甜瓜试管苗继代培养玻璃化现象的研究

试管苗玻璃化现象是甜瓜组织基因转化过程中试管苗继代培养过程中的一大障碍,采用在培养基中提高糖和琼脂的浓度,添加适当的钙离子,细胞分裂素6-BA含量不超过0.2mg/L,生长素IAA用量控制在0.5mg/L,适当的光,光照强度和温度对克服甜瓜玻璃苗玻璃化现象有明显的效果.     

鸡蛋参的组织培养和移栽(简报)

通过筛选最适鸡蛋参初代培养基和生根培养基,研究影响试管苗移栽的条件,建立了鸡蛋参无菌培养体系。结果表明,鸡蛋参的初代培养基为：1/2MS + 6-BA 0.5 mg/ L + IBA 0.2 mg/ L;生根培养基为：1 /2MS + IBA 0.5 mg/L + NAA 1 mg/L + 活性碳10 mg/L;移栽混合基质为：粗纤维草碳土90%+蛭石10%,成活率为85%。     

香附子块茎试管苗繁殖

以香附子块茎为材料,用组织培养的方法,进行试管苗繁殖研究。结果表明,1/3MS+炉灰渣培养基是块茎生长芽培养的适宜培养基;1/2MS+ZT 0.6 mg/L+NAA 0.1 mg/L是生长芽分化和继代分化繁殖培养的适宜培养基;1/2MS+ABT 2号6 mg/L+IAA 0.4 mg/L是生根和试管苗微型块茎培养的适宜培养基。培养30 d试管苗移栽成活率96%;培养60 d试管苗移栽成活率89.7%;种植的块茎发芽率99.8%;试管苗和微型块茎定植的成活率在99%以上;定植试管苗保持了香附子的植物学特征。     

花生成熟胚胚轴的植株再生和快繁

利用正交试验筛选出了以花生成熟胚胚轴为外植体获得较高频率的不定芽分化和植株再生的条件,并在此基础上对花生试管苗的快速繁殖进行了研究,研究表明,4d龄实生苗的花生胚轴,接种于MS NAA0.4mg/L TDZ0.2mg/L诱导培养基上培养28d后,转移到MSo可获得丛生的再生苗。将丛生苗分离,接种到P1培养基（MS NAA0.4mg/L BAP0.5mg/L）,小苗长大,把较大的试管苗切成带叶节的茎段,接种于含不同浓度的TDZ和BAP的快繁培养基,结果表明,TDZ0.2mg/L最适宜试管苗的快繁,繁殖系数可达4.8/月,试管苗经IBA诱导生根后,移栽田间,开花结果。     

矮生一品红试管快速繁殖技术研究

矮委一品红试管苗增殖的最佳培养基为MS 6-BA0.2mg/L NAA0.05mg/L 0.36%琼脂,每月增殖倍数7.6,最佳生根培养基为1/4MS IBA1.0mg/L 琼脂0.36g/L,每株生根2～3条,试管苗移栽成活率86.5%。     

徐长卿子叶组织培养及再生体系的建立

以徐长卿子叶为材料,进行愈伤组织诱导、愈伤组织和不定芽分化、试管苗生根、移栽及移植等研究。结果表明,MS+6-BA 0.3 mg/L+NAA 0.2 mg/L+2,4-D 0.4 mg/L是子叶愈伤组织诱导和继代培养的理想培养基;MS+6-BA 0.8 mg/L+NAA 0.2 mg/L是愈伤组织分化培养的理想培养基;MS+6-BA 0.6 mg/L+NAA 0.2 mg/L是不定芽分化继代培养的理想培养基;炉灰渣是试管苗移栽的理想基质,移栽成活率可达97%。试管苗移植后长势旺盛,根系发达,当年开花。根据本试验结果可建立徐长卿子叶诱导再生体系。     

芥蓝组织培养研究

以登峰芥蓝为试材,取无菌苗的茎段、下胚轴为外植体分别进行组织培养研究。结果表明:MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L为下胚轴最适诱导培养基,MS+6-BA 5.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L为带腋芽茎段最适诱导培养基;最适宜的不定芽增殖培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L;试管苗在1/2MS+NAA 0.1 mg/L+IBA 0.2 mg/L培养基中进行生根培养效果最好;经炼苗后组培苗移栽成活率达96.6%。     

光质对马铃薯试管薯形成的影响

以两个试管薯形成能力不同的马铃薯脱毒试管苗为材料,研究不同光质(白光、红光、蓝光)对马铃薯试管苗生长和试管薯形成的影响.结果表明：红光下试管苗叶片的净光合速率、可溶性糖含量和生物量最高,试管苗叶片数多.蓝光对试管苗干物质含量和试管苗发育后期的结薯数量以及结薯期提前有明显促进作用,但对试管苗株高有明显抑制作用.白光下试管苗净光合速率和干物质含量最低.不同品种试管薯的形成对光质的要求有一定差异.总之,壮苗培养阶段采用红光,试管薯诱导阶段采用蓝光处理利于提高试管薯产量.     

