离体心舰顺应性综合评定的实验研究

采用精度高、稳定性好的标准等长收缩灌流装置,从数学和弹性力学角度计算、分析正常及缺氧状态下大鼠乳头肌的应力-应变、应力松弛和蠕变三种生物物理特性的变化。以前者反映顺应性的静态变化,尝试以后二者反映顺应性的动态变化。结果表明,缺氧状态下,不仅心肌的静态顺应性降低(应力—应变曲线明显左移),其动态顺应性也明显降低(应力松驰及蠕变的程度和速度明显降低)。结果提示,本实验方法可用于不同状态下离体心肌顺应性的综合评定。     

缺氧对离体鸡胚前脑神经细胞生长的影响

在缺氧(95％N_2和5％CO_2)条件下进行8d鸡胚前脑的纯神经细胞培养。培养24,48和72h后,MTT微量比色法检测显示,甲(目替)明显减少,表明神经元已遭严重损害,同时,培养液中葡萄糖被急剧地消耗。但是,即使把糖浓度提高到800—1200mg/100ml,缺氧仍造成神经细胞死亡。结果提示,胚胎脑神经细胞对缺氧敏感,胶质细胞对缺氧神经元的保护可能不在于提供糖原。     

离体大鼠心肌细胞钠超负荷与缺氧—复氧损伤

本工作在离体成年大鼠心肌细胞缺氧-复氧模型上,观察到细胞无氧孵育时加入Na~ -K~ ATP酶抑制剂哇巴因,增加细胞内钠离子浓度,复氧孵育后造成了更严重的细胞损伤及钙超负荷,缺氧期末细胞内钠离子浓度与复氧后钙超负荷的程度呈显著正相关。复氧期给予Na~ -Ca~(2 )交换抑制剂Mn~(2 ),明显减轻了细胞的缺氧-复氧损伤,Mn~(2 )还显著抑制了无钠孵育引起的细胞损伤。结果提示:缺氧期细胞内钠超负荷是复氧时细胞内钙超负荷发生的条件,Na~ -Ca~(2 )交换是Ca~(2 )进入细胞的重要途径。     

牛磺酸对蟾蜍离体心脏活动及蝌蚪抗缺氧能力的影响

研究牛磺酸对蟾蜍离体心脏活动及蝌蚪抗缺氧能力的影响。结果表明 :在气温为 (2 0± 1)℃时 ,浓度为 5g·L- 1 ,10g·L- 1 的牛磺酸任氏液使离体心脏跳动时间明显延长 (p <0 .0 5 ) ,浓度为 1g·L- 1 、5g·L- 1 的牛磺酸水溶液对蝌蚪抗缺氧能力有极显著 (p <0 .0 1)、显著 (p <0 .0 5 )改善     

川芎嗪对慢性缺氧大鼠肺动脉和主动脉的离体舒张作用

用生物测定法观察了川芎嗪对慢性缺氧大鼠肺动脉和主动脉环的舒张效应,并与乙酰胆碱的舒血管作用进行了比较。结果表明:川芎嗪对慢性缺氧大鼠肺动脉和主动脉的舒张作用均与平原组无明显差异。慢性缺氧明显减低了乙酰胆碱诱发的肺动脉内皮依赖性舒张反应,但不影响川芎嗪对肺血管的舒张作用。提示川芎嗪对肺血管的舒张作用不依赖于内皮。川芎嗪对肺动脉的舒张作用明显大于体动脉。这些特性有利于川芎嗪对肺动脉高压的治疗。     

安定对兔心乳头肌动作电位和收缩的作用

本文观察了安定、戊脉安和PK11195对兔心乳头肌动作电位和收缩的作用,并比较了安定对兔与豚鼠心肌收缩作用的差异。安定(0.7×10~(-6)-22.4×10~(-6)mol/L)使兔乙乳头肌动作电位时程(APD)及钙依赖动作电位(Ca-AP)时程缩短,并使Ca-AP的最大上升速率(V_(max))和幅值减小;安定还抑制兔与豚鼠心室乳头肌的收缩,相比之下对豚鼠的作用更明显。在戊脉安(2×10~(-6)mol/L)作用下,兔心乳头肌Ga-AP逐渐消失。提高溶液中Ca~(2 )的浓度可拮抗安定和戊脉安的作用。PK11195(1×10~(-6)mol/L)可使安定对兔心乳头肌APD作用的剂量-反应曲线平行右移,且拮抗安定对Ca-AP的作用。预先加入PK11195(3×10~(-6)mol/L),则戊脉安不能取消Ca-AP。上述结果提示。(1)兔心乳头肌存在的苯二氮(艹卓)结合位点具有外周型苯二氮(艹卓)受体(BZR)的性质;(2)这种受体的激活可导致钙内流减少;(3)BZR的密度及反应性可能存在种属差异。     

