烟曲霉抗原Asp f16HLA-A*0201限制性的CD8+CTL抗原表位生物信息学预测与实验室鉴定

目的 预测与鉴定烟曲霉抗原Asp f16的HLA-A *0201限制性CD8+细胞毒性T细胞(CTL)抗原表位.方法 以国人常见的HLA-A*0201位点为靶点,依据生物信息学软件扫描烟曲霉特异性抗原Asp f16的全部427个氨基酸序列.使用HLA-A *0201转基因小鼠制备骨髓来源的树突状细胞(DC)和CTL.流式细胞仪技术检测DC表面MHC Ⅱ类抗原,CD80,CD86和CD11c的表达来验证其是否成熟.ELISPOT试验检测烟曲霉抗原多肽特异性CTL产生的细胞因子IFN-γ.四聚体(Tetramer)试验证实烟曲霉特异性CTL与抗原肽,HLA-A*0201分子复合体的亲和性.结果 根据与MHC I类分子结合的半衰期评分,选择了3个HLA-A*0201限制性抗原表位.流式细胞仪分析示成熟DC高表达HLA Ⅱ类抗原,CD80,CD86和CD11c.Tetramer试验证实烟曲霉特异性T细胞受体与抗原肽,HLA-A*0201分子复合体的高亲和性.ELISPOT实验结果 表明烟曲霉抗原肽体外可以活化CD8+CTL,被负载了抗原肽的DC刺激活化后可以产生IFN-γ.结论 本研究成功鉴定烟曲霉抗原Asp f16的HLA-A*0201限制性CD8+CTL表位,可作为疫苗设计的候选表位,为进一步研发新型抗烟曲霉疫苗提供参考.     

中国新疆维族人群HLA-B等位基因与HIV-1感染易感性或抗性

通过对中国维吾尔族人群HLA-B等位基因的分布频率的研究,探讨HLA-B等位基因与HIV感染的易感/或抵抗性的相关性.本研究用PCR-SSP的方法对新疆维吾尔族110例无相关的健康对照者(HIV阴性)和128例HIV阳性感染者进行HLA-B等位基因分型.用POPGEN软件对健康对照者人群进行Hardy-Weinberg平衡检测,用卡方检验分析HLA-B等位基因在健康对照者和HIV阳性感染者频率分布的差异.在HIV-1阳性感染者中,B*4901等位基因频率显著性增加(B*4901P=0.02,OR=3.06,95%CI=1.16～8.10).而在健康对照者中,B*40等位基因频率增加具有统计意义(B*40P=0.02,OR=0.39,95%CI=0.07～0.92).由此可见,B*4901等位基因可能与HIV-1感染的易感性有关,而B*40等位基因可能与与HIV-1感染的抵抗性有关.     

中国新疆维族人群HLA-B等位基因与HIV-1感染易感性或抗性

通过对中国维吾尔族人群HLA-B等位基因的分布频率的研究,探讨HLA-B等位基因与HIV感染的易感 或抵抗性的相关性。本研究用PCR-SSP的方法对新疆维吾尔族110例无相关的健康对照者(HIV阴性)和128例 HIV阳性感染者进行HLA-B等位基因分型。用POPGEN软件对健康对照者人群进行Hardy-Weinberg平衡检 测,用卡方检验分析HLA-B等位基因在健康对照者和HIV阳性感染者频率分布的差异。在HIV-1阳性感染者 中,B*4901等位基因频率显著性增加(B*4901:P=0．02．OR=3．06,95%CI=1．16～8．10)。而在健埭对照者 中,B*40等位基因顿率增加具有统计意义(B*40:P=0．02．OR=0．39．95％CI=0．07～0．92)。由此可见,B* 4901等位基因可能与HIV-1感染的易感性有关,而B*40等位基因可能与与HIV-1感染的抵抗性有关。     

人类免疫缺陷病毒入侵的新受体-- CD8分子

已知人类免疫缺陷病毒(HIV)感染通过包膜糖蛋白gp120与CD4分子结合,以及在细胞因子CDCR4和CCR5受体协同作用下完成吸附和穿入.本文报道从2例艾滋病病人体内分离到HIV-1变异株:AD3.v22和AD3.v6,可通过CD8受体侵犯CD8+细胞.     

