肌动蛋白存在于车蝗精母细胞核和染色体中

以兔抗肌动蛋白抗体为一抗,FITC偶联的羊抗兔IgG抗体为二抗进行间接免疫荧光实验,观察到车蝗（Oedaleus asiaticus）精母细胞核及减数分裂Ⅰ细线期、终变期、减数分裂Ⅱ中期染色体上均发出明亮的黄经发色荧光,说明其中含有肌动蛋白。本文结果证明肌动蛋白是车蝗减数分裂细胞核和染色体的组成成分。     

大麦细胞核骨架及染色体骨架肌动蛋白免疫细胞化学定位

以大麦（Ｈｏｒｄｅｕｍ ｖｕｌｇａｒｅ）根尖分生细胞为实验材料,采用免疫荧光标记技术证明了大麦细胞骨架及染色骨架中存在骨动蛋白;并进一步采用免疫电镜技术在原位水平探讨了肌动蛋白在细胞核及染色体中的分布规律。还对肌动蛋白在细胞核及染色体中的功能进行了讨论。     

肌动蛋白是多头绒泡菌细胞核骨架和染色体骨架的组成成分

自多头绒泡菌(Physarum polycephalum Schw.)的原质团中分离细胞核和染色体,分别经DNaseⅠ消化和2 mol/L NaCl抽提后制备成细胞核骨架和染色体骨架。以抗肌动蛋白的抗体作一抗、FITC标记的羊抗兔IgG抗体作二抗进行的间接免疫荧光实验结果显示,细胞核骨架和染色体骨架都分别与抗体呈阳性反应。间接免疫斑点印迹实验结果进一步证实,细胞核骨架和染色体骨架的蛋白质成分中存在与肌动蛋白抗体呈阳性显色反应的抗原。以抗肌动蛋白的抗体作一抗、金颗粒标记的蛋白A作二抗的间接免疫电镜实验结果表明,在实验组间期细胞核的核仁、集缩染色质和核基质以及中期染色体上都有很多金颗粒分布。上述结果证明,肌动蛋白是多头绒泡菌细胞核和染色体及其骨架的组成成分。     

紫鸭跖草花粉母细胞减数分裂细胞核和染色体含有F—肌动蛋白

肌动蛋白间接免疫荧光标记实验观察到紫鸭跖草花粉母细胞减数分裂前期Ⅰ细胞核,中期┘染色体,二分体和四分体均发现较明亮的黄绿色荧光,说明其中含有肌动蛋白。经ＴＲＩＴ－Ｃ鬼等环肽荧光标记后,减数分裂前Ⅰ细胞核,二分枝及中期Ⅰ染色体均发现较明亮的红色荧光;ＣＤ处理后细胞核和染色体的荧光明显减弱或没有荧光,说明其中存在Ｆ－肌动蛋白。     

XCAP-C类似蛋白存在于蒜根端细胞核和染色体中

以抗XCAP-C抗体为探针,用SDS-PAGE、免疫印迹、免疫荧光和免疫电镜技术,对蒜(Allium sativa L.)根端细胞核、核骨架、染色体和染色体骨架进行研究.SDS-PAGE和免疫印迹结果表明:细胞核中的165kD多肽是XCAP-C类似蛋白,在核骨架中未检测到XCAP-C类似蛋白.免疫荧光和免疫电镜结果表明:蒜细胞核、染色体和染色体骨架中含有XCAP-C类似蛋白,该蛋白位于细胞核中的染色质区域,但核骨架不含有XCAP-C类似蛋白.     

F—肌动蛋白是蒜根端分生组织细胞核和染色体的组成成分

以兔抗鸡肌动蛋白抗体为一抗、ＦＩＴＣ羊抗兔ＩｇＧ抗体为二抗进行间接免疫荧光标记实验,观察到蒜（ＡｌｉｕｍｓａｔｉｖｕｍＬ．）根端分生组织细胞核和染色体均发出明亮的黄绿色荧光,说明其中含有肌动蛋白。经ＴＲＩＴＣ鬼笔环肽标记后,完整的间期细胞、游离的间期细胞核、前期和中期染色体以及末期子细胞核均发出较强的红色荧光,而固定前用细胞松弛素Ｄ处理的根端分生组织细胞的荧光明显减弱或没有荧光,这些结果说明细胞核和染色体中存在着Ｆ肌动蛋白。抗肌动蛋白抗体和鬼笔环肽双标记实验结果指出,同一细胞核和染色体,在ＦＩＴＣ的激发光波长下发出代表总肌动蛋白的黄绿色的ＦＩＴＣ型荧光,在ＴＲＩＴＣ的激发光波长下则发出代表Ｆ肌动蛋白的红色的ＴＲＩＴＣ型荧光,两类荧光的分布是一致的。上述结果进一步证明Ｆ肌动蛋白是细胞核和染色体的组成成分,并说明Ｆ肌动蛋白可能是细胞核和染色体中肌动蛋白的主要存在方式。     

