dsRNA介导的RNA干扰

在多种生物中 ,外源或内源性的双链ＲＮＡ(ｄｏｕｂｌｅ ｓｔｒａｎｄｅｄＲＮＡ ,ｄｓＲＮＡ)导入细胞中 ,与ｄｓＲＮＡ同源的ｍＲＮＡ则受到降解 ,因而其相应的基因受到抑制。这种转录后基因沉默 (ｐｏｓｔ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌｇｅｎｅｓｉｌｅｎｃｉｎｇ ,ＰＴＧＳ)机制首先在线虫 (Ｃ .ｅｌｅｇａｎｓ)中得以证实。由于这是一种在ＲＮＡ水平的基因表达抑制 ,故也称为ＲＮＡ干扰 (ＲＮＡｉｎｔｅｒｆｅｒ ｅｎｃｅ) ,简称ＲＮＡｉ[1] 。随后发现 ,在各种生物 ,如果蝇[2 ] 、拟南芥菜[3 ] 、及小鼠[4] 等均存在ｄｓＲＮＡ介导…     

不依赖甲硫氨酸的翻译起始

Ｓａｓａｋｉ等在ＰｒｏｃＮａｔｌＡｃａｄＳｃｉＵＳＡ 2 0 0 0年第 4期上报道了一种不依赖甲硫氨酸的翻译起始方式[1] 。ＰＳＩＶ (Ｐｌａｕｔｉａｓｔａｌｉｉｎｔｅｓｔｉｎｅｖｉｒｕｓ)是一种昆虫ＲＮＡ病毒 ,属蟋蟀麻痹样病毒组 (Ｃｒｉｃｋｅｔｐａｒａｌｙｓｉｓ ｌｉｋｅｖｉｒｕｓｅｓ) ,为正链ＲＮＡ病毒。属于该组的还有ＤＣＶ、ＲｈＰＶ、ＨｉＰＶ等。该组病毒的理化性质与哺乳动物的小ＲＮＡ病毒 (ｐｉｃｏｒｎａｖｉｒｕｓ)相似 ,但基因图 1　 (Ａ)ＰＳＩＶ基因组结构 ;(Ｂ)预测的外壳蛋白编码区上游的茎环结构组织不同。…     

基因沉默

基因沉默 (ｇｅｎｅｓｉｌｅｎｃｉｎｇ)是指生物体中特定基因由于种种原因不表达。一方面 ,基因沉默是遗传修饰生物 (ｇｅｎｅｔｉｃａｌｌｙｍｏｄｉｆｉｅｄｏｒｇａｎｉｓｍｓ)实用化和商品化的巨大障碍 ,另一方面 ,基因沉默是植物抗病毒的一个本能反应 ,为用抗病毒基因植物工程育种提供了具有较大潜在实用价值的策略———ＲＮＡ介导的病毒抗性 (ＲＮＡ ｍｅｄｉａｔｅｄｖｉｒｕｓｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ,ＲＭＶＲ) [1～ 3] 。基因沉默现象首先在转基因植物中发现 ,接着在线虫、真菌、昆虫、原生动物以及老鼠中陆续发现。大量的研究表…     

东亚钳蝎神经毒素在大肠杆菌中的表达

以山西风陵渡东亚钳蝎（ＢｕｔｈｕｓｍａｒｔｅｎｓｉＫａｒｓｃｈ）的尾腺总ＲＮＡ为模板,根据已知的蝎神经毒素保守氨基酸序列设计引物,利用ＰＣＲ技术,扩增并克隆了两个蝎神经毒素基因．序列分析表明,由两个基因导出的氨基酸序列（ＢｍＫＭｍ１和ＢｍＫＭｍ２）与已知的蝎神经毒素ＢｍＫⅠ、ＢｍＫⅡ、ＢｍＫⅢ、ＢｍＫＭ１、ＢｍＫＭ９有很高的同源性．将ＢｍＫＭｍ２基因重组到大肠杆菌分泌型表达载体ｐＥｘＳｅｃ１中进行表达．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ证明表达产物被分泌到细胞周间质及培养液中．经ＩｇＧ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ纯化后的蛋白质注射小白鼠表明表达产物有生物学活性     

