紫花苞舌兰类原球茎诱导及植株再生

为建立紫花苞舌兰类原球茎离体再生体系,本研究以其腋芽为外植体,研究了不同激素浓度配比、添加剂对其类原球茎诱导、分化及生根诱导的影响。结果表明,外植体在1/2 MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.2 mg/L+AC(活性炭)0.2 g/L+CW(椰汁)10%培养基上培养35 d后,获得无菌苗,其成活率达80%以上;无菌苗的顶端分生组织在1/2 MS+10 mg/L Picloram培养基上的类原球茎的诱导率最高,达75%;类原球茎在1/2 MS+6-BA 2.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L培养基上培养45 d后分化出小苗,分化率为54%;小苗在1/2 MS+6-BA 0.5 mg/L+IBA 1.0 mg/L+AC 0.2 g/L培养基上生根培养35 d后,生根率达85%以上;小苗驯化移栽成活率达95%,长势良好。     

珠美海棠组培芽苗气培生根的某些生理基础

珠美海棠组培芽苗经８次以上继代分化,分化苗生长６０－８０ｄ,再经各处理后进行气培生根培养１５ｄ即可生根,生根率达８０％以上。     

纹瓣兰的无菌播种与试管成苗

纹瓣兰作为一种野生的兰花资源有其重要的保护及保存意义,本试验以纹瓣兰的种子作为外植体对其进行无菌播种,并成功诱导出再生植株.试验结果表明,在添加椰子水和6-BA的1/2MS培养基中纹瓣兰的种子可以在较短的时间内形成原球茎,其中以添加6-BA 2.0 mg/L+10%椰子水诱导效果最佳.添加6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L的1/2MS培养基最有利于纹瓣兰芽的分化,在分化培养50 d时其分化率可达到100%,且芽生长健壮.当生根培养基为1/2MS+NAA 0.1 mg/L时,纹瓣兰的生根率达95%;生根培养30 d后移栽,幼苗成活率达90%以上.     

火力楠种胚组培快繁研究

为探索火力楠组培快繁技术体系,以其优良家系种子为材料,从外植体选材与消毒、基本培养基、PVP浓度、生根促进剂类型及浓度等方面开展试验研究。结果表明:①应用0.1%的升汞溶液消毒胚6~9 min,无菌萌发率达60%~65%。②LY培养基适宜大部分胚系的增殖生长,35 d转接1次,增殖倍数高达3.50,高3.0 cm以上芽苗比率达50%以上。③应用4~8 g·L^-1浓度的PVP能够显著降低培养基褐化程度,促进芽苗抽高生长。④各胚系之间生根难易程度差异极显著,其生根率为0~93.6%,两种生根促进剂的最佳浓度均为8.5 mg·L^-1,ABT2号生根粉的生根诱导效果极显著(P<0.01)优于IBA。⑤生根瓶苗移植30 d后成活率达90%以上,未生根瓶苗移植60 d后成活率达80%以上。本研究为火力楠优良无性系的组培快繁研究及产业化生产提供理论与技术基础。     

韭菜胚根高效植株再生体系的建立

为了建立韭菜高频植株再生体系,以韭菜胚根的不同部位为外植体,研究了不同部位愈伤组织和芽的诱导。结果表明,胚根尖为诱导愈伤组织的最佳外植体,愈伤诱导率达到81.4%,出芽率达到73.3%;比较在不同激素配方上的愈伤组织诱导和芽的分化,在MS+1 mg/L BA+0.5 mg/L NAA+0.5 mg/L KT培养基中再生率最高,诱愈率达到80%以上,不定芽分化率达78.8%,繁殖系数为24.7;在MS+1 mg/L GA+0.5 mg/L KT不定芽伸长培养基中,30 d不定芽伸长为独立植株,比例为85.5%;独立的韭菜苗在1/2MS+0.3 mg/L IAA中生根率及根系状况最佳。通过该方法 130 d左右即可从胚根脱分化再生出植株。     

