鱼类基因组结构研究——Ⅰ.染色体的限制性内切酶显带

本文报道了1种新的鱼类染色体研究方法——限制性内切酶显带技术。我们应用限制性内切酶Bsp631等分别对黄鳝和长春鳊的染色体进行显带处理,结果表明,Bsp631能使这两种鱼的染色体发生稳定的带纹分化:适度的处理产生多重的G-带状带型,而过度的处理则产生特殊的限制性内切酶抗性带型。根据显带结果分析,我们对鱼类染色体限制性内切酶显带的可行性和实用价值进行了讨论。     

染色体显带机制研究若干进展

染色体分带技术的迅速发展,尤其是当今植物染色体高分辨G-带技术的突破,不仅为染色体鉴别、基因定位等提供了重要手段,对细胞分类学、物种生物学、细胞地理学、体细胞遗传学,以及育种学、人类遗传学和环境保护等领域的应用与发展,发挥着越来越大的作用。众多学者对染色体显带机制进行了研究。最早,用DNA变性与复性理论作为染色体显带的基础,认为是DNA的彻底变性和高度重复DNA的差别退火,导致分带程序中选择性染色的出现。实际上,染色体显带机制并非如此简单,许多实验结果均与上述解释相矛盾。近来的研究表明,染色体显带的核心问题是,     

三倍体草鱼染色体限制性内切酶带分析

本文报道运用Ｇｉｅｍｓａ染色、Ｃ－带显带、ＮＯＲ－显带和多种限制性内切酶消化对草鱼三倍体的染色体进行分析。其中,内切酶ＨａｅⅢ和ＨｉｎｄⅢ等使染色体产生Ｇ－带,其余内切酶产生与常规Ｃ－带不同的分化,即所谓修饰Ｃ－带。实验结果表明,限制性内切酶可使鱼类染色体产生多种带型,各种显带技术的结合使用,可探讨鱼类染色体及染色质结构与进化。     

鱼类染色体的荧光显带研究

应用GC碱基特异性荧光染料色霉素A,辅以AT减基特异性荧光染料Hoechst33258,DAPI或喹吖因对鲤鱼,鲫鱼,大鳞副泥鳅和的有丝分裂染色体及黄鳝的有丝分裂和减数分裂染色体进行了荧光显带研究,结果发现,色霉素A3可以特异性地显示鱼类有丝分裂及减数分裂各个时期核仁组织区NORS的存在,Hoechst33258,DAPI或喹吖因则使这些区域（NORs)淡染,大鳞副泥鳞的染色体NORs 分布位置具有性别,根据实验结果,对有关鱼类染色体的荧光染色研究及其应用进行了讨论。     

鱼类染色体G—显带的Brd U—BSG方法及白鲢G—带模式图的初步建立

本文报道了一种显示鱼类染色体G-带的BrdU-BsG方法。采用肾细胞短期培养,收获前12小时加入BrdU,使终浓度为10μg/ml。制片经HCl、Ba(OH)_2处理,4×SSC温育。Giemsa染色,显示出白鲢的G-带。其带纹细致清晰,一个细胞的单倍染色体上显示带纹达200条以上,是目前已报道的鱼类多重带中带纹最多的,且反差明显,带纹有特征性,结果较稳定。根据实验结果初步建立了白鲢的G-带模式图。     

黄鳝染色体高分辨G带的制备方法

ASimpleMethodforPreparingHigh-resolutionG-bandsonMeioticPachytcneChromosomeofMonopterusalbusFanLianchun;YuQixingCuiJianxun(DepartmentofBiology,WuhanUniversity430072)(NowAddress：InstituteofHydrobiology,Academiasinica,Wuhan43372)鱼类染色体多重带技术的应用,对于鱼类遗传变异、分类进化、基因定位、基因表达与调控等问题的深入研究,显得日益重要．但鉴于鱼类染色体数目较多,有丝分裂中期染色体螺旋化程度高,染色体短小,碱基分化程度较低等特点,至今鱼类染色体的多重带显带一直是个尚未解决的技术难题…     

斑马鱼二价体制备与多重带显带的方法学探讨

采用碱性低渗结合高氯仿一步显带技术获得了斑马鱼二价体高分辨多重G带,所出现的带纹丰富,反差明显。采用地高辛为标记的以限制性内切酶AfuⅠ介导的原位切口平移技术使斑马鱼二价体上呈现出类G带的多重带,获得了明暗反差强烈的带纹结果。通过比较多个不同分裂相的多条染色体,发现带纹的分布具明显特征性．并且特征一致,带纹数目基本吻合。首次从方法学上对斑马鱼二价体的制备过程及多重带显带技术进行了分析、探讨和总结,力求将该技术程序化、系统化,使其具有可重复性和可操作性,并对显带的可能机理进行了讨论。     

