结果均为不合格。基因检测结果为,1号种群NIH鼠含有H-2q型基因的百分比是96%,而2号种群NIH小鼠含有H-2q型基因基因百分比为30%,因此不同的q型基因百分比导致了不同的检测结果。结论根据本研究结果表明虽然NIH鼠的H-2单倍型中有q型基因,但不同来源的小鼠种群之间会存在差异,经不同的环境饲养后,小鼠的基因会发生不同的变化,因此在进行生物制品检定时,要注意不同品系小鼠及同一品系小鼠不同种群之间的差异对试验本身的影响。建立一种＂动物免疫＂的概念。     

MenACWY-TT与Tdap在青少年人群中共免疫和分别免疫时的免疫原性和安全性:一项Ⅲ期随机研究

此研究评估了以破伤风(T)类毒素为载体蛋白的四价脑膜炎球菌结合疫苗(MenACWY-TT)与白喉-破伤风-无细胞百日咳联合疫苗(Tdap)共接种与分别接种青少年成人的免疫原性和安全性。在此Ⅲ期、随机部分盲研究(NCT01767376)中,将11~25岁的健康者( N =660)随机(1∶1∶1)的在0个月接受MenACWY-TT和Tdap(共接种组)、0个月接受MenACWY-TT和1个月时接受Tdap(ACWY_Tdap组)或0个月接受Tdap和1个月时接受MenACWY-TT(Tdap_ACWY 组)。     

婴幼儿及学龄前儿童百日咳初免对4岁儿童记忆B细胞免疫应答的影响

<正>由博特百日咳杆菌引起的百日咳疾病在接种过百日咳疫苗的人群中再度发生。接种了全细胞百日咳疫苗(wP)和无细胞百日咳疫苗(aP)之后机体内百日咳抗体会迅速衰退,免疫力则主要来自于B细胞和T细胞的长期保护。荷兰根据计划免疫程序,给2、3、4和11月龄的婴幼儿分别接种wP和aP,4     

IL-18 DNA免疫对HIV-1核酸疫苗诱导的免疫应答的影响

为了研究白细胞介素-18(IL-18)基因对人免疫缺陷病毒(HIV-1)核酸疫苗诱导免疫应答的影响,将人IL-18基因插入到真核表达载体pVAX1中,构建了真核表达载体pVAX1-IL-18;将pCI-neoGAG联合pVAX1-IL-18或者pCI-neoGAG单独免疫Balb/c小鼠,检测免疫小鼠的特异性抗体和IFN-γ,同时观察免疫小鼠脾淋巴细胞增殖和小鼠特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)反应.酶切及测序结果表明成功地构建了人IL-18基因真核表达载体;与pCI-neoGAG免疫组比较,pCI-neoGAG联合pVAX1-IL-18免疫组小鼠血清的抗HIV-1p24抗体滴度降低(P<0.01);而与pCI-neoGAG免疫组比较,pCI-neoGAG联合pVAX1-IL-18免疫组小鼠血清的IFN-γ升高(P<0.01);pCI-neoGAG联合pVAX1-IL-18免疫组小鼠的脾淋巴细胞增殖实验刺激指数(SI)以及特异性CTL活性均高于pCI-neoGAG免疫组(P<0.01).IL-18基因联合HIV-1核酸疫苗免疫小鼠,可能增强特异性Th1细胞和CTL反应,白细胞介素-18基因对体液免疫有抑制作用.