基质金属蛋白酶与中枢神经系统感染

基质金属蛋白酶(MMPs)是一组合锌的能降解细胞外基质的中性蛋白酶家族.目前认为MMPs尤其是明胶酶(MMP-2,MMP-9)与中枢神经系统感染关系密切.通常它们以酶原的形式存在,一旦活化,则迅速攻击血脑屏障,降解基底膜的一些基质蛋白,破坏内皮细胞的紧密连接蛋白,促进脑水肿的形成和炎细胞的浸润.近年来研究发现,中枢神经系统感染后MMPs表达增加.导致血脑屏障损害及血管源性脑水肿,并参与中枢神经系统免疫反应,促进感染的病理生理过程.     

基质金属蛋白酶-9 与脑出血的关系

基质金属蛋白酶(MMPs)是一族锌离子依赖性内肽酶,具有降解细胞外基质的作用,而后者是构成血管基底膜的主要成分。MMPs参与了伤口愈合、动脉硬化发生、肿瘤细胞扩散等过程。MMP-9是MMPs中的重要成员,与脑血管病关系密切,在脑出血的发生、发展过程中起到了重要的作用。因此,监测MMP-9表达水平的变化可能对脑出血的发生、发展及预后产生重要影响;而降低MMP-9表达水平,则可能成为治疗脑出血的新途径。     

纤黏连蛋白重组多肽CH50抑制黑色素瘤MMP-2和MMP-9表达、激活的研究

目的 研究纤黏连蛋白重组多肽CH50对黑色素瘤B16细胞侵袭能力的影响,探讨CH50多肽抑制肿瘤生长、侵袭的机制。方法 体外培养小鼠黑色素瘤B16细胞、小鼠腿部皮下注射B16细胞建立肿瘤动物模型。采用明胶电泳法检测B16细胞和黑色素瘤组织中基质金属蛋白酶MMP-2和MMP-9的表达和激活;以CH50多肽体外处理B16细胞或体内表达CH50,观察CH50下调MMPs表达以及对肿瘤细胞侵袭能力的抑制作用。结果 B16细胞在体外培养条件下主要表达MMP-2,而在肿瘤微环境中则同时表达MMP-2和MMP-9。肿瘤组织中MMPs的表达明显高于体外培养B16细胞。CH50多肽对体外培养B16细胞的MMPs表达和激活无明显抑制作用,但处理后的B16细胞进入体内后表达MMPs的能力受到明显抑制。体内转染表达的CHSO多肽亦可明显抑制肿瘤表达MMPs、并抑制肿瘤侵袭能力。结论 纤黏连蛋白重组多肽CHSO可以抑制肿瘤微环境中基质金属蛋白酶MMP-2和MMP-9的表达和激活,从而抑制黑色素瘤生长及侵袭能力。     

MMP-26 在人正常胎盘滋养层细胞中的表达及激活素 A 对其表达的调节

胚胎植入和胎盘形成涉及细胞外基质的降解和重建,以及细胞的增殖、凋亡、迁移和分化,基质金属蛋白酶 (MMPs) 是参与这些事件的主要蛋白水解酶系统 . MMP-26 是近年来发现的 MMPs 家族的新成员,但其功能所知甚少 . 通过半定量 RT-PCR 、免疫组织化学、荧光免疫细胞化学等手段,发现人胎盘中 MMP-26 主要定位于绒毛滋养层细胞,在绒毛间质细胞中也有少量表达 . 妊娠早期,胎盘中 MMP-26 表达水平较高,至妊娠中期降至最低,但在足月胎盘中其表达又有显著提高,提示 MMP-26 可能参与妊娠早期滋养层细胞的侵润和分娩时的胎盘剥离 . 体外培养的妊娠早期人细胞滋养层细胞能产生一定水平的 MMP-26 ,而其表达受到激活素 A 的剂量依赖性刺激,表明滋养层细胞中存在 MMP-26 表达的自分泌 / 旁分泌调节 .     