激素种类及其浓度对矮牵牛试管苗增殖及生根率的影响

以MS培养基为基本培养基,以矮牵牛试管苗为材料,并用不同浓度的细胞分裂素6-BA、KT、Ad分别与生长素NAA（0．10mg／L）进行配比试验,并用一定浓度的细胞分裂素6-BA、KT、Ad两两分别组合配比试验,探讨了不同浓度的细胞分裂素对矮牵牛试管苗的影响,以及两类生长素IBA和NAA对生根的影响。结果表明,适合于矮牵牛试管苗增殖的培养基有：（1）MS＋1．60mg／L 6-BA＋0．10mg／LNAA;（2）MS＋0．80mg／L 6-BA＋1．60mg／LKT＋0．10mg／L NAA;（3）MS＋0．80mg／L 6-BA＋0．20mg／LAd＋0．10mg／LNAA;（4）MS＋1．60mg／L KT＋0．20mg／L Ad＋0．10mg／L NAA。适合于矮牵牛试管苗生根的培养基有（1）1／2MS;（2）1／ZMS＋0．20mg／L1BA;（3）1／2MS＋0．20mg／LNAA。     

斑花杓兰试管苗根茎繁殖

为保护斑花杓兰Cypripedium guttatumu种质、实现栽培,以其根茎为材料,采用组织培养方法,进行试管苗培养、根茎继代繁殖培养、试管苗扦插和定植研究。结果表明：1/2MS＋蔗糖16 g/L＋ABT 2号10 mg/L＋IAA 0.4 mg/L是根茎试管苗培养的理想培养基,且这种以炉灰渣为支持物的培养基也是试管苗根茎继代繁殖培养的理想培养基;在温室苗床上试管苗根茎段扦插成活率为96.5%,繁殖速度比移栽提高2.2倍;根茎扦插试管苗定植的成活率为96.8%。定植成活的根茎试管苗保持了野生斑花杓兰的所有植物学性状。     

植物激素和接种方式对广西金线莲壮苗生根的影响

该文以广西野生金线莲无菌播种离体茎段为材料,采用单因素对比试验,研究了植物激素(NAA、IBA、6-BA、GA_3、KT、ZT、TDZ、2-IP)以及接种方式(竖直接种和水平接种)对壮苗生根培养的影响。结果表明:与对照相比,生长素有利于壮苗生根,NAA的效果优于IBA;细胞分裂素对壮苗生根的效果依次为6-BATDZKT=ZT 2-IPCK,其中6-BA诱导平均株高8.4 cm,3.6条根,茎粗为2.84 mm,植株生长健壮,诱导效果最好;赤霉素GA_3诱导出的植株高且直,但植株细弱,且抑制根系生长,不利于壮苗生根培养;在激素组合6-BA 0.5 mg·L~(-1)、NAA1.0 mg·L~(-1)处理中,组培苗生长健壮且根数量较多,效果最佳;水平接种能诱导出更多的根系,且便于接种操作,可以节省接种时间。因此,确定广西金线莲最适宜的壮苗生根培养基配方为1/2MS+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+NAA 1.0 mg·L~(-1)+香蕉汁100 g·L~(-1)+AC(活性炭) 1.0 g·L~(-1)+蔗糖20 g·L~(-1),最佳接种方式为水平接种。     

油莎豆快速繁殖体系的研究

为建立油莎豆(Cyperus esculentus)的快繁体系,以茎尖为外植体,MS为基本培养基,采用正交设计法研究了6-BA、KT和NAA组合对丛生芽增殖和生根的影响。结果表明,3种生长调节剂对油莎豆丛生芽增殖的影响为6-BA NAA KT,最佳生长调节剂组合为1.0 mg L~(-1) 6-BA+0.2 mg L~(-1) KT,培养4周的增殖系数为7.58。MS培养基为最优生根培养基,生根率可达88.10%,平均生根数为2.04条。这为高效繁育油莎豆优质种苗和种质资源优化奠定基础。     

