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1.
dsRNA介导的RNA干扰 总被引:5,自引:0,他引:5
在多种生物中 ,外源或内源性的双链RNA(double strandedRNA ,dsRNA)导入细胞中 ,与dsRNA同源的mRNA则受到降解 ,因而其相应的基因受到抑制。这种转录后基因沉默 (post transcriptionalgenesilencing ,PTGS)机制首先在线虫 (C .elegans)中得以证实。由于这是一种在RNA水平的基因表达抑制 ,故也称为RNA干扰 (RNAinterfer ence) ,简称RNAi[1] 。随后发现 ,在各种生物 ,如果蝇[2 ] 、拟南芥菜[3 ] 、及小鼠[4] 等均存在dsRNA介导… 相似文献
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Sasaki等在ProcNatlAcadSciUSA 2 0 0 0年第 4期上报道了一种不依赖甲硫氨酸的翻译起始方式[1] 。PSIV (Plautiastaliintestinevirus)是一种昆虫RNA病毒 ,属蟋蟀麻痹样病毒组 (Cricketparalysis likeviruses) ,为正链RNA病毒。属于该组的还有DCV、RhPV、HiPV等。该组病毒的理化性质与哺乳动物的小RNA病毒 (picornavirus)相似 ,但基因图 1 (A)PSIV基因组结构 ;(B)预测的外壳蛋白编码区上游的茎环结构组织不同。… 相似文献
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4.
东亚钳蝎神经毒素在大肠杆菌中的表达 总被引:2,自引:0,他引:2
以山西风陵渡东亚钳蝎(ButhusmartensiKarsch)的尾腺总RNA为模板,根据已知的蝎神经毒素保守氨基酸序列设计引物,利用PCR技术,扩增并克隆了两个蝎神经毒素基因.序列分析表明,由两个基因导出的氨基酸序列(BmKMm1和BmKMm2)与已知的蝎神经毒素BmKⅠ、BmKⅡ、BmKⅢ、BmKM1、BmKM9有很高的同源性.将BmKMm2基因重组到大肠杆菌分泌型表达载体pExSec1中进行表达.SDS-PAGE证明表达产物被分泌到细胞周间质及培养液中.经IgG-Sepharose纯化后的蛋白质注射小白鼠表明表达产物有生物学活性 相似文献
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屈良鹄 《中国生物工程杂志》1996,16(5):21-26
核仁小分子RNA屈良鹄(中山大学生命科学学院生物工程研究中心广州510275)关键词核仁小分子RNA(sonRNA);内含子(nitron);基因(gene);核糖体(ribosome)真核生物(eukaryote)在真核生物细胞中,除了人们所熟悉的rRNA,mRNA和tRNA之外,还存在着许多小分子RNA[1,2],如核小分子RNA(snRNA),核仁小分子RNA(snoRN)以及细胞过程中的调控活动,具有十分重要的生物学意义[3,4]. 相似文献
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细菌的细胞程序性死亡 总被引:1,自引:0,他引:1
细胞凋亡 (apoptosis)也称为细胞程序性死亡 (programmedcelldeath ,PCD) ,是由细胞自身的程序性自杀机制激活的细胞死亡现象。在多细胞真核生物中 ,程序性的细胞死亡是由细胞表面的死亡受体介导 ,通过一系列的半胱氨酸蛋白酶 (caspases)作用而启动[1] ,维系个体结构稳定、功能平衡和生长发育所必需的基本生物学过程。一般存在于个体的发育过程中 ,导致细胞功能和形态学上的改变 ,如蛋白质的水解、DNA和RNA的降解、细胞的收缩 ,以及细胞碎裂形成凋亡小体 (apoptoticbodies)等 … 相似文献
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基因沉默:获得性免疫的新途径 总被引:3,自引:0,他引:3
基因沉默 (genesilencing)首先发现于转基因植物。发生沉默的基因可以是外源性转移基因 ,也可以是入侵的病毒或宿主内源性基因。双链RNA(dsRNA)作为启动因素或中间体为不同生物基因沉默所共有。通常 ,基因沉默发生在两种水平上 ,一是由于DNA甲基化、异染色质化及位置效应等引起的转录水平上的基因沉默 (transcriptionalgenesi lencing ,TGS) ,另一种是在基因转录后水平上通过对目标RNA特异性降解而使基因失活的转录后基因沉默 (post transcriptionalgene… 相似文献
