一种新的人兽共患传染病——狐狸阴道加德纳氏菌病的研究 Ⅵ.阴道加德纳氏菌病灭活疫苗的研制

选用免疫原性优良的我国狐狸阴道加德纳氏菌主要流行型血清Ⅰ型GVF44号菌株,先后试验研制了氢氧化铝胶、蜂胶和油佐剂灭活苗。试验结果表明,铝胶苗的安全性优,免疫剂量为40亿菌/1ml,3倍免疫剂量的铝胶灭活苗接种狐狸后无任何不良反应,免疫后21d经100个ID_(50)强毒的攻击,对Ⅰ型的保护率达92％。对Ⅱ、Ⅲ型的保护率达80％以上。免疫持续期为6个月,4～10℃条件下可保存10个月。通过田间试验应用证实该疫苗安全、有效。     

一种新的人兽共患传染病——狐狸阴道加德纳氏菌病的研究 Ⅵ.阴道加德纳氏菌病灭活疫苗的研制

选用免疫原性优良的我国狐狸阴道加德纳氏菌主要流行型血清Ⅰ型GVF44号菌株,先后试验研制了氢氧化铝胶、蜂胶和油佐剂灭活苗。试验结果表明,铝胶苗的安全性优,免疫剂量为40亿菌/1ml,3倍免疫剂量的铝胶灭活苗接种狐狸后无任何不良反应,免疫后21d经100个ID_(50)强毒的攻击,对Ⅰ型的保护率达92％。对Ⅱ、Ⅲ型的保护率达80％以上。免疫持续期为6个月,4～10℃条件下可保存10个月。通过田间试验应用证实该疫苗安全、有效。     

新的人兽共患传染病——狐狸阴道加德纳氏菌病的研究 Ⅳ.Dot-ELISA检测狐狸阴道加德纳氏菌病血清抗体的研究

应用建立的Dot-ELISA方法检测了192份狐狸阴道加德纳氏菌人工感染狐、疫苗免疫狐和菌检阳性狐血清,结果187/192呈阳性反应,检出率为97.3%. 阻断和交叉试验证实,本方法具有特异性.敏感度为平板凝集试验(PAT)的28.1倍,为微量凝集试验(MAT)的5.5倍.重复性良好,与PAT、MAT的阳性符合率为100%.     

新的人兽共患传染病——狐狸阴道加德纳氏菌病的研究 Ⅳ.Dot-ELISA检测狐狸阴道加德纳氏菌病血清抗体的研究

应用建立的Dot-ELISA方法检测了192份狐狸阴道加德纳氏菌人工感染狐、疫苗免疫狐和菌检阳性狐血清,结果187/192呈阳性反应,检出率为97.3%. 阻断和交叉试验证实,本方法具有特异性.敏感度为平板凝集试验(PAT)的28.1倍,为微量凝集试验(MAT)的5.5倍.重复性良好,与PAT、MAT的阳性符合率为100%.     

一种新的人兽共患传染病——狐阴道加德纳氏菌病的研究 V.狐阴道加德纳氏菌菌株的血清分型研究

将我国6个省(区)、13个主要狐场分离的145株狐阴道加德纳氏菌,进行抗原性、免疫原性测定,从每场分离菌中选出1～3个优良株进行血清型研究。凝集素交叉吸收试验证实,选出的26株菌可划分为3个血清型,以此3个血清型代表株制备因子血清,余下119株菌中,108株在所划分的3个血清型内,11株未能定型。在3个血清型中,Ⅰ型菌株数占定型菌数的79.1％,因而确定,Ⅰ型菌是国内狐场狐阴道加德纳氏菌主要流行型。试验还明确了从貉分离的5株、水貂分离的4株、犬分离的2株阴道加德纳氏菌也属于血清Ⅰ型。将3个血清型代表菌株制成超声抗原,经免疫琼脂扩散试验证实,各型抗原与同型或异型免疫血清均可形成一条明显的融合沉淀线,表明各型菌间有共同抗原成分。同型菌免疫琼脂扩散试验表明,各株菌形成的沉淀线完全融合,从而证实了血清分型的可靠性。     

