用免疫学方法检测脑脊液中抗原诊断隐球菌脑膜炎

1．本文报道成功地用改良的对流免疫电泳及微量补体结合技术检测隐球菌脑膜炎病人脑脊液中多糖体抗原的方法。对流免疫电泳的改进要点是电泳凝胶板采用国产琼脂糖。由于琼脂糖电渗流很弱,将凝胶板放在冰箱中7天后使用或在紧急待用时,在琼脂糖中掺入30％普通琼脂就可以使抗体产生足够的负向移动。改良对流免疫电泳后敏感度提商10倍左右。 2．本室制成的1号抗血清与本市所收集的9个菌株都能起凝集反应,也能与9个菌株的多糖体抗原起免疫反应,特异性和敏感性都是比较满意的。 3．用多糖体对1号抗血清的吸收试验,初步证叫所有多糖体实际上都可移走1号扰血清的凝集活性,但是用5号菌株吸收后,残留有少量的对几个菌株的凝集素,这可能是指它们存在有不能完全吸收的微量抗原。 4．用这批抗血清检测了临床几年来收集的16份脑脊液标本和11份血清标本,其中三例临床确诊为新型隐球曲脑膜炎,我们的抗原测定也全部阳性,其它疾病的24份标本抗原测定 全部阴性。 5．测定抗原的效价能反映出病情严重程度,迁延和治疗效果。     

甲种胎儿蛋白放射对流免疫电泳的定量测定

本文介绍一种新的放射对流免疫电泳测定甲胎蛋白的方法,此方法系用放射免疫的原理,对流电泳的条件建立的微量定量测定法。在电泳过程中,抗原抗体进行反应同时也就将复合的抗原-抗体与游离的抗原分开。这一新的方法比以往放射免疫方法简便快速,而具有同样的灵敏度。用放射对流免疫电泳法及放射免疫法对12例正常人及2例肝癌患者血清中甲胎蛋白的含量进行了比较,所得结果基本相符。另外,还用此方法观察了大鼠胚肝细胞培养过程中培养液内甲胎蛋白浓度的变化。     

关于对流免疫电泳和琼脂双向扩散试验的研究

对流免疫电泳和琼脂双向扩散是免疫学技术常用的沉淀试验方法之一。目前已广泛地应用于病毒、细菌、寄生虫和毒素等抗原抗体的检测、鉴别和分类。本试验通过肠道革兰氏阴性菌的抗原分析,进而掌握此法的特点和规律。现将结果报道如下。     

兔抗人和大鼠烧伤皮肤毒素提取物的免疫血清制备及抗原性分析

为进一步确证和研究人和大鼠烧伤毒素提取物的抗原性及其特征,以及同以新鲜皮制成的提取物在免疫学特性方面的异同,将人和大鼠烧伤皮肤与新鲜皮肤的提取物,经各种生物化学分析及定量后,分成四组,每组(?)只兔子,分别以福氏完全佐剂抗原、不完全佐剂和水剂抗原免疫,制成(?)种免疫血清。对上述抗血清先后经过免疫双相扩散、单相扩散、免疫电泳、火箭免疫电泳等方法的分析,结果表明,兔抗人和大鼠烧伤皮肤毒素提取物的抗原性较强,(?)双扩和免疫电泳上均出现一很强的抗原成分,抗体效价可达1∶16～1∶32(双扩);而人和大鼠新鲜皮肤提取物的抗原性很     

卡式微柱凝胶法在猴血型鉴定中的应用

灵长类动物的ABO血型抗原都表达在组织器官内,而不是在红细胞上,这给灵长类动物血型的鉴定带来很大的困难。为找到更加简捷、准确鉴定灵长类动物类人ABO血型的方法,采用近年来临床上广泛应用的卡式微柱凝胶正、反定型法对34只猕猴和16只食蟹猴的血型进行了鉴定,并与肾组织免疫组化法的检测结果进行比较。结果显示:卡式微柱凝胶正定型法的检测结果中无一例为阳性结果;血浆中的纤维蛋白原和人-猴种属间非特异性抗体都会对卡式微柱凝胶反定型法的部分检测结果产生干扰;采用经正常人O型红细胞吸附处理后的清亮血清,卡式微柱凝胶反定型法的检测结果明确,与免疫组化法判定结果一致。由此得出:卡式微柱凝胶反定型法可以用于灵长类动物血型的鉴定,其主要干扰因素为血浆内的纤维蛋白原和人-猴种属间非特异性抗体,在采用清亮血清及经正常人O型红细胞吸附处理后能消除其干扰。     

