降钙素

降钙素斯小宁黄文华甘人宝（中国科学院上海生物化学研究所,上海２０００３１）关键词降钙素骨质疏松症降钙素是一种重要的激素,它与体内的钙代谢及骨骼代谢有关。不同种属来源的降钙素的氨基酸顺序有所不同,但对人体同样有效,其中鲑鱼降钙素的活性最高。临床上,降钙...     

鲑鱼降钙素在链霉菌中的分泌表达

利用聚合酶链式反应(PCR)技术分别扩增鲑鱼降钙素的编码序列(sCT-Gly)和抗生链霉菌melCl的信号肽编码序列及其上游的调控序列,将鲑鱼降钙素编码序列融合在melCl信号肽编码序列后,定向克隆到链霉菌质粒载体pIJ680中的新霉素磷酸转移酶基因的启动子(Paph)下游,得到的表达质粒pMS680转化变铅青链霉菌(Streptomyces lividans TK54)进行分泌表达。酶联免疫测定法(EIA)显示重组菌株在YEME培养基中的分泌表达水平于96h达到最高,表达量大于100μ/L培养液。实验表明表达产物能降低大鼠血清钙的浓度。高压液相色谱(HPLC)结果表明,表达产物中主峰的保留时间与鲑鱼降钙素标准品的保留时间基本一致。以上结果提示,鲑鱼降钙素在链霉菌中获得了成功的分泌表达。     

人降钙素类似物的合成及活性研究

通过对鲑鱼降钙素和人降钙素结构的比较,设计并合成了人降钙素类似物ｍｈＣＴ－２。利用空气氧化获得分子内二硫键,经分离纯化,产物达ＨＰＬＣ及毛细管电泳均一,蛋白质序列分析和质谱分析符合理论值。在大鼠降血钙生物活性测定中,利用量反应平行线法进行ｍｈＣＴ－２的生物效价判定达２０００ＩＵ／ｍｇ,比ｈＣＴ的效价高一个数量级。     

降钙素对去势兔的人工假体四周骨组织形态计量学的影响

目的探讨降钙素对去势兔的假体四周骨组织形态计量学的影响.方法将30只全髋置换(THA)模型的骨质疏松症雌兔随机分成实验组和对照组,实验组给予降钙素治疗,持续半年;所有动物术后24周处死,分别行假体四周骨组织形态计量学分析.结果假体四周骨组织形态计量学显示,实验组骨吸收指标Oc.No/Tb.Pm、ES/BS较对照组有显著下降(P<0.01);假体四周骨量参数BV/TV及Tb.Th,实验组明显较对照组增多(P<0.01);成骨参数OV/BV、成骨细胞数量参数OB%及OB/1cm均较对照组有明显升高(P<0.05);骨形成速率参数BFR(T)及%L.Pm较对照组有明显升高(P<0.05).两组间,矿化沉积率MAR及矿化延迟时间MLT均无显著性差异(P﹥0.05).结论鲑鱼降钙素能抑制假体四周骨质的骨吸收,减少骨丢失,降低骨转化率;促进假体四周骨形成,增加骨量;改善假体四周骨微结构,提高骨质量.有利于提高假体四周骨质的生物力学性能,防止假体松动.     

受溶氧浓度调控的新型大肠杆菌表达系统

利用透明颤菌(Vitreoscilla sp.)的血红蛋白基因在大肠杆菌中的转录过程受环境溶氧浓度调控,在贫氧条件下基因转录被激活的性质,构建了一个在贫氧条件下能高效表达外源基因的新型大肠杆菌表达系统。该表达系统包括一个古血红蛋白基因启动子元件控制T7RNA聚合酶基因表达的低拷贝质粒的宿主菌GJ100和另一个T7启动子控制外源基因表达的质粒载体。研究结果表明大肠杆菌本身的硫氧还蛋白,原核生物的金黄色葡萄球菌A蛋白IgG结合区(ZZ),真核生物的蛇神经毒素融合蛋白,鲑鱼降钙素六聚体,人白细胞介素Ⅱ和人尿激酶原等基因均能在该系统中获得高效表达。重组蛋白表达的水平可达细胞总蛋白的30％以上。     

