复合水解酶黑曲霉HD—1固体发酵工艺研究

黑曲霉ＨＤ－１是一株分泌高单位酸性蛋白酶、纤维素酶、果胶酶、糖化酶等多种水解酶的生产菌,本研究采用单因素搜索和正交试验对其固体发酵工艺进行优化,并采用中心组合设计进行扩大生产试验,结果表明酶活可达;酸性蛋白酶１．１万Ｕ左右,果胶酶９千Ｕ以上,纤维素ＣＸ酶１．１万Ｕ左右,纤维素ＣＬ酶４千Ｕ以上,糖化酶７千Ｕ左右。     

复合水解酶黑曲霉HD—1固体发酵工艺研究

黑曲霉HD-1是一株分泌高单位酸性蛋白酶、纤维素酶、果胶酶、糖化酶等多种水解酶的生产菌,本研究采用单因素搜索和正交试验对其固体发酵工艺进行优化,并采用中心组合设计进行扩大生产试验,结果表明酶活可达:酸性蛋白酶1.1万U左右,果胶酶9千u以上,纤维素C_X酶1.1万U左右,纤维素C_L酶4千U以上,糖化酶7千U左右。同时说明数理统计方法设计实验,工作量小,优化结果准确。     

羊毛生物整理复合酶高产菌的激光选育*

采用激光对宇佐美曲霉棕色突变株W25进行诱变处理。选育到一株产酸性蛋白酶、纤维素CMC酶的复合酶生产菌L86,与出发菌株相比发酵单位酸性蛋白酶提高了42.7%、纤维素CMC酶提高了40.9%。所选育的L86经多次传代,遗传性状非常稳定。生物整理试验表明,L86复合酶比较适合用作羊毛织物生物整理用酶。     

羊毛生物整理复合酶高产菌的激光选育

采用激光对宇佐美曲霉棕色突变株W25进行诱变处理。选衣到一株产酸性蛋白酶、纤维素CMC酶的复合酶生产菌L86,与出发菌株相比发酵单位酸性蛋白酶提高了42．7％、纤维素CMC酶提高了40．9％。所选衣的L86经多次传代,遗传性状非常稳定。生物整理试验表明,L86复合酶比较适合用作羊毛织物生物整理用酶。     

S-PI对香菇酸性蛋白酶的抑制机理及其促进出菇的生化解释

S-PI对纯化的香菇酸性蛋白酶具有强烈的抑制作用,10μmol／L的S-PI可使酶活降低77％,这种抑制属于可逆竞争抛物线型抑制。经25μmol／L酸性蛋白酶水解6小时后,香菇胞外酸性磷酸酶的活性从24．6单位降低到20．8单位,同时C1酶和Cx酶的活性分别比对照降低了76％和58％,这表明香菇酸性蛋白酶不仅直接左右着香菇发育的氮代谢,同时也间接地影响着碳代谢及能量转换。     

S—PI对香菇酸性蛋白酶的抑制机理及其促进出菇的生化解释

Ｓ－ＰＩ对纯化的香菇酸性蛋白酶具有强烈的抑制作用,１０μｍｏｌ／Ｌ的Ｓ－ＰＩ可使酶活降低７７％,这种抑制属于可逆竞争抛物线型抑制。经２５μｍｏｌ／Ｌ酸性蛋白酶水解６小时后,香菇胞外酸性磷酸酶的活性从２４．６单位降低到２０．８单位,同时Ｃ１酶和Ｃｘ酶的活性分别比对照降低了７６％和５８％,这表明香菇酸性蛋白酶不仅直接左右着香菇发育的氮代谢,同时也间接地影响着碳代谢及能量转换。     

利用黑曲霉固态发酵啤酒糟生产饲料复合酶的研究

以啤酒糟为主要基质,利用黑曲霉固态发酵生产酸性蛋白酶、木聚糖酶和纤维素酶等多种饲料复合酶,研究了黑曲霉固态发酵培养基组成对复合酶酶活的影响,确定最优培养基配方为:啤酒糟75%,麸皮25%,硫酸铵1%,KH_2PO_4 0.2%,MnSO_4 0.1%、ZnSO_4 0.2%,料水比1:2。在适宜的发酵条件下,经30℃发酵5 d,烘干后得到的复合酶制剂中,具有多种酶活性(以干基计)。其中酸性蛋白酶活力3 800 U/g,木聚糖酶活力12 00 U/g和纤维素酶活力18 U/g。     

酸性蛋白酶处理羊毛染色新工艺

迄今为止,羊毛染色一直是采用高温长时间蒸煮的方法,因而染色后的羊毛强度受到一定损害。为了改进羊毛染色工艺,我们在以前有关利用植物蛋白酶(菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶、无花果蛋白酶)预处理羊毛进行低温染色的报道启发下,进行了霉菌酸性蛋白酶处理羊毛低温染色的试验。结果表明:羊毛通过微生物酸性蛋白酶预处理进行染色缩短了高温处理时间,降低了纺纱断头率,提高了毛纱强度,用于提花毛毯的生产;较老工艺产品质量显著提高,利于节省煤电、提高劳动生产效率。比使用植物蛋白酶酶源丰富、成本低廉。     

