家蝇幼虫抗菌活性物质相关基因表达情况

研究了家蝇幼虫体内抗菌活性物质相关基因诱导后的表达情况。选择30％H2O2诱导家蝇幼虫90min,应用半定量RT—PCR的方法,以组成型表达的β-actin基因作为内参照,对抗菌活性物质基因cecropin,defensin,dipteri．cin,attacin和溶菌酶基因lysozyme在诱导后的表达情况进行了初步探索。Cecropin、defensin和attacin基因在家蝇幼虫体内都是诱导表达型基因,分别在诱导后2h和6h达到活性高峰。而diptericin和lysozyme两个基因表达量一直较高,在诱导后6h表达量达到最大水平,随后开始下降,到诱导后36h时还能检测到基因有较高水平的表达。     

家蝇幼虫抗菌物质提取方法的比较

为了探索家蝇幼虫抗菌物质的提取方法,本文采用醋酸提取蝇蛆的抗菌物质,通过加热去除其中不稳定的蛋白成分,再通过切向流超滤和直接冻干法获得复合抗菌物质,测定其中可溶蛋白的含量、抗菌组分的抗菌活性及组成的差异。结果表明,和冻干法相比,利用切向流超滤法可以显著提高抗菌复合物质中可溶蛋白的含量。利用切向流超滤浓缩制备的抗菌物质和直接冻干制备的抗菌物质经过凝胶过滤层析及抗菌活性分析表明,非蛋白组分(A20-A21和B6-B12)比蛋白组分(A1-A2、A10-A13、B1-B2)抗菌谱广。电泳分析蛋白组分表明,其抗菌蛋白组分处在6 k Da-35 k Da的某些蛋白组分中。     

家蝇抗菌物质的诱导

针刺损伤诱导的家蝇三龄幼虫免疫血淋巴对动、植物病原菌有广谱的抗菌活性,同时,未经诱导的家蝇幼虫也具有抗菌活性。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳分析表明：外源诱导能增强原有抗菌物质的表达量,并能激活新的蛋白产生。家蝇免疫血淋巴中的抗菌物质具热稳定性和耐冷冻贮藏的特性     

家蝇幼虫抗菌肽的抗菌谱及其与抗生素的协同作用研究

研究3种家蝇幼虫抗菌肽的抗菌谱以及每种抗菌肽的最小抑菌浓度(MIC),初步探讨3种抗菌肽分别与青霉素、链霉素相结合后对抗菌活性的影响,并采用分级抑制浓度指数(Fractionalinhibitoryconcentrationindex,FIC)来定量检测抗菌肽与抗生素之间的抗菌作用关系。结果表明3种抗菌肽的抗菌谱不同,不同的抗菌肽对不同病原菌的抗菌活性不同。3种抗菌肽与链霉素、青霉素之间的抗菌协同关系因细菌种类不同。抗菌肽与抗生素之间并不是都存在协同关系,有些不相关,甚至表现为对抗关系,表明抗菌肽、抗生素与细菌三者的相互作用关系非常复杂。     

家蝇幼虫抗菌相关蛋白/多肽的诱导及抗菌活性分析

对家蝇Musca domestica 3龄幼虫进行针刺、带菌针刺、热激和超声4种处理,并于处理后不同时间分别收集提取家蝇幼虫体内耐热总蛋白,比浊法测定其抗菌活性,经逐步回归分析确定抗菌相关蛋白/多肽。结果表明,4种处理均能诱导家蝇幼虫产生抗菌物质,其中表观分子量为22 kD的蛋白对藤黄微球菌和大肠杆菌均有抗菌作用,50 kD,13 kD,26 kD,7 kD的蛋白抗菌活性具有专一性。还发现一种37 kD的蛋白对抗菌活性有负作用,推测它可能是促进细胞生长的物质。     

家蝇幼虫体内一种抗菌蛋白的分离纯化

30%H2O2诱导家蝇幼虫90min,继续饲喂24h后利用硫酸铵分级盐析、Sephadex G-25 和Sephadex G-75两步凝胶过滤、CM-Sepharose Fast Flow弱阳离子交换的纯化方法,得到一种电泳纯的抗菌蛋白,经过VDS凝胶扫描得到其分子量为28kDa,命名为AP28。抑菌活性分析表明,AP28对实验中涉及的大多数革兰氏阳性菌和阴性菌都有明显的抑制作用。     