一种新的人兽共患传染病——狐阴道加德纳氏菌病的研究 V.狐阴道加德纳氏菌菌株的血清分型研究

将我国6个省(区)、13个主要狐场分离的145株狐阴道加德纳氏菌,进行抗原性、免疫原性测定,从每场分离菌中选出1～3个优良株进行血清型研究。凝集素交叉吸收试验证实,选出的26株菌可划分为3个血清型,以此3个血清型代表株制备因子血清,余下119株菌中,108株在所划分的3个血清型内,11株未能定型。在3个血清型中,Ⅰ型菌株数占定型菌数的79.1％,因而确定,Ⅰ型菌是国内狐场狐阴道加德纳氏菌主要流行型。试验还明确了从貉分离的5株、水貂分离的4株、犬分离的2株阴道加德纳氏菌也属于血清Ⅰ型。将3个血清型代表菌株制成超声抗原,经免疫琼脂扩散试验证实,各型抗原与同型或异型免疫血清均可形成一条明显的融合沉淀线,表明各型菌间有共同抗原成分。同型菌免疫琼脂扩散试验表明,各株菌形成的沉淀线完全融合,从而证实了血清分型的可靠性。     

一种新的人兽共患传染病——狐阴道加德纳氏菌病的研究：V.狐阴道…

将我国６个省（区）、１３个主要狐场分离的１４５株狐阴道加德纳氏菌,进行抗原性、免疫原性测定,从每场分离菌中选出１￣３个优良株进行血清型研究。凝集素交叉吸收试验证实,选出的２６株菌可划分为３个血清型,以此３个血清型代表株制备因子血清,余下１１９株菌中,１０８株在所划分的３个血清型内,１１株未能定型。在３个血清型中,Ｉ型菌株数占定型菌数的７９．１％,因而确定,Ｉ型菌是国内狐场狐阴道加德纳氏菌主要流行型     

阴道加德纳菌生物型与细菌性阴道病的关系

对１２０例细菌性阴道病患者和９０例正常对照组进行阴道加德纳菌的分离鉴定,同时采用Ｐｉｏｔ分型法对分离出的９３株Ｇｖ进行生物分型,结果显示ＢＶ患者Ｇｖ的检出率（５９．２％）明显高于正常对照组（２４．４％）,Ｐ〈０．０１。９３株Ｇｖ中,８个生物型全检测到,其中１型２３．７％,２型１８．３％,４型３２．３％,６型１０．８％,３型和５型均为５．４％,７型和８型为２．２％。ＢＶ患者主要为１、２、４型,显著高于正常对照组（８７．３％和３１．８％,Ｐ〈０．０１）。     

一种新的人兽共患传染病—狐狸阴道加德纳氏病的研究

对国内主要狐场狐狸阴道加德纳氏菌病的流行病学调查表明,银黑狐、北极狐、赤狐及彩狐均对本病易感染,主要通过交配传染,病狐在本病流行中起主要作用。各狐场感染率为０．９－２１．９％,导致注率１．５－１４．７％,空怀率３．２－４７．５％,提示了本病的严重危害性。通过血清学和病原分离证实,本病可感染饲养管理人员,为人兽共患病,狐狸外,貉、水貂及犬也可感染。实验动物中小白鼠、小白鼠、地鼠、豚鼠和家兔对本病不感     

中药安菌凝胶对狐狸阴道加德纳菌病的实验研究

通过对狐狸加德纳菌病（ＧＶＦ）阴道菌群分析、阴道光镜和电镜下组织学结构观察认定,ＧＶＦ与人类细菌性道病（ＢＶ）同属菌群失调所致,并以此为动物模型,采用黄芪、苦参、蛇床子、甘草四味中药以新型高分子材料卡波姆（Ｃａｒｂｏｍｅｒ）为赋形剂制成凝胶,对其进行体外抑菌实验和不同组方的疗效比较,结果显示：Ｂ组方中药制剂（安菌凝胶）治疗后的疗效最好,关在细胞水平上中药作为微生态调节剂的机制进行了初步探讨。     

一种新的人兽共患传染病——狐狸阴道加德纳氏菌病的研究——Ⅱ.病原菌的鉴定

对从狐狸流产胎儿和阴道分泌物中分离得到的16株菌进行了细胞形态、细胞壁显微结构的观察和生化、对人血红细胞具溶血性、DNA的G+C含量等测定。根据它们细胞呈革兰氏阳性到可变,形态从球杆到杆状的多形态性,接触酶和氧化酶均阴性,葡萄糖的O/F测定为发酵产酸,主要产物有乙酸和乳酸等主要产物,归为阴道加德纳氏菌,但由于它们对营养要求不苛求,生长速度快和对氧要求低等,又不同于人体来源的加德纳氏菌。因此,将这群菌另定为一个亚种——阴道加德纳氏菌狐狸亚种(Gardnerella vaginalis subsp.fox)。模式株为U80。     

