粉拟青霉种内RAPD多态性分析

对来自不同地理来源和不同寄主的13株粉拟青霉Paecilomyces farinosus和其他3种拟青霉及1株球孢白僵菌进行RAPD分析,从RAPD扩增结果可知粉拟青霉种内具丰富的遗传多样型。RAPD扩增指纹图谱能有效地分辩不同菌株的基因型,可用于监测生防效果的菌株示踪。聚类分析结果表明种间的遗传差异要明显大于种内的差异。菌株间差异是和地理来源相关,而和寄主不相关。     

粉拟青霉种内RAPD多态性分析

对来自不同地理来源和不同寄主的 １３株粉拟青霉Ｐａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓ ｆａｎｉｎｏｓｕｓ和其他３种拟青霉及１株球孢白僵菌进行ＲＡＰＤ分析,从ＲＡＰＤ扩增结果可知粉拟青霉种内具丰富的遗传多样型。ＲＡＰＤ扩增指纹图谱能有效地分辨不同菌株的基因型,可用于监测生防效果的菌株示踪。聚类分析结果表明种间的遗传差异要明显大于种内的差异。菌株间差异是和地理来源相关,而和寄主不相关。     

粉拟青霉种内RAPD多态性分析*

对来自不同地理来源和不同寄主的 １３株粉拟青霉Ｐａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓ ｆａｎｉｎｏｓｕｓ和其他３种拟青霉及１株球孢白僵菌进行ＲＡＰＤ分析,从ＲＡＰＤ扩增结果可知粉拟青霉种内具丰富的遗传多样型。ＲＡＰＤ扩增指纹图谱能有效地分辨不同菌株的基因型,可用于监测生防效果的菌株示踪。聚类分析结果表明种间的遗传差异要明显大于种内的差异。菌株间差异是和地理来源相关,而和寄主不相关。     

粉虱拟青霉对黑刺粉虱的侵染过程

本文通过扫描电镜和透射电镜 ,观察了粉虱拟青霉对黑刺粉虱的侵染过程。用粉虱拟青霉分生孢子接种于黑刺粉虱幼虫后 ,12h孢子萌芽 ,36h菌丝穿透寄主表皮进入体腔 ,在虫体内进行生长繁殖 ,逐渐充满虫体内部 ,5d后 ,菌丝穿透寄主表皮长出体外 ,并继续生长 ,逐渐将整个虫体包裹 ,形成一个半球形的子痤 ,颜色也由白色变为栗褐色或棕红色。     

粉质拟青霉的初步研究

本文观察了粉质拟青霉产孢量高峰在20天左右。培养时间延长,产孢量有下降的趋势。在适温和相对湿度饱和状态下,分生孢子经2小时萌发,48小时见次代分生孢子链产生。此菌对碳源中的蔗糖,D-甘露糖,D-半乳糖,乳糖,甘油,赤藓糖,可溶性淀粉;氮源中的谷氨酸,谷氨酰胺,丙氮酸利用好。田间小面积使用1.2×10⁷孢子/ml悬浮液喷雾,对菜螟幼虫感病死亡率达90%。     

粉拟青霉类枯草杆菌蛋白酶基因的cDNA克隆及其序列和蛋白质分析

粉拟青霉是一种常见的昆虫病原真菌,被广泛用于生物防治。根据GenBank中已登录的淡紫拟青霉,球孢白僵菌和金龟子绿僵菌的类枯草杆菌蛋白酶基因序列的同源性比较,以它们高度保守的核苷酸序列设计一对引物,采用RT-PCR和3’/5’-RACE相结合的方法,首次从粉拟青霉中克隆出完整的类枯草杆菌蛋白酶cDNA基因。其全序列为2060bp,该序列5’-端和3’-端的非编码序列长度分别为209bp和252bp,开放阅读框为1599bp,编码532个氨基酸,信号肽长度为16个氨基酸。成熟蛋白的氨基酸序列和金龟子绿僵菌小孢变种(CAB63913),玉米赤霉菌(EAA68914),金龟子绿僵菌蚱蜢变种(CAC95047)及柄孢壳(AAC03564)的同源性分别为69%、71%、68%和68%。成熟蛋白具有典型的丝氨酸蛋白酶活性位点,同时有5个半胱氨酸,3个潜在的N-糖基化位点和2个可能的O-糖基化位点。该基因在的密码子第三位碱基的使用上,显示出明显的对C的偏爱。     

粉拟青霉异核性研究

本文通过细胞核染色和遗传分析的方法证明了粉拟青霉的异核性。在遗传分析中采用酶解菌丝细胞壁及原生质体再生的方法,得到了组分同核体;同核体又配接重新形成了与原菌株性状相似的异核体。细胞核染色显示粉拟青霉分生孢子为单细胞多核,结合其它现象,证明了在其生活史中异核性是稳定的。表明该菌田间分离株是永久性异核体。这一现象与已报道的分生孢子为单核的虫生真菌异核现象不同,了解这一现象及其实质对认识该菌生理、菌种改良以及提高野外防治害虫的效果有重要意义。     