XCAP—C类似蛋白存在于蒜根端细胞核和染色体中

以抗XCAP_C抗体为探针 ,用SDS_PAGE、免疫印迹、免疫荧光和免疫电镜技术 ,对蒜 (AlliumsativaL .)根端细胞核、核骨架、染色体和染色体骨架进行研究。SDS_PAGE和免疫印迹结果表明 :细胞核中的 16 5kD多肽是XCAP_C类似蛋白 ,在核骨架中未检测到XCAP_C类似蛋白。免疫荧光和免疫电镜结果表明 :蒜细胞核、染色体和染色体骨架中含有XCAP_C类似蛋白 ,该蛋白位于细胞核中的染色质区域 ,但核骨架不含有XCAP_C类似蛋白。     

大麦细胞核及染色体肌球蛋白免疫细胞化学定位

对去除DNA、组蛋白和大部分非组蛋白的大麦(Hordeum vulgare)细胞核和染色体间接免疫荧光标记实验结果表明:抗肌球蛋白抗体的荧光标记弥散分布在整个细胞核和染色体上;进一步应用免疫胶体金技术分析肌球蛋白在细胞核和染色体的分布情况,发现在染色体中散布着大量的胶体金颗粒;间期细胞核中胶体金颗粒主要分布在核仁和染色质中。上述实验结果表明:肌球蛋白是细胞核及染色体非组蛋白组成成分。本文还对肌球蛋白在细胞核和染色体中的分布规律进行了讨论。     

蚕豆根端细胞核中微核仁的研究

以蚕豆(Vicia faba)根端分生组织细胞为材料研究了微核仁的超微结构和细胞化学特点。结果表明;微核仁是直径0.3—0.5μm 的卵圆形或球形结构。常规染色时,微核仁与集缩染色质的电子密度相仿,但两者之间在结构上没有任何联系。细胞化学研究指出,微核仁含有 RNA 和蛋白质,其结构成分主要是与核仁颗粒组分十分相似的 RNP 颗粒。报道了植物细胞核中微核仁发生于核仁的过程并对微核仁的本质和功能进行了讨论。     

蚕豆(Vicia faba)M染色体DNA复制顺序的研究

真核细胞中,染色体DNA由许多复制子组成。一个复制子所需的复制时间短于S期时长,这意味着染色体DNA的各个复制子并非同时复制,而是按某种先后次序进行复制的。许多学者以人和动物细胞为材料进行了有关染色体DNA复制顺序的研究,但是关于植物染色体DNA复制顺序的研究报道还不很多。植物根端分生组织细胞在周期时长方面差异很大。Evans曾经研究过蚕豆根端细胞染     

蚕豆染色体鞘的免疫荧光显示和其抗原的分析

本文应用本实验室发现的着染HeLa细胞染色体鞘的一例红斑狼疮病人抗血清对分离出的蚕豆染色体及核和蚕豆根尖生长点压片进行了免疫荧光染色,从两种不同制片方法得到的染色体上均染出了清晰的染色体鞘免疫荧光。之后又用此血清对蚕豆三天龄幼苗中(去除子叶、种皮)提取出的总蛋白进行Western印迹分析,获得的带型显示分子量为41K,39K,18K,17K的蛋白质可与抗血清中的抗体特异性结合,另有分子量为87K,38K,35K,34K,32K的蛋白质也可能具有与抗体特异性结合的能力。     

蚕豆花粉母细胞染色体畸变同染色质胞间转移的关系

采用压碎、石蜡切片及植物染色体分带技术观察蚕豆花粉母细胞减数分裂过程发现:1.蚕豆花粉母细胞减数分裂的凝线期也出现染色质胞间转移现象;2.在8.08%的花粉母细胞内,染色体偏离正常的数目(n=6);3.染色体结构也有显著改变,其中包括染色体断裂、桥和长度的增减;4.出现双核和无核的花粉母细胞。大量证据表明,这些畸变现象同凝线期的染色质胞间转移有关。     