过氧化氢和次黄嘌呤＋黄嘌呤氧化酶对家兔离体肺、脑动脉环缺氧反应的影响

在家兔离体肺内动脉、脑基底动脉环观察了过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）及次黄嘌呤＋黄嘌呤氧化酶（ＨＸ＋ＸＯ）对动脉环缺氧反应的影响。结果发现：（１）Ｈ２Ｏ２１×１０－５ｍｏｌ／Ｌ加强ｆ去内皮肺动脉环（ＰＡ－）的缺氧收缩幅度（ＴＩＨ）,而Ｈ２Ｏ２３×１０－５ｍｏｌ／Ｌ、ＨＸ１０－４ｍｏｌ／Ｌ＋ＸＯ０．１及０．０３Ｕ／ｍｌ则可抑制内皮完整肺动脉环（ＰＡ＋）及ＰＡ－的ＴＩＨ（Ｐ＜０．０５）;（２）各剂量Ｈ２Ｏ２及ＨＸ＋ＸＯ对有、无内皮的脑基底动脉环的ＴＩＨ均无显著影响。     

氢气预处理对离体缺氧-复氧胸主动脉的保护作用

目的：观察氢气对缺氧-复氧离体小鼠胸主动脉组织结构和功能的保护作用。方法：90只ICR小鼠随机分为6组（n=15）：分别为内皮完整未通氢对照组（Con+E）、去内皮未通氢对照组（Con-E）、内皮完整预通氢组（Pre H₂+E）、去内皮预通氢组（PreH₂-E）、内皮完整再通氢组（Post H₂+E）、去内皮再通氢组（Post H₂-E）。血管环缺氧10 min后复氧以制备缺氧-复氧模型,氢气干预在再通氢组于复氧后7 min开始进行,在预通氢组于缺氧前10 min开始。经生物信号采集与分析系统测定血管环张力的变化,观察血管组织及细胞结构的改变。结果：在缺氧-复氧后,去内皮预通氢组的血管张力保持稳定,而去内皮未通氢对照组的血管张力明显降低（P<0.01）。组织细胞形态结构结果显示预通氢处理的两组血管组织细胞形态均良好,仅局部肌丝紊乱;再通氢处理的两组血管出现轻度损伤：肌细胞局灶性溶解、局部肌丝紊乱或消失、核周隙增宽;而未通氢对照的两组血管则均出现明显的内膜剥离等改变,肌细胞弥漫性溶解和线粒体空泡变、内质网扩张明显、核膜皱缩明显、核周隙增宽、细胞凋亡明显。结论：氢气预处理具有维持缺氧-复氧后血管张力稳定及保护组织细胞形态结构的作用,其效果明显优于损伤后的氢气再干预。     

慢性缺氧对大鼠肺动脉内皮依赖性舒张反应及cGMP含量的影响

本实验观察了慢性缺氧对大鼠肺动脉内皮依赖性舒张反应和肺动脉内环磷酸鸟苷(cGMP)含量的影响。乙酰胆碱(ACh)和三磷酸腺苷(ATP)可使正常大鼠的离体肺动脉产生内皮依赖性舒张反应,其舒张作用不受消炎痛的影响,但被甲烯蓝完全抑制。慢性缺氧明显减低了 ACh 和 ATP 诱发的大鼠肺内和肺外动脉的内皮依赖性舒张反应。当 ACh 浓度为10~(-6)mol/L 时,缺氧组大鼠肺内和肺外动脉舒张百分数分别为对照组的61.3%和59.2%;当 ATP浓度为1.8×10~(-5)mol/L 时,缺氧组大鼠肺内和肺外动脉舒张反应分別为对照组的64.9%和55.3%。慢性缺氧也减低了硝普钠(SNP)诱发的大鼠肺动脉非内皮依赖性舒张反应。慢性缺氧显著减低了大鼠肺动脉内 cGMP 的含量。缺氧组和对照组大鼠肺动脉内 cGMP 的基础含量分别是51.9±5.7 pmol/g wet wt.(n=14)和84.9±9.7 pmol/g wet wt.(n=14),p<0.01;经 10~(-7)mol/L ACh 刺激后分别是91.4±7.3 pmol/g wet wt.(n=5)和240.8±30.6pmol/g wet wt.(n=5),p<0.01。慢性缺氧可能抑制了肺动脉平滑肌细胞胞浆中可溶性鸟苷酸环化酶,从而减低了肺动脉对内皮舒张因子和 SNP 的舒张反应性。     

