一株种间融合的三倍体杂种酵母减数分裂产物的遗传学分析

通过原生质体融合技术将二倍体酿酒酵母（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅｖａｒ．ｅｌｌｏｐｓｉｏｄｅｕｓ）与单倍体糖化酵母（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｄｉａｓｔａｔｉｃｕｓ）构建成遗传上稳定的种间三倍体融合杂种。实验结果表明,这种融合杂种象有性杂种一样能诱导产孢;对其完整和非完整四分子的遗传分析,证明了通过遗传标记互补选择法获得的种间三倍体融合杂种ＨＵ－ＫＤＦ－２４０在产孢过程中,标记基因发生了分离和交换,出现了亲二型和重组类型;四分子对可溶性淀粉的发酵和不发酵分离比为１∶２,而原养型与营养缺陷型的分离比是１∶１。     

植物细胞电融合技术在空间实验中的应用

细胞电融合是实用性很强的生物技术,然而在地面上由于重力沉降和热对流的影响,杂种细胞融合得率较低,使得这项技术在生产上的应用潜力难以发挥。大量的实验表明,空间微重力环境是实现细胞电融合的重要途径。今后有望利用空间微重力条件获得有价值的杂合细胞,培育作物新品种,为开展空间生物加工和空间制药提供良好基础。     

烟草和枸杞属间原生质体电融合再生杂种植株

烟草（Ｎｉｃｏｔｉａｎａ ｔａｂａｃｕｍ Ｌ．）叶肉原生质体和枸杞（Ｌｙｃｉｕｍ ｂａｒｂａｒｕｍ Ｌ．）悬浮细胞原生质体在适宜电场条件下能以４％ —５％ 的频率发生异质融合。用过氧化物酶和超氧歧化酶同工酶方法对随机选取的１００ 个细胞系进行分析,发现杂种愈伤组织形成频率为９％ 。其中５个杂种细胞系具有分化能力,再生出大量丛生小苗。这些小苗多数在形态上兼有双亲特征并难以生根和长大。叶片酯酶同工酶分析表明,其中２ 个杂种细胞系（ＮＬ４ 和ＮＬ８）再生苗含有一条双亲没有的重组酶带。对亲本和杂种细胞系ＮＬ４ 的细胞学观察结果表明,杂种细胞系的染色体数目为２ｎ＝ ５５—８０,明显高于亲本。对亲本及ＮＬ４ 和ＮＬ８ 愈伤组织的基因组ＤＮＡ 进行ｒＤＮＡ Ｓｏｕｔｈｅｒｎ 杂交发现,ＮＬ８ 含有双亲的全部谱带,且在３．０ ｋｂ 处出现１ 条新带;ＮＬ４ 没有枸杞的特征带,但在３．０ ｋｂ 和５．５ ｋｂ 处出现２ 条新带,说明这两个杂种中的双亲ｒＤＮＡ 可能已发生分子间重组。从ＮＬ４ 愈伤组织得到４ 株形态上近似烟草的完整植株,并移栽成活     

沙打旺与苜蓿属间体细胞杂交

以豆科牧草沙打旺为一亲本,碘乙酰胺处理的紫花苜蓿发根农杆菌A4菌株转化系为另一亲本,通过PEG-高pH,高钙法诱导原生质体融合。在不加外源激素的DPD培养基上有效地筛选了杂种细胞。经培养首次得到沙打旺( )紫花苜蓿的属间体细胞杂种。尽管双亲原生质体均已丧失分化植株的能力,但杂种细胞系R1仍得到苗的分化。杂种R1细胞的染色体数检查、冠瘿碱检测、同工酶和RAPD分析结果,都证实了其杂种特性。     

啤酒酵母菌的细胞融合

啤酒多倍体酵母菌原生质体已成功地与单倍体原生质体进行融合。经细胞壁再生后,稳定的融合重组体被分离出来。这些融合体的基因分析表明,融合体中含有双亲的基因型。孢子形成良好,且每个子囊中含有四个孢子,每个孢子确实是二倍体。这样原生质体融合就提供了一个对啤酒酿造酵母进行遗传分析的方法。但是如果没有一个方便的杂交技术,这个方法将是很困难的。     