一种新的人兽共患传染病——狐狸阴道加德纳氏菌病的研究——Ⅰ.病原菌分离与人工感染试验

于国内外首次报道采用改良兔血胰(月示)琼脂培养基,从狐体及其流产胎儿脏器中,分离得到阴道加德纳氏菌共145株。其中从流产胎儿脏器分离得到26株,分离率为92.86％。从流产空怀狐阴道分泌物中分离得到118株,分离率34.01％。从阳性取皮狐鼠蹊淋巴结分离得到1株,分离率2％。血液中未分离到本菌。通过对病原菌的分离,揭示了该菌在狐体内的存在部位,优选出最佳的分离途径、时机与方法。人工感染试验结果证实了本菌的致病性。     

一种新的人兽共患传染病——狐狸阴道加德纳氏菌病的研究 Ⅲ.流行病学调查

对国内主要狐场狐狸阴道加德纳氏菌病的流行病学调查表明,银黑狐、北极狐、赤狐及彩狐均对本病易感染,主要通过交配传染,病狐在本病流行中起主要作用.各狐场感染率为0.9—21.9%,导致流产率1.5—14.7%,空怀率3.2—47.5%,揭示了本病的严重危害性.通过血清学和病原分离证实,本病可感染饲养管理人员,为人兽共患病.除狐狸外,貉、水貂及犬也可感染.实验动物中小白鼠、大白鼠、地鼠、豚鼠和家兔对本病不感染.     

一种新的人兽共患传染病——狐狸阴道加德纳氏菌病的研究 Ⅲ.流行病学调查

对国内主要狐场狐狸阴道加德纳氏菌病的流行病学调查表明,银黑狐、北极狐、赤狐及彩狐均对本病易感染,主要通过交配传染,病狐在本病流行中起主要作用.各狐场感染率为0.9—21.9%,导致流产率1.5—14.7%,空怀率3.2—47.5%,揭示了本病的严重危害性.通过血清学和病原分离证实,本病可感染饲养管理人员,为人兽共患病.除狐狸外,貉、水貂及犬也可感染.实验动物中小白鼠、大白鼠、地鼠、豚鼠和家兔对本病不感染.     

一种新的人兽共患传染病——狐狸阴道加德纳氏菌病的研究——Ⅰ.病原菌分离与人工感染试验

于国内外首次报道采用改良兔血胰(月示)琼脂培养基,从狐体及其流产胎儿脏器中,分离得到阴道加德纳氏菌共145株。其中从流产胎儿脏器分离得到26株,分离率为92.86％。从流产空怀狐阴道分泌物中分离得到118株,分离率34.01％。从阳性取皮狐鼠蹊淋巴结分离得到1株,分离率2％。血液中未分离到本菌。通过对病原菌的分离,揭示了该菌在狐体内的存在部位,优选出最佳的分离途径、时机与方法。人工感染试验结果证实了本菌的致病性。     

一种新的人兽共患传染病——狐狸阴道加德纳氏菌病的研究——Ⅱ.病原菌的鉴定

对从狐狸流产胎儿和阴道分泌物中分离得到的16株菌进行了细胞形态、细胞壁显微结构的观察和生化、对人血红细胞具溶血性、DNA的G+C含量等测定。根据它们细胞呈革兰氏阳性到可变,形态从球杆到杆状的多形态性,接触酶和氧化酶均阴性,葡萄糖的O/F测定为发酵产酸,主要产物有乙酸和乳酸等主要产物,归为阴道加德纳氏菌,但由于它们对营养要求不苛求,生长速度快和对氧要求低等,又不同于人体来源的加德纳氏菌。因此,将这群菌另定为一个亚种——阴道加德纳氏菌狐狸亚种(Gardnerella vaginalis subsp.fox)。模式株为U80。     

少年人群接种乙肝疫苗后七年随访观察

对７９名ＨＢＶ标志阴性少年人群,以乙肝疫苗１０μｇ×３的免疫剂量和０、１、２月的免疫程序进行接种,对其抗－ＨＢｓ免疫应答和临床保护效果作了为期７年的定人随访。结果表明,抗－ＨＢｓ阳转率在免后三个月时为１００％,均值为３０８４ＭＩＵ／ｍｌ。至免后８４个月时疫苗接受者中仍有５５．７％的抗－ＨＢｓ水平≥１０ＭＩＵ／ｍｌ。６例检出抗－ＨＢｓ,其中５例的抗－ＨＢｓ持续处于高水平。全部观察对象无一例检出ＨＢｓＡｇ或发生临床肝炎。少年接种乙肝血源疫苗至少７年内可具有保护性抗体。故在此期内不需加强免疫。     