绿僵菌属血清学的初步研究

本文采用凝集试验和免疫电泳的方法对不同来源的七株绿僵菌属真菌进行了免疫学对比研究。抗原是孢子悬液和菌丝体清液,通过对角兔接种抗原而获得抗血清。每一种抗原与其同源抗血清和异源抗血清进行交叉试验,并对凝集试验的结果以及免疫电泳反应产生的沉淀弧数目和免疫电泳图谱加以对比分析,试验结果表明：不同菌株间存在明显的抗原类似性,同时各菌株间也表现出一定的抗原专一性。根据试验数据对供试菌株进行血清学分型的结果与形     

绿僵菌属血清学的初步研究

本文采用凝集试验和免疫电泳的方法对不同来源的七株绿僵菌属真菌进行了免疫学对比研究。抗原是孢子悬液和菌丝体清液,通过对家兔接种抗原而获得抗血清。每一种抗原与其同源抗血清和异源抗血清进行交叉试验,并对凝集试验的结果以及免疫电泳反应产生的沉淀弧数目和免疫电泳图谱加以对比分析,试验结果表明:不同菌株间存在着明显的抗原类似性,同时各菌株间也表现出一定的抗原专一性。根据试验数据对供试菌株进行血清学分型的结果与形态学分类相符合。     

高等植物叶绿体和线粒体免疫亲近性的研究

以火箭免疫电泳分析表明：大豆叶绿体抗体与大豆线粒体有免疫交叉反应,同时大豆线粒体抗体与大豆叶绿体也有免疫交叉反应,但是大豆线粒体的抗体与鼠肝线粒体之间无免疫交叉反应。这说明高等植物线粒体对叶绿体比之对动物线粒体在免疫特性上有更大的亲近性;亦即高等植物线粒体和高等植物的叶绿体有更大的同源性。经火箭免疫电泳,交叉免疫电泳和线状免疫电泳进一步分析表明：菠菜偶联因子抗体和大豆线粒体,大豆叶绿体间,大豆线粒     

Bioxun微柱凝胶筛查红细胞不规则抗体的研究

目的:探讨Bioxun微柱凝胶法(Bioxun Micro-column Gel anti-globulin Test,BMGT)筛查红细胞不规则抗体的敏感性和特异性。方法:使用盐水介质法(Saline Media Test,SMT)、传统抗人球法(Traditional anti-Globulin Test,TGT)、达亚美凝胶法(DiamedMicro-column Gel Test,DMGT)和Bioxun微柱凝胶法分别检测红细胞不规则抗体,对方法学灵敏度和特异性进行观察比较。结果:Bioxun微柱凝胶法与达亚美凝胶法的结果无显著差异(P>0.05),二者的敏感度和特异性超过盐水介质法和传统抗人球法(P<0.05)。结论:Bioxun微柱凝胶法操作快捷,敏感度高,适宜在临床输血中推广应用。     

艰难梭菌荚膜多糖的提纯和分析

本文采用改进的丙酮法制备了艰难梭菌荚膜多糖。制备的荚膜多糖纯品含荚膜多糖达72％,在Sepharope-4B凝胶层析中,该英膜多糖的分配系数(Kd)为0.77。经对流免疫电泳法鉴定,纯化后的荚膜多糖仍保持着原性,用制备的艰难梭菌荚膜多糖免疫小白鼠,经间接法ELISA检测,未见抗荚膜多糖抗体明显增高。     

成人腹泻轮状病毒的提纯及其高价免疫血清的制备

本文采用交叉免疫电泳技术,首先提纯了成人腹泻轮状病毒(Adult DiarrhoeaRotavirus简称:ADRV),并经电镜确认,用作免疫抗原,首次制备了高价兔与豚鼠抗ADRV血清和小鼠抗ADRV腹水,其特异性经交叉免疫电泳和对流免疫电泳鉴定,其效价经酶联免疫吸附试验(ELISA)检测均在1:2,000以上。     