高原低氧对喜马拉雅旱獭、高原鼠兔、缺氧敏感大鼠颈动脉体超微结构的影响

应用扫描电镜结合透射电镜技术,对上海(海拔10米)的大鼠,5天内从上海急进到海拔3300米的大鼠,由北京引入西宁的子4代大鼠,同高原的喜马拉雅旱獭和高原鼠兔的颈动脉体微细结构进行对比观察。结果表明,高原低氧环境使由低海拔急进到高海拔的大鼠颈动脉体Ⅰ型细胞增生、肿胀、体积增大,胞浆中致密核心囊泡数量减少,线粒体变性肿胀,神经末稍中突触囊泡减少,Ⅰ型细胞表面微绒毛变性脱落;而喜马拉雅旱獭和高原鼠兔对高原低氧环境有较好的适应,未见缺氧损害征象。     

低Ca~(2 )对豚鼠心室乳头肌电缆特性的影响

应用常规细胞内微电极技术和一支细胞外玻璃吸引电极,观察低Ca~(2 )对豚鼠心室乳头肌电缆特性及动作电位传导速度的影响。实验结果表明,1/6正常Ca~(2 )浓度(0.3mmol/L)溶液灌流时,与正常对照相比,空间常数减小23.9％(p<0.01),细胞内纵向电阻增大37.1％(p<0.01),动作电位传导速度减小16.1％(p<0.01)。单纯缺氧时,与正常对照相比,空间常数减小29.4％(p<0.01),膜时间常数减小30.1％(p<0.01),细胞内纵向电阻增大100％(p<0.01),动作电位传导速度减小28％(p<0.01)。低Ca~(2 )(0.6mmol/L)加缺氧时,上述变化更加明显,与正常对照相比,空间常数减小39.4％(p<0.01),膜时间常数减小25.8％(p<0.05),细胞内纵向电阻增大140.9％(p<0.01),动作电位传导速度减小37.7％(p<0.01)。     

川芎嗪对豚鼠心室乳头肌电生理和机械特性的影响

本实验观察了川芎嗪对豚鼠乳头肌快反应电位(FAP)、慢反应电位(SAP)及收缩力(FC)的作用。结果表明,川芎嗪(3～100μmol/L)对FAP的复极化50％和90％时程(APD_(50)、APD_(90)及FC均呈剂量依赖性抑制,对静息电位(RP)及动作电位幅值(APA)则无明显影响。川芎嗪对组胺、BaCl_2或氨茶硷诱发的SAP的零期除极最大速率(V_(max))、APA、APD_(50)、APD_(90)及FC均呈剂量依赖性抑制作用,对RP无明显影响。提高细胞外液Ca~(2 )浓度至3.6mmol/L可拮抗川芎嗪对FC的抑制作用。结果提示川芎嗪抑制心肌慢内向电流I_(si)。     

5—羟色胺对肺动脉平滑肌细胞在缺氧条件下增殖的作用

本研究应用细胞培养、＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入,核酸分子杂交、免疫组织化学染色技术,探讨无氧（０％Ｏ２＋９５％Ｎ２＋５％ＣＯ２）和／或低氧（２．５￣３％Ｏ２＋９２％Ｎ２＋５％ＣＯ２）对新生小牛肺动脉平滑肌细胞增殖和５－羟色胺转载体基因表达的影响。结果表明：无氧２４ｈ可刺激ＰＡＳＭ的ＤＮＡ合成,＾３Ｈ－ＴｄＲ的掺入增加（Ｐ〈０．０５）,加入５－羟色胺能非常显著地促进无氧ＰＡＳＭ增殖（Ｐ〈０．００１）,而对常     

缺氧对体外培养的肺动脉平滑肌细胞形态及增殖的影响

本实验应用形态学、免疫组化染色,＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入、流式细胞等技术探讨缺氧（〈１％Ｏ２和２．５％Ｏ２）对肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭ）形态及增殖的影响。结果表明：缺氧２４ｈ使ＰＡＳＭ表型从收缩型向合成型转换,胞浆内ＳＭ－ａ ａｃｔｉｎ减少,线粒体和粗面内质网增多,缺氧４８ｈ以后线粒体肿胀,空泡化,内质网扩张,胞浆内出现髓鞘样结构。流式细胞分析显示缺氧ＰＡＳＭ Ｇ２／Ｍ期细胞比例明显增多（Ｐ〈０．００     