鱼雷形胚的高密度同步分化成功

三菱重工业基础技术研究所生物技术研究室的大菅康一、筑波大学生物科学系教授镰田博和日本女子大学理学系教授驹岭穆使高密度培养的不定胚以70～80％的高分化率同步分化鱼雷形胚获得成功。这项技术可提高用人工种子和罐培养生产种苗的效率。大菅等7月23日在京都召开的第13届植物组织培养学会大会上发表了这项研究成果。 作为科学技术厅1991、1993年度科学技术振兴调整费资助的“开发新的植物实验系的基础技术研究”的一部分,进行了这项研究。     

用补体控制因子阻止异种移植排斥反应

京都府立医科大学第2外科教授周隆宏、赤见敏和和东雪基础研究所小组确认表达人补体抑制因子CD59基因的小鼠细胞株可避免人淋巴细胞的攻击。如能抑制排斥反应,将使异种移植的实用化前进一大步。赤见等于9月在东京召开的日本移植学会上发表了这项成果。该小组将阻碍补体反应的终因子(C9因子)活化的人细胞表面分子CD59的cDNA导入小鼠细胞株(A31)。重组A31细胞与人血清反应时,由补体介导的细胞障碍随血清浓度不同(3～25％)而抑制程度不同(浓度8％时能抑制94％、浓度25％抑制47％)。异种移植的最大难关是超急性排斥反应。在移植患者的血液流入移植脏器血管的同时引起排斥反应。     

用γ-IFN治疗高钙血症

γ-干扰素将成为治疗高钙血症的强力治疗药.这项工作是生长科学协会附属研究所、东京女子医大研究小组与第一制药公司共同进行的.目前还处于动物(小鼠)试验阶段.从观察结果看,其效果远超过现行的降钙素疗法.于7月3日在札幌召开的日本癌学     

临床研究发现经鼻吸收型降钙素使血中浓度增大

日本大阪大学小儿科讲师清野佳纪及其助手黑濑裕史等,采用由鼻吸收降钙素,成功地使降钙素在血中浓度增大。另外,此经鼻吸收型降钙素对小儿骨形成不全症的疗效也得到了临床证据。迄今降钙素都作为骨佩吉特氏病和骨质疏松症等疼痛的去除药,静脉注射给药。     

鸟类病毒对人类构成威胁

在荷兰进行的一项抗体测试表明，去年一种鸟类流感病毒在该国家禽中爆发期间，至少造成了1000人感染．而后这些被感染后逐步显现出病状的病人又将病毒传染给了59％的家庭成员。荷兰Bilthoven的公共卫生与环境国家研究所(RIVM)于日前公布了这项调查结果。     

人降钙素受体胞外域的复性及新的体外活性测定方法

人降钙素受体胞外域是降钙素受体的药物靶点区域.本研究截取降钙素受体的N端胞外域22~140氨基酸残基区域,依据大肠杆菌偏爱密码子优化并人工合成基因,克隆至pET22b(+)载体,构建的表达质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)中表达.表达产物经复性、纯化后进行受体-配体结合实验.结果表明,目的蛋白质绝大部分以包涵体形式存在.本研究探索出了一套高效的复性方法,经SDS-PAGE鉴定,纯化蛋白质为单一条带,质谱测定蛋白质分子量与理论分子量一致.复性后的蛋白质采用新的体外活性测定方法证实,有较强的结合鲑鱼降钙素(salmon calcitonin,sCT)的能力.这为其进一步的结构与功能研究奠定了基础.     