关于双醛化被动血凝法若干问题的探讨

本文报道了探讨双醛化被动血凝法一些影响因素的结果,认为固定方法,致敏时的pH,致敬物的浓度,以及致敏红细胞的浓度,均对血凝滴度有影响。用纯化的乙型肝炎抗体致敏双醛化羊红细胞,作反向被动血凝试验,可以测出每毫升含3．73毫微克的乙型肝炎抗原。用纯化的乙型肝炎抗原致敏双醛化羊红细胞,作被动血凝法可检测,乙型肝炎抗体;在4℃保存的致敏红细胞,其滴度至少在4个半月内无明显变化。比较了对流免疫电泳、放射对流免疫电泳和反向被动血凝三种方法,用于检测病人血清中乙型肝炎抗原的敏感性和特异性。三种方法的相对敏感度相应为l：20：600。用这三种方法检测407侧患者血清样品的阳性率,相应为2．2％、11.3％和13．3％,反向被动血凝法敏感性最高,但特异性差;放射对流免疫法敏感度虽稍差,但特异性高。如果与抑制试验结合应用,反向被动血凝法是一种可以推广的简便检查方法。     

一种简便的凝胶干燥法

SDS-PAGE(聚丙烯酰胺凝胶电泳)已成为分析蛋白质核酸等样品的一种常用方法。为使染色后的凝胶长期保存,需制成干胶。下面介绍一种比已报道的更为简便易行的凝胶干燥方法。取一块如电泳用大小的玻璃扳,将二张略大于玻璃板的玻璃纸浸于脱色液中。先取一张玻璃纸平铺于玻璃板上,从一端向另一端平铺,抚平去气泡,涂一层50%甘油。将凝胶放其上,在凝胶面上也涂一层50%甘油。将另一张玻璃纸覆盖在凝胶上从一端开始慢慢平铺,抚平赶尽气泡,将大于玻璃板的玻璃纸向玻璃板     

流行性出血热病毒体外直接激活补体C_3的研究

用蔗糖梯度纯化的4株不同来源的流行性出血热(EHF)病毒(陈株、H8205、ALC96、R22)抗原,在体外直接与健康人血清于37℃作用30分钟,用交叉免疫电泳检测血清中C_3激活情况。结果陈株、H8205、R22 3株病毒抗原,可以直接激活补体C_3,电泳后呈现典型降解峰,而ALC96与正常细胞抗原则均为阴性。病毒抗原激活C_3的活性,与病毒核衣壳蛋白(Nucleocapsid Protein)的含量及毒株对乳鼠的半数致死量有关,并可被特异性抗体(IgG)所中和。     

免疫球蛋白

免疫球蛋白(immunoglobulins),是对含有抗体的三种球蛋白(γ-,β_(2A)-及β_(2M)-球蛋白)的概括语。自1937年Tiselius 提出在电泳上移动最慢的γ-球蛋白就是抗体蛋白以来,人们一直把γ-球蛋白与抗体等同起来看待。近年来由于超速离心法、层析法、凝胶扩散法、免疫电泳法等新技术的使用,发现与免疫有关的蛋白质的理化学性质及免疫学特性颇不均一(Heterogeneity)。例如,在超速离心上有7S与19S之别,在免疫电泳上亦不仅限于电泳图的末端部位,而是通过β-球蛋白一直扩展到α_2-球蛋白区域(图1)。所以正确地     

水凝胶贴片穿皮接种破伤风和白喉疫苗的临床研究

<正>穿皮免疫接种是一种非侵袭性的而且易于使用的接种方法。作者在动物模型中使用水凝胶贴片证实了穿皮免疫接种配方制剂的有效性和安全性。作者使用抗破伤风和白喉的穿皮免疫配方制剂在人体中进行了临床研究,这种穿皮免疫接种器具是水凝胶贴片(无抗原),应用到22名健康志愿者的左臂     

