淋球菌感染实验室诊断的实用技术

淋病奈瑟菌 (N eisseria gonorrhoeae)是淋病的病原体 ,该菌也称淋病双球菌 (diplococcus gonorrhoea)或淋球菌(gonoccus)。淋球菌的分离培养检测法仍是诊断淋病的金标准试验技术 ,基因探针技术有可能比分离培养法更敏感和特异而成为另一种可行的诊断方法 [1 ] 。在设计淋病的诊断技术时 ,实验技术人员要考虑所在单位的实际、社区淋病患病率以及试验方法的成本效益等 ,试验效果 (testperformance)是选择淋病诊断试验的关键指标。当社区淋病患病率低时 (如产前检查的妇女 ) ,敏感度与特异度均高的试验方法的阳性预测值 (PPV)也低 ;类似试验…     

淋病奈瑟菌感染实验室检测技术的进展

细菌培养是诊断淋病奈瑟菌(NG)感染的"金标准",也是目前诊断淋病最可靠的方法.但淋病奈瑟菌在人体外抵抗力极弱,不易培养;仅做细菌形态学检查,诊断意义有限.随着淋病奈瑟菌耐药性不断增强,多重耐药菌出现并广泛传播.高敏感性、高特异性、操作简便的分子生物学检验技术,如单管多重聚合酶链反应(PCR)技术等,已开始用于淋病奈瑟...     

美国生物技术中心的发展

自从八年前首次在北卡罗来纳和密执根州出现旨在促进地方或州际生物技术发展的生物技术中心以来,随后相继在30多个州建起了50多个此类生物技术中心。1988年5月生物技术协会(ABC)邀请各地生物技术中心建立了生物技术中心委员会作为该协会的一个分部。目前生物技术中心委员会(CBC)的成员已发展到30多个。     

淋病奈瑟菌感染的实验室诊断技术概述

淋病奈瑟菌是淋病的病原菌,淋病不及时诊断和治疗会引起严重的并发症,早期诊断和治疗是控制淋病传播的关键。试验诊断技术在淋病的诊断和治疗中具有十分重要的作用。目前,常用的试验诊断方法有涂片镜检、分离培养、免疫学方法、分子生物学检查和快速检查等。分泌物直接涂片染色镜检大多常用革兰染色,但是有其局限性,细菌培养是诊断淋病的金标准,也是目前诊断淋病最可靠的方法,但淋病奈瑟菌培养困难,仅做细菌学培养检查,诊断意义有限。随着新仪器的研发以及现代分子生物学理论和技术的发展,快速、准确、特异、敏感的分子生物学技术已经成为试验诊断的重要手段,具有广阔的应用前景,临床上还需要开发新的核酸扩增试验技术,以便更好地指导临床治疗。临床医生在实际诊疗过程中应该根据患者的实际情况正确选择检测方法,有时建议选择两种以上的检测方法以提高阳性检出率。本文就淋病奈瑟菌感染的试验诊断技术的研究进展加以概述。     

淋病奈瑟菌分型研究进展

淋病奈瑟菌(简称淋球菌)是引起淋病的病原体。淋球菌的疫苗研究工作进展缓慢,迄今未研制出有效的疫苗;近年来,淋球菌耐药性逐年上升,多重耐药性淋球菌随之出现并广泛传播,使淋病的防治越来越困难。研究表明,淋球菌分型在淋病疫苗的研究、制定流行病学控制措施和淋病的治疗中均具有极其重要的意义。淋球菌的分型方法包括血清学分型、营养分型等传统分型方法和脉冲场凝胶电泳(PFGE)、随机扩增多态性DNA分型(ARPD)、opa分型、por分型、多位序列分型(MLST)等分子生物学分型方法。本文就淋球菌的分型方法作一简要介绍。     

单克隆抗体在淋病奈瑟氏菌研究和感染诊断中的应用

淋病是全球性疾病,对于淋球菌的研究已进入分子水平,本文从以下３个方面综述了单克隆体抗体在淋球菌研究和感染诊断中的应用：１．对于脂寡糖的研究２．对于淋球菌外膜蛋白Ⅰ的研究３．单克隆抗体在淋病流行病学和诊断中的应用。     