3种拟青霉生物学特性的分析研究

通过分析研究3种拟青霉在PDA培养基上的最佳生长曲线、最大产孢量、最佳生长适温和最佳生长pH值等生物学特性,发现3种拟青霉均可在中、低温环境下生长,且在较短时间内成熟产孢。这为春秋两季林间的害虫生物防治奠定了侵染基础,同时分析研究3种拟青霉不同的生境条件,也为林间混菌持续控制害虫和菌种发酵生产提供了参考指导。     

拟青霉属一新种及其杀蚜活性

从病死棉蚜（AphisgossypiiGlover)分离到拟青霉属一新种一灰绿拟青霉（PaecilomycesgriseiviridisM．X．Dai）。在查氏琼脂和PDA上菌落呈灰绿色。瓶梗1．8～3．2×5．6～10．3μm,基部椭圆形膨大或呈圆柱状,上部明显变细;分生孢子纺锤形,单胞,壁光滑,1．2～1．8×2．8～4．4μm。分生孢子对蚜虫具有侵染力;该菌发酵液（离心后）亦具有一定的杀蚜活性。     

粉棒束孢几丁质酶基因cDNA全序列克隆及结构特征分析

通过设计基因保守区的特异性简并引物,运用SMARTRACERT-PCR技术,首次从粉棒束孢中克隆出完整的几丁质酶基因。该基因cDNA全长1549bp,5'端非翻译区89bp,3'端非翻译区有188bp,开放阅读框(ORF)1272bp,编码423个氨基酸。信号肽长度为22个氨基酸。信号肽很可能需要两次剪切。成熟的蛋白理论分子量为43.9kDa,理论等电点为5.67。氨基酸序列具有几丁质酶18族的两个高度保守的活性区域,一个是酶作用活性位点,另一个是几丁质结合区域。该蛋白可归于几丁质酶18族V类。成熟蛋白的氨基酸序列与裂虫壳AAV98691、白色扁丝霉CAA45468、菌生轮枝孢AAP45631、莱氏野村菌AAP04616和球孢白僵菌AAN41261的同源性分别为91%,89%,80%,76%和75%。     

构建微生物分子分类系统进化树的快速运算法与数据结构

本文介绍了构建系统进化树的NJ方法（NeighborJoiningMethod）所涉及的算法与数据结构。文中给出了基于数据复用性的算法改进,获得了快速算法──FNJ算法,从而将算法的时间复杂度由（N⁵）降低为（N³）;并给出了自动绘制进化分枝图的算法。     

Fast phylogenetic DNA barcoding

We present a heuristic approach to the DNA assignment problem based on phylogenetic inferences using constrained neighbour joining and non-parametric bootstrapping. We show that this method performs as well as the more computationally intensive full Bayesian approach in an analysis of 500 insect DNA sequences obtained from GenBank. We also analyse a previously published dataset of environmental DNA sequences from soil from New Zealand and Siberia, and use these data to illustrate the fact that statistical approaches to the DNA assignment problem allow for more appropriate criteria for determining the taxonomic level at which a particular DNA sequence can be assigned.     

Susceptibility of different life stages of the European cherry fruit fly,Rhagoletis cerasi,to entomopathogenic fungi

The effects of six fungus isolates on the mortality of different life stages of the European cherry fruit fly, Rhagoletis cerasi (Diptera: Tephritidae), were assessed in a series of laboratory experiments to find an isolate suitable for biological control. In a first step, the effects of fungus treatments on mortality, mycosis and fecundity of adult flies at a concentration of 10⁷ conidia/ml were evaluated. All fungus isolates caused mycosis but virulence varied considerably among the isolates. Beauveria bassiana and Isaria fumosorosea caused 90–100% mortality and had the strongest influence on fecundity. Metarhizium anisopliae also induced high rates of mortality, while the pathogenicity of Isaria farinosa was low. The effects of lower conidia concentrations and the influence of the age of flies were assessed in a second step. Higher conidia concentrations generally resulted in a higher mortality. B. bassiana was most efficient at low concentrations. Young flies showed lower mortality rates than older flies but, sub‐lethal effects on eclosion rate of eggs were greater in younger flies. Finally, the effects on L₃ larvae were tested: none of the fungus isolates induced mortality in more than 25% of larvae. As L₃ larvae and pupae are not susceptible to fungus infection, field control of R. cerasi should be focused on adult flies.     

两种虫生真菌酯酶同工酶酶谱多样性研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对不同来源的22株球孢白僵菌和21株粉拟青霉酯酶同工酶的酶谱多样性进行了研究,由酯酶图谱可知同种不同菌株间具有丰富的遗传多样性,可作为菌株亲缘关系的可靠的遗传标记。遗传距离进行聚类分析,结果表明球孢白僵菌、粉拟青霉不同菌株间亲缘关系的远近与寄主范围无任何相关性,与菌株来源地在某些菌株间存在一定的相关性。