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小分子RNA也能调节真核基因的表达仅在若干年前,“酶必定是蛋白质”这个概念是天经地义、神圣不可侵犯的,而今天RNA也可以是酶已是众所周知的事实了。最近(1993年)Lee.R.C.等与WightmanB.Ha.I等都发现一种小分子RNA可象调节蛋白那... 相似文献
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该芯片实验室试剂盒可用于微量采样的RNA分析以及极少量RNA样品的完整性分析全球领先的跨国高科技公司安捷伦科技 (NYSE :A)和Caliper科技公司 2 0 0 2年 12月宣布推出名为RNA 6 0 0 0Pico的芯片实验室试剂盒 ,用于总RNA和信使RNA样品的自动质量控制分析。同RNA 6 0 0 0Nano芯片试剂盒相比 ,RNA 6 0 0 0Pico灵敏度提高了 2 5倍 ,因而在临床微量采样技术的样品分析中非常有用 ,比如在癌症研究中 ,可用于比较肿瘤组织与相邻组织的基因表达差异。虽然现在的研究手段能够成功地分离单个细胞 ,并从… 相似文献
10.
抗水稻条纹叶枯病毒核酶的设计,克隆及体外活性测定 总被引:10,自引:0,他引:10
为探索控制水稻条纹叶枯病毒(Ricestripevirus,RSV)设计合成了特异切割该病毒RNA保守区及编码病害特异性蛋白(DiseaseSpecificProtein,DSP)基因的核酶,核酶基因的长度均为40个碱基,用化学合成方法合成其正链及与其3'-末端互补的15个碱基引物,用TagDNA多聚酶合成其互补链。双链DNA直接插入克隆载体PGEM3zf(+)的Smal位点。序列测定表明,克隆得到的核酶序列与设计的核酶序列完全一致。经SP6RNA多聚酶体外转录得到核酶RNA。当核酶RNA与以同样方法转录得到的靶基因RNA混合反应,可得到预期结果相同的切割片段,表明两种核酶在体外均具有特异性切割活性。 相似文献
11.
酵母pac—1基因的克隆、序列分析和在大肠杆菌中的高效表达及活性测定 总被引:4,自引:0,他引:4
粟酒裂殖酵母菌 (Schizosaccharmycespombe)的 pac 1基因于 1991年Yuichilino等首次报道。在温度敏感型的酵母突变体中 ,pac 1基因是一个多拷贝阻遏子 ,它使酵母在限制温度培养条件下的减数分裂不受调控 ,对酵母的生长过程起着重要的调节作用。该基因有一个编码 36 4个氨基酸的开放阅读框 ,编码产物的羧基端与大肠杆菌核糖核酸酶Ⅲ有2 5 %的同源性。通过酶活性测定 ,已经确定它是一类依赖dsRNA的核糖核酸酶 ,具有降解dsRNA的功能[1,2 ] 。由于大多数植物病毒为RNA病毒 ,因此无论它的基… 相似文献
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长期以来 ,对病毒侵染的研究 ,在病毒复制及病毒的细胞间转移方面相对要深入一些[1] ,但对病毒的组装、依赖于维管系统的长距离运输等的认识非常有限[2 ] 。对寄主防卫系统及其机制的认识则主要限于一些抗性因子的证实 ,如抗TMV的烟草上分离的N基因 ,抗PVA的马铃薯上分离的R基因 ,以及一些病程相关蛋白因子 ,如几丁质酶A(ChtA)和PR 1 0a等[2~4 ] 。借助于一些标记蛋白 ,如β glucuronidase(Gus)、Liciferase(Lici)和greenfluorescentprotein(GFP)等 ,通过跟踪嵌… 相似文献
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《天然产物研究与开发》2001,13(2)
January 17 2 0 ,2 0 0 1:IndependentPharmacyChainConference ,ScottsdalePrincessResort,Scottsdale,Arizona .Contact:NCPAExhibitsmanager( 70 3 )683 3 619(fax) .February 2 0 2 3 ,2 0 0 1:EXPO 2 0 0 1,NationalCommunityPharmacistsAssoci ation ,ChainDrugMarketingAssociation ,NationalHomeInfusio… 相似文献
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《天然产物研究与开发》2002,(5)
NaturalMedicineInformation(MedicalJournalWatch :AbstractandComments)L CarnitineImprovesExerciseToleranceAmongAnginaPatientslyerRN ,KhanAA ,etal.L carnitinemoderatelyimprovestheexercisetoleranceinchronicstableangina .JAssocPhysIn dia 4 8(11) :10 5 0~ 10 5 2 ,2 0 0 0 .Forty s… 相似文献
