土豆汤琼脂培养基培养分枝杆菌的研究

本文报道了一种土豆汤琼脂培养基系统,试验过的16株各群分枝杆菌都能在该培养基上生长。大多数分枝杆菌在土豆汤琼脂培养基上的初生长时间快于罗氏培养基。分枝杆菌H_(37)R_v、鸟型,胃型、堪萨斯、脓肿、不产色和偶发等标准株,在一些土豆汤琼脂培养基上产生两种不同的菌落。初步的研究表明,土豆汤琼脂培养基还可用于胸水、痰内结核杆菌的培养。土豆汤琼脂培养基系用传统的琼脂培养基制作方法,价格低廉,适合在发展中国家的实验室和国内医院检验科推广使用。     

抗酸分枝杆菌和相关菌全细胞枝菌酸甲基酯的薄层分析

用单向薄层层析方法对22种抗酸分枝杆菌及相关细菌的全细胞枝菌酸甲基酯进行了分析。结果表明,人型结核杆菌、牛型结核杆菌、堪萨斯分枝杆菌、海分枝杆菌和胃分枝杆菌的图谱特征相似,由a、甲氧基和酮基枝菌酸酯组成,还有两种未知成分I和J。微黄分枝杆菌、草分枝杆菌、鸟分枝杆菌．胞内分枝杆菌、蛙分枝杆菌和不产色分枝杆菌等均由带a、酮基和蜡脂枝菌酸组成。其它菌种的层析图谱各不相同。诺卡氏菌、红球菌和棒杆菌的图谱较分枝杆菌属简单,主要含有a枝菌酸,又因其Rf值不同,可以将这4种菌属区别开。从肺结核患者痰中分离出来的9株标本技菌酸图谱与标准人型结核扦菌相同,这和用标准化规程进行鉴定的结果一致。我们认为单向薄层层析对于抗酸分枝杆菌的分类和鉴定具有一定的意义。     

新疆喀什维吾尔族结核病患者结核分枝杆菌5个VNTRs基因分型研究

目的:应用多位点数目可变串联重复序列分析(multiple loci VNTR analysis,MLVA)技术,对新疆喀什地区维吾尔族结核病患者结核分枝杆菌临床分离株进行基因分型,探讨5个数目可变串联重复序列(VNTR)基因型种类及其分布。方法:收集结核分枝杆菌,采用PCR和琼脂糖凝胶电泳技术,结合BioNumerics5.0软件,对其5个VNTR位点进行结果分析。结果:分离出58株结核分枝杆菌,分为4个基因群21个基因型,分别为Ⅰ群占19.1%,含7个基因型;Ⅱ群占3.4%,含2个基因型;Ⅲ群占67.2%,含9个基因型;Ⅳ群占10.3%,含5个基因型。结论:新疆喀什地区维吾尔族结核病患者的结核分枝杆菌存在明显的基因多态性,且存在主要流行菌群。     

分枝杆菌

<正>一、分枝杆菌和分枝杆菌病 目前分枝杆菌的DNA诊断的靶物质并非是与分枝杆菌病原性直接相关的因子,而是核糖体RNA(rRNA)。分枝杆菌包括结核杆菌群、麻风杆菌和非定型分枝杆菌,分枝杆菌病则为由这些细菌引起的以慢性细胞性炎症为特征的感染症。为目前细菌感染症中最重要的传染病。日本每年有数千人因结核病而死亡,需要治疗的患者也有十几万人。在发展中国家,在最近的将来没有克服该病的希望。全世界患者达1600万—2000万人,每年因结核病而死亡者计有300万人。 非定型分枝杆菌的毒性比结核杆菌弱,故作为病原菌一直被忽视,但最近因发现其中有引起条件感染症的菌种而始引入注目。尤其在美国的AIDS患者中普遍检测到该菌。该菌的问题焦点是既存的抗结核制剂对大多数菌种无效。在AIDS患者中多     

我国土壤中小双孢菌的分离

从我国南方和西南各省,分离到300多株属于小双孢菌属的放线菌,对其中200株进行了形态和培养特征的观察。根据培养特征,将这些菌分为8个群：白色类群、白紫类群、玫瑰类群、玫瑰红类群、玫瑰黄类群、紫色类群、产色类群和黄色类群。     

