不同品种芹菜叶中精油的提取及其功效测定

以杭州本地旱芹的两种品种的芹菜叶为原料提取芹菜叶精油,并设计正交试验确定提取芹菜叶精油的最佳条件,测定精油的抗菌作用及抗氧化作用。采用水蒸气蒸馏法提取芹菜叶精油,最佳提取条件采用正交试验的方法进行考察;采用平板法及抑菌圈法测定精油的抗菌作用;采用DPPH清除自由基法、铁离子还原法测定精油的抗氧化作用。实验结果显示最佳提取条件为:料液比1∶8 g/m L,浸泡时间0.5 h,蒸馏时间3 h,在最佳提取条件下,两种芹菜叶精油有着相近的提取率;体外抑菌试验表明,芹菜叶精油对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌具有明显的抑制作用,而对大肠杆菌无明显的抑菌作用;芹菜叶精油具有较低的抗氧化作用,其作用低于抗坏血酸和二丁基羟基甲苯(BHT)。     

家蚕信使核糖核酸的分离及体外活性测定

总RNA的制备主要参考Schutz等(1972)的方法,加以修改。除注明外,实验操作控制在4℃以下。以家蚕幼虫的整体 (除去消化道) 为材料,按1:8(W/V)加入pH8.3缓冲液(0.01M Tris,0.075M NaCl,0.005M EDTA,0.5％SDS),置组织捣碎机中迅速匀浆一分钟。加入4倍组织体积(W/V)90％酚液(9份体积重蒸酚溶     

红花的花蕾培养和殖株再生

植物名称:菊科红花(Carthamus tinctorius)。材料类别:幼嫩花瓣。取刚刚鼓起的红花花蕾,剥去外层苞叶,用蒸馏水洗两次,然后浸入70％酒精中表面消毒40秒钟,再用0.1％升汞液消毒10分种,无菌水冲洗3次,用滤纸吸干,在无菌条件下取出幼嫩花瓣为外植体。培养条件:(1)L/2 MS大量元素+微量元素+维生素。除维生素B_1 0.1mg/L外,其他成分和用     

MTT法评价医用骨科材料的细胞毒性

目的:评价三种常用医用骨科材料的细胞毒性。方法:通过制备表面阳极氧化钛合金(Ti-6Al-4V)材料、聚醚醚酮(PEEK)材料和β-磷酸三钙(β-TCP)材料的浸提液与L929细胞接触,进行MTT试验。结果:所有样品浸提液的细胞相对增殖率(RGR)均≥80%,细胞毒性反应分级为0至1级。结论:这三类材料的0.2g/ml浸提液均显示无明显的细胞毒性。     

抱茎蓼挥发油成分及其抗菌活性的研究

水蒸气蒸馏法从抱茎蓼全草中提取挥发油,用气相色谱-质谱联用技术对其挥发油组分进行分离和鉴定,运用气相色谱面积归一化法确定各组分的相对含量,并利用正构烷烃系列物质对各组分进行定性确定,从抱茎蓼全草的挥发油中检出41个组分,占全油的99.21%,鉴定出38个组分,其主要组分是石竹烯(16.98%)、3-己烯-1-醇(14.69%)、3-辛烯-3醇(8.89%)、a-里哪醇(7.13%)、β-环柠檬醛(6.36%)等。对抱茎蓼全草的挥发油做了抗菌试验,其挥发油对大肠埃希菌(ATCC25922株)、肠炎沙门菌(50040株)、金黄色葡萄球菌(ATCC25925株)有显著地抑制和灭活作用。     

秦岭毛茛属植物(毛茛科)的分类学研究

记载了产于秦岭的毛茛属植物共11种,4变种,其中含秦岭分布新记录4种、3变种,它们是:美丽毛茛、丽江毛茛(变种)、毛果毛茛(变种)、丝叶毛茛(变种)、褐鞘毛茛、愚毛茛、匍枝毛茛;另外,收录了《秦岭植物志》遗漏的另外2种,即太白山毛茛和细长喙毛茛。经研究认为,《秦岭植物志》原记载的小毛茛Ranunculus ternatusThunb.在秦岭无分布。给出了秦岭毛茛属植物分种(变种)检索表;对每一种及种下等级的产地及分布进行了详细的论述。     