扁桃愈伤组织诱导及分化的研究

以扁桃优良品种'Naporeil'的茎段、叶片和花药作为外殖体,分别对其进行愈伤组织诱导和分化研究,以筛选愈伤组织的最佳诱导增殖培养基、分化培养基和生根培养基.结果表明,该品种以茎段、花药作为外殖体最易诱导获得愈伤组织,叶片不适宜作为外殖体诱导愈伤组织;愈伤组织的最佳诱导增殖培养基均为B5+0.5 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA,愈伤组织诱导率为100%,增殖倍数最高可达7倍;茎段愈伤组织的分化培养基为MS+0.2 mg/L NAA+0.8 mg/L 6-BA+0.5 mg/L ZT,分化率为71%;花药愈伤组织未见分化.由茎段愈伤组织再分化获得的不定芽在1/2MS+0.5 mg/L IBA培养基上诱导生根,并给以黑暗预处理可使生根率达80%以上.     

西伯利亚百合器官离体培养及结鳞茎的研究

通过对西伯利亚百合不同外植体离体培养、生根培养以及结鳞茎的研究,建立了组织培养快速繁殖技术体系。结果表明:诱导鳞茎不定芽分化的最佳培养基为M S+1.0 BA+0.5 NAA,大于2 cm叶片长的分化率达到135.67%;诱导叶柄不定芽分化的最适培养基为M S+0.5 BA+1.0 NAA,分化率达到28%;诱导叶片不定芽分化的最适培养基为M S+0.5 BA+1.0 NAA+0.1 KT,分化率达到12.50%。最适增殖培养基为M S+0.2 NAA,60 d后增值率达到318%;最佳结鳞茎和生根培养基为M S+9%蔗糖,蔗糖浓度为3%~9%时,对结鳞茎和生根具有促进作用,11%时,对其具有抑制作用。     

毛白杨叶片再繁和遗传转化体系的优化

主要对毛白杨的叶片再繁和遗传转化体系进行了优化,通过对影响组织培养效率的叶片分化方式、生根培养基、激素组合等因素的筛选和影响遗传转化效率的外植体选材、菌液浓度两个主要因素的研究,得出以下主要结果:叶片通过直接分化培养的方式,20 d即可形成丛芽;6-BA和TDZ(Thidiazuron)激素混合使用可促进叶片分化,叶片分化率可达100%;增加芽伸长步骤提高了单片叶的繁殖系数;生根培养基凝固剂使用水晶洋菜(Gelrite)代替琼脂(Agar),幼芽8 d即可生根,侧根多、长,有二级侧根,根的生长状态良好。对于转化效率,不同茎段继代数的叶片外植体均可用于进行转化,但是继代次数越多,转化效率越低,选择初代培养植株的叶片作外植体,愈伤形成率83.5%,阳性植株得率100%,转化效率可达55%以上。这是一种明显不同于已发表过的具有高效率的毛白杨遗传转化方法。叶片再繁采用直接分化方式,6-BA和TDZ激素混合使用和增加芽伸长步骤,提高了叶片的组织培养效率;生根培养基使用水晶洋菜做凝固剂,无需添加促进生根的激素,有利于植株生长;初代培养植株的叶片外植体,更适合毛白杨的遗传转化。     

多肉植物劳尔的组织培养

以多肉植物劳尔(Sedum clavatum)叶片为外植体, 通过诱导愈伤组织、愈伤组织分化新芽、芽生根和无菌苗移栽等步骤建立劳尔无菌苗快速繁殖体系。研究结果表明, 诱导劳尔叶片愈伤组织的最佳培养基为MS+3.0 mg·L^–1 6-BA+0.1mg·L^–1 NAA+1 mg·L^–1 KT, 诱导率达95.7%; 愈伤组织诱导分化新芽的最佳培养基为3/4MS+3.0 mg·L^–1 6-BA+0.3 mg·L^–1NAA, 分化率达80%; 芽生根的最佳培养基为1/2MS+0.03 mg·L^–1 NAA, 生根率可达94.89%; 采用珍珠岩:蛭石(1:2)作为基质移栽培养生根苗, 成活率达90%以上。实验成功建立了劳尔快速繁殖体系。     