阿仑膦酸钠联合鲑鱼降钙素对老年髋部骨质疏松骨折患者骨密度及血清BGP、PTH、BALP水平的影响

目的:研究阿仑膦酸钠联合鲑鱼降钙素对老年髋部骨质疏松骨折患者骨密度及血清骨钙素(BGP)、甲状旁腺激素(PTH)、骨碱性磷酸酶(BALP)水平的影响。方法:收集2014年6月至2015年6月我院接诊的90例老年髋部骨质疏松骨折患者,按抽签法随机分为实验组和对照组,每组各45例。两组均给予手术治疗,术后进行康复锻炼并常规补充钙剂,每次500 mg,每天2次。对照组在此基础上采用阿仑膦酸钠治疗,每次70 mg,每周1次。实验组在对照组基础上采用鲑鱼降钙素治疗,每次100IU,每天1次。两组均治疗24周。观察和比较两组患者的临床疗效、治疗前后骨密度、血清BGP、PTH、BALP、VAS水平及生活质量评分的变化。结果:实验组总有效率显著高于对照组(P0.05);实验组腰椎、股骨颈、Wards三角区骨密度显著高于对照组(P0.05);实验组BGP、BALP显著高于对照组(P0.05),实验组PTH显著低于对照组(P0.05);实验组VAS评分显著低于对照组(P0.05)。结论:阿仑膦酸钠联合鲑鱼降钙素治疗老年髋部骨质疏松骨折疗效显著,能够增强骨密度,促进骨折愈合,可能与其有效调节血清骨代谢BGP、PTH、BALP的水平有关。     

鲑鱼降钙素对胸腰椎脊柱骨折术后I型胶原氨基端延长肽、I型胶原C端肽β降解产物的作用

目的:探讨鲑鱼降钙素对胸腰椎脊柱骨折术后Ⅰ型胶原氨基端延长肽、Ⅰ型胶原C端肽β降解产物的作用。方法:选择2014年3月至2016年5月我院收治的胸腰椎脊柱骨折患者80例,将其随机分为观察组和对照组,每组40例。两组均采用微创经皮椎弓根螺钉内固定术,对照组术后给予常规治疗,观察组术后给予鲑鱼降钙素治疗。比较两组患者治疗前后的骨密度、Ⅰ型胶原氨基端延长肽、Ⅰ型胶原C端肽β降解产物、视觉模拟疼痛评分(VAS)评分、Oswestry功能障碍指数评分(ODI)评分、Harris评分的变化、骨折愈合时间及不良反应的发生情况。结果:治疗后,观察组患者骨密度及Harris评分明显高于对照组(P0.05),Ⅰ型胶原氨基端延长肽、Ⅰ型胶原C端肽β降解产物、VAS评分和ODI评分均低于对照组(P0.05);观察组患者骨折愈合时间明显短于对照组(P0.05),不良反应发生率(7.50%)较对照组(10.00%)比较无显著性差异(P0.05)。结论:鲑鱼降钙素用于胸腰椎脊柱骨折术后可有效改善患者骨密度,促进骨折愈合且不会增加不良反应。     

用20升培养物生产5克降钙素

三得利公司确立了一种基因重组法,可大量生产酰胺化的人降钙素(hCT),结果在4月东京召开的日本农艺化学会上发表.使用基因重组生产的α酰胺化酶作用于用基因重组大量生产的目的蛋白,获得活性蛋白.用20升培养物能制造4～5克酰胺化活性型hCT.用这项技术还能大量生产由于酰胺化而产生活性的其它蛋白.三得利公司最近打算向厚生省申请批准生产hCT. hCT的生产程序如下:首先用基因重组大肠杆菌生产与融合有β半乳糖苷酶片段的蛋白,然后用蛋白酶V8切出hCTGKKR(hCT-Gly-Lys-Lys-Arg),用羧肽酶B将其变换成     

克隆破骨细胞特异的人组织蛋白酶K

明海大学口腔解剖学教授久米川正好、前助手手(?)健一和日本汽巴嘉基国际研究所生物有机化学研究部小组负责人小久保利雄、稻冈哲也等小组克隆了新的组织蛋白(半胱氨酸蛋白分解酶)——人组织蛋白酶K。上月将DNA序列输入到欧洲分子生物学研究所(EMBL)的数据库。组织蛋白酶K在破骨细胞中特异地表达,其表达量有可能在进行骨吸收的酶中是最高的。如果能开发特异性高的抑制剂,就能发展成骨质疏松症的治疗药。     