6种毛茛属植物的等位酶变异和亲缘关系分析

用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳检测了6种毛良属(Ranunculus Linn．)植物4个酶系统的等位酶谱带变异式样,并将酶谱带的二忿数据进行相关分析和聚类分析,结果表明：有93．94％的等位酶谱带在6个种之间显示出或多或少的变异,只有6．06％的等位酶谱带在6个种中保持恒定。相关分析和聚类分析显示,同种内个体间表现出较大的遗传同质性;而不同种的个体则表现出明显的趋异性。表明6种植物之间遗传分化较明显．并按聚类结果将6个种划分为两个类群．水城毛茛和毛茛为一个类群;扬子毛茛、褐鞘毛茛、钩柱毛茛和棱喙毛茛为一个类群。其中,扬子毛茛和棱喙毛良之间的亲缘关系最近。毛茛和褐鞘毛茛之间的亲缘关系最远。     

瓜果腐霉菌丝中除草活性物质的初步研究

将瓜果腐霉进行液体发酵,其菌丝用等体积乙酸乙酯和甲醇进行依次萃取,甲醇萃取液旋转蒸发去溶剂后进行硅胶柱层析,以乙酸乙酯和石油醚(V/V=3:1和V/V=2:1)的混合液进行梯度洗脱,每50 mL收集为一个馏分,共收集到40个馏分。生物测定结果表明,以乙酸乙酯和石油醚(V/V=2:1)洗脱得到的馏分21 24对供试杂草马唐表现出了较强的活性,其对马唐的生长抑制作用均为4级。合并馏分21 24,以乙酸乙酯和石油醚(V/V=2:1)的混合液为展开剂进行等度洗脱,每50 mL收集为一个馏分,共收集到20个馏分。生物测定结果表明,馏分3对马唐有较强的抑制活性。HPLC分析发现,该馏分主要含有3个组分,其保留时间分别为12.7、14.0和30.5 min。     

凤丹牡丹花朵不同发育时期挥发性成分积累规律与蒸馏工艺研究

以凤丹牡丹(Paeonia ostii)花瓣为试材,采用三因素三水平正交试验设计,结合气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术,探讨其花发育时期[大风铃期(S1)、圆桃期(S2)和破绽期(S3)]、料液比 (1:1、1:2和1:3)和蒸馏时间(1 h、2 h和3 h)对蒸馏提取牡丹花露的工艺及其挥发性成分积累规律的影响。结果表明,不同发育时期和不同蒸馏工艺获得的牡丹花露中挥发性成分含量和种类有明显差别,9种处理获得的花露中共检测到145种挥发性成分,包括醇类、萜烯类、醛类、酯类、烷烃及其他物质,其中S1期最多为96种,占比最大的是其他物质;S2和S3期占比最大的是烷烃类。从蒸馏工艺来看,同一发育时期花瓣采用不同料液比和蒸馏时间提取,其挥发性成分种类及含量有差异,S1、S2和S3期花瓣选择料液比分别为1:1、1:3和1:2,蒸馏1 h为最佳蒸馏工艺。     

无患子及其制剂的薄层色谱鉴别探讨

目的探讨无患子及其制剂的鉴别方法。方法采用薄层色谱法在不同条件下进行薄层色谱考察,选择适宜的薄层色谱条件。结果最佳薄层色谱条件为:以正丁醇-乙酸乙酯-水-浓氨水(40∶10∶50∶1;V∶V∶V∶V)上层液为展开剂,室内环境中展开,晾干,喷5%磷钼酸乙醇液,105℃加热至斑点清晰,在日光下检视,无患子及其在制剂中的成分分离效果良好,色谱斑点清晰,耐用性好。结论该法操作简便可靠,分离度较好,可作为无患子及其制剂的鉴别方法。     

