建国以来我国自建的一些细胞株或系

目前利用培养细胞进行的研究工作日益增多。为了互通情况,便于交流利用,今年一月中国细胞生物学学会全国理事会上决定在《细胞生物学杂志》上先发表中国医学科学院基础医学研究所何申同志编写的“建国以来我国自建的一些细胞株或系”一文,今后还将陆续刊登我国自建的细胞株系的介绍。介绍由建株工作者自撰,目前先收登已发表过的及虽未发表但曾经一定鉴定手续的细胞株。每株细胞介绍在200字左右,每株一篇。内容包括名称、细胞来源、供者性别年龄、建株年代及简要过程,细胞株的主要特性,目前细胞株的情况(细胞保存单位及地址)和建株时发表在何种刊物的卷、期、页数及年份。本刊将按收到先后次序陆续发表。希望全国从事组织及细胞培养的同志大力支持,踊跃投稿。     

抗人肺腺癌细胞株SPC-A-1的单克隆抗体的制备和鉴定

人肺腺癌细胞株SPC-A-1,经抗人正常肺抗血清复被后免疫小鼠,脾细胞和同系NS-1或SP 2/0融合,获得17株单克隆抗体。本文报道其建株过程及其中7株单克隆抗体的一些特征。LAC-122、LAC-163与LAC-210对人体肺腺癌和肺鳞癌的阳性反应率分别为75%、78.3%和75%,除LAC-122对一例胃癌细胞株有微弱交叉反应外,三株单抗对肺小细胞癌, 其它肿瘤组织及正常、胚胎组织均呈阴性。对利用抗体复被瘤细胞及肺癌相关抗原问题作了较详细的讨论.     

本刊将召开创刊30周年座谈会

1987年5月17日是《动物学杂志》创刊30周年纪念日。为总结办刊经验,拟整理有哭创刊以来的一些资料。如历届编委会组成、编辑情况及出版、发行情况等。欢迎有关同志提供资料。届时本刊将发表纪念文章并在北京召开座谈会和编委会全体会议     

关于从猿到人的过渡阶段中亦猿亦人的性质问题

本刊去年第4期发表了赖金良同志与吴汝康同志商榷的文章《评“亦猿亦人”阶段论》,引起了读者的关注。根据毛主席关于“我们提倡百家争鸣”“科学上不同的学派可以自由争论”的教导,今特发表吴汝康同志下面这篇文章,欢迎同志们继续就这一问题展开热烈讨论。     

征稿简则

本刊是细胞生物学中级学术性刊物。方针任务是:在党的领导下,贯彻“双百方针”,交流推广有关细胞生物学的新进展,促进国内细胞生物学的发展,为加速实现四个现代化,为社会主义革命和社会主义建设服务。本刊主要读者对象为从事本学科的科研人员、大学中学教师、医务工作者、大专院校学生及科研组织管理人员。本刊主要刊登细胞生物学的研究报告、阶段性研究成果、实验技术与方法、国内外研究资料综述及国内外有关学术研究动态。欢迎有关人员提供稿件(译文由本刊约稿)。     

SPOP对卵巢癌细胞生物学行为的影响及其分子机制的研究

探讨人卵巢癌组织中斑点状蛋白(SPOP)的表达及对其卵巢癌细胞生物行为学的影响及相关机制。采用免疫组化技术分别检测正常卵巢组织10例、卵巢癌组织90例的组织芯片中SPOP的表达;体外培养永生化人卵巢癌细胞株OVCAR-3、SKOV3及永生化的人卵巢表皮上皮细胞株HOSE,RT-PCR、WB检测3种细胞株SPOP的表达。用慢病毒稳定转染OVCAR-3、HOSE细胞株,构建过表达、敲低SPOP的细胞株。流式细胞仪检测转染后细胞株的凋亡,CCK8检测转染后细胞株的增殖情况,Transwell小室检测转染后细胞株的迁移侵袭情况。WB检测转染后细胞株PI3K-Akt通路相关蛋白的表达情况。组织学免疫组化评分显示卵巢癌组织染色明显高于正常卵巢组织。细胞学实验显示,成功构建过表达、敲低SPOP的OVCAR-3细胞,过表达组、过表达空载组、敲低组、敲低空载组细胞凋亡及增殖能力无明显差异;各组细胞迁移及侵袭结果与空载组有明显差异,且差异有统计学意义(p0.05)。过表达组细胞P-GSK3β(Ser9)表达水平明显低于敲低组(p0.05),MMP-9表达水平明显高于敲低组(p0.05)。SPOP在卵巢癌组织中表达上升,且具有促进卵巢癌细胞迁移侵袭的作用,其调节机制可能与p-GSK3β(Ser9)通路相关。     