血管内皮细胞通过诱导ERG表达促进前列腺癌耐药

目的:探讨血管内皮细胞对前列腺癌细胞耐药能力的影响,并进一步研究血管内皮细胞作用于前列腺癌细胞的可能的分子机制。方法:1.利用Transwell小室构建共培养体系,通过CCK-8和Annexin V-FITC/PI检测细胞耐药的能力并通过蛋白印迹法(WB)检测凋亡相关分子的表达;2.利用聚合酶链式反应(PCR)及WB检测共培养后前列腺癌细胞中成红细胞病毒E26致癌物(ERG)的表达情况;利用酶联免疫吸附实验(ELISA)筛选出共培养组与非共培养组细胞上清之间有差异的细胞因子,并通过WB检测各个细胞因子与ERG的关系,确定影响ERG表达最明显的细胞因子。结果:1.前列腺癌细胞与血管内皮细胞共培养后,前列腺癌细胞对多西他赛的耐药性增加,细胞凋亡减少;2.共培养后前列腺癌细胞ERG的表达增高;血管内皮细胞分泌的成纤维细胞生长因子2(FGF2)在共培养后有明显增加,FGF2可以促进前列腺癌ERG的表达,并且这种病效应会被FGF2的抑制剂所逆转。结论:血管内皮细胞分泌的FGF2可促进前列腺癌细胞ERG的表达,促进前列腺癌细胞对多西他赛的耐药性。     

用组合肽库技术分析HLA-B27的抗原提呈模式

HLA分子抗原表位提呈模式的分析,在自身免疫病和肿瘤的病因与治疗研究方面有重要意义。本研究采用组合肽库的策略合成19组ORX7型肽亚库,通过与荧光素标记肽的竞争结合试验,分析了与强直性脊柱炎有强相关的HLA-B27分子的抗原提呈模式。结果显示HLA-B27与P1为不同氨基酸残基的19种肽亚库有相近的结合率,提示P1为非锚定残基;中国人群最常见的二种HLA-B27亚型B*2704和B*2705,在提呈肽表位的P1模式方面存在一些小差异,P1为D或E的肽亚库与HLA-B*2704的结合能力要强一些,而P1为K的肽亚库则与HLA-B*2705的结合能力强一些。本研究为HLA-B27与强直性脊柱炎关联机制的研究提供了线索,为开展HLA分子的抗原提呈模式分析打下了基础。     

实验室HIV-I病毒株比从患者身上分离的病毒株具有更强的CD4亲和力

以CD4为基础制成的艾滋病治疗药物有可能遇到麻烦.几项研究表明,CD4与HIV-Ⅰ之间在体外的亲合性比体内强,从而令人怀疑CD4药物是否有效,并使人得出这样的结论:CD4分子也许只不过是HIV病毒进入细胞的几种途径之一. 据加州大学医学院(洛杉矶,加利福尼亚)的DavidHo报道,初期临床研究表明HIV浓度并不随Biogen的可溶性CD4浓度增高而下降,之后,又进行了一些研究.这些补充实验表明,Biogen的可溶性CD4产品、其它可溶性CD4产品以及CD4-免疫球蛋白     

细胞因子和天然杀伤(NK)细胞

随着 NK 细胞的发现。NK 细胞克隆的建立以及细胞因子(cytokines)中有些活性分子的高度纯化和分子克隆,为细胞因子和 NK 细胞相互关系的研究提供了不少新的认识。本文将对上述研究的一些新进展作概要综述。一、一般概念1.细胞因子:1966年,一些科学工作者发现,淋巴细胞体外激活后释放了非免疫球蛋白的糖蛋白分子能够抑制巨噬细胞的迁移,从而引起了研究淋巴细胞来源的活性因子的兴     

HIV—1结构基因与白细胞介素基因在重组痘苗病毒中的共表达研究

Env糖蛋白是决定HIV病毒粒子感染、穿入、融合及抗原性的主要结构蛋白,并且可诱导机体产生体液免疫和细胞免疫。Gag蛋白是HIV主要结构蛋白之一,氨基酸序列较为保守,抗源决定簇较少变异,也能够诱导机体产生体液免疫和细胞免疫。利用O把蛋白研制巨分子颗粒化疫苗,可能克服env不有效抵抗异源变异毒株攻击的缺陷,这是近年来HIV疫苗研制新热点。在艾滋病的研究中,已成功地利用痘菌病毒表达了HIV－IGag、Env等蛋白。随着生物技术的发展,人们设想把细胞因子基因与某些外派目的基因在细胞中进行共表达,来增强免疫反应,现已证明多…     