古尼虫草的生物活性物质I含肽镇痛组分的分离及性质

用理化分离分析和生物检测方法相结合,从古尼虫草(Cordyceps gunnii(Berk.)Berk.)无性型,古尼拟青霉(Paecilomyces gunnii Liang)菌丝体中初步分离纯化得到镇痛物质,该物质经氨基酸组成分析表明是一种酸性氨基酸残基高的肽类物质。经不同温度、pH及蛋白酶的稳定性试验分析观察到这种肽类物质对酸稳定、在酸性条件下抗热,对胃蛋白酶、胰蛋白酶部分敏感,对蛋白酶K不敏感。经小鼠竖尾法和大鼠攻击法测定,无吗啡类药物依赖性。     

关于吸附精制百日咳菌苗、白喉、破伤风类毒素混合制剂配方的实验报告

本文对吸附精制百白破混合制剂的不同配方进行了实验,结果表明,新一代吸附精制百白破混合制剂最佳配方为：精制百日咳菌苗１８μｇＰＮ／ｍｌ、精制白喉类毒素为３０Ｌｆ／ｍｌ、精制破伤风类毒素为１０Ｌｆ／ｍｌ。由该配方组成的吸附精制百白破混合制剂,其中百日咳菌苗的毒性试验ＢＷＤＵ／ｍｌ、ＬＰＵ／ｍｌ、ＨＳＵ／ｍｌ三种指标均符合制检规程要求。其效力单位（ＩＵ／ｍｌ）超过规程要求一倍以上,精制白喉和破伤风类毒素的安全试验均符合规程要求,白类效力试验≥８０－１００％,破类效力试验≥０．５－４．５ＩＵ／ｍｌ。上述结果说明本文提出的配方作为新一代精制百白破混合制剂的配方是适宜和实用的。     

粗糙脉孢霉酸性蛋白酶基因的克隆与鉴定

以粗糙脉胞霉CICIM F00021染色体DNA为模板,通过PCR扩增得到粗糙脉胞霉酸性蛋白酶结构基因。对其序列进行了测定和分析,表明扩增得到的片段为酸性蛋白酶基因。将扩增出的酸性蛋白酶基因克隆入酵母表达载体中获得重组质粒pPIC9K-ap。将其转化入毕赤氏酵母获得重组菌NA3。重组酸性蛋白酶在pH4．0和45℃下表现出最高活性。     

粗糙脉孢霉酸性蛋白酶基因的克隆与鉴定*

以粗糙脉胞霉CICIM F00021染色体DNA为模板,通过PCR扩增得到粗糙脉胞霉酸性蛋白酶结构基因。对其序列进行了测定和分析,表明扩增得到的片段为酸性蛋白酶基因。将扩增出的酸性蛋白酶基因克隆入酵母表达载体中获得重组质粒pPIC9K-ap。将其转化入毕赤氏酵母获得重组菌NA3。重组酸性蛋白酶在pH4·0和45oC下表现出最高活性。     

白带中白色念珠菌致病性的研究

目的探讨女性生殖道分泌物(白带)中白色念珠菌的致病性,评价其在白带中分离的临床意义.方法对重庆医科大学第二临床学院2002年1月～2003年12月300株白带分离的白色念珠菌进行蛋白酶测定,并从蛋白酶活力高、中、低中分别选2株作血管内皮细胞毒力和粘附性测定.结果 300株白色念珠菌全部检出蛋白酶,其中蛋白酶活力高为249株,占83.0%;中等活力38株,占12.7%;低等活力13株,占4.3%.细胞毒力试验表明蛋白酶活力高,细胞毒性强,蛋白酶活力与毒力呈正相关(r=0.9946、P＜0.01);细胞粘附试验表明蛋白酶活力高,粘附能力强,蛋白酶活力与粘附呈正相关(r=0.9944、P＜0.01).结论蛋白酶是白色念珠菌重要的毒力因子,蛋白酶活力可直接反映其毒力,蛋白酶活力与其粘附直接相关.白带中白色念珠菌具有致病性,临床应对其引起的感染密切关注.     

pH值对葡萄酒除铁与澄清的影响

葡萄酒采用菲丁除铁及单宁明胶澄清工艺中，葡萄酒的ｐＨ值是显影响除铁与澄清效果。经试验，菲丁除铁时ｐＨ３￣４为宜，单宁明胶澄清时将葡萄酒的ｐＨ值提高约０．２个单位就能达到澄清目的。     