Polι与移行细胞癌发生关系的实验研究

目的:检测DNA聚合酶■(Pol■)在膀胱肿瘤细胞株及移行细胞癌组织中的表达,探讨Pol■在移行细胞癌组织中表达的意义。方法:培养膀胱肿瘤细胞株BIU87细胞、T24细胞株,利用RT-PCR方法检测Pol■在膀胱肿瘤细胞株中的表达;收集人膀胱粘膜正常组织、临床膀胱肿瘤和肾盂癌的移行细胞癌组织标本,利用RT-PCR方法检测组织标本中Pol■的表达。结果:Pol■在膀胱肿瘤细胞株中丰富表达,显著高于膀胱正常粘膜组织(P<0.01);Pol■在膀胱肿瘤及肾盂癌组织的表达显著高于膀胱正常粘膜组织的表达(P<0.01),且与移行细胞癌的分级相关。结论:Pol■在移行细胞癌组织中的高表达可能与膀胱肿瘤的发生、发展相关,为进一步研究Pol■在膀胱肿瘤中表达的意义打下基础。     

也谈基因的连锁和互换的教材处理

本刊1980年第三期发表了张世荣、刘真、林镜仁、邱永湘等同志的《试谈高中‘生物’教材中连锁和互换遗传规律的教材处理》一文后,收到一些读者的来稿来信,表示不同意见,愿和张世荣等同志商榷。这反映了生物教师关心生物教学研究的新气象。限于篇幅,只能摘登部分同志的来信来稿。今后,本刊发表的其它文章,也欢迎读者展开讨论,为繁荣生物科学和推动生物教学研究而共同努力。     

抗人尿道高分化鳞癌单克隆抗体的研制

用本室建立的人尿道高分化鳞状上皮癌细胞株(Hus-98)免疫Balb/C小鼠,通过细胞杂交技术及ELISA方法进行筛选,SP免疫组织化学方法进行鉴定,获得10株能稳定分泌、选择性强、效价高的杂交瘤细胞株;同时从乳腺癌组织中提出肿瘤相关抗原行免疫印记实验(Western-blot)。结果6株经4次克隆能稳定分泌抗体Ig,免疫组化显示这些抗体是针对来源于上皮的鳞癌、腺癌细胞膜和细胞浆的,而癌旁正常组织及胎儿组织呈阴性反应;通过western-blot结果显示肿瘤相关抗原分子量为46.414kb。     

tPA/gGH双基因转染山羊乳腺上皮细胞表达分析

人组织纤溶酶原激活剂(tissue-type plasminogen activator,tPA)是一种被广泛应用于临床的溶栓药物。双基因共整合入生物体内能够产生协同作用,从而提高目的基因的表达水平。但是目前,利用gGH基因与tPA基因共整合以期提高tPA表达水平的相关研究较少。为筛选获得tPA高表达的tPA/gGH双基因整合的单克隆转基因山羊乳腺上皮细胞株,本研究以β-casein基因作为调控序列,构建乳腺特异性表达载体PCL25/gGH,并通过电转染将tPA和gGH双基因共转染山羊乳腺上皮细胞;通过G418筛选获得抗性细胞株,经PCR检测获得转基因单克隆细胞株;利用催乳素诱导tPA表达,收集48 h后细胞诱导液进行ELISA()和Western blotting检测并分析其tPA表达水平。结果表明,共获得142株抗性单克隆细胞,其中有53株tPA单基因整合细胞株,34株tPA/gGH双基因整合细胞株,双基因整合率达23.9%(34/142)。共检测出29株细胞能够表达tPA,其中单基因表达细胞为12株,表达率为22.6%(12/53);双基因表达细胞为17株,表达率为50.0%(17/34);且单基因细胞表达tPA含量为7.5~52.0μg/mL,而双基因细胞表达tPA含量为40~360μg/mL,明显高于单基因表达水平。本研究通过电转染的方式成功获得了tPA/gGH双基因整合的单克隆山羊乳腺上皮细胞株,并证明双基因整合的细胞株表达tPA水平明显提高,为后期制备高表达转基因山羊奠定了基础。     