阻断艾滋病病毒通道

众所周知:CD4分子是HIV细胞受体;可溶性重组CD4(sCD4)能体外消除HIV对靶细胞的感染作用,体内也可能有此作用.但是CD4在HIV外壳蛋白运送中的作用一直未被重视,也未研究可能存在的有效治疗方法.目前耶鲁大学医学院的Linda Buoncore和John Rose正集中研究CD4在HIV外壳蛋白运送中的作用,方法是寻找抑     

经随机肽文库鉴别的唯一组织标记

LàJolla肿瘤研究中心Burnham.研究所的研究人员用简单的实验证实:指示哺乳类不同器官血管的“定位”分子的作用比我们已知的要广泛得多。他们的研究还发现,利用这些分子可对基因治疗所需的各种化疗药物进行组织专一性定靶。     

IL-27增强TNF-α介导上调的炎症因子的表达

目的:动脉粥样硬化是慢性炎症疾病,免疫细胞及炎症因子在其发病过程中起重要调节作用。本研究在于探讨IL-27对血管内皮细胞的直接作用。方法:采用ELISA方法,研究IL-27和TNF-α对人冠状动脉内皮细胞产生炎症相关细胞因子和趋化因子的作用。结果:IL-27显著增强TNF-α介导上调的炎症相关细胞因子IL-6和趋化因子CCL5的表达。IL-6和CCL5的表达受特异性信号分子抑制剂显著抑制。结论:人冠状动脉内皮细胞诱导释放IL-6和CCL5可能受JNK,p38MAPK和NF-κB通路差异调控。这些结果为阐明IL-27与TNF-α在动脉粥样硬化血管炎症发生中的作用提供重要生物化学基础。     

核酶与AIDS治疗

 艾滋病(AIDS)是由人免疫缺陷病毒(HIV)感染并破坏人体免疫功能所导致的一种综合症. 作为具有核酸内切酶活性的RNA小分子,核酶能特异性结合及切割HIV病毒靶分子,并促进靶分子mRNA的裂解,且能相继与多个靶分子RNA作用,同时又不影响宿主细胞RNA. 利用核酶治疗艾滋病不仅没有化疗药物常见的副作用,而且由于核酶本身具有RNA剪切酶活性,可同时剪切HIV mRNA和HIV生命过程中重要的调节蛋白mRNA.因此,较其它基因疗法如RNAi、DNA decoy等,更能有效地抑制HIV复制,并且对由HIV变异而导致的耐药病毒株同样有效,同时对病毒突变的诱导作用也较其它抗病毒药物低.因此,在抗AIDS基因治疗研究中具有潜在的应用价值. 本文在对核酶的结构、催化作用机制及其对HIV-1的作用机制进行概述的基础上,重点讨论了近年来核酶作用于HIV的研究进展以及对AIDS治疗的应用前景.     

HIV研究的另一关键问题——未知分子

一些医学研究人员相信HIV侵入细胞的途径马上就要真相大白了,在旧金日召开的第六届AIDS国际会议上,他们公布了新实验结果,这些实验结果将有助于未来的抗病毒感染治疗。科学家们已知HIV侵入细胞必须与细胞表面的CD_4分子结合,然而一些研究已经显示HIV在进入细胞时必须有另一未知分子的参与,如果我们能知道这个分子的性质,就可以阻止病毒进入细胞。在本次国际会议上有几个科研小组对此分子提出了不同假设,但其中有一个小组证明他     

抗血管生成蛋白与多肽研究进展

多项动物实验和临床实啦已经充分证实,抗血管生成疗法可以抑制肿瘤生长。在可抑制肿瘤生长的分子中,许多是蛋白与多肽,包括细胞因子、趋化因子、血管内皮生长因子及其受体的抗体、可溶性受体、胞外基质蛋白片段及小分子合成多肽等。简要综述其中部分分子的作用机理及临床应用情况。     