Actin is Immunolocalized in the Nuclei and Chromosomes of Vicia faba

Meristematic cells of Vicia faba L. were labeled with rabbit anti-actin antibody and FITC-conjugated goat anti-rabbit lgG antibody and observed with fluorescence microscopy. Both the nuclei and chromosomes sent forth distinctive fluorescence, indicating that actin is present in the nuclei and chromosomes. Sections were reacted with the anti-actin antibody and protein A-colloidal gold and observed with transmission electron microscopy. Gold particles were found over the whole nuclei, and a lot of particles were concentrated in condensed chromatin areas and nucleoli, confirming the observations with the fluorescence microscopy. V. faba nuclei and chromosomes were treated with DNase Ⅰ and 2 mol/L NaC1, and DNA and histone-depleted nuclei and chromosomes were obtained. Indirect immunofluorescence tests showed that the DNA and histone-depleted nuclei and chromosomes reacted positively with the anti-actin antibody. These results demonstrated that actin exists not only in intact nuclei and chromosomes but also in DNA and histone-depleted nuclei and chromosomes of V. faba. In addition, the authors' results indicate that tropomyosin is present in the nuclei and chromosomes of V. faba. Presence of actin in nuclei and chromosomes as well as in DNA and histone-depleted nuclei and chromosomes of higher plants is discussed.     

MAD2蛋白在蚕豆细胞周期中的同源定位

细胞周期是一个高度有序的过程,其运行过程受到多个检验点(checkpoint)的严格监控.MAD2是动物细胞纺锤体检验点(spindle checkpoint)中一种重要的蛋白。我们利用免疫印记法从蚕豆组织中检测到一种MAD2的同源蛋白,该蛋白的分子量在26KD左右,其亚细胞分布方式与动物细胞大致相同,都随细胞周期的进行而变化:在间期细胞中,MAD2分布于整个细胞中,并且在核膜外侧有优先聚集;在有丝分裂前期细胞中,MAD2在核膜破裂后开始在动粒处聚集;到早中期(prometaphase),MAD2定位于动粒;随着微管的延伸,MAD2逐渐减少直至消失,在中期,晚中期及后期细胞中,动粒处已无MAD2的分布。     

蚕豆气孔运动中脱落酸对周质微管排列的影响

气孔由一对保卫细胞组成,且其壁具有不均一加厚的特性(图1),并能敏感地感受内、外环境信号而调节K~ 等渗透调节物质进出保卫细胞引起膨压变化,从而控制气孔的大小、调节植物体与外界环境所进行的水分和气体交换。进一步研究发现,以K~ 为主的渗透调节物质引起的膨压变化受到许多因子的调控,如ABA可以中介Ca~(2 )作用抑制K~ 内向通道或直接作用于K~ 外向通道使K~ 外流,但ABA影响K~ 通道的信号转导途径仍是一个有待进一步探索的课题。大量研究表明,细胞运动与细胞骨架有关。如丝瓜卷须的卷曲运动、胞质环流、花粉管萌发与伸长、含羞草的感震性运动,以及细胞器的运动等都与细胞骨架有关。我们用植物微管特异性解聚剂——甲基胺草磷(APM)以及微丝专一性抑制剂——细胞松驰素B(CB)预处理蚕豆开放或关闭气孔后可明显地抑制Ca~(2 )、ABA、光、K~ 等引起的气孔运动,表明微管、微丝可能参与调节气孔的运动过程。Couot-Gastelier和Louguet经电镜观察证     

蚕豆保卫细胞原生质体质膜ABA结合蛋白的理化特性

以蚕豆(Vicia faba L.)保卫细胞原生质体为材料,证明在其质膜外侧存在着对ABA高亲和力的结合蛋白。这种蛋白与ABA作用的最适pH为6.5;在25℃时.其特异结合比高于0℃时的特异结合比;在温育30min时即达到其最大结合。它与ABA作用的解离常数为2.0×10~(-8)mol/L,每个原生质体上大约有3.2×10~6个结合位点。该结合蛋白内部具有维持其功能所必须的二硫键,而且其功能的发挥要求介质中有一定浓度的Ca~(2 )的存在。     

镉离子对蚕豆根尖细胞分裂的影响

蚕豆根尖经不同浓度(0.1—10.0ppm)的CdCl_2溶液处理24～48小时后,根的生长受到不同程度的抑制.对根尖细胞分裂的毒害则表现为低毒的C-有丝分裂和高毒的染色体断裂、粘连和液化.此外,对Cd~( )的毒害机理进行了简略讨论.