缺氧对游离的颈动脉体球细胞和细胞簇内球细胞的不同效应

用细胞内记录法测定了２０１个培养的大鼠颈动脉体球细胞的膜电位及输入电阻。在连二硫酸钠（Ｎａ２Ｓ２Ｏ４）造成缺氧（Ｐｏ２,１．３－８．０ｋＰａ）条件下,细胞簇内球细胞与游离球细胞对缺氧的反应不同。８２％以上的细胞簇内球细胞发生去极化和输入电阻降低,而６０％的游离球细胞产生超极化和输入电阻增加。细胞簇内球细胞与游离球细胞反应不同的主要原因可能取决于支持细胞存在与否。细胞簇内球细胞常被支持细胞的突起所包绕,而游离的球细胞则无支持细胞的包绕。也可能存在不同功能的球细胞。     

低氧对肺动脉内皮细胞PDGF—B链释放及平滑肌细胞生长的影响

应用蛋白ｄｏｔｂｌｏｔ技术检测了低氧内皮细胞条件培养液（ＨＥＣＣＭ）和常氧内皮细胞条件培养液（ＮＥＣＣＭ）内ＰＤＧＦ相对含量,并利用［３Ｈ］－ＴｄＲ掺入法和流式细胞术观察了ＨＥＣＣＭ和ＮＥＣＣＭ及加入特异ＰＤＧＦ抗体对肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣ）生长的影响。结果表明,ＨＥＣＣＭ中的ＰＤＧＦ含量明显高于ＮＥＣＣＭ;ＨＥＣＣＭ能明显增强ＰＡＳＭＣ内ＤＮＡ合成,促进ＰＡＳＭＣ从Ｇｏ／Ｇ１期进入Ｓ期;当预先加入ＰＤＧＦ－Ｂ链抗体时,则会明显地抑制ＨＥＣＣＭ对ＰＡＳＭＣ的ＤＮＡ合成,阻止ＰＡＳＭＣ从Ｇｏ／Ｇ１期进入Ｓ期。结果提示,低氧时ＰＡＳＭＣ增殖与肺动脉内皮细胞分泌释放ＰＤＧＦ增加有关     

内皮素－1对缺氧肺动脉平滑肌细胞的增殖作用

内皮素（ＥＴ）是至今所发现的最强的内源性血管收缩肽,近年来发现ＥＴ－１能促进血管平滑肌细胞增殖。本研究表明ＥＴ－１对缺氧培养的肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣ）有剂量依赖的增殖作用,缺氧可促进ＰＡＳＭＣ的ＤＮＡ合成且增加ＥＴ－１的丝裂原作用。ＥＴ－１的丝裂原作用主要由其Ａ型受体（ＥＴＲ＿Ａ）所介导,ＥＴＲ＿Ａ的特异拮抗剂ＢＱ１２３可显著抑制缺氧以及缺氧与ＥＴ－１协同所产生的增殖作用,而且发现ＥＴＲ＿Ａ在缺氧培养的ＰＡＳＭＣ中的表达显著高于常氧对照组ＰＡＳＭＣ。本研究表明ＥＴ－１参与了缺氧性肺动脉结构重组,而缺氧可增强ＰＡＳＭＣ对ＥＴ－１的增殖反应性。     

低氧条件下大脑皮层微血管平滑肌细胞内皮细胞中[Ca~(2 )]_i变化的研究

目的和方法：本研究采用离子探针Ｆｕｒａ２／ＡＭ 结合计算机图象分析技术,并通过施加ＮＯ合酶抑制剂ＬＮＮＡ和ＮＯ的作用靶———鸟苷酸环化酶（ＧＣ）的抑制剂美兰（Ｍｅｔｈｙｌｅｎｅ Ｂｌｕｅ;ＭＢ）,观察经培养的大鼠大脑皮层微血管内皮细胞和平滑肌细胞中的［Ｃａ２＋］ｉ 在低氧作用后的变化以及与有关血管舒张因子ＮＯ和ｃＧＭＰ之间的关系。结果：低氧时大脑微血管内皮细胞和平滑肌细胞内的Ｃａ２＋ 浓度有所下降,变化幅度的大小与低氧的程度及低氧作用的时间有关,且可以被ＬＮＮＡ和ＭＢ所抑制。结论：低氧时大脑微血管的舒张反应与ＮＯ的产生有关,ＮＯ通过细胞内的多种机制,最终使得胞内Ｃａ２＋ 下降而导致血管舒张