石油发酵生产AS.1.398蛋白酶的中试鉴定会

由北京市第一轻工业局主持,于1979年12月24日在北京召开了石油发酵生产AS.1.398蛋白酶的中型试验技术鉴定会。参加鉴定会的有来自全国13个科研和生产单位的22名代表。会议期间,北京市发酵工业研究所报告了利用AS.1.398菌株进行石油发酵生产蛋白酶的试验情况。     

羊毛生物整理复合酶L86发酵工艺优化研究

采用L9（9^4)正交试验对L86复合酶生产菌的发酵培养基进行优化、并通过溶氧浓度调节和中期补加蛋白水解液对发酵过程进行调控,结果表明罪状优的培养基组成为（g/100ml);黄豆粉4.0、玉米粉1.0、鱼粉0.6、蚕蛹粉0.6、CaCl20.5、NH4Cl1.0、Na2HPO4.2H2O0.4;通气量控制30h前1：0.5、30-50h1:1.0、50h,后1：1.2v/v/m。在上述条件下摇瓶,酸性蛋白酶酶活10000u/ml、纤维素CMC3600u/ml;在0.5m^3搅拌罐中扩大中试平均发酵单位酸性蛋白酶5500u/ml、纤维素CMC酶2200u/ml。     

精制白喉毒素加β—丙氨酸后脱毒效果观察

精制白喉毒素加０．０２Ｍβ—丙氨酸,再加甲醛溶液经适当的时间解毒,即可转化为完全类毒化且无毒性逆转的精制白喉类毒素。此精白类的脱毒试验、毒性逆转试验、安全试验及效力试验均符合《中国生物制品规程》要求。在脱毒过程中絮状单位的损失明显低于单纯甲醛脱毒者,纯度亦相应得到了提高。     

羊毛生物整理复合酶L86发酵工艺优化研究

采用L9（34）正交试验对L86复合酶生产菌的发酵培养基进行优化、并通过溶氧浓度调节和中期补加蛋白水解液对发酵过程进行调控。结果表明较优的培养基组成为（g/100ml）：黄豆粉4.0、玉米粉1.0、鱼粉0.6、蚕蛹粉0.6、CaCl20.5、NH4Cl1.0、Na2HPO4·2H2O 0.4;通气量控制30h前1:0.5、30-50h1:1.0、50h后1:1.2 v/v/m。在上述条件下摇瓶,酸性蛋白酶酶活10000u/ml、纤维素CMC酶3600u/ml;在0.5m3搅拌罐中扩大中试平均发酵单位酸性蛋白酶5500u/ml、纤维素CMC酶2200u/ml。     

怀头鲇早期发育阶段消化酶及碱性磷酸酶活性变化(英文)

采用动物性饵料和人工饲料培育1～10日龄怀头鲇(Silurus soldatovi)仔稚鱼,分析测定了全鱼酸性、碱性蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶以及碱性磷酸酶的活性。结果表明:孵化后3天开口期仔鱼已具有较高的碱性蛋白酶活性,5日龄时碱性蛋白酶比活力达到较高值,8日龄时出现低值,总体变化呈波动上升趋势;酸性蛋白酶活性在1～8日龄处于较低水平,8日龄后开始迅速升高;淀粉酶活性在5日龄左右达到最高值,随后酶活性开始下降至较低水平;脂肪酶活性变化波动较大,表现为双峰型,两个峰值分别出现在3～4日龄和6～8日龄。摄食动物性饵料仔稚鱼消化酶活性和碱性磷酸酶活性均高于摄食人工饲料。在整个早期发育过程中,碱性蛋白酶比酸性蛋白酶活性高,碱性蛋白酶、淀粉酶比活力在约8日龄仔稚鱼转变期明显下降,而酸性蛋白酶活性开始迅速升高,这说明消化酶活性的变化与仔稚鱼发育过程中消化机能转换具有相关性。怀头鲇在10日龄内碱性磷酸酶活性呈上升趋势,表明怀头鲇胃肠道功能的逐步发育完善。     

深层培养黑曲霉生产酸性蛋白酶的研究I．酸性蛋白酶产生菌的筛选及其培养条件

用5种培养基,从120株霉菌中筛得5株产生酸性蛋白酶的黑曲霉及其突变株。对影响这些菌株生产酸性蛋白酶的各种因素的研究结果表明,黑曲霉生产酸性蛋白酶需要高浓度的氮源,特别是无机氮,这与其他微生物蛋白酶的生产有所不同。另外,CaCl2,、胨、豆饼粉、蚕蛹粉、鱼粉的石灰水解液均能促进酸性蛋白酶的生产。磷酸盐、微量的Cu++、Fe++、Mn++、Ni++、于产酶略有促进作用。培养基中固形物的浓度、通气量、起始pH、种子培养条件以及种龄、种量等都对产酶有明显的影响。