乙型肝炎病毒与乙型肝炎疫苗

乙型肝炎已成为严重威胁人类健康的世界性疾病之一,我国也是高流行区。现在对本病的认识与研究逐渐深入,已取得了很多研究成果。本文仅就乙型肝炎的病原(乙型肝炎病毒)和与疫苗有关的两个问题简述如下: (一)乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒(HBV)属DNA病毒,该病毒与其相关抗原颗粒在电镜下分三种不同形态:直径为22nm小球型颗粒、直径为22nm长为200nm的管状颗粒和直径为42nm的大球型颗粒(又称Dane颗粒)。一般认为Dane颗粒是完整的病毒。这三种形态病毒颗粒的衣膜均由表面抗原(HBsAg)组成,不含核酸。Dane颗粒衣膜内为27nm的核心,核心部分包括核心抗原(HBcAg)和e抗原(HBeAg)、内源性DNA模板及相应的DNA聚合酶。据研究HBV进入肝细胞浆脱去衣膜,其环形     

丁型肝炎病毒的分子生物学研究进展

丁型肝炎病毒(Hepatitis delta virus,HDV)是一种缺陷病毒,必须在嗜肝DNA病毒的辅助下才能复制并组装成有感染性的病毒颗粒。其毒粒为直径35～37nm,大小介于HBV的Dane颗粒和HBsAg颗粒之间的球形颗粒。病毒颗粒外层由脂双层和HBsAg组成,内包含由HDAg和HDV RNA基因组结合组成的核蛋白体。HDV是目前所知唯一具有     

以牛痘病毒为载体的乙型肝炎病毒表面抗原基因的表达

乙型肝炎是一种严重危害人类健康的疾病,对它的防治国内外均十分重视。乙型肝炎是由乙型肝炎病毒(HBV)感染所致。HBV是部分单链的DNA病毒,其基因组编码了表面抗原蛋白、核心抗原蛋白以及内源DNA聚合酶等蛋白质。乙肝表面抗原蛋白(HBsAg)是病毒的外壳蛋白,在乙肝病人的血液中能形成直径约22nm的表面抗原颗粒。用它作为抗原给动物注射,可使动物产生专一性抗体。     

乙肝病毒前核区基因的功能

<正>乙型肝炎病毒(HBV)有一个表面抗原(sAg)蛋白包埋的脂外壳,壳内有核心颗粒,颗粒由病毒DNA,核心抗原(cAg)及DNA聚合酶和共价连接DNA5'端的蛋白组成。用二巯基乙醇和加热法,或用中等强度的蛋白酶降解法处理外壳,可使cAg转化为与之密切相关的e抗原(eAg)。一般认为,血清eAg是cAg的另一种形式,或是其衍生物。乙肝病毒急性感染期的肝细胞内出现高水平的sAg和cAg,但eAg水平低。此     

从乙型肝炎病毒表面抗原阳性母亲流产的胎儿查出乙型肝炎病毒标志

应用Southern blot杂交试验检测HBsAg及HBeAg均阳性母亲流产的9例胎儿肝细胞中HBV DNA的存在状态,并与其HBV血清学、免疫电镜及肝脏免疫组织化学的结果相比较。结果在3例胎肝高分子DNA中检出了整合的HBV DNA顺序,且此3例HBV DNA整合到胎肝细胞基因组并无特定部位,提示为随机整合。3例中2例的血清及肝匀浆都检出HBsAg颗粒,其胎肝细胞胞浆HBsAg也阳性;另1例受HBV感染的唯一标志是在胎肝细胞中存在着整合的HBVDNA。此外,另1例则仅胎肝细胞中HBsAg阳性而无整合的HBV DNA。在胎肝细胞中检出整合的HBV DNA进一步证实HBV子宫内传播途径的存在。     