两种不同保护剂冻干的仔猪副伤寒活疫苗质量比较

【目的】系统比较两种不同保护剂冻干的仔猪副伤寒活疫苗(耐热苗和常规苗)质量指标,为科学评价两种疫苗质量提供参考。【方法】制备耐热苗和常规苗各3批,分别进行物理性状、纯粹性、活菌计数、安全性、剩余水分、真空度和保存期等参数测定和比较,同时比较冻干前后的活菌存活率及耐老化性能。任选耐热苗与常规苗1批,按3×109 CFU分别口服与肌肉注射仔猪各5头,设相同条件下不免疫对照5头,30 d后静脉注射致死量猪霍乱沙门氏菌,临床观察30 d后评估疫苗的效力。【结果】耐热苗及常规苗的物理性状、纯粹性、活菌计数、安全性、剩余水分、真空度均符合现行《中国兽药典》的要求。3批耐热苗冻干菌存活率分别为88.2%、83.1%和86.4%,耐老化试验后的活菌存活率为83.6%、82.9%和88.8%;然而3批常规苗冻干菌存活率分别为52.3%、56.2%和61.4%,耐老化活菌存活率分别为58.5%、60.2%和54.7%。经37°C、7 d耐老化试验结果显示,耐热苗物理性状良好,而常规苗原有团块表面凹陷1/4-1/2。保存期结果表明耐热苗4°C有效期可达24个月,常规苗仅为9个月。仔猪免疫攻毒结果表明,耐热苗肌肉注射及口服免疫均达100%(5/5)保护;常规苗肌肉注射达80%(4/5)保护,口服达100%(5/5)保护,不免疫对照0保护(5/5死亡)。【结论】耐热苗具有较高的冻干菌存活率和良好的耐老化性能,4°C可长期保存且不影响其免疫效力。     

O139型霍乱菌苗人群副反应观察报告

在广西田阳县中学生中,分６组共６９７人进行了Ｏ１３９型霍乱菌苗与Ｏ１群霍乱菌苗的双盲、有对照的人体反应现场观察。结果表明,不加铝佐剂的Ｏ１３９型霍乱菌苗及Ｏ１群霍乱菌苗,不论是低剂量组（两剂全程接种４５亿菌体）抑或常剂量组（全程接种９０亿）接种人群均可产生１０～２５％的体温呈轻度升高的弱反应,并且同种菌苗的两剂量组的反应率无显著差异;第一剂接种的反应率（１９～２５％）较第二剂接种的（１０～１５％）高,Ｐ＜０．０５;接种局部反应轻微,只有个别受试者出现直径小于１５ｍｍ的硬结;加佐剂的Ｏ１群吸附霍乱菌苗的反应较其它组强。结果证实,甲醛灭活的Ｏ１３９型霍乱菌苗和Ｏ１群霍乱菌苗是安全的,接种人体对之具有良好的耐受性     

阴道加德纳菌检出率及唾液酸酶A基因携带与细菌性阴道病的关系

目的探究阴道加德纳菌(Gardnerella vaginalis)检出率及唾液酸酶A基因携带与细菌性阴道病(BV)的关系。方法选择2017年1月至2019年8月确诊的BV患者82例作为BV组,并随机选择同时期健康女性82例作为健康组,比较2组人群G. vaginalis检出率和唾液酸酶A基因携带情况,相关统计学资料分析其对BV发生的影响。结果BV组人群G. vaginalis阳性检出率高于健康组(χ²=11.511,P<0.05)。BV组人群共检出G. vaginalis 1、2、3、4、5、6和7型,其中2型占比最高;BV组人群G. vaginalis 2、3、4型占比率高于健康组(χ²=4.148,17.009,9.973,均P<0.05)。BV组人群唾液酸酶A基因携带率高于健康组(χ²=39.234,P<0.05)。较健康组人群,BV组PCR DGGE宽度更窄,肠道菌群条带数少(t=9.217,P<0.05)。结论G. vaginalis检出率和唾液酸酶A基因携带情况与BV发生相关,有待成为相关生物学治疗靶点。