核仁小分子RNA

核仁小分子ＲＮＡ屈良鹄（中山大学生命科学学院生物工程研究中心广州５１０２７５）关键词核仁小分子ＲＮＡ（ｓｏｎＲＮＡ）;内含子（ｎｉｔｒｏｎ）;基因（ｇｅｎｅ）;核糖体（ｒｉｂｏｓｏｍｅ）真核生物（ｅｕｋａｒｙｏｔｅ）在真核生物细胞中,除了人们所熟悉的ｒＲＮＡ,ｍＲＮＡ和ｔＲＮＡ之外,还存在着许多小分子ＲＮＡ［１,２］,如核小分子ＲＮＡ（ｓｎＲＮＡ）,核仁小分子ＲＮＡ（ｓｎｏＲＮ）以及细胞过程中的调控活动,具有十分重要的生物学意义[3,4].     

细菌的细胞程序性死亡

细胞凋亡 (ａｐｏｐｔｏｓｉｓ)也称为细胞程序性死亡 (ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄｃｅｌｌｄｅａｔｈ ,ＰＣＤ) ,是由细胞自身的程序性自杀机制激活的细胞死亡现象。在多细胞真核生物中 ,程序性的细胞死亡是由细胞表面的死亡受体介导 ,通过一系列的半胱氨酸蛋白酶 (ｃａｓｐａｓｅｓ)作用而启动[1] ,维系个体结构稳定、功能平衡和生长发育所必需的基本生物学过程。一般存在于个体的发育过程中 ,导致细胞功能和形态学上的改变 ,如蛋白质的水解、ＤＮＡ和ＲＮＡ的降解、细胞的收缩 ,以及细胞碎裂形成凋亡小体 (ａｐｏｐｔｏｔｉｃｂｏｄｉｅｓ)等 …     

基因沉默：获得性免疫的新途径

基因沉默 (ｇｅｎｅｓｉｌｅｎｃｉｎｇ)首先发现于转基因植物。发生沉默的基因可以是外源性转移基因 ,也可以是入侵的病毒或宿主内源性基因。双链ＲＮＡ(ｄｓＲＮＡ)作为启动因素或中间体为不同生物基因沉默所共有。通常 ,基因沉默发生在两种水平上 ,一是由于ＤＮＡ甲基化、异染色质化及位置效应等引起的转录水平上的基因沉默 (ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌｇｅｎｅｓｉ ｌｅｎｃｉｎｇ ,ＴＧＳ) ,另一种是在基因转录后水平上通过对目标ＲＮＡ特异性降解而使基因失活的转录后基因沉默 (ｐｏｓｔ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌｇｅｎｅ…     

抗水稻条纹叶枯病毒核酶的设计,克隆及体外活性测定

为探索控制水稻条纹叶枯病毒（Ｒｉｃｅｓｔｒｉｐｅｖｉｒｕｓ,ＲＳＶ）设计合成了特异切割该病毒ＲＮＡ保守区及编码病害特异性蛋白（ＤｉｓｅａｓｅＳｐｅｃｉｆｉｃＰｒｏｔｅｉｎ,ＤＳＰ）基因的核酶,核酶基因的长度均为４０个碱基,用化学合成方法合成其正链及与其３＇－末端互补的１５个碱基引物,用ＴａｇＤＮＡ多聚酶合成其互补链。双链ＤＮＡ直接插入克隆载体ＰＧＥＭ３ｚｆ（＋）的Ｓｍａｌ位点。序列测定表明,克隆得到的核酶序列与设计的核酶序列完全一致。经ＳＰ６ＲＮＡ多聚酶体外转录得到核酶ＲＮＡ。当核酶ＲＮＡ与以同样方法转录得到的靶基因ＲＮＡ混合反应,可得到预期结果相同的切割片段,表明两种核酶在体外均具有特异性切割活性。     