生命科学 1993年度 第五卷 著者索引

包国海边振甲蔡坤华曹思华曹鹤年3 .455,273*271*61:10曹盛丰柴建华江海声江虎军靳晓红1 .364*20 伟奋1一烤44 .45陈可冀流通率最高的中文生命科学图书1:47创制新药应抓好筛选第一环4:25首届全国神经科学学术会议纪要1:37核酸碱基HPLC多峰现象及其分析3:27HIV病毒株库受污染lt45基因工程改造的活病毒显示AIDS 疫苗的可喜前景3.421992年AIDS疫苗研制的新争论3.42PCR技术使AIDS的争论趋向统一5:招IGF一I对卵巢的作用及其调节5 .2‘人基因组分析技术—染色体特定区域单拷贝探针群制备2:16人基因组转录图研究技术5:16生命科学的新进…     

骨折愈合过程中生长因子的研究进展

目的:骨折愈合是一个复杂的过程受到机体多层面、多途径调节,而在这个过程中有许多生长因子的参与.方法:通过对有关生长因子文章的筛查,选取近年发表的针对性和权威性的文章将其行回顾性分析.结果:骨折愈合过程中有多种细胞因子参与并促进骨折愈合.结论:随着分子生物学的发展,特别是生长因子及其受体的发现,骨折愈合机制的研究也进入分子水平.目前,生长因子在骨折愈合中的骨发生、诱导、修复和骨量保持方面发挥着重要而关键的作用.因此,进一步明确作用机制,尤其是各细胞因子之间的相互作用是今后要研究的问题.     

吡格列酮抑制大鼠心肌肥厚的实验研究

目的: 以体外实验和体内实验探讨噻唑烷二酮(Thiazolidinedione,TZD)类药物吡格列酮对大鼠心肌肥厚的影响.方法: 体外原代培养新生大鼠的心肌细胞,以血管紧张素Ⅱ刺激建立心肌肥大模型,分别给予不同浓度的吡格列酮处理.采用RT-PCR法检测心肌肥大特征性基因心钠素(ANP)和脑钠素(BNP)mRNA的表达,并以3H-亮氨酸掺入测定心肌细胞蛋白合成速率.体内实验中通过不完全结扎大鼠腹主动脉引起压力负荷增加,导致左心室肥厚.从术前1周起用灌胃器经口给予吡格列酮(20 mg*kg-1*day-1)直至术后4周.处死动物,计算心脏重/体重比值,测量左心室壁厚度和心肌细胞的平均直径,RT-PCR法测定心肌细胞中BNP及炎性细胞因子的mRNA表达.结果: 心肌细胞肥大模型出现后,心肌细胞的ANP和BNP mRNA的表达以及蛋白合成速率增加.经不同浓度的吡格列酮处理后,这些变化得以减轻,并呈一定的剂量依赖性.吡格列酮抑制左心室心肌白细胞介素-1β,心调理素-1的mRNA表达,同时减轻压力负荷升高引起的大鼠心脏重/体重比值、左心室壁厚度和心肌细胞平均直径的增加.结论: 吡格列酮在体外和体内实验研究中显示对大鼠心肌肥厚有保护作用,可能对防治以心肌肥厚为特征的心血管疾病有一定的应用前景.     

新型大豆异黄酮磺酸酯抑制血管平滑肌细胞增殖活性研究

为了寻找对血管平滑肌细胞异常增殖有较强抑制作用的化合物,本文用MMT法考察新型大豆苷元磺酸酯体外抑制血管平滑肌细胞增殖活性.结果表明:该大豆苷元磺酸酯对血管平滑肌细胞增殖在10-7 mol/L时有抑制作用(P＜0.05),该浓度下的抑制率为56.06％,与先导化合物大豆苷元相比活性提高约1000倍.构效关系研究表明,大豆苷元经苯磺酸酯修饰,改变分子的空间结构、分子的可极化率从26.51增加到54.12,改变了药物的电荷分布,更有利于药物通过细胞膜到达靶标和与靶标更精确作用而导致药物药理作用大大增强.药理实验与构效关系研究初步表明,该大豆苷元磺酸酯有进一步研究价值.