黄花烟草和枸杞属间原生质体融合再生杂种小苗

利用改良的PEG方法以2%的频率诱导黄花烟草原生质体和经IOA失活的枸杞原生体融合。在获得的250块愈伤组织中,有5块为形态上与枸杞愈伤组织类似。对这5块愈伤组织的过氧化物酶和酯酶同工酶分析结果表明,其中的2块(记作Hy2和Hy5)为对称程度较高的体细胞核杂种,其它3块为不对称核杂种或细胞质杂种。细胞学观察指出,Hy2和Hy5的平均染色体数目分别为98.2和59.3。此外,两个杂种的几乎所有中期细胞均含有结构变异的染色体。以小麦rDNA为探针的Southern杂交结果表明,Hy2和Hy5均含有双亲DNA特异片段。从Hy5再生出了形态上介于双亲之间的小苗。对再生苗叶片的酯酶同工酶分析指出,这些小苗含有双亲的特征酶带。     

同工酶与玉米杂种优势研究——Ⅰ.营养生长期杂种与其亲本的比较研究

自从1959年提出同工酶概念以后,很快就在医学、生理学、分类学、病理学及遗传学中得到广泛的重视与应用。 最早利用同工酶技术于玉米杂交工作中的是Schwartz,作者在玉米杂种胚乳中发现除两亲本的同工酶带以外,还出现了亲本所没有的新的同工酶带。作者称之为杂种酶。在这一工作影响之下,很多人进行了类似的研究,但所得结果并不一致。     

沙打旺与苜蓿属间体细胞杂交

以豆科牧草沙打旺为一亲本,碘乙酰胺处理的紫花苜蓿发根农杆菌A_4菌株转化系为另一亲本,通过PEG-高pH,高钙法诱导原生质体融合。在不加外源激素的DPD 培养基上有效地筛选了杂种细胞。经培养首次得到沙打旺( )紫花苜蓿的属间体细胞杂种。尽管双亲原生质体均已丧失分化植株的能力,但杂种细胞系R_1仍得到苗的分化。杂种R_1细胞的染色体数检查、冠瘿碱检测、同工酶和RAPD 分析结果,都证实了其杂种特性。     

小麦核质杂种及其在育种中的应用

一、什么是核质杂种 一般说的杂种,指的是细胞核里染色体及其载荷基因不同的两个亲本杂交得到的后代。通过两个亲本精、卵细胞的融合,杂种得到了两亲本细胞核中的遗传物质,能表现出双亲的特征。我们现在所说的核质杂种却是另外一种情况。大家知道,生物的不同物种之间遗传性不同,细胞核和细胞质之间都有一定分化。愈来愈多的事实证明,不只是细胞核中存在遗传物质,     

浅谈植物细胞融合的方法

细胞融合是指通过组织培养的方法,在机体外将两个不同种、不同属、不同科,甚至不同界的生物体细胞混合培养在一起,使这两个细胞发生融合,形成具有两个亲本体细胞染色体的杂种细胞。杂种细胞经过再培养诱导成为杂种生物。所以,细胞融合即是体细胞的杂交。是一种无性杂交。细胞融合包括动物体细胞杂交、植物体细胞杂交、动物和植物间体细胞杂交等方面。因此,细胞融合是细胞水平的遗传工程,属于细胞工程。     

克鲁维酵母与酿酒酵母属间原生质体融合构建高温酵母菌株

通过ＰＥＧ诱导碘乙酸灭活呼吸缺陷克鲁维酵母原生质体与酿酒酵母原生质体融合,获得４５℃发酵产酒率高达８．７％的高温酵母菌株ＡＹ００６。线粒体缺失和氯霉素抑制可显著降低高密度原生质体回复抑制效应。对融合子菌落形态,同工酶性质和高温发酵等方面分析,融合株表达了耐温和高产酒率双亲优良性状,证实其杂种特征。     