濒危植物盘龙参种子的非共生萌发及种苗的快繁研究

以盘龙参种子为材料,筛选离体条件下适宜种子非共生萌发、种苗快繁的培养基。结果表明:盘龙参种子在无植物生长物质的培养基中能够萌发,但不能发育成苗;在含有1.0mg·L-1 KT、0.1mg·L-1 IAA和0.1mg·L-1 GA3的培养基中萌发,并能进一步发育形成种苗;在较高浓度生长素(1.2mg·L-1 NAA)的培养基中不能萌发。种苗在较高浓度细胞分裂素和较低浓度生长素配比的培养基中能够增殖,最高增殖系数可达到2.8,转入壮苗生长培养基中培养80d后可以移栽温室。最适增殖培养基为1/2MS+12.0mg·L-1 6-BA+0.1mg·L-1 NAA+10.0mg·L-1腺嘌呤;最适壮苗生根培养基为1/2MS+1.0mg·L-1 KT+0.1mg·L-1 IAA+10.0mg·L-1腺嘌呤。     

广西五种绞股蓝属植物离体快繁与种质保存研究

以绞股蓝属植物的带芽茎段为材料,研究不同6-BA浓度与NAA 0.02mg·L-1组合对其诱导、分化和增殖的影响,并建立离体快繁体系。结果表明:MS+6-BA 2.0mg·L-1+NAA 0.02mg·L-1最适宜初代诱导,MS+6-BA 2.0mg·L-1+NAA 0.02mg·L-1最适合扁果绞股蓝的增殖培养,而MS+6-BA 1.5mg·L-1+NAA0.02mg·L-1是其它四种植物增殖的最佳培养基,在1/2MS+NAA 1.0mg·L-1上的生根率均达100%。1/2MS与蔗糖40g·L-1对五种植物的保存效果均最好;添加生长抑制剂能有效减缓生长速度,最佳生长抑制剂为ABA和CCC,浓度均为1.0mg·L-1,其中CCC能适合多个物种,连续保存360d的存活率均在94.5%以上;PP333不适合五种植物的保存。活力检测表明,各种质经保存后增殖、生根能力均未下降。     

菜心组织培养技术初探

为建立菜心(Brassica campestris ssp.chinensis var.utilis)的快繁技术体系,以花药和子叶-子叶柄为外植体进行组织培养研究。结果表明,花药培养以选取未开放的花蕾为宜,且花柱略高于花瓣,此时小孢子多数处于单核靠边期。菜心花粉的萌发率不高,且秋冬季的花粉比夏季的萌发率高。菜心花药愈伤组织诱导培养基为:MS+1.0 mg L–1 KT+1.0 mg L–1 2,4-D+3%糖+6 g L–1琼脂+8%椰乳,不定芽诱导培养基为:MS+2.0 mg L–1 6-BA+0.5 mg L–1 NAA+1.0 g L–1活性炭+2%糖+6 g L–1琼脂或MS+2.0 mg L–1 ZT+0.5 mg L–1 IAA+0.5 g L–1 AgNO3+1.0 g L–1活性炭+2%糖+6 g L–1琼脂。花药培养的不定芽诱导率为36.7%,不定芽培养出现褐化现象,不能形成再生植株;而以子叶-子叶柄为外植体培养获得的植株再生率可达80%。     

马来沉香组织培养技术研究

以马来沉香茎段为外植体,分别对外植体的消毒、启动培养、增殖培养、壮苗培养、生根培养、炼苗移栽环节进行研究,着重探索马来沉香组织培养技术各个环节的最佳培养基配方,为马来沉香的工厂化育苗提供技术指导。结果表明:马来沉香最佳消毒方法是用0.1%升汞消毒4～5min;启动率最高的培养基配方是1/2MS+6-BA 0.2mg·L-1+NAA 0.1mg·L-1+蔗糖30g·L-1+琼脂5.8g·L-1,启动率达70.5%;增殖系数最高的培养基是1/2MS+0.1mg·L-16-BA+25g·L-1蔗糖+5.8g·L-1琼脂,增殖系数达2.9;最佳壮苗培养基是1/2MS+30g·L-1蔗糖+5.8g·L-1琼脂;最佳生根培养基为1/2MS+NAA 5.0mg·L-1+20g·L-1糖+6g·L-1琼脂,培养2d后移入1/2MS培养基继续培养,生根率为83%;马来沉香移栽较难成活,在泥炭土∶黄泥土(2∶1)的基质上成活率最高,移栽成活率65%。     

