扬子鳄胚胎大脑皮层神经元核内包涵体的超微结构特征

孵化40、50d扬子鳄胚胎的海马皮质及刚孵出的小鳄大脑皮层各部的部分神经元细胞核内均有核内包涵体出现。按其形态可将它们分为两大类：膜性包涵体和核体。膜性包涵体位于近内核膜处,直径0．3—0．9μm,是由一到几层膜组成的囊泡状结构;核体体积较小,0．2—0．4μm,位于近核仁处或近内核膜,周缘的电子致密度较高,中心较清亮。本文就扬子鳄的核内包涵体同其它动物的核内包涵体的形态、出现时间进行了比较,并就其作用进行了讨论。     

蛇毒蛋白原核表达包涵体复性研究进展

外源基因在大肠杆菌中表达后常形成不溶性的无活性包涵体。包涵体的形成已经成为研究和应用活性蛋白质生产的主要障碍。然而,在合适的条件下,包涵体经过溶解、纯化、复性过程后可在体外重新折叠成有活性的蛋白质。迄今,已对蝰科、眼镜蛇科11种毒蛇的18个基因(包括金属蛋白酶、PLA₂、β-银环蛇毒素、心脏素素、丝氨酸蛋白酶、神经生长因子、C-型凝集素等)成功进行了原核表达,采用稀释复性、透析复性和层析复性三种方法成功进行了包涵体复性。着重就蛇毒蛋白原核表达后包涵体复性所用的方法予以综述。     

斜带髭鲷外周血嗜中性粒细胞核内包涵体的超微结构

目的在对斜带髭鲷（Hapalogenys nitens）外周血细胞结构进行透射电镜观察时发现嗜中性粒细胞存在大量的核内包涵体,系统研究了这些核内包涵体的超微结构,以探讨其来源和形成过程。方法应用电镜技术对这些核内包涵体的超微结构进行研究。结果斜带髭鲷外周血嗜中性粒细胞的核内包涵体可分为假包涵体和真包涵体两种类型,包涵体中的内含物来自胞质。胞核首先是以核膜内陷的方式将胞质及其各种有形成分包绕进核内而在核质外层形成具有双层膜包裹的典型假包涵体,随后假包涵体双层膜降解消失而转化成无被膜包裹的真包涵体,即核内糖原包涵体。结论假包涵体是形成真包涵体的开始阶段。随着假包涵体向真包涵体的转变,包涵体内含物的组成及其超微结构也出现了显著变化。     

包涵体纯化技术

20世纪90年代以来,基因重组技术得到很大的发展,基因工程产品的分离成本约占其全部成本的60%～80%,因此纯化技术越来越重要。着重介绍包涵体纯化技术,包括金属亲和层析,凝胶过滤层析,离子交换层析,疏水层析,双水相萃取技术和反胶团相转移技术近年来的进展情况。     

腺病毒感染胞核特殊型类包涵体的电镜观察

一株分离的4型腺病毒在感染细胞核内病毒晶体中出现特殊型类包涵体。该包涵体呈长空芯管样,长度可达1.5μ,外径约为70nm,内径约20nm,可视为与病毒衣壳发育形成有关的形态结构。     

原核基因工程中的包涵体

包涵体是原核基因工程的特有产物,其中表达的蛋白产物是以无活性、不溶解的形式存在。包涵体特性、蛋白回收及活性恢复是生物工程研究的重要课题。文章对包涵体特性、回收及产物提取,重组蛋白的复性及纯化作了综述。     

功能性包涵体的研究进展

利用原核系统表达外源重组蛋白的一个特点是表达蛋白多以包涵体形式存在。在过去人们一直认为包涵体是错误折叠、无生物活性的蛋白,需要经过变复性的过程重新获得有生物活性、可溶的蛋白,因而变复性条件的摸索迄今仍然是该领域的难点。但近几年的研究表明包涵体并非都是无生物活性的,功能性包涵体(或者称为非传统意义包涵体) 概念的提出是该领域的一个重大研究进展。由于功能性包涵体本身具有生物活性,可在非变性条件下提取,目前已经在生命科学的基础研究、生物制药、生物材料、生物催化等领域展现出良好的应用前景。重点从功能性包涵体的定义、形成机理、提取条件等近期研究进展进行综述,以期为原核细胞表达和工业生产重组蛋白药物提供新的思路。     