曲霉属种间原生质体融合后病毒传递及遗传重组——Ⅱ.黑曲霉与米曲霉种间杂交

感染直径28-33纳米球形病毒的葡糖淀粉酶生产菌黑曲霉与无病毒生长较快的米曲霉通过原生质体融合杂交,获得两种形态不同的种间杂种。杂种Ⅰ经遗传及生化分析推测是二倍体,杂种Ⅱ不产孢子并生长较慢。两个杂种均感染了病毒,病毒形态、血清反应、衣壳多肽及核酸组份均与亲本黑曲霉的病毒相同。杂种诱发分离的后代中,多数包括亲代型黑曲霉分离子及其它分离子均感染了病毒,只有一个分离子和来自异核体的一个分离物例外,二者均产生亲代型米曲霉类型的孢子。这种亲代型分离表明病毒种间传递并非胞质遗传。 黑曲霉与米曲霉分属黑曲霉群及黄曲霉群,是曲霉属内亲缘关系远的种间杂交,迄今并无报道。杂种Ⅰ具有接近原始亲本的葡糖淀粉酶的产量及米曲毒的生长速度。     

杉木与柳杉人工杂交种子发育的软X-射线判断及种子萌发和幼苗生长的观察(英文)

进行了杉木属（ＣｕｎｎｉｎｇｈａｍｉａＲ．Ｂｒ．）与柳杉属（ＣｒｙｐｔｏｍｅｒｉａＤ．Ｄｏｎ）的属间人工杂交,结果如下：１．从７６个经人工授粉后获得的球果中脱落的种子大量是空瘪的。对外观较饱满的种子６２８粒进行了软Ｘ射线检查,其中无胚的５９７粒（９５．６％）,胚发育不全的１７粒（２．７％）,胚发育完全的只有１４粒（２．２％）。２．种子萌发试验表明,经软Ｘ射线照射判断的、具发育完全胚的种子可以萌发形成幼苗,而具发育不完全胚的种子不能萌发。３．在生理上,杂种幼苗下胚轴的生长速度、种皮脱落和子叶张开的日期、上胚轴的伸长、１１月龄幼苗的分枝和出芽等均落后于母本;在形态上,１１月龄杂种幼苗较矮而瘦弱,叶呈线形,母本较高而粗壮,叶呈线状披针形。４．可以认为本杂交实验得到真实的杂种。杉木属与柳杉属杂交成功,表明此二属密切的亲缘关系,具有分类学和系统发育的意义。     

酿酒酵母和产朊假丝酵母原生质体的形成、再生及属间融合

使用由亚硝基胍诱变所得到的营养缺陷型作为单倍体融合亲株的核基因标记,同时也采用线粒体球红霉素抗性突变株的小菌落形式作为融合亲株的线粒体基因标记。酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)和产朊假丝酵母(Candida utilis)两亲株原生质体的制备是用对数生长早期的细胞在蜗牛酶和0.7M KCl及β-巯基乙醇或二巯基苏糖醇的作用下完成的。二者的原生质体的形成率在30—60分钟内达到90—99％。原生质体再生率,酿酒酵母最高为29—35％,产朊假丝酵母为7.5％。两亲株的原生质体在35％PEG(M.W.6,000),10mM CaCl_2条件下被诱导融合。在基础培养基上,长出以营养互补为标记的融合菌株。融合频率为10~(-5)—10~(-6)。试验表明,这些融合菌株具有杂种的性质。其中一株杂合子在同化D-木糖、纤维二糖等的能力上比亲株明显增强。     

YAC修饰和原生质体融合法转移进哺乳动物细胞

应用ＤＮＡ同源重组的方法对酵母人工染色体（ＹＡＣ）进行修饰,用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交和ＰＣＲ等方法证实ｎｅｏ基因整合于ＹＡＣ上,通过ＰＥＧ介导的原生质体融合法将一个３３０ｋｂＹＡＣ导入Ｌ９２９细胞,得到Ｇ４１８抗性克隆。     

生物的学名

鉴定各种生物的学名,虽是分类学专家的工作,但中学生物学教师,对于生物的学名,也应有正确的认识。因为学名的概念,是和种、属的概念,及品种、变种、杂种的概念分不开的。俗名和学名任何生物,我们已经晓得了它,一定要给它一个名称来称呼它。     

