通过染色体重组导人外源基因

由于栽培作物在世界范围内大规模的基因流蚀和近代遗传学、生物系统学研究成果的积累以及栽培植物与其野生近缘种进化关系的澄清,育种学家把作物改良的突破寄希望于野生基因库的开发和利用。同时,近代生物学技术,如:种、属间杂交、离体胚培养、染色体削除、附加、代换等的迅速发展,使对野生基因库的利用已成为可能。     

"科学史经典实验"的生物学课堂探究教学思考

探究：是一种模拟性的科学研究活动，涉及问题、假设、数据、解释、评价、结论等多个环节。探究有多种类型：定向探究与自由探究、归纳探究与演绎探究。探究又有多种实施途径：探究性提问、探究性讨论、探究性演示以及探究性实验。     

细菌重组系统及其应用研究进展

利用重组酶和辅助蛋白共同作用于DNA片段上,使不同基因重新组合以完成基因重组的现象在细菌中广泛存在,基因重组对于细菌的遗传多样性、进化等具有重要意义。目前,细菌基因重组主要分为同源重组、位点特异性重组和转座重组3种类型。本文主要对细菌重组系统重组酶的种类、作用机制及其在细菌遗传操作中的应用策略进行阐述。     

“基因在染色体上”基于科学史的教学设计

以科学史发展过程中科学家对基因与染色体关系的探索与研究为主线,以基于类比推理、演绎推理、模型构建的科学思维和方法的训练为核心,兼顾科学态度的培养,实现知识、能力、情感态度与价值观的三维教学目标。     

一道实验题的思维训练教学策略

例题：将青蛙脑破坏,保留脊髓,在脊柱下部打开脊椎骨,剥离出脊髓一侧的1对脊神经根（包含1个背根和1个腹根,见图）。分别电刺激背根与腹根均可引起蛙同侧后肢发生运动反应。背根与腹根合并成脊神经。     

利用细菌人工染色体同源重组对小鼠基因进行条件型敲除

目的:探索通过细菌人工染色体(BAC)同源重组系统构建条件基因敲除载体的高效率方法,提高条件基因敲除小鼠(Flox小鼠)的构建效率。方法:利用作者自己构建的噬菌体重组酶系统,通过BAC同源重组进行条件型基因敲除载体构建工作。首先通过亚克隆构建了一系列载体含有同源臂的靶向质粒,线性化后,打靶片段经电穿孔法转入大肠杆菌内,与相应的BAC同源重组,再经过三步同源重组和一步位点特异性重组,构建小鼠条件型基因敲除载体。结果:高效率构建了小鼠基因的最终条件基因敲除载体。结论:通过BAC同源重组高效构建条件基因敲除载体,为条件基因敲除载体的构建提供了全新思路,并为FLox小鼠的建立,及相应基因在发育、生理、致病机制等方面的功能研究奠定了基础。     

基因重组与基因合成实验设计软件系统的建立

本文报导了用于基因重组与基因合成实验设计的软件系统的建立.此系统由30个功能模块组成,为研究者提供了包括在DNA分子上寻找限制性内切酶位点、核酸分子片段之间同源性比较,基因化学合成的实验设计、特定顺序分析引物及核酸杂交探针的设计、阅读框的查找等功能.此外,本系统可以对外来数据库的资料进行援引和进一步分析,为分子生物学的研究提供有价值的信息.     

细菌内同源重组法制备FMDV聚蛋白编码基因重组腺病毒

采用PCR方法从重组质粒pMD18_T/PP中扩增出FMDV的聚蛋白(PP)编码基因,再亚克隆至腺病毒穿梭质粒中,形成重组穿梭质粒rpAd_CMV/PP;将获得的重组穿梭质粒与腺病毒骨架载体通过在大肠杆菌内质粒间同源重组获得重组腺病毒质粒rpAd/PP。将腺病毒载体线性化后用脂质体介导转染293细胞从而获得含有口蹄疫病毒PP编码基因的重组腺病毒。通过倒置显微镜观测,可见明显的细胞病变,利用荧光显微镜可观测到报告基因绿色荧光蛋白的表达,并在电镜下观察到FMDV的空衣壳。结果证明已成功获得了含有口蹄疫病毒PP编码基因的重组腺病毒rAd/PP,并成功表达组装FMDV空衣壳,为FMDV腺病毒活载体疫苗的研究奠定了基础。     

冠状病毒的基因重组

冠状病毒的基因组约有高达25％的重组频率。已经证明在病毒基因组之间以及缺损性干扰（DI）RNA与病毒RNA之间可以发生重组,这为病毒RNA及DI RNA提供了一种进化的工具,并可用来解释冠状病毒基因组的多样性,冠状病毒能进行重组的特性可能与其mRNA的转录机制有关,其RNA的合成是不连续的,产生了病毒聚合酶的非持续性,重组还被用作病毒基因组RNA突变的一种工具。     

Red重组技术研究进展

主要从Red系统组成元件、作用机理、重组策略以及先进性和发展前景四个方面综述了利用Red 重组系统敲除或替换细菌染色体目的基因的方法。首先简要介绍了传统的细菌染色体重组技术,指出了其中的缺陷。然后提出了Red重组技术的定义：利用噬菌体Red系统介导来实现外源线性DNA片断与细菌染色体的靶基因进行同源重组的方法,外源线性DNA通常是PCR产物、寡核苷酸片断等,在它们的两翼各含有与染色体靶基因两翼同源的序列40~60bp。这种Red重组技术省去了体外DNA酶切和连接等步骤,使细菌染色体靶基因的敲除与替换操作相对简单,逐渐成为基因功能探索以及新菌株构建的有力手段。     

细菌的氧化应激反应及其基因调控

细菌受到氧化刺激时,会激发一系列保护性反应,激活一群特定的调控子,诱导一些具有抗化作用的蛋白质,从而保护自身。其中较重要的调控子如ｏｘｙＲ及ｓｏｘＲ,都通过正调控激活基因表达,但不影响基础表达。氧化应激反应广泛存在于原核和真核细胞生物中。     

融合科学史感悟科学探究过程——以“基因的显性与隐性”为例

在课程中融合科学史可以激发学生学习的兴趣,让学生亲身感悟科学家实验探究的过程,进而增强对科学本质的认识,养成勤于思考、不断探索的良好品德.以“基因的显性与隐性”的教学为例,探讨如何引导学生以科学史重演过程的方式进行探究实验,深刻理解知识.     

基因重组技术在衰老研究中的应用

近年来应用基因重组技术在发现衰老相关基因,研究中枢神经系统衰老,构建老年病模型及老年性疾病的基因治疗等方面取得了一些进展。１．衰老相关基因的发现日本学者Ｋｕｒｏ等发现突变的ｋｌｏｔｈｏ基因缺陷小鼠产生衰老表现,且寿命缩短。他们是在研究高血压病遗传变化...     

细菌的必需基因

发现：研究鉴定了最小的非生命细菌——生殖器支原体（Mycoplasma genitalium）的必需基因，美国克莱格·凡特研究所的John Glass等人利用全球转座子诱变分离单一基因，发现482个基因中有382个基因是维持细菌正常功能所必需的，比以前研究的结果265-350多一些。     

基因重组卡介苗的优点及应用

基因重组卡介菌（rBCG）是借助分子生物学技术,将外源基因导入BCG中构建而成的多价疫苗,rBCG可诱导长期的体液免疫和细胞免疫,初步的研究结果已显示出rBCG具有广阔的应用前景,有望发展成为一种经济有效的新型疫苗以预防传染病和一些肿瘤。