基质金属蛋白酶-2、-9及其组织抑制因子（TIMPs）在动情周期大鼠子宫中的表达

基质金属蛋白酶（MMPs)家族的作用是降解所有细胞外基质,其活性受其特异性组织抑制因子（TIMPs)的抑制。细胞外基质成分的降解与重组在动物生殖生长过程中起重要作用,其变化可以通过MMPs和TIMPs两者表达水平的变化进行监测。大鼠虽然没有月经形成,但是在其子宫内膜也出现类似灵长类的生殖生物学变化。本文从MMPs和TIMPs两者的表达水平,对大鼠子宫内膜的这些变化进行了研究。于大鼠动情周期的不同时期,将算处死,取子宫制备酶粗提液和组织切片,采用酶谱法(zymography)和原位杂交方法研究动情周期大鼠子宫中MMP-2和-9的活性变化以反MMP-2、-9和TIMP-1、-2、-3mRNA的表达。并通过光密度扫描方法对酶谱结果进行半定量分析。所用杂交探针见Table 1．酶谱结果显示：在动情周期大鼠子宫中只检测到67kDa的MMP-2活性,而没有检测到MMP-9的活性(Fig.1)。MMP-2的活性在动情前期最高,动情期和动情后期次之,同情期最低(Flg．2)。原位杂交结果显示：MMP-2、-9、TIMP-1、-2、-3m RNA主要在子宫内膜基底部的基质细胞中表达。MMP-2和-9 mRNA在动情前期、动情期和动情后期子宫内膜基底部的基质细胞和动情期子宫环行肌层中表达均较强,在间情期表达较弱。MMP-9 mRNA在动情期腔上皮和腺上皮细胞中也有较弱的表达(Fig．3)。TIMP-1 mRNA在动情期和动情后期子宫内膜基底部的基质细胞中以及动情期腔上皮和腺上皮细胞中表选较强,在动情前期和间情期表达较弱(Fig．4)。TIMP-2 mRNA在动情期和间情期子宫内膜基底部的基质细胞中以度在动情期上皮细胞中表达较强,在动情前期和动情后期表逮较弱(Fig.4)。TINP-3 mRNA在动情期子宫内膜基底部的基质细胞中表达最强,在动情后期和间情期次之,动情前期表达最弱。TIMP-3 mRNA在动情期子宫环行肌层中也有较强的表达(Fig.5)。由此可见,MMP-2的活性和MMIP-2的基固表达基本一致,MMP-2和-9及其组织抑制因子TIMPs在时间和空间上的表达也基本一致。提示：MMP-2,-9及TIMP-1、-2、-3共同参与了动情周期大鼠子宫内膜的周期性变化。     

基质金属蛋白酶MMP-26能有效促进人绒毛膜上皮癌细胞JEG-3浸润能力

胚胎植入过程中,滋养层细胞浸润与肿瘤的迁移过程非常相似,但显著的区别在于前者是受严格调控的有节制的浸润,基质金属蛋白酶(MMPs)的许多成员在其中起重要的作用.MMP-26是近年来发现的MMPs家族的新成员,它在滋养层细胞中的作用所知甚少.利用国际常用的人滋养层细胞模型——人绒毛膜上皮癌细胞系(JEG-3)作为体外实验模型,探讨MMP-26在人滋养层细胞浸润调节中的作用.将含有MMP-26全长cDNA的pCR3.1质粒转染到JEG-3细胞中,获得过量表达MMP-26基因的稳定细胞系JEG-3/MMP-26;细胞浸润分析表明JEG/MMP-26细胞的浸润能力较母本细胞明显增强;RT-PCR和明胶酶谱分析显示JEG-3/MMP-26细胞中MMP-9的表达和分泌水平提高;双荧光免疫细胞化学进一步显示MMP-26和MMP-9蛋白在细胞中有共定位现象.上述结果表明MMP-26能有效促进人滋养层细胞浸润,其作用可能是通过与其他MMP分子(如MMP-9)的协调来实现的.     

MMP-2和MMP-9在骨骼肌组织中的研究进展

基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)是一类Zn2+、Ca2+依赖性蛋白水解酶,在动物组织中已分离鉴定出MMPs家族的28种亚型.国内外对明胶类酶MMP-2和MMP-9在动物正常生理条件下的骨骼肌生长发育、病理条件下的骨骼肌修复与再生等方面的研究较多,并且近年来明胶类酶MMPs在...     