由小-簇麦杂种悬浮细胞和原生质体再生植株

１９８８年以来,小麦原生质体培养取得了重要进展［１—７］,但成功还仅限于少数基因型,因此,为了建立和不断完善小麦及其他禾谷类植物原生质体培养的技术体系,还有待在更多的基因型中进行探索。在小麦远缘杂种系统中,１９９０年王铁邦等［８］培养小－偃麦原生质体获得成功。本文报道由普通小麦－簇毛麦杂种悬浮细胞和原生质体再生植株的结果。材料和方法起始材料取自本实验室继代保存近２年的小－簇麦杂种（２ｎ＝４ｘ＝２８）愈伤组织。该愈伤组织是由小麦（ＴｒｉｔｉｃｕｍａｅｓｔｉｖｕｍＬ．,品种：“农大１４６”）×簇毛麦…     

烟草种间的体细胞杂交──Ⅰ．通过原生质体融合将波缘烟草部分核基因组转移给普通烟草

通过“供体──受体”原生质体融合获得５个“波缘烟草＋普通烟草”体细胞杂种细胞系（ＴＵ＿１至ＴＵ＿５）。对５个杂种细胞系的细胞学观察表明,其中２个系为多细胞融合产物,其平均染色体数目分别为１６７．２和１９８．４;３个系为二细胞融合产物,其平均染色体数目分别为５４．３７０．６和６２．８。杂种细胞系的一个明显特征是所有观察的中期细胞均存在数量不等的畸变染色体。对５个杂种细胞系再生植株叶片苹果酸脱氢酶和酯酶的同工酶分析结果表明,它们均为程度不同的不对称核杂种,即只含有供体亲本（波缘烟草）的部分核基因组。以小麦ｒＤＮＡ为探针对杂种细胞系基因组ＤＮＡ的Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交结果表明,杂种中双亲的载有ｒＤＮＡ的染色体可能均有部分消除;此外,杂种中新ＤＮＡ片段的存在说明双亲ｒＤＮＡ可能发生了分子间重组。两个由多细胞融合产生的杂种细胞系（ＴＵ＿２和ＴＵ＿５）再生苗不易生根而且形态上异常。３个由二细胞融合产生的杂种细胞系（ＴＵ＿１、ＴＵ＿３和ＴＵ＿４）再生苗可生根长大,形态上类似受体亲本;对其根尖的细胞学观察表明,染色体数目在５１─６６之间,说明均为只含有少量供体亲本染色体的不对称核杂种。     

小麦与多年生黑麦草原生质体的电融合及杂种愈伤组织的形成

多年生黑麦草(Lolium perenne L.)悬浮培养细胞来源的原生质体和小麦(Triticumaestivum L.)含叶绿体的悬浮培养细胞来源的原生质体间,用直流方波脉冲进行电融合,获得了体细胞杂种愈伤组织。小麦的原生质体经过碘乙酰胺失活。愈伤组织的形态和颜色被用作识别预期杂种的标记。为了对杂种愈伤组织进行同工酶分析,观察了亲本的9种同工酶谱,其中3种在亲本间表现出差异(ADH、GOT 和 SDH)。酒精脱氢酶(ADH)的分析结果表明,有6个细胞系表现出杂种带。这些细胞系经过其他两种同工酶分析和 rDNA 探针杂交试验表明,一个细胞系表现出基本完全的亲本基因组间的组合,其余5个细胞系是部分杂种。     

分支系统学评述

本文论述了分支分类学说的主要内容及有关问题。全文包括7方面的内容：(1)分支分类学说 的哲学原理为波普尔的证伪主义科学哲学;(2)分支分析的三个基本原则是近裔共性原则、严格单系 原则及简约性原则;(3)分支分析的工作步骤包括：单系类群的确立、性状分析、分支分析运算、分支图与分类系统的建立及分支图与性状再分析;(4)本文讨论厂分支分类学派、表型分类学派与演化 分类学派;(5)由于板块构造理论及分支分析的兴起,生物地理学发生了重大变化,出现了传统的演化生物地理学、系统发育生物地理学及替代生物地理学争鸣的局面;(6)由于杂交导致性状矛盾,因 此可以由分支分析识别杂种;(7)由科学理论的三条标准来看,分支系统学属于严格意义的科学理论。