沙眼包涵体多形性的研究

从50年代制备的48例沙眼包涵体阳性标本片中摄制出一批彩色沙眼包涵体图片,经分类顺序排列,对各种沙服包涵体的形态及其与宿主细胞的关系进行了描述和讨论,提出了一个五期分类法,有助于对沙眼包涵体多形性的理解。本文所附15幅彩色沙眼包涵体图片,显示了沙眼包涵体的多形性特征,将有助于临床实验诊断和教学。     

包涵体蛋白复性技术研究进展

本文对原核表达的包涵体蛋白的分离,洗涤,溶解及复性方法做了一个简单的总结。同时就国内外近几年的最新复性方法进行了概述。并分析了各种复性方法的利弊。     

斑节对虾杆状病毒包涵体研究

利用显微图像分析技术,对斑节对虾肝胰腺正常细胞胞核和斑节对虾杆状病毒(MBV)感染细胞胞核横切面的直径、周长和面积进行了测量分析.结果表明:正常细胞胞核的直径为3.47±0.30μm、周长为13.03±1.36μm、面积为10.87±1.78μm²;MBV感染细胞胞核的直径为3.81±0.79μm、周长为14.00±2.87μm、面积为13.52±5.37μm²;两者的直径、周长和面积均存在极显著的差异(P<0.01).对3种类型的包涵体进行了测量,其中1类包涵体最大,2类包涵体次之,3类包涵体最小,并以1类包涵体占大多数.     

包涵体蛋白体外复性的研究进展

外源基因在大肠杆菌中高水平表达时 ,通常会形成无活性的蛋白聚集体即包涵体。包涵体富含表达的重组蛋白 ,经分离、变性溶解后须再经过一个合适的复性过程实现变性蛋白的重折叠 ,才能够得到生物活性蛋白。近年来 ,发展了许多特异的策略和方法来从包涵体中复性重组蛋白。最近的进展包括固定化复性以及用一些低分子量的添加剂等来减少复性过程中蛋白质的聚集 ,提高活性蛋白的产率。     

重组包涵体蛋白质的折叠复性

综述了减少包涵体形成、包涵体分离和溶解以及包涵体折叠复性的策略及其最新进展 .详细讨论了包涵体蛋白质折叠复性的基本原则、包涵体折叠复性促进剂和包涵体折叠复性方法     

重组蛋白包涵体的复性研究

重组蛋白在大肠杆菌中的高表达往往形成不可溶、无生物活性的包涵体,需经过变性溶解后,在适当条件下复性形成天然的构象,才可恢复其生物活性．变复性实验是建立在对蛋白质体外折叠机制的了解的基础上．根据近年来对蛋白质折叠机制的认识和重组蛋白包涵体在复性方面的主要进展,论述以下3个方面的内容：1)蛋白质在细胞内的折叠机制;2)蛋白质体外折叠机制;3)蛋白质复性的策略和方法．     

包涵体复性研究进展(英文)

用基因工程技术在大肠杆菌高水平表达重组蛋白时,通常形成无生物活性的包涵体。包涵体在体外经分离、溶解与重折叠后可实现复性,表现为具有生物活性的蛋白。总结了包涵体的相关复性技术,重点介绍重折叠的最新进展情况 。     