石刁柏茎尖及茎段培养

西德鲁克鲁斯全雄株茎尖、茎段诱导芽分化：（）MS＋BAI．5＋IBA0．2诱导生根：（2）圣／ZMS＋BA0．05～0．25＋IBA0．5～2。5切取l～2cm长茎尖及茎段接种到培养基（）上,10d左右,芽迅速伸长,15d后芽周围开始形成丛生小芽,平均分化7～10个幼芽,分化率达100％。35d左右细弱幼芽继代复壮,连续培养25代,仍保持较高的幼芽分化率,仅芽数略有降低。切取2～3cm长幼芽移入培养基（）,14d即见生根,生根率达67％～gi％,平均根数为7～11条。1＊心＊A为10：1最佳,在此比值下,适当提高二者的浓度有利于降低畸根率,提高移栽成活率。…     

水稻幼穗培养高效再生系统的建立

本文测试了不同基因型幼穗取材时期、消毒方式、4℃下处理时间、愈伤组织诱导、分化及生根条件等对水稻幼穗培养再生成株的影响,实验结果表明,在优化条件下,籼稻的绿苗分化率在85%以上,成苗率115%左右;粳稻的绿苗分化率在90%以上,成苗率130%左右;粳型广亲和的绿苗分化率、成苗率分别达到85%和115%以上.由此建立了一套高效、可靠、重复性好的水稻组织培养再生系统,为水稻遗传转化的顺利进行奠定了基础.     

水稻幼穗培养高效再生系统的建立

本文测试了不同基因型幼穗取材时期、消毒方式、4℃下处理时间、愈伤组织诱导、分化及生根条件等对水稻幼穗培养再生成株的影响,实验结果表明,在优化条件下,籼稻的绿苗分化率在85%以上,成苗率115%左右;粳稻的绿苗分化率在90%以上,成苗率130%左右;粳型广亲和的绿苗分化率、成苗率分别达到85%和115%以上。由此建立了一套高效、可靠、重复性好的水稻组织培养再生系统,为水稻遗传转化的顺利进行奠定了基础。     

非洲菊试管苗叶柄愈伤组织的诱导与分化研究

以非洲菊(Gerbera janesonii Bolus)品种‘Sunanda'试管苗幼叶的带叶叶柄为材料,研究了培养基、外植体类型和继代次数等因素对愈伤组织诱导及分化的影响.结果表明:培养基上附加不同植物生长调节剂所诱导出的愈伤组织在形态和分化能力上存在显著差异,叶柄基部诱导愈伤组织的最适培养基是MS+TDZ 0.3 mg L-1+NAA0.1 mg L-1.外植体以叶片长度＞0.5 cm,叶片已舒展,颜色嫩绿的幼叶最佳,继代培养基以MS+KT 1.0 mg L-1较适宜,愈伤组织在分化培养基MS+6-BA 2.0 mg L-1+NAA 0.1 mg L-1上分化出芽的同时还会增殖,分化率达87.4%,继代培养2次的愈伤组织分化率可提高至95%.不定芽在生根培养基1/2MS+IBA0.6 mg L-1上的生根率达100%,试管苗移栽45 d后,成活率达97%以上.     

液体悬浮培养促进蔓茎堇菜高效再生的研究

液体悬浮培养具有促进蔓茎堇菜芽分化的作用。以叶片为外植体在培养基MS 2,4-D1.5 ZT1.0中诱导出生长良好的愈伤组织。愈伤组织在液体培养基MS 6-BA1.0 NAA0.25中振荡培养12d后（转速为90r/min）,转入固体培养基MS 6-BA2.0 NAA0.5中继续培养14d,芽分化率可达97.5%,转接至生根培养基MS NAA2.0 6-BA0.25中培养1个月后可移栽,成活率在90%以上。     

西兰花再生体系的建立与优化

目的:以西兰花无菌苗为材料,对影响西兰花再生的各种素进行研究,建立并优化西兰花的再生体系.方法:用组织培养法,对西兰花的外植体进行诱导生芽、生根.结果:不同品种的再生率差别较大,珠绿和青秀两个品种的再生率达91%以上,而鼎丰一号仅为80.3%;培养6 d 的下胚轴分化能力最强;当培养基中添加3 mg/L 6-BA 和0.2 mg/L IAA 时,下胚轴的分化率最高,玻璃化程度也降到最低;当培养基中添加0.2 mg/L IBA 或0.2 mg/L NAA时,可成功诱导不定芽生根.结论:建立并优化了西兰花再生体系,为西兰花遗传转化体系的建立奠定了基础.     