天冬酰胺酶介导的分枝杆菌酸适应机制

[目的]结核分枝杆菌可以在宿主细胞内的酸性环境中长期存活.为了探明天冬酰胺酶(AnsA)代谢通道介导的分枝杆菌在酸性环境中的适应机制,分别通过体内和体外实验,对AnsA的活性、突变体性质进行了分析.[方法]以无致病性的卡介苗分枝杆菌(M.bovis BCG)为模式菌,扩增天冬酰胺酶编码基因ansA并在大肠杆菌中进行表达和纯化,对AnsA的酶学活性进行了分析.在卡介苗分枝杆菌中将ansA敲除,对其抗酸、产氨等特性进行了研究.[结果]纯化的重组AnsA在体外可以将天冬酰胺分解并产生氨.在酸性培养基中,分枝杆菌利用天冬酰胺产生的氨,可以释放到培养基中,将酸性培养基中和.敲除ansA后,卡介苗分枝杆菌在酸性环境中的生长滞后10天左右.为了更好的理解天冬酰胺介导的抗酸机制,绘制了天冬酰胺代谢、氨产生和转运示意图.[结论]结核分枝杆菌的抗酸特性之一是通过分泌氨将周围的酸性环境中和来实现的.氨来源于分枝杆菌AnsA对底物天冬酰胺的分解.这为揭示结核分枝杆菌在宿主巨噬细胞内酸性环境中的生存机制提供了线索.     

丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶在结核分枝杆菌致病机制中的作用

丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(STPK)是一类真核细胞样的蛋白激酶,是分枝杆菌生长和代谢的重要调节因子,参与其多种细胞活动(如细胞和菌落形态、葡萄糖和谷氨酰胺转运、吞噬体-溶酶体融合、转录因子活性等)的调节.结核分枝杆菌编码产生11种STPK( PknA、PknB、PknD～PknL),可分为5群(ABL群、HED群、FIJ...     

鲟分枝杆菌病及其病原研究

20092010年间,我国人工养殖的中华鲟（Acipenser sinensis）、史氏鲟（Acipenser schrencki）和杂交鲟（hybrid sturgeon:A. baeri-A. gueldenstaedtii）暴发了细菌性疾病。患病鲟通过组织切片观察,病原菌的分离、鉴定以及组织样品中病原菌的检测,结果显示从19条患病鲟中分离到49株分枝杆菌。病原菌经过多个保守基因的测序分析和部分生理生化特征的鉴定,共发现有7种分枝杆菌,分别为龟分枝杆菌（Mycobacterium chelonae）、海分枝杆菌（Mycobacterium marinum）、戈登氏分枝杆菌（Mycobacterium gordonae）、偶发分枝杆菌（Mycobacterium fortuitum）、苏尔加分枝杆菌（Mycobacterium szulgai）、猪分枝杆菌 （Mycobacterium porcinum）和Mycobacterium arpuense。在诊断过程中发现两种或三种分枝杆菌同时存在于同一样品中,分子生物学的诊断结果表明分枝杆菌复合感染十分常见,而海分枝杆菌是分枝杆菌复合感染中最为常见的分枝杆菌。分离的病原菌对斑马鱼的攻毒试验结果表明在以上7种分枝杆菌中海分枝杆菌的毒力最强。以上结果表明海分枝杆菌是鲟分枝杆菌病的主要致病菌,分枝杆菌复合感染是鲟分枝杆菌病的主要感染形式。研究中史氏鲟和中华鲟的分枝杆菌病,以及在病鱼体内分离的猪分枝杆菌和M. arupense在国内外均尚未见报道。       

从大容量噬菌体抗体库中筛选抗Acr蛋白人源单链抗体

目的:从天然的大容量噬菌体抗体库中筛选特异的抗结核分枝杆菌晶体蛋白( alpha-crystallin Acr)的人源抗体.方法:以结核分枝杆菌Acr蛋白包被免疫管,通过对噬菌体抗体库进行4轮“吸附-洗脱-扩增”的过程从大容量抗体库中筛选特异性抗结核分枝杆菌Acr蛋白的抗体,并对可变区序列进行了测序分析.将特异性的噬菌体抗体感染HB2151菌,经IPTG诱导表达,制备了抗结核分枝杆菌Acr蛋白的可溶性单链抗体;对其序列和抗原结合活性进行分析鉴定.结果:经过4轮筛选,获得了43个与结核分枝杆菌Acr蛋白结合的阳性克隆,其中29个特异结合的克隆;测序分析有26不同的可变区片段;通过可溶性单链抗体(scFv)表达筛选到14株特异性结合Acr蛋白的可溶性单链抗体克隆;经过基因测序,分析了可变区基因的亚群.成功制备了可溶性单链抗体.Westren blotting分析证实筛选的人源单链抗体能与天然蛋白结合.结论:利用单链大容量抗体库获得抗结核分枝杆菌Acr蛋白的噬菌体抗体并且成功制备抗结核分枝杆菌Acr天然蛋白的可溶性单链抗体,为今后的研究和应用奠定基础.     