小分子RNA也能调节真核基因的表达

小分子ＲＮＡ也能调节真核基因的表达仅在若干年前,“酶必定是蛋白质”这个概念是天经地义、神圣不可侵犯的,而今天ＲＮＡ也可以是酶已是众所周知的事实了。最近（１９９３年）Ｌｅｅ．Ｒ．Ｃ．等与ＷｉｇｈｔｍａｎＢ．Ｈａ．Ｉ等都发现一种小分子ＲＮＡ可象调节蛋白那...     

酵母pac—1基因的克隆、序列分析和在大肠杆菌中的高效表达及活性测定

粟酒裂殖酵母菌 (Ｓｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｍｙｃｅｓｐｏｍｂｅ)的 ｐａｃ 1基因于 1991年Ｙｕｉｃｈｉｌｉｎｏ等首次报道。在温度敏感型的酵母突变体中 ,ｐａｃ 1基因是一个多拷贝阻遏子 ,它使酵母在限制温度培养条件下的减数分裂不受调控 ,对酵母的生长过程起着重要的调节作用。该基因有一个编码 36 4个氨基酸的开放阅读框 ,编码产物的羧基端与大肠杆菌核糖核酸酶Ⅲ有2 5 %的同源性。通过酶活性测定 ,已经确定它是一类依赖ｄｓＲＮＡ的核糖核酸酶 ,具有降解ｄｓＲＮＡ的功能[1,2 ] 。由于大多数植物病毒为ＲＮＡ病毒 ,因此无论它的基…     

安捷伦科技与Caliper科技联合推出最新型的RNA6000Pico芯片实验室试剂盒辅助癌症研究

该芯片实验室试剂盒可用于微量采样的ＲＮＡ分析以及极少量ＲＮＡ样品的完整性分析全球领先的跨国高科技公司安捷伦科技 (ＮＹＳＥ :Ａ)和Ｃａｌｉｐｅｒ科技公司 2 0 0 2年 12月宣布推出名为ＲＮＡ 6 0 0 0Ｐｉｃｏ的芯片实验室试剂盒 ,用于总ＲＮＡ和信使ＲＮＡ样品的自动质量控制分析。同ＲＮＡ 6 0 0 0Ｎａｎｏ芯片试剂盒相比 ,ＲＮＡ 6 0 0 0Ｐｉｃｏ灵敏度提高了 2 5倍 ,因而在临床微量采样技术的样品分析中非常有用 ,比如在癌症研究中 ,可用于比较肿瘤组织与相邻组织的基因表达差异。虽然现在的研究手段能够成功地分离单个细胞 ,并从…     

寄主防卫过程中病毒的维管积集与传播

长期以来 ,对病毒侵染的研究 ,在病毒复制及病毒的细胞间转移方面相对要深入一些[1] ,但对病毒的组装、依赖于维管系统的长距离运输等的认识非常有限[2 ] 。对寄主防卫系统及其机制的认识则主要限于一些抗性因子的证实 ,如抗ＴＭＶ的烟草上分离的Ｎ基因 ,抗ＰＶＡ的马铃薯上分离的Ｒ基因 ,以及一些病程相关蛋白因子 ,如几丁质酶Ａ(ＣｈｔＡ)和ＰＲ 1 0ａ等[2～4 ] 。借助于一些标记蛋白 ,如β ｇｌｕｃｕｒｏｎｉｄａｓｅ(Ｇｕｓ)、Ｌｉｃｉｆｅｒａｓｅ(Ｌｉｃｉ)和ｇｒｅｅｎｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔｐｒｏｔｅｉｎ(ＧＦＰ)等 ,通过跟踪嵌…     