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《日经生物技术》2 0 0 0年 10月 9日号 16页报道 :美国NationalScienceFoundation(NSF) 9月 2 2日宣布 ,今后在 5年内将提供总额 4 80 0万美元的研究经费进行 16种植物染色体研究。目的是促进包括玉米、小麦、水稻等主要粮食作物基因构造和基因分析。NSF的AssistantDirectorforBiologicalSciencesMaryClutter说 :重点集中在“以全染色体为研究对象 ,进行参与在叶绿体生物发生过程、植物营养、寄生、环境胁迫的植物反应等基因机能的研究。该研究项目最大… 相似文献
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《植物学通报》2002,(6)
数字或英文3’cDNA末端 (5 84)AFLP (4 4 4)AFLP分析 (1 94)AM菌根 (4 62 )ATP酶 (5 88)α 淀粉酶 (63 )CHS (2 65 )COP1 (62 0 )DNA甲基化 (3 74)Fiber FISH技术 (3 5 9)FLC (4 0 6)GA12 _醛 (1 3 7)GAs (63 )GA信号传导 (1 3 7)H _ATPase (1 84)ITS (698)MADS_box基因 (1 5 0 )mRNA (1 0 3 )PLD (1 5 6)PCR产物克隆测序 (698)PCR产物直接测序 (698)RAPD (2 0 1 ) (4 5 2 )RNAi (4 91 )Ri质粒 (65 0 )rol基因 (65 0 )SSR标记 (4 4 )中文一… 相似文献
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雪花莲外源凝集素基因转化番茄 总被引:20,自引:0,他引:20
将含有雪花莲外源凝集素基因(GNA)的质粒pRSSGNA1通过冻融法转化到根癌土壤杆菌9Agrobacterium tumefaciens(Smith et Townsend)Conn)菌株LBA4404中。采用叶盘法转化番茄(Lycopersicon esculentum Mill.)栽培品种“C8”、“A39”和“A53”,获得了含GNA基因的43株转化植物株。通过卡那霉素抗性鉴定、NPTⅡ基 相似文献
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《天然产物研究与开发》2002,(2)
L CarnitineImprovesExerciseToleranceAmongAnginaPatientslyerRN ,KhanAA ,etal.L carnitinemoderatelyimprovestheexercisetoleranceinchronicstableangina .JAssocPhysIn dia 48(11) :10 5 0~ 10 5 2 ,2 0 0 0 .Forty sevenmenandwomenaged 48to 6 4yearswhohadchronicstableanginatook 2gofL car… 相似文献
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《天然产物研究与开发》2002,(3)
L CarnitineImprovesExerciseToleranceAmongAnginaPatientslyerRN ,KhanAA ,etal.L carnitinemoderatelyimprovestheexercisetoleranceinchronicstableangina .JAssocPhysIn dia 4 8(11) :10 5 0~ 10 5 2 ,2 0 0 0 .Forty sevenmenandwomenaged 4 8to 6 4 yearswhohadchronicstableanginatook 2 gofL c… 相似文献
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DNA模板序列的转录调控是基因表达多级调节过程的关键 ,细胞周期中基因转录水平的改变应激细胞发育、分化及正常生理功能的多种信号转导。疾病或其它因素也应激转录水平变化 ,从而改变各种mRNAs的稳定性。因此基因的mR NA水平分析 ,在基因调控研究领域是必不可少的。mRNA的常规分析方法是Northernblots、RNAdot/slotblot、核酸酶保护法(nucleaseprotection)和原位杂交 (insituhybridization)。而PCR技术的应用开创了mRNA分析新方法[1 -3] :RN… 相似文献