水蒸气蒸馏法提取大蒜挥发油的工艺研究

以挥发油提取率为指标,通过单因素和L9(34)正交试验设计确定了水蒸气蒸馏法提取大蒜挥发油的最佳提取工艺及条件。结果表明,各因素作用主次顺序为蒸馏时间(D)>料液比(C)>发酵温度(A)>浸泡时间(B),各因子的最优组合为A2B2C2D3,即以1∶3.5的料液比(m∶V),在35℃时浸泡3h后蒸馏2h为大蒜挥发油的最佳提取工艺,此时挥发油的提取率达到0.32%,证明此方法是大蒜挥发油提取的可靠、易行的科学方法。     

浮毛茛的组织培养与植株再生

1植物名称浮毛茛(Ranunculus natans C.A.Mey.),又称水毛。2材料类别基生茎。3培养条件愈伤组织诱导培养基:(1)MS 6-BA 1mg·L~(-1)(单位下同);(2)MS 6-BA 1 IBA 0.6:(3)MS 6-BA 1 IAA 0.6:(4)MS 6-BA 1 2,4-D 0.6;(5)MS 6-BA 1 NAA 0.6。愈伤组织分化培养基:(6)1/2MS 6-BA 0.2 NAA 0.1;(7)1/2MS 6-     

大葱挥发油的提取工艺、GC-MS分析及抗菌活性研究

为优化大葱挥发油提取工艺并建立气相-质谱联用法(GC-MS)分析大葱挥发油成分,并研究大葱挥发油的抗菌活性。本研究通过单因素实验和正交实验对超声时间,料液比和提取时间的考察,采用超声辅助水蒸气蒸馏的方法提取大葱挥发油,优化出大葱挥发油提取最佳工艺为超声40 min,料液比1∶3,蒸馏时间3 h。大葱挥发油实际提取率为0. 042 96%。运用GC-MS对其主要化学成分进行鉴定,通过NIST质谱库检索,鉴定了其中42个主要化合物,运用峰面积归一法确定各个组分的含量,其中主要物质为含硫化合物,含量较多的是氟胞嘧啶、烯丙基异丙基硫醚、丙烯基甲基硫醚,二甲基三硫化物、二丙基三硫化物、四硫化物、噻吩、噻烷和噻唑类。抗菌实验表明大葱挥发油对所选取得8种菌株均有很好的活性。本实验提取工艺优化后使提取率增加,抗菌实验表明大葱的挥发油具有抗菌作用,而成分分析鉴定出大量硫化物,可能为抑菌有效成分。     

36种中药材体外抗菌活性筛选研究

该文研究36种常用中药材80%乙醇提取物在体外抗临床常见致病菌的抗菌活性。采用药敏纸片法测耐药菌的耐药谱,中药粗粉用80%乙醇浸泡提取,提取液减压浓缩得浸膏,通过琼脂打孔法测定提取物抑菌圈,再通过微量倍比稀释法测定最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。结果表明:36种中药材醇提物中,有15种具有广谱抗菌活性,对实验中各标准菌表现出不同程度的抑制作用,对MRSA抗菌活性也较强。其中,岩陀、卷柏、首乌藤、苏木、乌药、夏枯草6种药材的抗菌活性比较突出,抑菌圈均大于11 mm,细菌对其表现为中高度敏感;它们对7株标准菌的MIC/MBC值除个别为12.5 mg·m L~(-1)以外,均小于1.563 mg·m L~(-1),对16株MRSA的MIC/MBC值均小于1.563 mg·m L~(-1),它们的萃取层活性均小于1 mg·m L~(-1)。所筛选出的15种抗菌活性较强的中药材,可为后续研究其活性单体化合物和作用机制,研发有效的抗多重耐药菌的中药制剂以及解决细菌耐药性问题提供一定的参考。     