肝病患者肝细胞内HBV DNA原位杂交研究——形态、分布及意义

应用生物素标记HBV DNA(乙肝病毒脱氧核糖核酸)作探针,对129例肝病患者肝组织作原位杂交研究。发现HBV DNA主要存在肝细胞浆内,可分为胞浆致密型、疏松型和包涵体型。HBV DNA阳性肝细胞在肝实质中分为三种型:小叶型、局灶型与散在点状分布。HBV DNA在慢性活动型肝炎中检出率最高(81％),显著高于肝硬化,慢性小叶型肝炎、急性肝炎及原发性肝癌组。乙肝复制指标阳性患者肝细胞内HBV DNA检出率明显高于非复制组;并观察到HBV DNA阳性肝细胞与肝细胞坏死灶关系密切,多数紧紧毗邻肝细胞坏死灶/或和位于坏死灶中间,尤以局灶型分布的HBV DNA阳性肝细胞为显著。     

疱疹病毒UL26．5基因及其编码蛋白研究进展

疱疹病毒是一类具有相同形态学且有较大囊膜的双链DNA病毒,分为α、β和γ三类疱疹病毒亚科.成熟病毒粒子近似球形,直径120nm～200nm,主要山核心(core)、衣壳(capsid)、外膜(tegument)和囊膜(envelope)4部分组成.衣壳是疱疹病毒的重要组成部分,它在细胞核内装配并包装DNA,然后转移到细胞质中被膜成熟.正常衣壳的形成必须围绕一个由UL26.5蛋白和UL26支架蛋白组成的内部支架进行组装.     

烟草花叶病毒(TMV)的重建实验

我们知道,根据病毒含DNA或RNA,可将病毒分为DNA病毒和RNA病毒。RNA病毒不含DNA,那么在这种病毒中,遗传信息是否存在于RNA分子中呢? 1956年,美国学者弗伦克尔一库兰特(Fraemkel-Courat)用烟草花叶病毒(TMV)的重建实验证明了RNA也是遗传的物质。烟草花叶病毒呈杆状,直径为18nm,长度为300nm。它有一个由2130个蛋白质亚基组成的外壳,环绕着一条单螺旋的RNA分子核心。这种病毒约含有6%的RNA(由6400个核苷酸组成)和90%的蛋白质。烟草花叶病毒及其它的病毒在烟叶上引起的病斑都具有种的特异性,而且这些特性是遗传的.     

三角帆蚌瘟病的研究II．三角帆蚌瘟病的病原——一种嵌砂样病毒

从自然发病与人工感染发病蚌分离的三角帆蚌瘟病病毒(HcPV)呈球形、类球形,大小差异悬殊,直径45--296nm。病毒颗粒外被一层表面突起和类脂质的囊膜。核衣壳呈串珠状,直径10一12nm,卷曲于细胞浆内,可超过1000nm。超薄切片中病毒颗粒积聚于细胞浆与内质网中。超微病变的主要特征：内质网高度扩张,核糖体增殖并凝聚,胞浆内出现包裹着病毒的层卷状结构。病毒核酸对RNA酶敏感,对DNA酶不敏感,经聚丙烯酰胺凝歧电泳,出现。条大分子带与1条低分子带。HcPV的上述特征与嵌砂样病毒基本吻合。因此认为三角帆蚌瘟病的病原是一种嵌砂样病毒。     

含preS2的乙肝表面抗原基因的表达

HBV是一个含有部分单链区的环状双链DNA病毒,由表面抗原蛋白与脂构成的表面外壳和含核心抗原蛋白与病毒基因组的核心组成。编码病毒外壳蛋白即表面抗原的编码区是个大的开放读码区,它可分为S基因、preS2区和preS1区三部分,有三个相应的、彼此位相相同的翻译起始密码子ATG,分别编码分子量为24K和27K的主要S蛋白,     

抗白蛋白抗体(AAA)

1974年Lenkel发现肝病病人血清能凝集聚合人血清白蛋白(PHSA)包被的红细胞。这现象已由许多学者所证实。产生这一现象的原因有二。1,与PHSA结合的是HBsAg(包括Dane颗粒、小球形和管形颗粒)颗粒上存在PHSA受体,2,乙肝病人血清中存在抗自身变性白蛋白的抗体(AAA),介导了HBV感染的病人的HB_sAg和Dane颗粒与PHSA包被的红细胞起反应。     