淋病奈瑟菌实验诊断方法学的评价

淋病是临床常见的性传播疾病。本文根据了淋病奈瑟菌（淋球菌）的实验室诊断分级、质控标准。并对诊断方法,尤其是核酸检测技术的敏感性与特异性进行了评估。     

淋病奈瑟菌肽基脯氨酰异构酶的原核表达及其作为候选疫苗的初步评价

【背景】淋病是我国主要的性传播疾病之一,感染淋病奈瑟菌可促进人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus, HIV)的传播和感染。目前我国淋病发病人数呈上升趋势,随着多重耐药菌株的出现,亟须研发保护性疫苗来防治淋病的传播和感染。【目的】分析淋病奈瑟菌(Neisseria gonorrhoeae, NG)肽基脯氨酰异构酶(peptidyl-prolyl isomerase, PPIase)蛋白的高级结构和表位,探讨其作为疫苗和分子诊断靶点的潜力。【方法】利用生物信息学软件分析PPIase蛋白的极性、亲水性、柔韧性、表面可及性、二级和三级结构,以及T、B细胞表位等;用pET32a(+)质粒构建PPIase蛋白的原核表达系统并纯化蛋白,用纯化的重组蛋白和超声波破碎的NG全菌抗原分别免疫BALB/c小鼠,收获免疫血清;制备NG全细胞抗原,分别以全细胞抗原酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)和间接免疫荧光试验检测重组PPIase蛋白血清抗体与NG全细胞表面抗原的结合情况。【结果】生物信息学分析结果显示,...     

中国猎蝽科的新种和新纪录

本文记述了在我国新发现的猎蝽13种,属于蚊猎蝽亚科(Emesinae)八种,盲猎蝽亚科(Saicinae)四种,绒猎蝽亚科(Tribelocephalinae)一种。其中包括九个新种和四个在我国的首次纪录。     

男性尿道炎患者多形核白细胞计数与解脲脲原体感染的临床相关性分析

本研究旨在检测男性尿道炎患者中尿道多形核白细胞数量,并进行解脲脲原体(Uu)培养,以评价非淋病奈瑟菌性尿道炎的临床意义。将2284例男性性病患者的尿道分泌物涂片,亚甲蓝(美蓝)染色后镜检多形核白细胞,并体外培养尿道分泌物的Uu。结果显示,645例患者(28.2%)Uu培养阳性,其中158例(24.5%)≥5个多形核白细胞,157例(24.3%)1～4个多形核白细胞,330例(51.2%)无多形核白细胞。218例阳性患者(33.8%)无症状,614例阳性患者(95.2%)无体征。男性尿道多形核白细胞数量在Uu培养阳性和阴性患者中存在显著差异(P0.01)。结果提示临床诊断与实验室检查在证实男性非淋病奈瑟菌性尿道炎中具有重要意义。     

杭州市淋病奈瑟菌质粒酶切图谱分析研究

目的 :了解杭州市淋病奈瑟菌质粒携带及质粒谱型分布情况。方法 :采用碱裂解法对门诊 2 0 0 0年 1月～ 2 0 0 1年 10月分离的 2 0 7株淋病奈瑟菌进行了质粒抽提及质粒谱分型研究 ,并对菌株的青霉素耐药现象和耐药性质粒的关系进行探讨。结果 :2 0 7株淋病奈瑟菌中 194株 (93 .7% )检见质粒带 ,其中含一条质粒带的 112株 (5 4.11% ) ,含两条质粒带的 12株 (5 .8% ) ,含三条带的 70株 (3 3 .82 % ) ,尚有 13株(6.2 8% )未检测到质粒。以 E.coli V5 17细菌质粒作分子量标准 ,测得这些分子量分别为 2 .6、4.5、和 2 4.5Md。质粒谱型以 2 .6 4.5 2 4.5 Md(3 3 .82 % )多见。结论 :杭州地区质粒酶切图谱的分析研究有助于淋病的治疗和防治 ,这将对该地区淋病奈瑟菌的分子流行病学调查和淋病监控提供依据     

淋病奈瑟菌耐药机制研究进展

淋病是由淋病奈瑟菌(淋球菌)感染引起的一种性传播疾病,其流行和蔓延已成为全球公共卫生事业巨大的负担.抗菌药物治疗是目前淋病防治的主要方式,但随着抗菌药物在临床上的广泛应用,淋球菌的耐药性问题日益严重.深入探究淋球菌的耐药机制,对完善其耐药监测体系和调整临床用药方案均有重要意义.本文在回顾近几年淋球菌耐药机制相关研究的基...     