白藜芦醇抑制上皮肿瘤细胞侵袭和迁移的机制

白藜芦醇是一种多酚类的植物抗毒素,具有多种生物学活性,其中,抗肿瘤作用受到人们越来越多的关注。大量实验表明,白藜芦醇具有靶向抑制癌细胞侵袭和迁移的能力。EMT过程使上皮细胞获得间充质表型,从而促进癌细胞的侵袭和迁移。Micro RNAs可靶向EMT的转录因子以及上皮和间充质标志物来调节EMT过程。MMP-2和MMP-9是细胞外基质的两个重要成分,均参与肿瘤细胞的转移。白藜芦醇通过影响EMT过程、调控micro RNAs家族的表达以及抑制MMPs的蛋白表达和酶活性来影响上皮肿瘤细胞的侵袭和迁移。现对白藜芦醇抑制上皮肿瘤细胞侵袭、迁移的机制进行综述。     

血小板、基质金属蛋白酶与肿瘤转移

血小板除参与正常的止血过程外还具有很多病理和生理作用。血小板活化后可以分泌基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases,MMPs）。MMPs属于Zn^2＋和Ca^2＋依赖的内肽酶家族,能特异性与细胞外基质成分相结合并降解细胞外基质。MMPs降解基底膜中的主要成分Ⅳ型胶原,是肿瘤转移发生必不可少的关键步骤。血小板能够与肿瘤细胞结合并促进肿瘤转移,而MMPs在血小板促进肿瘤转移过程中发挥了重要的作用。     

基质金属蛋白酶和组织金属蛋白酶抑制剂在肾细胞癌组织中的表达

目的:基质金属蛋白酶及组织金属蛋白酶抑制剂在肾细胞癌转移中占有重要的作用,研究肾细胞癌组织中MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2的表达情况,为肾癌转移的治疗提供理论依据。方法:选取36例肾细胞癌肾组织标本,从相同的肾细胞癌组织及癌旁肾组织获得对照样本,均进行根治性肾切除手术切除。肿瘤分期按TNM分期标准。为了统计评估,肿瘤1期和2期为低级,3期以上为高级。RT-PCR检测肿瘤和正常组织中的MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2的表达。结果:不同样本MMPs和TIMPs表达水平各不相同。肾细胞癌组织中MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2在肾细胞癌中的表达明显高于正常肾组织(P0.05)。在肾细胞癌的肿瘤分期方面,MMP-2与MMP-9和肿瘤的分期显著相关,随着肿瘤分期的增加,MMP-2与MMP-9的表达明显升高(P0.05),而TIMP-1与TIMP-2与肿瘤的分期无关。结论:肾细胞癌组织中TIMP-2、MMP-2,MMP-9,TIMP-1的mRNA表达显著高于正常肾组织,抑制MMPS的表达将成为治疗肾细胞癌转移的新的方向。     

缺氧对肺动脉内皮细胞MMP-2、MMP-9表达的影响

目的观察缺氧对培养的猪肺动脉内皮细胞基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达的影响.方法采用RT-PCR、Western blot、底物胶电泳(酶谱图)、免疫细胞化学等方法.结果肺动脉内皮细胞缺氧24h可使MMP-2的mRNA表达和蛋白分泌减少,酶活性减弱,与常氧组比较有显著性差异, MMP-9无明显变化.结论缺氧时MMP-2降低,溶解细胞外基质的能力降低,可能是缺氧性肺血管构型重组的机制之一.     

