带有逆转录病毒的恶性T淋巴细胞株的建立

从一例患神经系统疾病病人的外周血淋巴细胞中建立了一株恶性Ｔ淋巴细胞株ＣＭ－１并研究了它的生物学特性。用过滤的ＣＭ－１细胞的培养上清,可命名多发性血管硬化症病人的淋巴细胞转化恶性Ｔ淋巴细胞,由此建立ＣＭ－２细胞株。用ＣＭ－１和ＣＭ－２细胞皮下接种裸鼠,都能使裸鼠产生弥漫性恶性淋巴瘤。电镜下见到了类似于Ｃ型逆转录病毒的颗粒,逆转酶活性检测阳性。血清学和基因检测表明ＣＭ－１和ＣＭ－２中不存在本室常用的其     

应用RAPD技术对不同基因组组合生物型遗传多态性的研究(英文)

利用ＲＡＰＤ技术对不同基因组合的鱼类进行了基因组指纹图谱构建,在ＤＮＡ水平上对基因组成分进行了分析,探讨了其遗传多态性。ＲＡＰＤ结果发现,在２６个随机引物扩增的产物中,平均每个个体观察到约１４２个ＲＡＰＤ标记,单个引物获得的标记平均为５．４。其中４个引物扩增的图谱可将不同的生物型区分开：Ｓ－２６引物的扩增图谱（Ｆｉｇ．１）可将红鲫（ＲＡ）与其它组合区分开,还可将鲤鲫杂种一倍体（ＣＡ）与鲫鲤杂种三倍体（ＣＡＡ）和人工复合三倍体鲤（ＣＣＡ）区分开;Ｓ－８引物（Ｆｉｇ．２）可区分开红鲤（ＲＣ）和镜鲤（ＭＣ）;Ｓ－４５引物（Ｆｉｇ．３）可区分开ＲＣ和ＣＡ;Ｓ－２２引物则可区分开ＣＡＡ和ＣＣＡ。六种生物型均存在基因组特异性的图谱即各自独特的“诊断性”图谱,作者由此建立了详细的分子标记检索表（Ｔａｂｌｅ１）。通过对ＲＡＰＤ图谱的量化分析,利用ＵＰＧＭＡ构建了不同生物型的遗传关系树图;反映了鲤鲫及各种组合生物型之间的遗传相似关系：ＲＣ和ＭＣ属同一种系,聚为一族;ＣＡＡ和ＣＡ基因组类型相同,聚为一族;ＣＣＡ虽自成一体,但可与ＣＡＡ和ＣＡ聚为一族;而ＲＡ与其它组合遗传距离较远,自成一族。ＲＡＰＤ的结果也表明各种生物型内个体间     

人Xp21．1－p21．3上3．5MbYAC重叠群构建及物理图谱分析

用Ａｌｕ－ＰＣＲ指纹图谱法分析了人Ｘｐ２１．１－ｐ２１．３上一系列的酵母人工染色体（ｙｅａｓｔａｒｔｉｆｉｃｉａｌｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ,ＹＡＣ）克隆,发现其中的两个ＹＡＣ克隆构成包含ＤＸＳ１６６位点的重叠群,而且这一重叠群与以前构建的包含ＤＭＤ基因全序列的ＹＡＣ重叠群相连接,ＹＡＣ克隆末端探针交叉杂交证实了这一重叠,使这一ＹＡＣ重叠群至少延伸至ＤＸＳ１６６位点,形成一个跨度为３．５Ｍｂ的ＹＡＣ重叠群。基于这些重叠的ＹＡＣ克隆绘制了这一区域的大尺度限制酶切图谱,并在这一图谱上定位了ＤＸＳ１６６位点,从而确定了ＤＸＳ１６６位点与ＤＭＤ基因的物理关系。这一工作为ＤＭＤ基因的５＇远端调控作用研究及该区域未知基因的克隆奠定了基础。     