烈香杜鹃的离体培养和高效植株再生

以烈香杜鹃嫩茎为外植体,应用均匀设计法筛选其最适合的嫩茎基部直接再生芽苗和生根培养基。结果表明,最适合烈香杜鹃嫩茎基部直接再生芽苗的诱导培养基为DR＋2．30mg·L-1 TDZ＋0．05mg·L-1 IAA＋1．80mg·L-1 KT,诱导率为99．6％;生根培养基为1／2DR＋0．07mg·L-1 IAA＋0．02mg·L-1NAA,生根率达99．7％以上。以再生植株茎节为材料进行快速繁殖,在35d的培养周期内,每段增殖倍数平均达5以上。     

短距槽舌兰的驯化栽培与快速繁殖

为促进短距槽舌兰的资源驯化栽培, 本文对其生物学特性、生长发育规律和组织培养快速繁殖技术进行了研究。对开花植株进行人工授粉, 取种子进行观察发现, 授粉后140 d 种子才达到成熟状态; 将其接种在无植物生长调节剂的RE培养基上, 萌发率可达90%以上。将萌发的种子转接在RE＋0.2 mg·L-1 NAA＋0.2 mg·L-1 6-BA＋5 g·L-1椰粉＋2 g·L-1水解酪蛋白的培养基上可诱导原球茎大量增殖。最适壮苗生根培养基为RE＋0.6 mg·L-1 NAA＋0.2 mg·L-1 6-BA＋80 g·L-1香蕉泥, 生根率100%。试管苗移栽到直径0.3-1.7 cm的小号细树皮盆栽中, 成活率在95%以上, 试管苗栽培6个月后可分化花芽, 这为短距槽舌兰的产业化生产奠定了基础。     

无芒雀麦组织培养再生体系的建立

以无芒雀麦(Bromus inermis)的成熟种子为外植体,建立其组织培养再生体系,筛选最适愈伤组织诱导、分化及再生植株生根培养基,为之后的转基因实验奠定基础。结果表明:MS+1 mg·L~(-1) 2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)+0.5 mg·L~(-1) 6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)为最佳愈伤组织诱导培养基,诱导率为68.7%;MS+2 mg·L~(-1)萘乙酸(NAA)+1 mg·L~(-1) 6-BA为最佳分化培养基,分化率高达100%;不添加任何植物生长调节物质的1/2MS培养基为最佳生根培养基;组培苗移栽至蛭石与珍珠岩3:1(V/V)的基质中,30 d后成活率可达70%~80%。     

罗布麻离体培养及快繁技术的研究

采用野生罗布麻(Apocynum venetamL.)顶芽及芽下茎段为外植体进行离体培养及快繁技术优化的研究。结果表明:适宜罗布麻离体培养的基本培养基为MS,适宜外植体起始分化的培养基为:MS BA 1.8mg/L KT 0.5mg/L,分化率为88.9%以上;适宜茎段增殖的培养基为MS BA 2.0mg/L KT 0.5mg/L,繁殖系数最高达5.67倍,通过切段繁殖还可提高繁殖系数3倍;适宜生根的培养基为MS IBA 0.5mg/L NAA 0.02mg/L,生根率达90%以上。     

红叶石楠离体植株再生频率的影响因素研究

以红叶石楠带芽茎段及叶片为外植体,分析激素和培养条件等因子对愈伤组织诱导及植株再生的影响。结果表明,MS+0.10mg/L 2,4-D+0.50mg/L NAA+0.50mg/L 6-BA+0.50mg/L KT为最佳愈伤组织诱导培养基,暗培养的愈伤组织诱导率高于光培养,其愈伤组织诱导率可达100%(带芽茎段)和98%(叶片)。MS+0.50mg/L IBA+2.00mg/L 6-BA+2.00mg/L KT为最佳分化增殖培养基,分化率91%以上,增殖倍数6.8以上,均达到最高。1/2MS+0.50mg/L IBA+0.01mg/L NAA为最佳生根培养基,生根率92%,生根量4.4根/株,均达到最高。