基质金属蛋白酶9与缺血性脑卒中的研究进展

基质金属蛋白酶9(MMP-9)是一种具有降解功能的锌依赖性内肽酶,在神经系统生理发育及病理损伤过程中起重要作用。在缺血性脑卒中过程中,MMP-9通过破坏血脑屏障、促进炎性细胞浸润及炎性因子释放、诱发神经细胞死亡、介导出血转化等诸多机制参与脑组织损伤。本文对MMP-9在缺血性脑卒中的损伤及修复中的作用机制进行综述,以期为缺血性脑卒中提供新的诊疗靶点。     

基质金属蛋白酶与体外循环肺损伤研究进展

肺泡 毛细血管基底膜损伤是体外循环 (CPB)术后肺损伤发生和发展的主要病理过程 ,基质金属蛋白酶 (MMPs)可能通过降解细胞外基质、调节细胞因子而参与CPB所致肺损伤的发生 ,研究MMPs在CPB肺损伤中的作用机制 ,对于防治CPB术后肺损伤的发生和发展具有重要意义     

基质金属蛋白酶-2、-9及其组织抑制剂-1在大鼠肺组织中的增龄变化

目的研究基质金属蛋白酶（MMPs）-2、-9及组织型基质金属蛋白酶抑制剂（TIMPs）-1在大鼠肺组织中的增龄性变化规律。方法不同月龄（1月龄、3月龄、12月龄、18月龄、24月龄）雄性清洁级（SD）大鼠47只分为5组,按月龄取实验大鼠的右下叶肺组织,用流式细胞术检测MMP-2、MMP-9及TIMP-1的表达水平,进行定量分析。结果 MMP-2、MMP-9和TIMP-1均随着月龄的增长呈先降后升波谷型曲线变化;3月龄、12月龄和18月龄MMP-2、MMP-9和TIMP-1均较1月龄明显下降,且以12月龄为最低值;24月龄MMP-2、MMP-9和TIMP-1均较1月龄上升。MMP-2/TIMP-1比值和MMP-9/TIMP-1比值均随着月龄的增长呈先升后降波峰型曲线变化;12月龄和18月龄均较1月龄明显升高,且以18月龄为最高点;3月龄的MMP-2/TIMP-1较1月龄有所上升,3月龄的MMP-9/TIMP-1与1月龄持平;24月龄的MMP-2/TIMP-1和MMP-9/TIMP-1较1月龄也有不同程度上升。结论大鼠肺组织中MMPs及其抑制剂TIMPs随月龄的增长,呈特征性变化规律。     

MMP-2及MMP-9与主动脉疾病相关性的研究进展

基质金属蛋白酶是一类可降解细胞外基质的蛋白酶,基质金属蛋白酶-2和-9为明胶酶,可降解细胞外基质中的胶原蛋白及弹性蛋白,其动态平衡对维持细胞外基质的稳定具有重要意义。主动脉的细胞外基质是主动脉中层重要的组成部分,细胞外基质成分的改变可导致主动脉中层结构的损伤,在主动脉疾病的发生、发展过程中起着重要作用。主动脉基质金属蛋白酶-2和-9的表达失衡可引起主动脉中层细胞外基质的降解,导致主动脉中层结构的损伤,从而促进主动脉疾病的发生。同时,主动脉疾病也可导致血浆中MMP-2、MMP-9浓度的升高。本文对近年来基质金属蛋白酶与主动脉疾病相关性的研究及进展作一综述,为心血管疾病发生机制的研究和治疗提供文献依据。     

67ku层黏连蛋白受体促进肝癌细胞MMP-2和MMP-9的表达

目的 研究分析67ku层黏连蛋白受体（laminin receptor,67LR）与肝癌细胞基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases,MMPs）及其组织抑制因子（tissue inhibitor of metalloproteinases,TIMPs）表达的关系,探讨67LR促进肝癌细胞体外侵袭能力的分子机制.方法 以67LR转染HepG2的稳定细胞株及其对照细胞为材料,采用半定量RT-PCR分析目前已知的23种MMPs和4种TIMPs的表达及变化情况,对表达有变化的基因采用荧光定量PCR进行验证,采用明胶酶谱分析MMP活性的变化。结果 半定量RT-PCR和荧光定量PCR发现,67LR高表达的LR4细胞,其MMP2,9的表达比67LR低表达的LR6及对照组pcDNA-1细胞明显升高,明胶酶谱分析也揭示,LR4细胞分泌的MMP-2和MMP-9的活性明显上升。结论 67LR可以促进肝癌细胞MMP-2和MMP-9的表达和分泌,从而促进肝癌细胞体外侵袭能力。     