天花粉蛋白的定点聚乙二醇修饰

用一种定点修饰天花粉蛋白（ｔｒｉｃｈｏｓａｎｔｈｉｎ,ＴＣＳ）的方法,将聚乙二醇（ＰＥＧ）偶联到预先选定的位点．利用ｎＴＣＳ无半胱氨酸（Ｃｙｓ）残基这一特点,通过定点突变将一个Ｃｙｓ残基引入ＴＣＳ以取代第７位的丝氨酸（Ｓｅｒ）残基．然后,与巯基反应的ＰＥＧ－ｍ ａｌｅｉｍ ｉｄｅ 即可偶联到新引入的Ｃｙｓ 残基上．经纯化得到均一的ＰＥＧ－ＴＣＳ复合物,在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ上显示一条区带,表观分子量为３８ ｋＤ．复合物的体外致核糖体失活活性降低了６倍,但其体内引产活性与ｎＴＣＳ相同．定点ＰＥＧ修饰方法为改造ＴＣＳ提供了新途径．     

中国－欧共体生物技术中心（CEBC）成立两年来的回顾

中国－欧共体生物技术中心（ＣＥＢＣ）成立两年来的回顾丁一明（中国－欧共体生物技术中心）中国－欧共体生物技术中心（Ｃｈｉｎａ—Ｅｕ－ｒｏｐｅａｎＣｏｍｍｕｎｉｔｅｓＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙＣｅｎｔｅｒ）已成立两周年了。两年多来,ＣＥＢＣ这一双边合作机...     

基因工程可溶性MHC分子的研究和应用

为了揭示ＴＣＲ－抗原肽－ＭＨＣ三元复合体的识别模式,利用基因工程技术构建的可溶性ＭＨＣ分子,为此提供了有利工具,可溶性单链ＭＨＣ分子具有与穿膜型分子似的功能,在体外已成功地应用于ＴＣＲ与ＭＨＣ分子之间的识别学研究及三维空间结构研究,并可能作为一种免疫调节分子起到治疗疾病作用。     

番茄果实ACC合成酶的纯化

以伤诱导的番茄囊果皮为材料,改进了ＡＣＣ合成酶（ＥＣ４．４．１．１４）纯化方法。经改进的５步纯化后,ＡＣＣ合成酶被纯化７３００倍,比活性达到１１６８７０Ｕ／ｍｇ蛋白,回收率为７％．以较少的步骤得到了较高的纯化倍数。纯化的ＡＣＣ合成酶经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和银染检验为一条带,分子量为５０ｋＤ,等电点为ｐＨ６．５。     

番茄果实ACC合成酶的纯化

以伤诱导的番茄囊果皮为材料,改进了ＡＣＣ合成酶（ＥＣ４．４．１．１４）纯化方法,经改进的５步纯化后,ＡＣＣ合成酶被纯化７３００倍,比活性达到１１６８７０Ｕ／ｍｇ蛋白,回收率为７％,以较少的步骤得到了较高的纯化倍数,纯化的ＡＣＣ合成酶经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和银染检验为一条带,分子量为５０ｋＤ,等电点为ｐＨ６．５。     

蛋白质组表达图谱用于基因功能提示的可行性研究

本文以ＥＣＯ２ＤＢＡＳＥ（Ｅｄｉｔｉｏｎ６）为研究材料,探讨了利用蛋白质组表达图谱提供的生命动态活动信息提高基因组功能提示效果的可行性,在设计出一套较为完整的细胞功能簇（ＣＲＣ）聚类方案的基础上,经考察,７９个蛋白质聚成４个不同的ＣＲＣ。结果显示出功能相关的蛋白质趋向于聚集在相同的ＣＲＣ中,如９种氨酰,ｔＲＮＡ合成酶和４种热休克蛋白分别准确地聚合到ＣＲＣ２和ＣＲＣ３中,这些结果提示,在蛋白质组研究     

CAAT结合蛋白CBF在转录中的作用

ＣＡＡＴ结构是一种在真核生物启动子中普遍存在的顺式作用元件。ＣＢＦ,又称为ＮＦ -Ｙ、ＣＰ１,是一个ＣＡＡＴ特异性转录因子。在转录过程中 ,ＣＢＦ与ＣＡＡＴ特异性结合 ,共同调控启动子的转录 ,本文综述了ＣＢＦ的结构及其在转录中的作用。１ＣＡＡＴ结构ＣＡＡＴ结构存在于由ＲＮＡ聚合酶Ⅱ所转录的大多数真核生物基因的近端启动子中〔１〕,它与其他的启动子元件相互协调 ,一起控制启动子的转录活性。在高等的真核细胞启动子中 ,ＣＡＡＴ一般位于 -８０区〔２〕。对不同物种的某些基因进行比较 ,发现ＣＡＡＴ结构在启动子上的位置以…     