第12届国际生物奥林匹克竞赛(2001)理论试题(2)

(续 2 0 0 2年第 6期封三 )遗传和进化　　 79.猫的黑色由 1对 X连锁的等位基因决定 ;另一等位基因决定黄色。杂合型为龟壳色。黑色雌性与黄色雄性交配后会产什么后代 ?A.龟壳色雌性 ;龟壳色雄性B.黑色雄性 ;黄色雌性C.龟壳色雌性 ;黄色雄性D.龟壳色雌性 ;黑色雄性80 .1个男子到法庭作亲子鉴定。他是 B型血 ,Rh阳性 ,孩子母亲的血型为 B,Rh阴性 :孩子的血型为 A,Rh阴性。该男子是孩子生父的机率有多大 ?A.他不是父亲B.他有 5 0 %的可能是父亲C.他就是父亲D.他有 2 5 %的可能是父亲81 .孟德尔研究的豌豆的 7种性状都遵循分离规律的事实…     

外周血T细胞亚群在小鼠结核感染中的意义

目的探讨外周血T细胞亚群在小鼠结核感染中的意义,并与加用免疫调节剂组对比研究。方法60只小鼠随机分为3组,每组20只。结核感染组:小鼠经血管注射结核分枝杆菌(H37RV)0.05 ml,建立小鼠结核模型。生理盐水组:用0.05 ml生理盐水替代H37RV处理。母牛分枝杆菌菌苗组:按结核感染组同样剂量和方法复制小鼠结核模型,H37RV感染后第3、10、17天分别肌注22.5μg母牛分枝杆菌菌苗。感染4周后,取外周血用流式细胞仪检测T细胞亚群。结果感染组外周血T细胞亚群比率显著降低,母牛分枝杆菌菌苗组小鼠外周血T细胞亚群比率显著高于感染组。结论外周血T细胞亚群数量与结核感染的病情密切相关,调节小鼠结核模型的T细胞亚群免疫功能可使结核感染的病情发展得到一定程度的的控制。     

结核分枝杆菌生物被膜基质及潜在的药物靶点和治疗策略

持留性是结核分枝杆菌产生耐药和复发的重要原因之一.分枝杆菌的持留性与生物被膜的形成密切相关,对生物被膜的研究将有助于新型抗结核药物的开发.细胞外多糖、蛋白、DNA和脂质是结核分枝杆菌生物被膜细胞外基质的重要组成成分.本文阐述了结核分枝杆菌生物被膜基质的组成成分及基于这些成分潜在的药物靶点和治疗策略,希望为结核分枝杆菌生物被膜基质的生物学功能的研究带来新的思考.     

应用PCR-SSCP快速鉴定结核分枝杆菌复合群

通过聚合酶链反应（ＰＣＲ）－单链构象多态性（ＳＳＣＰ）技术分析结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌临床株的１６ＳｒＤＮＡ基因。６０例临床标本中,２０例为阳性,与传统方法比较无差异。其中分型：１８例为结核分枝杆菌,２例为结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌双重感染。２０例阴性标本中,ＰＣＲ－ＳＳＣＰ又检查出５例阳性。２０例对照标本中,３种传统方法与ＰＣＲ－ＳＳＣＰ法均检测为阴性。全部试验３ｄ报告结果。结核分枝杆菌复合群和卡介苗的图形相同以外,其它分枝杆菌的ＰＣＲ－ＳＳＣＰ电泳图谱均有差异。所以,应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术快速     

不同气候条件大花葵花色苷含量的分析

研究对不同气候条件的大花葵花色苷含量进行了分析, 气候条件不同的大花葵花色苷含量有明显差异, 从测定结果上看, 黑龙江哈尔滨产的大花葵花色苷含量要高于辽宁丹东产的大花葵;日照时数长, 昼夜温差大的条件下, 大花葵中的花色苷含量较高。     

