一种简便适用的蛋白质水解方法

进行蛋白质的氨基酸的组成分析时,蛋白质水解液的制备是十分重要的一步.样品水解的好坏直接影响测定结果的准确性.经典水解条件是:6N HCI,110℃在封管条件下恒温水解24小时.在这条件下进行水解,蛋白质分子中的Ser,Thr,Trp,Cys,Tyr,Met仍可能因氧化、降解等反应影响回收率.为此,要求在封管时减压或充氮以提高回收率,但这又需要特殊装置,国内一般实验室不具备这样的条件.我们试用1.5ml聚丙烯带盖的离心管代     

一种简便适用的蛋白质水解方法

进行蛋白质的氨基酸的组成分析时,蛋白质水解液的制备是十分重要的一步。样品水解的好坏直接影响测定结果的准确性。经典水解条件是:6N HCI,110℃在封管条件下恒温水解24小时。在这条件下进行水解,蛋白质分子中的Ser,Thr,Trp,Cys,Tyr,Met仍可能因氧化、降解等反应影响回收率。为此,要求在封管时减压或充氮以提高回收率,但这又需要特殊装置,国内一般实验室不具备这样的条件。我们试用1.5ml聚丙烯带盖的离心管代替玻璃指管进行蛋白质水解。实验结果表明用这二种管子水解结果相同,而使用聚丙烯离心管可以免去加热封管等步骤,减少了样品的损     

一种简便快速的蛋白质免疫印渍法介绍

一种简便快速的蛋白质免疫印渍法介绍骆爱玲,王继伟,李佳格（中国科学院植物研究所,北京１０００４４）ＡＳＩＭＰＬＥＭＥＴＨＯＤＦＯＲＰＲＯＴＥＩＮＢＬＯＴＴＩＮＧＡＮＤＬＭＭＵＮＯＡＳＳＡＹＬｕｏＡｉ－ｌｉｎｇ;ＷａｎｇＪｉ－ｗｅｉ;Ｌｉｊｉａ－ｇｅ（...     

介绍一种简便快速的电洗脱方法

凝胶电泳是研究核酸、蛋白质等生物大分子的一项重要技术,也是 DNA 的限制性内切酶切割片断的分析、分离、纯化的一种不可缺少的方法。这样,就时常需要将某些大分子或片段从凝胶中分离纯化出来,所采用的方法很多,如渗滤法、连续电泳洗脱法、透析法等等。但是,所有这些方法都或多或少地受到诸如分子大小、回收率、纯化时间等方面的限制。联邦德国 Schleicher and Schuell 公司最近推出了新型的电洗脱仪,用于从凝胶中分离生物大分子,并可对样品进行浓缩。经我们实验室使用,效果很好。现特作介绍,供国内同     

介绍一种新的电泳技术——蛋白质的硝酸纤维纸转移电泳

硝酸纤维纸转移电泳首先应用于DNA片段的研究中,其原理是把琼脂糖凝胶电泳后分离的DNA各片段,再一次,转移到硝酸纤维纸上,然后在纸片上进行DNA-RNA杂交等实验。由于Southern最先报道,转移过程又类似于把墨迹吸到吸墨纸上,故称Southern Blot。此后Alwine等又把它应用到RNA的研究上,称为Northern Blot。Towbin等又扩展到蛋白质研究中,取名为Western Blot。最近Reinhart等将等电聚焦电泳后的蛋白质转移到硝酸纤维纸,称为Eastern Blot。这种方法为蛋白质检测提供了方便,也扩大了凝胶电泳技术的应用范围。本文综合国外的报道,并结合     

定量测定生物材料中少量蛋白质的一种简便方法

Lowry 等人通常使用定量测定蛋白质的方法需要操作40分钟左右,并且需要三种试剂。经 Miller 改进的这种技术,测定时间缩短约20分钟。通过以下方法可以缩短测定时间:用升高温度(50℃)以缩短显色时间和改用两种试剂,即用较小体积、较浓的碱性铜试剂和较多量、较稀的酚试剂。     

酵母菌分类中泛醌类型的一种快速简便的鉴定方法

泛醌类化合物(简称UQ)是生物体内的一类非极性化合物,在电子传递及氧化磷酸化中起重要作用。近年来,已普遍将它作为酵母化学分类的一种指标。泛醌作为分类指征的基础在于其异戊烯基侧链单元的长度。存在于酵母细胞中的泛醌类型通常为UQ_6、UQ_7、UQ_8、UQ_9、UQ_(10)。目前,对酵母菌泛醌类型的确定     

玻璃上打孔的一种简便方法

在实验室里,常需要在玻璃器皿等上钻孔,如自制玻片微滴培养凹阵,普通玻璃瓶改作滴液瓶用等。以往钻孔需要到专门的工厂或拥有专门的设备加工。几年来,我们采用一种很简便的方法加工,达到同样目的。方法如下:先洗净需加工的玻璃件,凉干或烘干,然后在打孔部位做好记号,用钢锉或砂轮把打孔或需要加工的部位打(锉)毛糙并滴上浓氢氟酸(HF40.0％),或者把需要加工的部位浸润于氢氟酸中,每隔1小时左右,用干布擦净残液,换滴新液;若玻璃厚度大,在擦净残液后,用钢锉或砂轮再打磨一下被腐蚀部位的表面再滴上新液,每隔1小时,如此反复进行,效果较好。通常1毫米厚薄的玻璃,打穿孔约需1天时间,1毫米以下的则很快就能腐蚀穿,2—3毫米厚薄的玻璃板需要的时间约3天,这也要视玻璃件是否便于加工而定,总之用这种化学腐蚀方法来加工小型玻璃器皿等,给实验室工作带来方便。注意事项:因氢氟酸是一种毒物和强烈的腐蚀剂,有刺激嗅味,加工时切勿与人体皮肤直接接触(可带塑     