天然药物会议信息(英文)

Ｊａｎｕａｒｙ 17 2 0 ,2 0 0 1:ＩｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔＰｈａｒｍａｃｙＣｈａｉｎＣｏｎｆｅｒｅｎｃｅ ,ＳｃｏｔｔｓｄａｌｅＰｒｉｎｃｅｓｓＲｅｓｏｒｔ,Ｓｃｏｔｔｓｄａｌｅ,Ａｒｉｚｏｎａ .Ｃｏｎｔａｃｔ:ＮＣＰＡＥｘｈｉｂｉｔｓｍａｎａｇｅｒ( 70 3 )683 3 619(ｆａｘ) .Ｆｅｂｒｕａｒｙ 2 0 2 3 ,2 0 0 1:ＥＸＰＯ 2 0 0 1,ＮａｔｉｏｎａｌＣｏｍｍｕｎｉｔｙＰｈａｒｍａｃｉｓｔｓＡｓｓｏｃｉ ａｔｉｏｎ ,ＣｈａｉｎＤｒｕｇＭａｒｋｅｔｉｎｇＡｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ,ＮａｔｉｏｎａｌＨｏｍｅＩｎｆｕｓｉｏ…     

天然药物信息(医学期刊扫描:文摘和评论)(英文)

ＮａｔｕｒａｌＭｅｄｉｃｉｎｅＩｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ(ＭｅｄｉｃａｌＪｏｕｒｎａｌＷａｔｃｈ :ＡｂｓｔｒａｃｔａｎｄＣｏｍｍｅｎｔｓ)Ｌ ＣａｒｎｉｔｉｎｅＩｍｐｒｏｖｅｓＥｘｅｒｃｉｓｅＴｏｌｅｒａｎｃｅＡｍｏｎｇＡｎｇｉｎａＰａｔｉｅｎｔｓｌｙｅｒＲＮ ,ＫｈａｎＡＡ ,ｅｔａｌ.Ｌ ｃａｒｎｉｔｉｎｅｍｏｄｅｒａｔｅｌｙｉｍｐｒｏｖｅｓｔｈｅｅｘｅｒｃｉｓｅｔｏｌｅｒａｎｃｅｉｎｃｈｒｏｎｉｃｓｔａｂｌｅａｎｇｉｎａ .ＪＡｓｓｏｃＰｈｙｓＩｎ ｄｉａ 4 8(11) :10 5 0～ 10 5 2 ,2 0 0 0 .Ｆｏｒｔｙ ｓ…     

美国在5年内提供4800万美元进行植物染色体研究

《日经生物技术》2 0 0 0年 10月 9日号 16页报道 :美国ＮａｔｉｏｎａｌＳｃｉｅｎｃｅＦｏｕｎｄａｔｉｏｎ(ＮＳＦ) 9月 2 2日宣布 ,今后在 5年内将提供总额 4 80 0万美元的研究经费进行 16种植物染色体研究。目的是促进包括玉米、小麦、水稻等主要粮食作物基因构造和基因分析。ＮＳＦ的ＡｓｓｉｓｔａｎｔＤｉｒｅｃｔｏｒｆｏｒＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓＭａｒｙＣｌｕｔｔｅｒ说 :重点集中在“以全染色体为研究对象 ,进行参与在叶绿体生物发生过程、植物营养、寄生、环境胁迫的植物反应等基因机能的研究。该研究项目最大…     

植物学通报2002年19卷关键词索引总目次(括号内为页码)