供水系统非结核分枝杆菌生长因素及控制措施研究进展

近年来,非结核分枝杆菌感染在世界范围内日益普遍,严重威胁公众健康。供水系统是非结核分枝杆菌重要环境来源和主要传播途径,但目前对供水系统非结核分枝杆菌生长因素及控制措施的认识仍有较多不足。本文介绍了供水系统非结核分枝杆菌的生长传播特征,探讨了多个工程环境因素(如消毒剂、有机碳、管材和温度)和生物因子(如生物膜、阿米巴原虫和细菌)对非结核分枝杆菌丰度和物种多样性特征的影响,分析了供水全流程不同阶段控制措施对非结核分枝杆菌的控制效用,提出了深化认识供水系统非结核分枝杆菌的研究需求。     

耐药结核分枝杆菌基因组信息挖掘

<正>由于结核分枝杆菌的耐药性问题,使结核病这个古老的传染病死灰复燃,并成为全球性的严重公关问题。从1998年首个结核分枝杆菌(H37Rv)全基因组完成图的获得[1],到近年来采用新一代测序技术对多个菌株进行高通量的基因组测序与分析,对结核分枝杆菌进化及耐药机制的认识不断深入。关于结核分枝杆菌菌株的基因组比较分析有多篇报道,包括对中国12个省来源的161株结核分枝杆菌     

重组分枝杆菌噬菌体检测分枝杆菌的发光研究

采用生物发光方法检测重组的分支杆菌噬菌体对不同细菌的发光反应,并比较了仅在特定的温度范围内才能繁殖的温敏噬菌体Phage 88和正常噬菌体Phage 40对分枝杆菌感染活力测定时发光强度的差异,以建立用不同类型重组噬菌体检测结核分枝杆菌耐药性的方法和条件.结果显示两种噬菌体对各种分枝杆菌作用后均有发光,对非分枝杆菌发光值很低,两者差异有显著性;不同的分枝杆菌发光值有差异：卡介苗的发光值最高,结核分枝杆菌的发光值最低;温敏噬菌体Phage 88的检测灵敏度大于正常噬菌体Phage 40,差异显著.因此可认为两株噬菌体均可特异地检测结核分枝杆菌,但Phage 88的效果优于Phage 40.     

重组IL-2限制鼠麻风杆菌和卡介苗在小鼠中增殖

<正> 分枝杆菌特别是非结核分枝杆菌危及健康并具耐药性已引起人们的关注。因此,研究新的治疗方法是重要的.特别是当获得性免疫缺陷综合症流行时增多非结核分枝杆菌的感染病例.在分枝杆菌感染中,IL-2可能有重要的作用,因为众所周知IL-2可诱导产生r-干扰素和其他淋巴因子,淋巴因子又可活化小鼠巨噬细胞和人单核细胞,从而抑制各种分枝杆菌的生长。也有证据表明,IL-2影响淋巴细胞对分枝杆菌抗原的反应,因为IL-2反向     

成簇的规律间隔短回文重复序列在致病菌中分型研究及应用

为全面深入了解CRISPR在致病菌中的最新进展,该文简介了CRISPR的结构与功能,深入论述其在各类致病菌中的分型研究及应用情况,剖析CRISPR分型研究现有问题和措施,并展望今后CRISPR重点研究方向。CRISPR分型在各类致病菌中有着不同程度应用,在结核分枝杆菌复合群、沙门氏菌、产志贺毒素大肠杆菌等致病菌中已获成功。加强多种致病菌的全基因组测序及扩充CRISPR数据库,CRISPR分型将会应用更广泛。     

三叶草根系分泌物对多环芳烃微生物降解及加氧酶的影响

为揭示根际效应对多环芳烃降解的影响机制,建立恰当的植物-微生物联合修复模式,本研究向含有微生物及多环芳烃(芘和苯并\[a\]芘)的微宇宙中加入三叶草根系分泌物,分析其对多环芳烃降解的影响,研究降解过程中微生物加氧酶和16S rDNA基因拷贝数的变化,并对具有多环芳烃降解能力的微生物进行鉴定.结果表明： 分枝杆菌M1具有降解多环芳烃的能力;三叶草根系分泌物总有机碳(TOC)浓度为35.5 mg·L^-1时,芘和苯并\[a\]芘降解率明显提高,分枝杆菌加氧酶基因所占比例增加,表明其促进了分枝杆菌对芘和苯并\[a\]芘的降解;在降解过程中,加氧酶基因拷贝数明显增加,而16S rDNA数量增加不明显,表明前者与多环芳烃降解过程有关,而后者和微生物数量有关.三叶草根系分泌物使分枝杆菌加氧酶基因拷贝数明显增加,从而促进了分枝杆菌对多环芳烃的降解.