人红系分化相关基因高表达提高TF-1细胞系存活能力

目的：检测人红系分化相关基因（EDAG）对TF-1细胞株存活能力的影响。方法：采用电转染法将过表达EDAG的质粒高效转染TF-1细胞株,通过G418筛选得到过表达EDAG的TF-1细胞稳定株,用MTs法检测过表达EDAG的细胞稳定株在撤除细胞因子后的增殖情况,用流式细胞术检测细胞凋亡。结果：用表达GFP的质粒电转染TF-1细胞株,通过综合评价转染效率和细胞状态,确定最佳转染条件为1350V电压电击30ms,电击次数为1次;对得到的细胞稳定株进行检测,其内源EDAG的mRNA和蛋白水平均上调;将细胞稳定株在撤除细胞因子状态下培养,过表达EDAG后细胞存活能力增强、凋亡减少。结论：用电转染方式高效转染TF-1细胞,通过筛选得到过表达EDAG的稳定细胞株,并证实撤除细胞因子后过表达EDAG能提高TF-1细胞系的存活及抗凋亡能力。     

关于防治水稻白叶枯病放线菌筛选方法的补充材料——兼答薛恒平同志

农用抗生素及其产生菌的筛选方法,是长期以来国内外有关研究工作者十分关注的问题。薛恒平就筛选防治水稻白叶枯病放线菌的方法对温州地区农科所在本刊6卷4期发表的文章提出的商榷意见(见本刊7卷3期),得到了作者的反应,现予发表。我们特别希望从事农抗科研的同志踊跃发表意见。     

三单位保存的艾氏腹水癌细胞株及克隆细胞蛋白质表达

目的　比较三个单位保存的艾氏腹水癌 (EAC)细胞株及克隆细胞的蛋白质表达。方法　对北京市肿瘤研究所 (北京 )保存的EAC进行克隆培养 ,从中选出 5株克隆 ;对武汉大学保种中心 (武汉 )、山东省医学科学院药物研究所 (山东 )及北京保存的EAC细胞株及 5株克隆细胞的SDS PAGE电泳图谱及免疫组化蛋白质分布进行了对比。结果　武汉、山东及北京保存的EAC的电泳条带数分别为 2 2、2 5及 2 8条 ,而克隆细胞E2G8为 2 6条带。三单位EAC瘤细胞对 5种抗体做免疫组化染色 ,与 1株抗体反应的阳性细胞比例均较高 ,差异无显著性 (P >0 0 5 ) ,与另 4种抗体反应的阳性细胞率差异有显著性 ;5株克隆细胞对 10种抗体作免疫组化染色 ,其中克隆细胞E2G8、E2F4与 7种抗体反应阳性 ,E2C6与 8种抗体反应阳性 ,E1G5、E2B5与 6种抗体反应阳性。克隆细胞一旦与某种抗体反应阳性 ,阳性细胞的比例即在 85 %以上。结论　不同单位保存的EAC细胞株及克隆细胞株蛋白质表达有差异     

内源性活性氧水平及锰型超氧化物歧化酶的表达与胃癌细胞分化、增殖相关

检测了不同分化的胃癌细胞株内MnSOD基因的表达及胞内活性氧限（ROS)的水平。同时通过基因转染观察上调或下调MnSOD基因表达对SGC790l胃癌细胞胞内ROS水平及增殖能力的影响。用电穿孔法将人反义和正义MnSOD cDNA真核表达载体pHβA—SOD(-)／pHβA—SOD（ )转入790l细胞,用含G418的RPMIl640培养基筛选稳定表达克隆。然后用RT-PCR鉴定MnDSOD基因的表达。同时用RT-PCR方法检测正常胃粘膜组织及MKN-28、SGC790l、BGC823、HGC-27四株高、中、低、未分化胃癌细胞株内的MnSoD的mRNA表达。利用DCFH-DA荧光染色方法检测不同分化胃癌细胞株及790l转染细胞株内的ROS水平。四唑蓝比色法(MTT)绘制MKN-28、SGC790l、BGC823、HGC-27四株不同分化胃癌细胞及正义、反义、空载MnSOD转染790l细胞的生长曲线。发现不同分化胃癌细胞内的MnSOD普遍呈低表达且与分化程度平行,不同分化胃癌细胞株胞内ROS水平随着MnSOD表达的下调逐步上升,细胞增殖加快。较之MnSOD空载790l,正义、反义MnSOD转染的790l细胞中该基因的表达出现明显上调及下调,胞内ROS水平较对照细胞也相应有显著降低和升高。正义株增殖受抑,反义株增殖加快。表明胃癌细胞内MnSOD的表达与肿瘤的分化程度呈负相关。可通过改变胞内RoS水平改变MnSOD基因的表达,从而调节胃癌细胞的生长。     