药物传输系统(DDS)的研究现状与发展前景

药物传输系统(drug delivery system,简称DDS)的出现大大改善了药物的药理学和药效学特性,目前已有一些抗肿瘤和抗真菌的DDS制剂应用于临床。基因组学和蛋白质组学的发展为制备新药提供了契机,如能最大限度地利用DDS系统的优势并将其应用于新药的体内传输及受体靶向治疗方面,将推动新药以至医学的进一步发展。     

藻类性状转化技术获得专利

《日经生物技术》2000年4月24日号第16页报道：美国Martek Biosciences公司(马里兰州Columbia)和美国Carnegie Institute of Washington研究所4月11日宣布,覆盖了真核藻类性状转化的方法获得了美国专利,专利号为6027900。 如果使用这项专利,就可迅速提高从多种藻类基因中鉴定出有使用价值基因的能力。美国Martek公司拥有将这项技术用于商业开发的所有权利。 得到认可的在特定藻类中导入DNA的这项专利技术是Carnegie研究所植物生物学部门Kirk Apt和Arthur Grossman以及Martek公司共同开发的。Martek公司还提供了一部分研究资金。 在动物及植物细胞中表达外来基因而使用的启动子对藻类没有启动功能。研究人员研究藻类基因高效表达时发现在藻类光合作用的基因启动子区域可诱导来自其他生物的基因表达。 这项专利还涵盖了简单地鉴定和分离引起性状转化的藻类细胞标记的使用。Martek公司获得了含有新发现启动子的所有载体及用该载体进行性状转化的所有细胞的商品化权利。该公司会长兼最高经营负责人Henry Linsert说：“我公司因此可确立在藻类生物技术商品化方面的主导地位。使用新一技术就能从藻类染色体中搜索到农作物育种用的性状。用藻类细胞可生产有价值的植物蛋白和动物蛋白”。该公司现在的兴趣已转向用藻类鉴定参与胡萝卜素、维生素E、类固醇、异黄酮、长链多不饱和脂肪酸等生物合成的基因。 因为藻类与高等植物的基因结构和生物化学途径类似,所以科学家最大的希望是将藻类作为新的基因供给源。孙国凤     

芦荟蒽醌类物质对灌浆期冬小麦光合作用及产量的影响

UV—B辐射伤害是导致小麦光合效率降低的环境因素之一。于2007年5月2日-6月5日,在河南新乡地区,研究了叶面喷施芦荟蒽醌类物质对冬小麦灌浆期旗叶光合速率、光呼吸速率、叶绿素含量、丙二醛含量和产量等的影响,旨在探索预防UV辐射伤害的新途径。结果表明：在灌浆期用浓度为1和5mg&#183;L^-1的芦荟蒽醌类物质喷施小麦,光合作用速率分别提高了38．03％和39．73％;叶绿素含量分别提高了3．53％和3．83％,丙二醛含量分别降低了11％和23％;蒽醌类物质能够吸收太阳中的紫外线,并将紫外线转换成能促进光合作用的蓝光或黄光;芦荟蒽醌类物质能促进小麦光合作用效率,减轻紫外线对小麦的损伤;喷施合适浓度的芦荟蒽醌类物质能够提高小麦产量。     

人降钙素基因克隆表达和重组产物的纯化

人降钙素(hCT)在治疗骨质疏松、高血钙和骨肿瘤等方面具有广泛的用途。但是,目前临床使用的制剂,主要依赖国外肽合成方法制备。 本文介绍基因工程技术制备和纯化重组人降钙素的过程。首先用亚磷酸酰胺法将hCTcDNA分成6个寡聚核苷酸片段化学合成,经磷酸化、连接反应,克隆于pGEM7z载体。DNA序列测定证明,hCT DNA结构与预期的一致。     

诺维信公司推出新型酶技术提高玉米乙醇生产效率

2013年6月10日,诺维信公司宣布,开始推出可以提高玉米乙醇生产效率5％的新型酶技术。该技术能以更少的玉米产出更多乙醇,并且将玉米油的提取率提高13％,节约8％的能耗。由SpirizymeAchieve、Olexa和Avantec一起使用的新型酶技术能够让生产者以更少的原料产出更多的乙醇,从而提高利润。