置换层析—重新崛起的生物物质分离技术

置换层析是一种非线性层析技术,它产生于４０年代末。只是在近十几年里,置换层析才显示了其在生物物质特别是蛋白质的制备性分离中的重要潜力。     

从薄层层析到天然产物工业制备层析的理论与实践

基于分离理论的共性,通过薄层层析优化难分离物质对的最佳分离条件并直接放大到植物天然产物的工业制备分离。本文对实际应用中的溶剂组成、溶剂强度、溶剂用量及溶剂再利用等问题作了详细论述。最佳溶剂选择性可通过不同溶剂系统在薄层板上所给难分离物质对的最大Rf比值确定;在正相硅胶层析中,主要极性溶剂决定了物质的洗脱顺序;洗脱剂中极少量强极性溶剂(O．5％)或pH值的改变可显著改善拖尾现象;根据Rf值和容量因子(K)及洗脱体积三者之间的关系,Rf在0．1～0．3为用于柱层析的洗脱溶剂强度的最佳范围。     

胶体金免疫层析快速诊断技术

免疫胶体金技术是一种新的免疫学方法,该技术是一种将胶体金颗粒与包括抗原、抗体在内的许多蛋白质标记形成免疫金复合物的技术.目前在生物医学各领域得到了日益广泛的应用.在过去的十年里,基于膜上的快速诊断技术的发展为金标免疫试剂创造了巨大的市场.使用免疫金标技术制备的标记物作为检测系统中的指示试剂,应用在检测传染病、环境污染物、毒品、早孕以及兽医等领域.这两种技术的应用很大程度上提高了体外诊断技术的简便性和快速性.本文对其基本原理及其中应注意的问题做了一些介绍,并对其应用领域及发展方向进行了探讨.     

蛋白质层析用离子交换和疏水作用层析介质的发展概况

层析是蛋白质纯化的关键技术之一 ,作为层析技术的核心———层析介质一直以来是层析技术研究的一个热点。近年来 ,越来越多的新型层析介质被开发出来 ,如粒度均匀的交联多糖、人工合成的大孔聚合物、触角型吸附剂、软胶包裹在硬胶表面等介质。主要介绍应用较为广泛的IEC和HIC介质的组成、特性及其在蛋白质纯化中的应用 ,还研究了与HIC技术相关的两种新技术 :亲硫层析和疏水电荷诱导层析 (HCIC) ,重点介绍了HCIC的介质及其应用 ,同时也讨论了在蛋白质纯化中应用的三相纯化策略 (富集、中间纯化和精制 )。结合我国的实际情况 ,就当前蛋白质纯化的离子交换和疏水层析介质面临的挑战和未来的发展进行讨论并提出了建议     

置换层析——重新崛起的生物物质分离技术

置换层析是一种非线性层析技术,它产生于４０年代末,只是在近十几年里,置换层析才显示了其在生物物质特别是蛋白质的制备性分离中的重要潜力。由于这一技术与传统的洗脱层析技术相比,有着明显的优点,即高上样量、高产率、高分辨率、易于操作,以及被分离样品在分离过程中的自行浓缩效应,因此这一技术已越来越引起人们的关注。     

利用小肽控制的基于蛋白质内含子非层析标签制备重组蛋白(英文)

基于蛋白质内含子的蛋白质纯化自我断裂标签已经被广泛使用超过15年之久.但这一系统体内表达过程的提前断裂一直是限制这一技术广泛应用的瓶颈,特别是在需要高温表达和长表达周期的真核表达系统中.本研究介绍了一种利用小肽控制的基于蛋白质内含子和非层析标签ELP(elastin-like polypeptide)的自我断裂系统.在这一系统中,蛋白质内含子的体内外活性严格受到其结构互补小肽控制.在体内表达不含有互补小肽时,蛋白质内含子不具有活性;而在体外添加结构互补小肽,蛋白质内含子结构恢复并发生C端断裂反应释放目的蛋白.由于非层析标签ELP的引入,因此整个纯化过程可以简单地通过几步机械沉淀完成.此外,这一系统反应pH、小肽与前体蛋白之间的摩尔比及断裂速率也一并进行了系统的研究.     