紫茉莉不定芽诱导和植株再生

紫茉莉(Mirabilis jalapa)观赏价值较高,是一种重要的污染修复植物.组织培养技术为植物品种改良和选育的重要途径,但紫茉莉离体快繁方面的研究尚未见有相关报道.该研究以紫茉莉叶片和茎段为外植体,通过观察和统计外植体愈伤组织和不定芽的诱导情况,分析不同植物生长物质对紫茉莉植株再生的影响.结果表明:紫茉莉带芽茎段比较适合丛生芽的诱导,当带芽茎段在MS+1.0 mg·L-16-BA+1.5 mg·L-1 KT+1.0 mg·L-1 NAA+0.05 mg·L-1 TDZ培养基中培养时,不定芽的增殖系数较高.无论是MS或1/2MS培养基,都可诱导不定根的产生,其中生根效果较好的培养基为1/2 MS+0.5 mg·L-1 NAA.该研究结果探索了紫茉莉组织培养的最适条件,根据愈伤组织诱导率和不定芽的增殖系数筛选出了适宜不定芽诱导的培养基类型,根据不定芽生根情况确定了最佳的生根诱导培养基,为建立紫茉莉高效稳定的再生和遗传转化体系奠定了基础.     

牛角瓜离体快繁技术

该文选用牛角瓜茎段为外植体,通过组织培养方法探索牛角瓜组织培养和种苗快繁技术。结果表明:最佳外植体表面消毒方法是以0.1%HgCl_2处理7 min,外植体存活率为32.3%;初代培养基为MS+蔗糖30 g·L~(-1)+琼脂3.5 g·L~(-1),培养20 d后形成3～4 cm高的再生芽。增殖培养前期筛选的较为适宜的增殖培养基为MS+6-BA 1.5 mg·L~(-1)+NAA 0.05 mg·L~(-1)+蔗糖30 g·L~(-1)+琼脂3.5 g·L~(-1),增殖系数4.6。但在后续的培养过程中发现,牛角瓜组培苗易玻璃化,且随着世代更迭,玻璃化程度加重,到了第四代几乎全部玻璃化。因此在上述增殖培养的基础上,以AgNO_3作为玻璃化抑制剂,筛选出最终的增殖培养基为MS+6-BA1.5 mg·L~(-1)+NAA 0.05 mg·L~(-1)+AgNO_31.0 g·L~(-1)+蔗糖30 g·L~(-1)+琼脂3.5 g·L~(-1)。用此增殖培养基,培养25 d,苗高5～8 cm,增殖系数5.8,玻璃化率低于10%,且连续培养多代,玻璃化率维持在10%以下。生根壮苗培养基为1/2MS+NAA 1.0 mg·L~(-1)+蔗糖20 g·L~(-1)+琼脂3.6 g·L~(-1),培养14 d,生根率98%;将生根苗移栽于70%遮阴度的大棚中,30 d后,苗高20 cm左右,成活率85%。利用该方法可对牛角瓜优良种苗进行规模化生产。     

催吐萝芙木离体培养和植株再生体系的建立

为建立催吐萝芙木(Rauvolfia vomitoria Afzel.)的快繁再生体系,以茎段为外植体,比较了植物生长调节剂对其愈伤组织诱导、分化及生根的影响。结果表明,诱导愈伤组织的适宜培养基为MS+2,4-D 1.0 mg L~(–1)+TDZ 0.5 mg L~(–1)或MS+2,4-D2.0 mg L~(–1)+TDZ 0.5 mg L~(–1),出愈率达100%且生长状况良好;诱导丛生芽的最佳培养基为MS+6-BA 3.0 mg L~(–1)+NAA 0.1 mg L~(–1),出芽率为46.6%,平均出芽数为3.04。这为催吐萝芙木的快速繁殖和遗传转化研究奠定了基础。     

银杏愈伤组织诱导的多因子正交试验研究

采用正交试验设计法,研究了NAA、KT、2,4-D、蔗糖浓度和不同外植体类型等因素对银杏愈伤组织诱导的影响。结果表明:不同外植体类型对银杏愈伤组织诱导率影响最大,KT和NAA其次,2,4-D和蔗糖浓度最小。银杏愈伤组织诱导最佳培养基为MS+NAA 0.5 mg·L-1+KT 0.5 mg·L-1+蔗糖40 g·L-1,最佳外植体为茎段,其愈伤组织诱导率可达100%。