沙眼衣原体包涵体膜蛋白的研究进展

沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)是一种专性细胞内寄生的革兰阴性病原体,在宿主细胞内增殖形成包涵体,通过包涵体与宿主细胞发生相互作用。包涵体膜蛋白(inclusion membrane proteins,Inc蛋白)是一类定位于衣原体包涵体膜上的含独特双叶片状疏水性基序结构的衣原体蛋白。Inc蛋白广泛存在于衣原体属各个种内,每种衣原体既有各自独特的Inc蛋白,又有其关键Inc蛋白同系物,基于生物信息学方法,预测Ct有59个Inc蛋白。Inc蛋白在衣原体与宿主细胞相互作用过程中发挥重要作用。在过去的十年内,鉴定Inc蛋白并对其功能进行研究受到了重视,但对于Inc蛋白的功能仍知之甚少。衣原体基因操控技术的应用,推动了Inc蛋白等衣原体单个蛋白的功能研究。现就Ct Inc蛋白的鉴定及其功能研究进展作一概述。     

大熊猫鳞状上皮细胞中的病毒包涵体和合胞体

给疑患犬瘟热病的动物采用睑结膜采样涂片染色镜检病毒包涵体以诊断犬瘟热的方法在兽医临床上已有实施。用此睑结膜拭片法检测大熊猫疑患犬瘟热病时出现的多核巨细胞合胞体尚未见报导。1病例回顾1997年,某动物园的大熊猫相继患上疑为犬瘟热的疾病。检查了仍然活着的大熊猫睑结膜鳞状上皮细胞中的犬温热病毒诱导的合胞体。用灭菌脱脂棉签(棉拭)浸蘸生理盐水,在患病大熊猫的眼睑结合膜上稍用力擦拭。将此已取样的棉拭在清洁载玻片上轻轻涂抹一下。玻片自然干燥后,用瑞特氏法染色,在普通光学显微镜(油镜)下观察,发现了很多个清楚而典型的多核巨…     

卡哈尔体——功能复杂的核内细胞器

卡哈尔体（Cajalbody,CB）的发现可以溯源至100多年前,而直到近10年的研究取得突破性进展,才逐渐揭示了其复杂的分子组成及生理功能。作为当前备受关注的核内小体之一,CB是细胞核质中处于动态变化的细胞器,广泛存在于高等真核生物的细胞核内,在电镜下表现为球形小体样结构,其中p80Coilin蛋白是CB最为明确的特异性标志物。cB的分子构成十分复杂,主要包括参与mRNA剪接所需、称为snRNP的核酸与蛋白质复合体的各种组分,以及snoRNAs、scaRNAs和其他相关蛋白质。此外,一些基因活化中不可或缺的转录因子、mRNA修饰的必需蛋白因子以及与细胞增殖和细胞周期功能相关的功能分子等,也被发现存在于CB之中或周边。其中,snRNAs、snoRNAs与scaRNAs等低分子量RNAs在CB中完成自身的成熟并且参与RNP的组装。染色体端粒长度的维持以及组蛋白基因簇的表观遗传修饰依赖于cB的形成与功能发挥。由此可见,CB与细胞周期、细胞增殖、应激和老化等一系列重要的细胞生物学过程存在密切的联系,同时其功能和表现的异常往往也提示与肿瘤的发生相关。该文在归纳cB相关研究最新进展的同时,着重讨论CB的结构与功能及其与疾病的潜在联系。     

病毒包涵体在病毒感染细胞中的作用

病毒包涵体(viral inclusion bodies,IBs)是病毒蛋白在胞质或核内的聚集体,许多病毒能够形成病毒包涵体。早期研究认为,病毒包涵体只是病毒复制及组装的重要起始位点,然而最近研究发现,一些病毒形成的病毒包涵体在宿主细胞抗病毒免疫反应中具有一定作用。本文主要就病毒包涵体在病毒感染细胞中的作用进行综述。     

包涵体蛋白复性的几种方法

外源基因在大肠杆菌中高水平表达时,通常会形成无活性的蛋白聚集体即包涵体。包涵体富含表达的重组蛋白,经分离、变性溶解后须再经过一个合适的复性过程实现变性蛋白的重折叠,才能够得到生物活性蛋白。