传染性法氏囊病病毒VP2基因的真核表达载体的构建及表达

根据GenBank发表的传染性法氏囊病病毒 (IBDV) 5 2 70株VP2 基因序列 ,设计合成了 1对特异扩增IBDVVP₂ 基因的引物。以IBDV超强毒河南分离株HN0 1感染发病鸡法氏囊组织中提取病毒RNA来制模板 ,利用RT PCR扩增出了 1 .4kb的VP₂ 基因 ,将其克隆到pIREShyg载体上 ,构建了pIRES VP₂ 真核表达载体。然后通过磷酸钙共沉淀法转染CHO细胞 ,通过潮霉素筛选得到阳性克隆 ,间接免疫荧光实验 (IFA)鉴定VP₂ 在CHO细胞中的表达 ,并用RT PCR的方法从转录水平证实VP₂ 在CHO k1细胞中的表达 ,最终建立了CHO VP₂ 细胞株 株。     

人小细胞肺癌细胞株中CNDP2的检测及意义

为了研究胞浆非特异性肽酶2(CNDP2)在人小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)中的作用,我们检测了29株人SCLC细胞株CNDP2的拷贝数和部分细胞株CNDP2的m RNA表达水平,并构建了CNDP2全长(CPGL)及可变剪切体(CPGL-B)过表达SCLC细胞稳转株,初步分析了CPGL及CPGL-B对SCLC细胞生长和克隆形成的影响。结果表明,SCLC细胞株普遍存在CNDP2基因缺失和CPGL-B的m RNA表达水平降低的现象,CPGL和CPGL-B表达上调可抑制SCLC细胞克隆形成能力。可见,CNDP2在人小细胞肺癌中可能起着抑癌基因的作用。     

一株存在有逆转录样病毒的肿瘤性小鼠早期T细胞株的建立及鉴定

从对正常LACA小鼠腹腔细胞的体外培养中,获单一细胞集落,由此集落细胞扩展建成一株淋巴样细胞株。由流式细胞计分析细胞表面标志显示。此株细胞表面具有不成熟的早期T细胞的表而抗原,为Thy-1.1~ ,PgP~ ,B2A2~ 及LFA-1~ ;不具有成熟T细胞表面抗原,为Ly 2~-及L3T4~-,亦不具有B细胞及巨噬细胞表面抗原,为SIg~-,Lyb 5~-及Mac-1~-。因而为早期T细胞株,命名为C 320细胞株。C 320细胞的生长不依赖于外源性IL_2的供应,已在体外维持一年半。此细胞分裂相活跃,染色体数目及形态均异常。1—5×10~6个C 320细胞腹腔接种裸鼠,于三周内引起腹水型肿瘤,并广泛转移至腹腔脏器,纵膈淋巴结及肺部。故C 320细胞为小鼠肿瘤性早期T细胞株。电子显微镜检查,见胞浆及胞膜上有病毒颗粒,形态酷似逆转录病毒C型,提示C 320细胞可能是逆转录病毒转化的肿瘤性早期T细胞株。     

《微生物学通报》十年内容统计初析

《微生物学通报》十年内容统计初析汪穗福（广州市医药中专学校,广州５１０２６０）为进一步加强本刊与广大读者和作者的联系,博采众议,改进工作,提高本刊质量,特设此栏目,欢迎赐稿。本期发表了汪穗福同志有关本刊十年内容统计初析,尽管其中统计项目的设置不一定完...     

镉,铜抗性植物细胞株的增长及元素吸收特性

在含Cd、Cu浓度100、200μMol的培养基中进行驯化培育,获5株抗Cd细胞株及3株抗Cu细胞株。驯化株细胞相对增长率显著高于亲株,在Cd、Cu浓度波动较大的条件下,驯化株细胞增长率仍较稳定;驯化株对Cd、Cu的蓄积性因细胞种类不同而异,或具有降低对Cd、Cu的吸收,使抗性增加的机制,或对Cd、Cu有更强的吸收特性,但浓缩系数相对较稳定,从而抵御环境中Cd、Cu的波动,驯化株对营养元素的吸收呈现高于亲株或低于(近于)亲株两种类型,推断具有通过新陈代谢调节的适应机制;终止驯化的回复株一定程度保留了驯化获得性,但有向亲株回复的趋势,推断所获抗性非基因控制类型。