一种简便快速检测质粒DNA的方法

简便、快速检测质粒DNA的方法,无论是 在筛选、鉴定新质粒或重组质粒的研究中都具有重要的意义。我们在将质粒pBR 322 DNA与 A DNA进行体外重组、筛选和鉴定重组子过程 中,摸索了一种简便快速检测质粒及重组质粒 DNA的方法。此法对菌体和溶菌产物不需任 何处理,比较简便易行     

一种简便快速筛选重组子的方法

目的：根据碱裂解法抽提质粒DNA的原理,研究应用快检缓冲液方法挑取重组子克隆,从而获得简单易行,快速方便,节省时间,提高工作效率的筛选重组子的方法。方法：不需抽提质粒,只要将菌落接入快检缓冲液后直接进行普通琼脂凝胶电泳分析,就可以快速筛选出重组子。结果：结果和提取质粒酶切鉴定结果一致。结论：经实验证明用快检缓冲液方法筛选重组子是一种简单易行,快速方便,节省时间,提高工作效率并且可靠的方法。     

一种简便的叶绿体色素纸层析的点样方法

“叶绿体色素的提取与分离”实验中 ,“点样”是用毛细管在滤纸上划滤液线的方法来完成的。现介绍一种用玻璃片“盖印”的点样法 ,优于毛细管点样方法。1　点样玻璃片制作挑选无缺损的载玻片 (75 mm× 2 5 mm× 1mm) ,用玻璃刀横向裁成 10 mm宽的小玻片 (2 5 mm× 10 mm×1mm ) ,此玻片即可用作点样。制成的点样玻片宽的一侧要保证平直无缺损 ,其宽度要小于滤纸条的宽度。因此 ,玻璃片的宽度为 10 mm,滤纸条的宽度可裁成 15 mm为宜。2　操作　　从小漏斗流出的滤液不要用试管收集 ,可直接滴1～ 2滴在 1块干净的载玻片上 ,用点样玻片宽的一侧…     

一种快速简便的噬菌体DNA的抽提方法

噬菌体DNA的制备和纯化是分子生物学研究中极为重要的一环,在基因库和eDNA库的建立,以及DNA克隆和筛选等方面都是不可缺少的。噬菌体DNA的制备可以通过噬菌体感染细菌在琼脂板上繁殖(称为平板法),也可以在液体培养液中繁殖(称为液体法)。平板法多用     

一种快速简便提取真菌染色体DNA的方法

本文描述一种快速、简便提取真菌嗜松青霉菌染色体DNA的方法,包括液体培养菌体,Tris-EDTA缓冲液中破碎菌体,通过酚、氯仿导戊醇和乙醚提取染色体DNA。用此法提取的嗜松青霉菌染色体DNA分子长度可达50     

一种简便、快速的大肠杆菌质粒转化方法

将受体菌与质粒DNA混匀直接在Ca2+离子选择平板上进行转化和筛选,其转化过程仅需2 min左右,并能得到105以上的转化效率, 可满足一般克隆工作的需要。 Abstract：After mixing the recipient cells and plasmids DNA, directly spread the mixture on selective media containing Ca2+. The whole process of transformation just needs 2 min or so, and could acquire the transformation efficiency of more than 105, which is enough to common gene cloning.     

一种快速简便的CaCl2质粒转化方法

介绍一种质粒DNA快速转化方法.质粒DNA加入感受态细胞,冰浴3～10min,涂布预热至37℃的平板,即可获得与常规转化方法相当的转化效率.操作步骤由5步减至2步,时间由2h减至3～10min.同时探讨了Ca2 浓度、4℃保存时间等因素对感受态细胞转化效率的影响     

一种简便,快速的真菌油脂提取方法

利用微生物发酵生产不饱和脂肪酸(ＰＵＦＡｓ)即将大规模工业化生产,诱变筛选富含ＰＵＦＡｓ的高产菌株成为工业育种的热门课题,快速判断真菌中油脂含量对菌株的筛选有着重要意义。对真菌进行油脂含量鉴定的方法有两种:一种是半定量方法———脂肪染色法,该法判断结果较困...     

简便快速分离天花粉毒蛋白的一种方法

 简便快速分离天花粉毒蛋白的一种方法孙建忠,季瑞华,王克夷（中国科学院上海生物化学研究所,上海２０００３１）天花粉是由多年生草质藤本植物栝楼（ＴｒｉｃｈｏｓａｎｔｈｅｓｋｉｒｉｌｏｗｉｉＭａｘｉｍ,Ｃｕｃｕｒｂｉｔａｃｅａｅ）的块茎制成,天花粉毒蛋白是...