数字或英文3’ｃＤＮＡ末端 (5 84)ＡＦＬＰ (4 4 4)ＡＦＬＰ分析 (1 94)ＡＭ菌根 (4 62 )ＡＴＰ酶 (5 88)α 淀粉酶 (63 )ＣＨＳ (2 65 )ＣＯＰ1 (62 0 )ＤＮＡ甲基化 (3 74)Ｆｉｂｅｒ ＦＩＳＨ技术 (3 5 9)ＦＬＣ (4 0 6)ＧＡ12 ＿醛 (1 3 7)ＧＡｓ (63 )ＧＡ信号传导 (1 3 7)Ｈ ＿ＡＴＰａｓｅ (1 84)ＩＴＳ (698)ＭＡＤＳ＿ｂｏｘ基因 (1 5 0 )ｍＲＮＡ (1 0 3 )ＰＬＤ (1 5 6)ＰＣＲ产物克隆测序 (698)ＰＣＲ产物直接测序 (698)ＲＡＰＤ (2 0 1 ) (4 5 2 )ＲＮＡｉ (4 91 )Ｒｉ质粒 (65 0 )ｒｏｌ基因 (65 0 )ＳＳＲ标记 (4 4 )中文一…     

天然药物信息(医学期刊扫描:文摘和评论)(英文)

Ｌ ＣａｒｎｉｔｉｎｅＩｍｐｒｏｖｅｓＥｘｅｒｃｉｓｅＴｏｌｅｒａｎｃｅＡｍｏｎｇＡｎｇｉｎａＰａｔｉｅｎｔｓｌｙｅｒＲＮ ,ＫｈａｎＡＡ ,ｅｔａｌ.Ｌ ｃａｒｎｉｔｉｎｅｍｏｄｅｒａｔｅｌｙｉｍｐｒｏｖｅｓｔｈｅｅｘｅｒｃｉｓｅｔｏｌｅｒａｎｃｅｉｎｃｈｒｏｎｉｃｓｔａｂｌｅａｎｇｉｎａ .ＪＡｓｓｏｃＰｈｙｓＩｎ ｄｉａ 48(11) :10 5 0～ 10 5 2 ,2 0 0 0 .Ｆｏｒｔｙ ｓｅｖｅｎｍｅｎａｎｄｗｏｍｅｎａｇｅｄ 48ｔｏ 6 4ｙｅａｒｓｗｈｏｈａｄｃｈｒｏｎｉｃｓｔａｂｌｅａｎｇｉｎａｔｏｏｋ 2ｇｏｆＬ ｃａｒ…     

天然药物信息(医学期刊扫描:文摘和评论)

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雪花莲外源凝集素基因转化番茄

将含有雪花莲外源凝集素基因（ＧＮＡ）的质粒ｐＲＳＳＧＮＡ１通过冻融法转化到根癌土壤杆菌９Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ（Ｓｍｉｔｈ ｅｔ Ｔｏｗｎｓｅｎｄ）Ｃｏｎｎ）菌株ＬＢＡ４４０４中。采用叶盘法转化番茄（Ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｏｎ ｅｓｃｕｌｅｎｔｕｍ Ｍｉｌｌ．）栽培品种“Ｃ８”、“Ａ３９”和“Ａ５３”,获得了含ＧＮＡ基因的４３株转化植物株。通过卡那霉素抗性鉴定、ＮＰＴⅡ基     

研究基因转录的RT-PCR技术

ＤＮＡ模板序列的转录调控是基因表达多级调节过程的关键 ,细胞周期中基因转录水平的改变应激细胞发育、分化及正常生理功能的多种信号转导。疾病或其它因素也应激转录水平变化 ,从而改变各种ｍＲＮＡｓ的稳定性。因此基因的ｍＲ ＮＡ水平分析 ,在基因调控研究领域是必不可少的。ｍＲＮＡ的常规分析方法是Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔｓ、ＲＮＡｄｏｔ/ｓｌｏｔｂｌｏｔ、核酸酶保护法(ｎｕｃｌｅａｓｅｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ)和原位杂交 (ｉｎｓｉｔｕｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ)。而ＰＣＲ技术的应用开创了ｍＲＮＡ分析新方法[1 -3] :ＲＮ…