HCV感染者抗HCV抗体产生的不均匀性与B细胞优势克隆

本文采用抗原捕捉ＥＬＩＳＡ方法检测了ＨＣＶ感染者血清中抗－ＨＣＶＩｇＧ抗体轻链Κ和λ的比值,发现所检测的抗ＨＣＶ－ＮＳ４、抗ＨＣＶ－ＣＰ１和抗ＨＣＶ－ＣＰ２抗体轻链的表达呈现明显的偏斜,６５例抗ＨＣＶ阳性者中６３例（占９６．９％）,至少一种抗ＨＣＶ抗体К／λ偏离了正常１∶１的比值,尤以λ链较多,分别占６５．６％、８９．９％和７０．２％,但任何一个ＨＣＶ感染者血清抗－ＨＣＶ抗体既可能是Κ链占优势,也     

番茄抗病基因Cf9的3‘UTR区含有内含子序列

从番茄抗病品种“中杂９号”基因组ＤＮＡ中扩增并克隆了番茄抗叶霉病基因Ｃｆ９。序列分析结果表明,该基因全长２７５１ｂｐ,含有一个编码８６３个氨基酸的开放阅读框架。在该基因的３＇ＵＴＲ区发现了一段未曾报道的内含子序列,长１１５ｂｐ,它所处的位置与番茄另一个抗叶霉病基因Ｃｆ２内含子的位置相似,其５＇和３＇边界序列为一重复序列,ＴＣＣＡＧＧ（Ｔ）ＡＴＴＣ,并与Ｃｆ２基因内含子边界序列高度同源。与已报道的Ｃ     

一个适用于分离光系统Ⅱ的凝胶电泳系统

用一高分辨率的凝胶电泳系统从延长破碎时间的蓝藻类囊体膜增溶物中分离出１４条绿色的带。按照电泳迁移率的增加顺序,自上而下分别是ＣＰＩａ,ＣＰＩｂ,ＣＰＩｃ,ＣＰＩｄ,ＣＰＩｅ,ＣＰＩｆ,ＣＰＩｇ,ＣＰＩｈ,ＣＰａ１,ＣＰａ２,ＣＰａ３,ＣＰａ４,ＣＰａ５和ＦＣ。ＣＰａ１,ＣＰａ２,ＣＰａ３,ＣＰａ４和ＣＰａ５５种叶绿素蛋白复合体的吸收光谱相似,它们在蓝区的吸收峰位子４３６ｎｍ,而红区的吸收峰则位于６７０—６７３ｎｍ附近。它们的低温荧光发射光谱亦很相似,其荧光发射峰都位于６８５ｎｍ处。因此它们都属于光系统Ⅱ叶绿素ａ蛋白复合体．跟传统电泳相比,该系统对光系统Ⅱ的分离能力提高了１．５倍。     

人类YAC库PCR三维筛选体系的建立及质量考核

为了在知道某个区域、位点、基因或ＤＮＡ片段的部分信息后,能从ＣＥＰＨＹＡＣ库中筛选出与其对应的ＹＡＣ克隆,为进一步研究奠定基础,需要建立一个筛选体系。本文概述了这一筛选体系的建立过程。随后,用两对与已知基因对应的引物进行了筛选验证工作,证明了这一体系的可用性,同时提出了以后筛选的途径,即首先筛选ＹＡＣ库的ＭｅｇａＹＡＣ部分,并以５块板为一组进行筛选。另外,运用荧光原位杂交技术（ＦＢＨ）,对ＣＥＰＨＹＡＣ库的质量及其第一代人类基因组物理图谱进行了考察。我们取２６个ＹＡＣ克隆进行ＦＩＳＨ定位,结果其中嵌合体１３个,占５０％。定位错误的克隆有６个,占２３％。非嵌合体且定位正确的共９个,占３５％。     