哺乳动物染色体高分辨显带研究现状

高分辨染色体（High Resolution Chromosome, HRC）是指通过某种处理,获得有丝分裂早期染色休 （指晚前期、前中期、早中期染色体）分裂相,此时分裂 相的染色体较中中期染色体长,显带后可得到更多更 细的带纹,从而提高了人类对染色体的分辨力。Yunis (1976)134'首先以氨甲喋吟使细胞同步化,再使细胞 短时暴露于秋水酸胺中,从而提出了对400, 5-50,850 和1200条带时期的染色体进行研究的技术,高分辨染 色体应运而生。接着国内外许多学者对人类染色体进 行了高分辨分带研究『’一,,‘,一,‘’。人类细胞遗传学命名 常务委员会（1981)制定了人类高分辨染色体显带命名 的国际体制‘’‘’。这项工作大大促进了人类染色体高 分辨的研究,目前这项技术已经广泛应用于临床医 学‘4-1,t8,11,37 3。动物遗传学家借鉴人类高分辨染色 体技术对一些哺乳动物的染色体进行了高分辨研 究“,,,,之盆,川,但理沦和应用方面的研究均进展较'R o 本文对哺乳动物高分辨染色体研究的方法、进展以及 意义进行了阐述,同时提出了值得探讨的几个问题。     

II型限制性核酸内切酶在真核生物染色体显带中的应用

限制性核酸内切酶（简称限制酶)能切割DNA双链。已知的限制酶有I, II和III型三类。II型限制酶能识别专一核普酸序列,并在识别序列内有固定切割点,是分子生物学研究和基因工程重要工具酶。1980年,以II型限制酶处理印度鹿染色体,沿染色体纵轴得到选择消化结果^[16]。目前,限制酶这一应用研究发展成称为限制性核酸内切酶显带（Restriction endonuclease banding）的最新显带技术,已应用于哺乳类、鸟类、两栖类、鱼类和昆虫等真核生物。限制酶显带与其他显带法相比有其特点,特别在揭示异染色质的异质性方面有其独到之处。本文介绍此项技术的发展与现状,并指出需要进一步探索的几个主要方面。     

一种显示植物染色体C带的有效易行的实验方法

在植物染色体分带技术中 C 带技术应用最广,它是显示染色体上结构异染色质区的一种方法,至今已在许多植物中获得了 C 带,并已应用于染色体的研究。现介绍一种有效易行的染色体显带方法,此法以蚕豆子叶为材料,用 NaHCO_3进行分带处理,具体做法如下。材料和方法(一)材料以蚕豆品种为材料     

大熊猫与黑熊显带染色体的比较研究

以体外培养的大熊猫（Ａｉｌｕｒｏｐｏｄａｍｅｌａｎｏｌｅｕｃａ）与黑熊（Ｓｅｌｅｎａｒｃｔｏｓｔｈｉｂｅｔａｎｕｓ）外周血淋巴细胞为实验材料,应用ＢｒｄＵ复制带显示技术,研究了大熊猫和黑熊染色体晚复制带带型。通过对大熊猫与黑熊显带染色体带型的比较,发现黑熊部分具端着丝粒的染色体与大熊猫部分具中,亚中,或亚端着丝粒的染色体的整个短臂或整个长臂有明显的带型相似性,在黑熊具中,亚中着丝粒染色体中,仅３３     

牛蛙（Rana catesbeiana）染色体高分辨带显示的初步探讨

本文报道显示牛蛙染色体高分辨带的一种方法。通过2—巯基乙醇的预处理和Ohnuki低渗液和低渗及火焰干燥可使染色体伸长并显出高分辨带纹,且这种带纹和人的高分辨G带类似。初步探讨了牛蛙染色体高分辨显带机理。     

BrdU处理的鱼类染色体高分辨G-带带型分析

本文应用鱼类染色体高分辨G-带技术,重点将黄鳝培养细胞具不同长度染色体的正中期分裂相做成G-带核型加以比较分析。随着染色体长度的增加,带纹数目也增加。但增加是有限度的。染色体带纹数目的增加,明显地表现在深染带再分为若干亚带。当染色体从前期向中、后期过渡收缩变短时,一些亚带融合为原来数目的带。染色体上各个带的收缩程度、收缩时间是不均等的。实验证明大剂量的BrdU不仅能阻断鱼类细胞于中S期,也可使染色体伸长、小剂量的伸长作用不明显。最后讨论了BrdU处理与G-显带的关系、染色体带纹数目相对恒定以及染色体伸长缩短问题。     