蒸馏-电感耦合等离子体发射光谱法测定葡萄酒中的SO

建立一种自动蒸馏结合电感耦合等离子体发射光谱(ICP-OES)法快速测定葡萄酒中SO2的分析方法。在酸性条件下,先用FOSS Kjeltec8100自动蒸馏仪将葡萄酒样品中的SO2蒸出,然后馏出液用6%(质量分数)过氧化氢(H2O2)溶液吸收,最后采用电感耦合等离子体发射光谱在181. 972 nm波长条件下测定吸收液中的总硫含量,从而计算出葡萄酒中的SO2含量。葡萄酒中SO2在0～0. 032 g/L的范围内具有较好的线性关系,相关系数为0. 999 94。当取样体积为5. 00 m L时,方法检出限为0. 001 1 g/L,定量限为0. 003 5 g/L,加标回收率为76. 0%～95. 3%,相对标准偏差(RSD)9. 8%。该方法具有快速、稳定、高效的优点,可用于葡萄酒中SO2的快速测定。     

贯叶连翘挥发性化学成分研究

采用水蒸气蒸馏法提取中草药贯叶连翘(全草)挥发油。通过气相色谱/质谱联用技术测定了挥发油的化学成分,从中鉴定出75种化合物,其中百里香酚、桉油精、丁香油酚等酚类物质为首次检出。结果表明,贯叶连翘因产地不同、部位不同,其挥发油的成分有较大的差别。     

槟榔胚培养

1植物名称槟榔(Areca catechu L.)。2材料类别幼胚。3培养条件(1)启动培养基:MS 5%(V/V)椰子水 40g·L-1蔗糖 1g·L-1活性碳 0.55%琼脂;(2)生长培养基:MS BA1mg·L-1(单位下同) NAA0.5 5%(V/V)椰子水 4     

对牛,羊,人包虫囊液成份及抗原性的研究

诊断人、畜包虫病的免疫学方法主要以包虫囊液作抗原,但存在一定的非特异反应。研究包虫囊液生化成份及抗原性,有助于选择适宜的包虫囊液供作免疫实验,以及纯化包虫囊液粗抗原,可提高免疫诊断方法的特异性。本文收集牛、羊、人包虫囊液对抗原的生化成分及免疫性进行了研究。现报道如下:材料与方法一、包虫囊液:将收集的包虫囊液经3000rpm离心30分钟,取上清液存于-20℃备用。二、抗血清:将囊液离心收集原头节,制成匀浆。浸提后10000rpm离心30分钟,上清液蛋白含量为2.8mg/ml(Lowry法)。多点注射免疫家兔。抗血清阳性滴度ELISA为1/12800,对…     

莱氏野村菌产几丁质酶条件及酶学性质研究

对莱氏野村菌(Nomuraea rileyi)菌株CQ031021产几丁质酶条件及酶学性质进行了研究。结果表明:该菌株最适产酶碳源为2.0%(W/V)葡萄糖,氮源为1.2%(W/V)复合氮源(蛋白胨、牛肉膏按1∶1的比例),接种量为孢悬液2mL(1×107个/mL),培养温度28℃,培养液初始pH6.0,培养时间6d;一定浓度的吐温-80对几丁质酶活性有促进作用,而SDS有抑制作用;粗酶液最适反应温度50℃,最适pH6.0,在40℃以下及pH5.5～6.5范围内酶活力较稳定。     

弓形虫MIC6突变体的构建及其特性分析

目的:体外构建弓形虫微线体蛋白6(MIC6)突变体并分析其特性。方法:利用基因定点突变的方法,将MIC6蛋白羧基端(MIC6C)的348位色氨酸的碱基突变为缬氨酸的碱基,PCR扩增MIC6C W/V突变体基因片段;构建MIC6C W/V/pGEX-4T-1重组原核表达系统,IPTG诱导表达GST-MIC6C W/V突变体蛋白。以该蛋白为探针蛋白与弓形虫裂解液进行GST沉降实验,SDS-PAGE及Western blot分析。结果:获得了MIC6C W/V突变体基因片段,制备了GST-MIC6C W/V突变体蛋白;MIC6C W/V突变体蛋白的沉降产物中未见蛋白条带,而MIC6C蛋白(未突变蛋白)的产物中有一蛋白条带,且能被抗醛缩酶抗体识别。结论:在体外获得了MIC6突变体;MIC6突变体失去了与醛缩酶作用的特性。