乙型肝炎病毒与乙肝疫苗的基因工程

乙型肝炎病毒(HBV)能引起人患乙型肝炎。乙型肝炎(简称乙肝)是一种流行很广的传染病,而且传染性也比较强,大约4×10~(-5)ml含乙型肝炎病毒的血液能够足使人发生感染。输血或注射是重要的传染途径;外科和牙科手术、针刺、使用公用剃刀,牙刷等物品,皮肤微小损伤沾染少量含乙型肝炎病毒,均可成为传染源,吸血昆虫也可能传播乙肝。据统计,全世界乙肝携带者约有2亿人。乙肝病毒除了能引起人患乙肝外,部分还可能诱发肝癌。乙型肝炎病毒的结构与乙肝病毒相关的颗粒有三种不同的形态: 1.大球形颗粒:是一种具有双层外壳的病毒样颗粒,直径约42nm(纳米,1nm=10~(-9)m),外壳厚度7nm,含有乙肝表面抗原(HBsAg),最能代表HBsAg抗原性的是由亚基PⅠ和PⅡ所构成的二聚体。PⅠ是一个分子量     

血源性Dane颗粒的多肽分析

采用PAGE-Western Blot技术对血源性Dane颗粒的多肽组份进行了分析。并结合HBV感染的其它血清学指标,初步探讨了HBV感染者对这些多肽的抗体应答情况及意义。结果显示:Dane颗粒在PAGE图谱上有12条多肽表型;Western Blot证实除S区的6条多肽和来自C区的具有cAg和eAg两种抗原位点的同一多肽P21外,还有与抗Pol结合的P24-25多肽以及与抗人免疫球蛋白结合的多肽(P45-IgC,P76-IgM),推测血源性Dane颗粒上可能存在有Pol基因表达的产物和结合在表面的人免疫球蛋白或相似的抗原决定簇。调查29例隐性HBV感染自限后人群和185例HBV现症感染者对这些多肽的应答情况发现:P24、P27、P39、P42是引起免疫应答的多肽,两组对它们时应答存在着差异(P<0.01)。表明对它们的有效应答可能有利于HBV感染的清除。     

SIRT3激动剂对乙肝病毒转录和复制的影响

该文探讨了SIRT3激动剂(Honokiol,HKL)对乙肝病毒(Hepatitis B virus,HBV)转录和复制的影响。培养HepG2-NTCP和人原代肝细胞(primary human hepatocytes,PHH),感染HBV颗粒后,用Honokiol(5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L)处理细胞后继续培养10天,通过荧光定量PCR检测细胞内HBV DNA、cccDNA和HBV RNAs水平,Southern blot实验进一步检测胞内HBV DNA水平。构建SIRT3-KO细胞,检测敲除SIRT3后,Honokiol对细胞内HBV DNA、cccDNA和HBV RNAs的影响。通过小鼠尾静脉高压注射pCMV-KRAB-Cre质粒和precccDNA质粒构建持续感染小鼠模型,一周后腹腔注射Honokiol持续20天。荧光定量PCR检测小鼠血清中HBV DNA拷贝数,肝组织内HBV DNA、cccDNA和HBV RNAs水平。结果表明,Honokiol浓度依赖性地抑制HepG2-NTCP和PHH细胞内HBV DNA以及HBV RNAs水平,此外,Honokiol可以降低cccDNA的转录活性;敲除SIRT3后,Honokiol不能发挥抗病毒作用;小鼠模型中,Honokiol能够降低血清中HBV DNA和肝组织内HBV DNA拷贝数,以及能够显著抑制肝组织内HBV RNAs水平和cccDNA的转录活性。该研究结果表明,Honokiol能够抑制乙肝病毒转录和复制。     

乙型肝炎病毒(DANE颗粒)的特点

<正>在慢性HBsAg携带者血清里环流的乙型肝炎表面抗原(HBsAg)有几种形态;约22nm的颗粒,管形和Dane颗粒。42nm的Dane颗粒有一个复杂的形态学上的构造,包括一个HBsAg外壳和一个27nm的核心,HBcAg。以HBsAg形式表现的D-     