免疫亲和吸附剂制备方法的某些改进

制备免疫吸附剂是亲和层析重要的一环,而其中载体活化与配基偶联两个步骤又是关键。Axen等指出配基的偶联率与活化的pH值有关,March等利用2mol/LNa_2CO_3。维持高pH的方法代替了载体活化时不断滴加NaOH并使用pH计监测的经典方法。然而,国内最新出版的实验方法     

一种简便的叶绿体色素纸层析的点样方法

“叶绿体色素的提取与分离”实验中 ,“点样”是用毛细管在滤纸上划滤液线的方法来完成的。现介绍一种用玻璃片“盖印”的点样法 ,优于毛细管点样方法。1　点样玻璃片制作挑选无缺损的载玻片 (75 mm× 2 5 mm× 1mm) ,用玻璃刀横向裁成 10 mm宽的小玻片 (2 5 mm× 10 mm×1mm ) ,此玻片即可用作点样。制成的点样玻片宽的一侧要保证平直无缺损 ,其宽度要小于滤纸条的宽度。因此 ,玻璃片的宽度为 10 mm,滤纸条的宽度可裁成 15 mm为宜。2　操作　　从小漏斗流出的滤液不要用试管收集 ,可直接滴1～ 2滴在 1块干净的载玻片上 ,用点样玻片宽的一侧…     

对(A)KTAexplorer100快速纯化工艺开拓系统的几点认识

生物分子纯化方法是生物技术的重要组成部分,为优选纯化过程,选用介质和探索操作条件是形成完整而又合理纯化方案的两个方面：AEKTAexplorer100快速纯化工艺开拓系统为之提供了操作平台。本文介绍了它的特性、有关参数和作者的体会。     

能源危机日益突出 生物炼制备受关注——生物炼制国际学术研讨会

石油价格持续高位,化石资源日趋枯竭,生态环境不断恶化带来的生存危机,使得人们的目光再一次聚焦到可再生资源,而生物炼制作为开发可再生资源的核心技术下段已经成为世界各国研究的热点。     

离子膜法技术在氨基酸制备中的探讨

介绍了离子交换膜分离技术原理及其在氨基酸制备中的应用工艺，设计提出了新型反馈离子交换膜分离工艺，取代传统的老工艺，实现了工业化大生产。     

几种层析液对滤纸圆盘分离叶绿体色素的影响

现行高中生物学（必修）教材和教师教学用书．介绍“叶绿体中色素的提取和分离”实验中有关层析液的替代品有很多种,只有通过实验验证．才能知道哪种层析液分离色素效果好。同时在实验验证过程中还能发现更为理想的层析液比例搭配．既容易配制又操作简单。笔者进行了实验探索．现将“几种层析液对滤纸圆盘分离叶绿体色素的影响”的实验过程、实验现象和实验结果阐述如下,以便于各位同仁交流和商榷。[第一段]     

纳滤技术在生物分离中的应用

纳滤技术近年来已成为生物分离领域中的研究热点之一。本文分别就纳滤技术在食品、医药等方面的应用及其膜污染控制进行较为详细的介绍,综述了近年来纳滤生物分离技术的研究与应用进展。     

包涵体蛋白的层析复性技术研究进展

包涵体蛋白的复性是生物工程下游技术中的一个重要难题。层析法用于蛋白质复性是一种较新的、适用于大多数蛋白的方法。其原理是将层析技术应用于蛋白质复性和纯化,使变性蛋白质在层析柱上重折叠为正确的空间构象,在洗脱的同时实现部分纯化。本文详细介绍了蛋白质在5种层析柱上的复性方法、原理、应用及研究的新进展,为层析法对蛋白质复性的进一步应用提供依据。     

生物组织X光照片的层析合成法的研究——Ⅱ.优化层片特性的模拟

在圆层析合成法中,我们提出了两种X光扫描采样的方法.一种是以零阶贝塞尔函数为窗函数,采用单个的采样园锥.另一种是以圆长球函数为窗函数,用Fourier-Bessel级数展开的系数为权,采用多重采样圆锥.在适当选择窗函数的参数下,给出了采样几何学的设计及对不同窗函数的衰减特性进行了模拟.     

NAD(P)依赖型氧化还原酶分离纯化技术进展

NAD(P)依赖型的氧化还原酶是一类重要的生物催化剂,在生物合成中被广泛应用。以亲和技术为基础的分离纯化方法与其它分离制备方法相比具有高选择性、高活力回收等优点。本文着重讨论亲和色谱技术在NAD(P)依赖型的氧化还原酶的分离纯化及制备中的研究进展。