MMP-13在皮肤相关疾病中的研究进展

基质金属蛋白酶(MMPs)是依赖锌的蛋白水解金属酶。MMP-13隶属于胶原酶亚群,在细胞外基质循环、癌细胞迁移、细胞生长、炎症、血管生成等方面发挥重要作用,它能降解胶原、明胶和聚集蛋白聚糖。在光老化中MMP-13的表达可受MAPK、NF-κB及TGF-β等多条信号通路影响。在癌症细胞中MMP-13能通过细胞外基质降解,导致肿瘤细胞的侵袭和转移,也可能直接调节多条控制组织稳态的信号通路。该文就MMP-13在皮肤相关疾病中的研究进行综述。     

可溶性endoglin减弱人早孕细胞滋养细胞的浸润功能

本研究旨在探讨可溶性endoglin(soluble endoglin,sEng)对人早孕细胞滋养细胞活力和浸润功能的影响。采用胰蛋白酶-DNase消化法培养人早孕期(孕6～8周)细胞滋养细胞,传代后待细胞长满至70%～80%,分别加入没有添加(对照组)和添加sEng(10μg/L)的细胞培养液培养24h;Transwell技术检测细胞滋养细胞的浸润功能;RT-PCR法检测细胞滋养细胞基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)mRNA的表达;Western blot方法分别检测细胞滋养细胞MMP-2、MMP-9蛋白的表达。结果显示,sEng组细胞滋养细胞浸润能力低于对照组。与对照组比较,sEng组细胞滋养细胞MMP-2和MMP-9 mRNA及蛋白的表达明显下降(P<0.05)。以上结果提示,sEng可能通过调节人早孕细胞滋养细胞中MMP-2、MMP-9的表达而影响细胞的浸润能力,从而参与子痫前期的发生。     

恒河猴胚胎浅表型植入机理的探讨

为揭示恒河猴胚胎浅表型植入的分子机理,实验采用免疫组化和原位杂交的方法研究了粘附侵润相关分子在妊娠恒河猴母胎界面的表达模式,发现层粘连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(ColⅣ)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在滋养层细胞柱的远端开始表达;整合素α1β1从柱的近端到远端表达逐渐升高,但在滋养层细胞鞘中上述分子的表达均降低;大量侵润母体血管的滋养层细胞高水平表达上述分子。此外,植入早期上皮斑和蜕膜基质细胞高表达MMPs组织抑制因子-2(TIMP-2)。结果提示,滋养层细胞鞘中α1β1、LN、MMP-2表达水平的降低及上皮斑、蜕膜和滋养层细胞中TIMP-2的高表达可能是导致浅表型植入形成的分子基础。     

微波消融对骨肉瘤肺转移的影响

目的:探讨微波消融治疗骨肉瘤对其肺转移的影响及可能机制。方法:用含有1×10~7个大鼠源骨肉瘤UMR106细胞的悬液于SD大鼠右下肢皮下注射建立骨肉瘤移植模型,将其随机分为对照组和消融组。消融组大鼠肿瘤予以微波消融治疗10 min,50℃,空白对照组大鼠模拟消融10 min,0℃,检测和比较两组大鼠肿瘤直径变化,于治疗15天后处死大鼠,取大鼠肿瘤及肺组织,通过HE染色以及免疫组化检测基质金属蛋白酶(Matrix metalloproteinase,MMPs)及其拮抗因子(Tissue inhibitors metalloproteinase),即MMP-2、MMP-9及TIMP-2的表达。结果:消融组大鼠肿瘤直径明显小于对照组大鼠肿瘤直径,消融组大鼠肿瘤组织及肺组织MMP-2及MMP-9的阳性表达均显著高于对照组(P0.05),而TIPM-2的阳性表达则明显低于对照组(P0.05)。结论:微波消融技术治疗骨肉瘤可以抑制骨肉瘤细胞的增殖,甚至引起细胞凋亡,并且通过上调MMP-2、MMP-9以及下调TIMP-2的表达,可能会提高其远处转移发生的风险。