基因突变引起罕见的牙龈病

在大多数人的口腔中都有一组酶与免疫细胞保持着牙齿与牙龈的健康 ,其中组织蛋白酶Ｃ和中性粒细胞起着主要的作用。组织蛋白酶Ｃ的作用是阻止牙齿与牙龈之间间隙处所容纳的众多细菌所引起的感染 ,人的 11号染色体上有一个ＣＴＳＣ基因 ,它编码组织蛋白酶Ｃ。有一种罕见的牙龈病称为Ｐａｐｉｌｌｏｎ Ｌｅｆ埁ｖｒｅ综合症 ,患者在ＣＴＳＣ中有一个突变 ,以致制造了错误的组织蛋白酶Ｃ的译本。大多数患者在十几岁时就掉了恒牙。一个国际研究组在 1999年 12月的ＮａｔｕｒｅＧｅｎｅｔｉｃ上作了报道。他们分析了来自埃及、巴基斯坦和黎巴嫩的…     

树舌多糖结构修饰前后CD谱比较研究

树舌多糖ＣＦ２ａ经１５ｍｍｏｌ／Ｌ１０＾－４ｈ选择化,继以氯酸氧化、得修饰树舌多糖ＣＦ２ａｍ,其结构分析表明侧链氧化率为６５％,以Ｊ－５００Ｃ圆二色性仪比较测定ＣＦ２ａ,ＣＦ２ａ一刚果红复合物及ＣＦ２ａｍ在不同ｐＨ下的ＣＤ谱,结果表明紫外区中性多糖子整体修饰、即其与刚果红形成复事物时,除提供很强的外源Ｃｏｔｔｏｎ效应外也提供了一些有序结构信息。     

丙型肝炎病毒DNA疫苗研究进展

丙型肝炎病毒（Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ Ｖｉｒｕｓ,ＨＣＶ）感染严重危害人类健康,目前尚无特效的治疗方法。ＨＣＶ ＤＮＡ疫苗是近年来的研究点之一,它的研制为预防和治疗ＨＣＶ感染提供了新的思路。本文从ＨＣＶ ＤＮＡ疫苗的构建、免疫效果的影响因素、作用机制等方面作一综述。     

CD3AK细胞抗肿瘤作用的研究进展

抗ＣＤ３单克隆抗体激活的杀伤细胞ＣＤ３ＡＫ是一种新型抗肿瘤免疫活性细胞,具有体外扩增能力强,细胞毒活性高,体内抗肿瘤效果好,低依赖ＩＬ－２等特点。本文综述了ＣＤ３ＡＫ细胞的诱导和扩增、形态学和免疫学特性、体内外抗肿瘤作用和ＣＤ３ＡＫ细胞的活性增强物质,并讨论了ＣＤ３ＡＫ细胞的作用机制     

果实成熟过程相关调控基因研究进展

果实成熟过程中,多聚半乳糖醛酸酶（ＰＧ）参与果胶的分解,从而在果实软化中起作用,新近发现,果实软化过程中,协同展蛋白具有一定的作用：ＡＣＣ合成酶（ＡＣＳ）、ＡＣＣ氧化酶（ＡＣＯ）和ＡＣＣ脱氨酶与乙烯合成直接有关,ＡＣＳ是乙烯形成的关键酶,由多基因家族编码,各个基因协同表达,每一基因都有自己的转录特性,新近不断发现果实中ＡＣＳ基因家族中的新成员;ＡＣＯ是一种与膜结合的酶,这种酶具有结构上的立体专一性     

树舌多糖结构修饰前后CD谱比较研究

树舌多糖ＣＦ２ａ经１５ｍｍｏｌ／Ｌ１０４ｈ选择氧化,继以次氯酸氧化、得修饰树舌多糖ＣＦ２ａｍ,其结构分析表明侧链氧化率为６５％,以Ｊ－５００Ｃ圆二色性仪比较测定ＣＦ２ａ,ＣＦ２ａ一刚果红复合物及ＣＦ２ａｍ在不同ｐＨＴ的ＣＤ谱,结果表明紫外区中性多糖ＣＦ２ａ缺少结构信息,而修饰后的ＣＦ２ａｍ在ｐＨ２．０时有很强的有序结构信息,ＣＦ２ａ分子整体修饰、即其与刚果红形成复合物时,除提供很强的外源Ｃｏｔｔｏｎ效应外也提供了一些有序结构信息．