乙型肝炎病毒DNA疫苗的研究进展

预防与控制乙型肝炎发病的乙型肝炎病毒(HBV)疫苗,是有重大的社会和经济意义。HBV的持续感染可引起慢性肝脏疾患,并逐步发展为肝硬化和肝细胞癌(HCC)。目前的乙肝重组亚单位疫苗可以使90％的接种产生保护性抗体;但是对慢性HBV携带,由于其机体对HBsAg蛋白产生耐受,不能产生体液和细胞免疫,因此它只能作为一种预防性的疫苗。DNA疫苗(基因疫苗)是一种新的疫苗技术,通过向体内递送编码抗原的细菌质粒,刺激产生特异的体液和细胞免疫反应。在小鼠和其他的肝炎病毒感染动物模型中,HBV DNA疫苗可以特异性地引起体液和细胞免疫,清除HBV转基因动物血循环中的HBsAg颗粒和HBV DNA。如果加入各种免疫调节细胞因子的基因,可以进一步提高HBV DNA疫苗的免疫效果,因此它不仅可作为预防性疫苗,也可作为治疗型疫苗。     

乳头状瘤病毒

<正>Shope于1933年首先证明了形成肿瘤的棉尾兔乳头状瘤病毒(CRPV),以后相继发现了牛、马、犬、鹿等各自特有的乳头状瘤病毒。所有的乳头状瘤病毒,如其名所示,都能形成乳头状瘤。具有致癌性者,已知有CRPV和BPV(牛乳头状瘤病毒),为HPV(人类乳头状瘤病毒)癌变的珍贵模型。本文以HPV为重点论述。 一、HPV的特性 1、病毒颗粒 HPV颗粒的外壳是表面具有72个衣壳蛋白亚单位(壳微粒)的正二十面体,外壳至少由2个结构蛋白(分子量53000～59000及70000)所组成。由于外壳缺乏脂质,故对醚有抗性。其它的蛋白质为组蛋白(H2、H3、H4),在中空颗粒中不存在。核酸为8000个碱基对的双链环状DNA,鸟嘌呤     

乳鼠感染肾综合征出血热病毒形态的电镜观察

应用常规超薄切片技术,对新生乳鼠脑内接种ALC96株肾综合征出血热(HFRS,又称流行性出血热)病毒后不同时期的脑组织进行电镜观察。感染早期(4天),大脑海马回神经细胞显示核周胞浆内高尔基膜囊堆增生,小泡密布。感染晚期(8天、10天),在显著增生、扩大的高尔基嚷泡池内找到为数不多的直径在70—110…的圆形、卵圆形或杆状病毒颗粒。成熟病毒具有双层脂质包膜及表面穗状微突,核心含少量细管丝或微细颗粒。病毒成熟的方式是从高尔基囊泡膜内壁上发芽进入池内。在感染细胞高尔基区及其邻近可见到由中等致密的细管丝或细颗粒样结构所组成的胞浆包涵体。根据感染乳鼠大脑神经细胞内病毒的形态学和形态发生学特征,可以证实HFRs病毒属于布尼安病毒科(Famiiy Bunyaviridae)的成员。     

乙型肝炎病毒HBsAg基因在酵母中GAL-10控制下的表达

肝炎病毒是严重影响人类健康的病毒之一,它的感染导致肝炎等人类肝脏疾病。肝炎病毒是约3,200bp长,其中部分为单链的DNA病毒,其基因组编码了表面抗原蛋白、核心蛋白和它自己的DNA聚合酶等蛋白质。表面抗原蛋白是在病毒外壳表面的单链蛋白质。肝炎病毒感染后不仅会产生许多病毒颗粒,而且会过量产生直径为     

水痘一带状疱疹病毒分离株核衣壳的形态特征

本文用超薄切片电镜技术对水痘一带状疱疹病毒(VZV)分离株J_1的核衣壳进行了形态学研究。结果表明,在病毒感染后5小时即可观察到细胞核内大量的病毒核心相关颗粒和少量核衣壳。在细胞核内和细胞浆内均可见到病毒基质或毒浆结构。VZVJ_1株具有三种类型的核衣壳,命名为A型、B型、C型核衣壳。A型具有电子致密核心,B型的核心呈颗粒状,C型具有电子透明核心。三种核衣壳大小一致,直径75—100nm,核心为35—55nm。将VZV的核衣壳与疱疹病毒科其它成员作了比较分析,并对各种核衣壳在病毒成熟过程中的作用进行了探讨。