毕赤酵母表达的含前S1、前S2和S表位乙肝表面抗原疫苗的制备和免疫原性研究

整合了乙肝表面抗原嵌合基因SS1和SS2的毕赤酵母工程菌株GS115-SS1S2经高密度发酵培养,甲醇诱导,抗原表达量达到300~600mg/L发酵液。SS1S2抗原经细胞破碎、硅胶吸附、疏水层析和凝胶过滤纯化,纯度达99%以上,每升培养物可收获纯化抗原82mg。纯化的SS1S2抗原经Al(OH)3吸附,在NIH小鼠中进行免疫效果评价。三组NIH雌性小鼠,分别腹腔接种2.5μg、0.625μg和0.156μgSS1S2疫苗或商品化的单S疫苗。部分小鼠在30天时采血,测定各疫苗组的ED50值。在SS1S2疫苗组,前S1、前S2和S抗原的ED50值分别为0.46、0.29和0.84μg,而S疫苗组S抗原的ED50为0.99μg。另一部分小鼠分别在7天和14天时采血,考察抗体阳转率与时间的关系。SS1S2疫苗前S1、前S2抗体阳转率在7d和14d时比S抗体的阳转率为高,提示前S抗体出现的时间较早。上述结果显示SS1S2疫苗比单S疫苗具有更好的免疫原性。     

酶联免疫吸附试验(双抗体法)检测实验犬斯氏肺吸虫循环抗原的研究

近年来在肺吸虫病免疫诊断方面巳建立了不少检测抗体的方法,但这些方法作为考核疗效都不理想。本文报告以家犬作为斯氏肺吸虫病实验动物模型,应用双抗体法,观察其体内循环抗原的消长规律及治疗前后的变化,旨在探索解决临床上难于判定的药物疗效问题。检测材料及方法一、兔抗肺吸虫抗体的制备:用肺吸虫成虫抗原,免疫健康家兔获得的免疫血清(效价1:12800)经硫酸铵提取,再经Sephadex—G200柱层析纯化,用自动收集仪收集,作对流免疫电泳测定各管活性,混合浓缩以凯氏定氮测定,蛋白含量为2毫克/毫升,置4℃冰箱备用。二、酶标记抗体:取辣根过氧化物…     

重组鼠疫菌F1抗原的纯化及其在ELISA检测鼠疫免疫中的应用

从表达rF1抗原的大肠杆菌中以Superdex-200凝胶过滤层析纯化rF1抗原,电泳扫描显示纯化率>90%。SDS-PAGE及琼脂免疫双扩散结果显示纯化的rF1抗原具天然F1抗原的活性。将此纯化的rF1抗原用于间接ELISA分析免疫动物血清中抗F1抗体的水平,并与天然F1抗原相比较,证明rF1抗原优于天然F1抗原分析结果,可用于鼠疫的血清学检测。     

高等植物叶绿体和线粒体免疫亲近性的研究

以火箭免疫电泳分析表明:大豆叶绿体抗体与大豆线粒体有免疫交叉反应,同时大豆线粒体抗体与大豆叶绿体也有免疫交叉反应,但是大豆线粒体的抗体与鼠肝线粒体之间无免疫交叉反应。这说明高等植物线粒体对叶绿体比之对动物线粒体在免疫特性上有更大的亲近性,亦即高等植物线粒体和高等植物的叶绿体有更大的同源性。经火箭免疫电泳、交叉免疫电泳和线状免疫电泳进一步分析表明:菠菜偶联因子抗体(AbCF_1)和大豆线粒体、大豆叶绿体间,大豆线粒体抗体与CF_1和大豆叶绿体之间,以及大豆叶绿体的抗体(AbC)与CF_1和大豆线粒体间有免疫交叉反应,说明两种换能器之间有免疫亲近性,并分别与CF_1存在免疫亲近性。这揭示两种换能器免疫亲近性的表现是由于存在共同物质基础所致,这内在共同物质基础是偶联因子。这个结果有力地支持高等植物叶绿体和线粒体在结构和功能上以及发生上存在同源性的观点,在理论上也为两种换能器的起源和演化上存在同源性提供了一些依据。