迷宫漏斗蛛Agelena labyrinthica的染色体(蜘蛛目:漏斗蛛科)

报告迷宫漏斗蛛的染色体数目、形态结构和性染色体组成。结果表明,迷宫漏斗蛛体细胞染色体数目是:雄性2n=42,雌性2n=44,性别决定机制属X_1X_2O型。X染色体是全部染色体中最长的和最短的2个(对)。染色体似乎均为端或亚端着丝粒染色体,这由C-显带标本分析所证实,没有亚中着丝粒染色体的证据。C-带标本分析表明,常染色体中,各条染色体的C-带纹,其大小和染色深浅无明显差异,但X_2染色体上有明显宽的C-带纹。C-显带处理没有得到稳定的有重复性的带纹。     

20世纪90年代生物染色体显带技术的研究与应用

染色体显带是系统学和进化研究中广泛应用的有效技术。主要用于以下目的 :在更加微观的水平上鉴定染色体 ,获取遗传信息 ;获得居群水平上与物种形成有关和遗传变异的信息 ;确定与系统发育有关的种间关系等等。该技术形成于 1938年 ,先驱者是 Darlington和La Cour,自 2 0世纪 70年代以后得到广泛应用。染色体显带有几种带型 ,据处理方法不同而异 ,分别为 Hy-带、Q-带、C-带、G-带、N-带等。 2 0世纪 90年代以前应用在玉米、鸭跖草、芫荽、紫葳、百合、烟草、鼠尾草和黎科等植物以及家猪、人类和鲑鱼等动物的细胞学研究方面 ,对于染色体的…     

鱼类染色体显带的研究进展

全世界现存鱼类约有２００００种左右,分属４６目,４５０科,４０３２属［１］。其中淡水鱼类占４１２％,是脊椎动物分布最广,种类最多的类群,具有多种多样的生物学特性和重大的经济价值［１］。在脊椎动物中,鱼类的染色体较小,数目偏多,研究工作难度较大。早期...     

迷宫漏斗蛛Aglena labyrinthica的染色体（蜘蛛目：漏斗蛛科）

报告迷宫漏斗蛛的染色体数目,形态结构和性染色体组成,结果表明,迷宫漏斗蛛体细胞染色体数目是：雄性２ｎ＝４２,雌性２ｎ＝４４,性别决定机制属Ｘ１Ｘ２Ｏ型,Ｘ染色体是全部染色体中最长的和最短的２个（对）,染色体似乎均为端或亚端着丝粒染色体,这由Ｃ－显带标本分析所证实,没有亚中着丝粒染色体的证据,Ｃ－带标本分析表明,常染色体中,各条染色全的Ｃ－带纹,其大小和染色深浅无明显差异,但Ｘ２染色体上有明显宽的Ｃ     

条石鲷雌雄鱼核型及C-带的比较分析

染色体核型和带型分析是鱼类细胞遗传学研究的重要内容之一,不仅对认识鱼类的分类系统、进化关系及染色体演化过程具有重要意义,还可为鱼类遗传育种提供细胞遗传学依据。我国从20世纪70年代开始开展鱼类细胞遗传学方面的研究,到目前为止,有关鱼类染色体核型已有很多报道。在海水鱼类中,据不完全统计,至2006     

蕹菜的DAPI显带核型

利用一种新的DAPI显带技术分析了蕹菜染色体的DAPI带型及其异染色质的分布,建立了类似于G带的蕹菜DA PI带模式图,为蕹菜的细胞遗传学研究、育种和资源的开发利用提供帮助。     

同步化技术在草鱼染色体显带中的应用及草鱼核型的初步分析

对草鱼细胞进行同步化处理,并在DNA复制的早期和晚期分别掺入BrdU,制备的染色体标本置于CaCl_2溶液中温浴同时用紫外线照射,然后用Giemsa染色即可分别显示出G带和R带。标本中的部分晚前期和早中期分裂相具有高分辨染色体显带特征。用这一技术对草鱼每条染色体进行识别和分析,提出了初步的草鱼核型,发现了四对草鱼染色体具有随体。