五种水蛭对不同P^H值的生物效应

本文论述了使用常规试验方法研究5种水蛭:宽身舌蛭(Glossiphonia lata)、八目石蛭(Erpobdella octoculata)、光润金线蛭(Whitmania laevis)、尖细金线蛭(Whitmania acranulata)和日本医蛭(Hirudo nipponia)对12个pH值的24—96小时急性生物效应。结果表明:稻田3个种(尖细金线蛭,光润金线蛭和日本医蛭)均较湖泊近岸2个种(八目石蛭和宽身舌蛭)对pH值的变化要敏感,其中尖细金线蛭最敏感(pH6.0—7.2),八目石蛭的忍耐限度最宽(pH4.0—10.5);当pH值在9.5时,稻田3种水蛭的死亡率在40％以上,其中日本医蛭高达70％;当pH值在3.0时,湖泊近岸2种在24小时内全部死亡,日本医蛭仅死亡10％。日本医蛭是华中农村地区一种主要吸血蛭类,生石灰是一种从稻田消灭蛭类的有效手段,然而水的pH值必须不低于8.6。     

云南新收集水稻地方品种的表型多样性分析

以来自云南16个州(市)新收集的1189份水稻地方品种为试验材料,分析了17个农艺性状的多样性指数在县(市)、州(市)、稻作生态区及稻作民族间的差异和分布。结果表明,在县(市)分析单元内,滇南、滇西南的芒市、盈江、陇川、腾冲、勐海、沧源等县(市)的多样性指数为1. 6010~1. 6822,高于其他县(市)。在州(市)分析单元内,滇南、滇西南的德宏(1. 6951)、普洱(1. 6746)、临沧(1. 6723)等州(市)的多样性指数较其他州(市)高。在稻作生态区分析单元内,有效穗数、穗粒数、千粒重和结实率等产量性状及株高、谷粒长、谷粒宽、剑叶宽和穗抽出度生物学性状的多样性指数为南部边缘水陆稻区(Ⅱ)高于滇西北高寒粳稻区(Ⅲ)和滇南单双季籼稻区(Ⅰ); 17个性状的多样性指数在Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ稻作生态区间的差异不显著,而结实率、谷粒宽、谷粒长宽比、剑叶长和剑叶宽5个性状的多样性指数在南部边缘水陆稻区(Ⅱ)与滇东北高原粳稻区(Ⅴ)间存在显著差异;除剑叶角度、倒伏性、种皮色和叶片茸毛外,其他13个性状的多样性指数在南部边缘水陆稻区(Ⅱ)与滇中一季粳籼稻区(Ⅳ)间也有显著差异。在稻作民族分析单元内,哈尼族、汉族、景颇族和彝族稻作的多样性指数为1. 7033~1. 7308,高于其他稻作民族;其中,在同一州(市)不同稻作民族间,德宏州景颇族(1. 3735)、傈僳族(1. 3714)和汉族(1. 3526)的多样性指数平均值较高;同一稻作民族不同州(市)间,德宏、保山和临沧汉族及红河州彝族的多样性指数平均值较大(1. 6190~1. 6808)。大穗和大粒型资源分别为173份和84份,主要分布于德宏、西双版纳和普洱等州(市);长粒型资源主要分布于德宏州和临沧市。总体而言,位于滇南和滇西南地区的县(市)、州(市)及稻作生态区是云南水稻地方品种性状多样性分布中心,而哈尼族、汉族、景颇族和彝族等的稻作表型多样性高于其他民族。     

淋病的临床及实验室诊断

<正> 淋病是由革兰氏染色阴性的淋病双球菌引起的一种以尿道炎为主的性传播疾病。本病虽有特效疗法,但由于潜伏期短,接触者的传染率高达50～90％,短时间内病例可成倍增加,以及为数众多的无症状患者,使传染源的控制甚为困难,故至今仍在不少国家与地区流行,仅美国每年即有患者300余万,因而,近年来对淋病的临床及实验室诊断研究十分活跃,现将有关资料综述如下。     

COA实验快速鉴定淋病双球菌的研究

近几年随着国际交往机会增多,在我国性病流行不断增加,其中淋病占80％以上,因此及时准确进行淋病球菌的病原学诊断对淋病的治疗有重要意义。但目前的鉴定方法大多数单位仍采用传统分离培养或直接涂片染色的形态学作为病原菌主要依据,影响了淋病的准确诊断率。我们采用COA实验快速鉴定淋病双球菌经考核验证此方法敏感,阳性率明显高于培养方法,介绍如下。     

男性尿道炎尿道多形核白细胞与沙眼衣原体和淋病奈瑟菌感染临床相关性分析

目的：沙眼衣原体和淋病奈瑟氏球菌是引起泌尿生殖系统尿道炎疾病常见的致病菌。临床化验一般采用美蓝染色检查男性尿道多形核白细胞或病原微生物阳性可提示尿道炎症状,指导临床的早期治疗。在缺乏临床症状体征和尿道多形核白细胞的情况下,临床的治疗将是不同的。本研究采用美兰染色检查男性尿道炎患者多形核白细胞数量、沙眼衣原体抗原和淋病奈瑟氏球菌培养,评价非淋菌性尿道炎和淋病的临床意义。方法：3,000例性病患者的尿道分泌物进行美兰涂片染色镜检,衣原体抗原检测和淋病奈瑟氏球菌染色镜检和培养。结果：3,000例性病患者中,387例患者（12.9%）沙眼衣原体抗原阳性。 在沙眼衣原体患者中,242例（62.5%）≥5个多形核白细胞, 59例（15.2%）为1~4个多形核白细胞,86例（22.2%）为0个多形核白细胞,其中36例患者（9.3%）无症状,141例患者（36.4%）无体征。415例（13.8%）淋病奈瑟氏球菌阳性,在淋病患者中,397例（95.7%）≥5个多形核白细胞, 10例（2.4%）1~4个多形核白细胞, 8例（1.9%）为0个多形核白细胞,其中5例（1.2%）患者无症状, 46例(11.1%)无体征。86例沙眼衣原体和淋病奈瑟氏球菌合并感染的患者中,76例阳性患者≥5个多形核白细胞,5例阳性患者为1~4个多形核白细胞, 5例阳性患者无多形核白细胞。结论：本研究分析了尿道炎患者尿道多形核白细胞,沙眼衣原体和淋球菌感染的相互之间的关系,男性尿道炎患者尿道多形核白细胞数量与沙眼衣原体感染和淋球菌感染存在明显的差异（P<0.001）。86例（22.2%）沙眼衣原体感染和8例（1.2%）淋病患者的尿道中无多形核白细胞。因此,加强临床与实验室诊断可提高男性尿道炎的诊断和控制性病的传播。     

Ecogen试验非重组体细菌杀虫剂

通过使用改良杀虫剂细菌的非重组体方法,Ecogen正避免与管理当局的争论。该公司已获得美国环境保护局(EPA)的准许,在南部八个州进行遗传性质变异的Bacillus thurin-giensis(BT)的大田试验以消灭棉花和蔬菜的害虫。通过野生 BT 品系之间的自然接合获得了新品系。细菌混合时,一些细菌互相接合,含有 BT 毒素基因的质粒可从一个细菌细胞转     

聚合酶链反应-单链构型多态性检测细胞壁缺陷型淋病奈瑟菌cppB基因变异

目的：检测与分析淋病奈瑟菌L型的cppB基因,探讨细胞壁缺陷对淋病奈瑟菌cppB基因的影响。方法：用青霉素诱导淋病奈瑟菌成为L型并获得稳定L型纯培养物,用cppB基因特异性引物以聚合酶链反应(PCR)检测稳定L型纯培养物的cppB基因和进行单链构型多态性(SSCP)分析。结果：淋病奈瑟菌的细菌型及其L型都具有cppB基因扩增产物,但PCR—SSCP分析可见异常泳动DNA带型(细菌型有2条带、L型有3条带)。结论：细胞壁缺陷淋病奈瑟菌仍然具有cppB基因,但其碱基序列可以发生改变。     

云南嘉赐树属的新植物

嘉赐树属(Casearia Jacq.)植物为天料木科(Samydaceae)。约有160种,主要分布于热带美州、非州、亚州和大洋州地区。产于我国的种类非常之少,据文献记载只有6种,产华南和西南地区。云南有2种,即C.yunnanensis和C.membranaeea,而后者又只见之于文献,未见标本。笔者最近在清理该属植物标本时发现,产于云南的种类远较以前文献记载的为多,计有6种和4变种、其中包括1个新种、3个新变种和4个新记录的种和1个变种。主要产于云南南部和东南部,海拔140—2000米。