家蝇幼虫抗菌肽MDL-2的电泳制备及其抗菌作用机理

通过体壁损伤和感染大肠杆菌同时诱导家蝇Musca domestica幼虫产生免疫血淋巴,经沸水浴热变性,透析浓缩处理,然后经Tricine-SDS-PAGE得到诱导前后家蝇幼虫血淋巴中蛋白差异表达条带,将该条带电泳回收,复性,抗菌活性检测等步骤,分离纯化得到抗菌肽MDL-2,其分子中富含Pro,Gly和碱性氨基酸,分子量为11 kD,对革兰氏阴性菌Escherichia coli和革兰氏阳性菌Staphylococcus aureus均有较强抗性,因此电泳制备抗菌肽的方法为此类生物微量活性物质的分离纯化提供一种行之有效的途径。通过MDL-2对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌通透性和透射电镜超微结构的图谱分析,MDL-2首先与细菌的外膜结合,然后抗菌肽形成柔性的两亲空间构象与细胞内膜作用,扰乱了膜脂分子的排列,改变了细胞膜的通透性,影响细胞膜的结构和功能,细胞膜上形成了许多孔道,同时造成细胞内的原生质扩散,并从孔道向胞外渗漏,影响了细菌的代谢系统,最终引起细胞膜破碎,细胞完全解体,从而起到抑菌杀菌作用。     

家蝇抗菌肽的研究与应用

近年来,对家蝇Muscadomestica体内外抗菌活性物质的研究受到人们广泛的关注,其中研究较多的是抗菌肽。家蝇抗菌肽对细菌、真菌、肿瘤癌细胞和病毒等具有生物活性,可通过针刺、带菌针刺、超声波、放射性射线、高频电磁场和生理盐水等方法诱导增量产生,能耐极端的温度和pH值的溶液,在高浓度盐溶液中也很稳定。文章还对家蝇抗菌肽的结构特点、作用机理与分子生物学研究做了概述,同时对家蝇抗菌肽的应用前景进行了讨论。     

广东种子植物区系科的组成及其特点

广东共有种子植物２１９科１４３４属４９８６种．本文主要对其科的组成进行了统计和分析,结果表明广东植物区系具有明显的过渡性特点,但在北回归线两侧地区的植物区系仍是一整体．且由于中国特有科、东亚特有科、亚洲特有科、东亚和北美间断分布科,以及各种区系和植被表征科的存在表明广东植物区系是东亚植物区的一个组成部分。     

新型脱氢松香基季铵盐类抗菌剂的合成、结构表征及抗菌活性研究

以天然松香酸衍生物——脱氢松香胺为原料,合成了6种脱氢松香基季铵盐。对合成化合物结构进行了元素分析、紫外、红外光谱及核磁共振谱鉴定。药理实验结果表明,合成产品对金黄色葡萄球菌及大肠杆菌具有一定抗菌活性,其最低抑菌浓度分别为7. 18～31. 25μ/ml和250～500μg/ml。同时对产品结构对抗菌活性影响也进行了比较研究。     

藿香和广藿香挥发油的抗皮肤细菌活性与化学成分的研究

研究了4种来源于植物藿香（Agastacherugosa）和广藿香（Pogostemoncablin）挥发油对16种皮肤细菌的体外抑制作用,发现中国广藿香油的活性最强,它可以完全抑制大部分皮肤细菌的生长繁殖,尤其是与人体腋臭和脚气有关的负责菌,MIC小于400μl/L。同样情况下,藿香油的抗性很弱或无。通过GC—MS分析发现,藿香油的主要成分为薄荷酮类化合物,而广藿香油的主要成分是广藿香醇、异愈创木烯和广藿香烯,挥发油抗细菌活性与其主要成分含量有关。     

PHYSICOCHEMICAL CHARACTERISTICS AND ANTIOXIDANT EFFICACY OF CHITOSAN FROM THE INTERNAL SHELL OF SPINELESS CUTTLEFISH Sepiella inermis

Cuttlefish chitosan was extracted from the cuttlebone of Sepiella inermis by demineralization and deproteinization and produced by deacetylation, and its physical and chemical parameters were also compared with that of commercial chitosan. Ash, moisture, and mineral and metal content of the chitosan was estimated by adopting standard methodologies. The rate of deacetylation was calculated as 79.64% by potentiometric titration. Through viscometry and gel permeation chromatography, the molecular weight of chitosan was found to be significantly lower than that of the commercial chitosan. Optical activity was found to be levorotatory. The structure of the chitosan was elucidated with spectral techniques such as Fourier-transform infrared (FT-IR) and nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy. Cuttlefish chitosan showed a melting endothermic peak at 117.32°C. The x-ray diffraction (XRD) pattern of chitosan and standard chitosan exhibited the same crystalline peaks. Through scanning electron microscopy (SEM) the fine structure of chitosan was studied. The binding capacity (water and fat) of cuttlefish chitosan was found to be significantly higher than that of the commercial chitosan. The antioxidant efficacy of chitosan was determined through the conjugated diene method, scavenging ability on DPPH radicals, reducing power, and chelating ability on ferrous ions. This study has brought out the importance of shell as a potential source for obtaining another natural antioxidant.     

乙酰胆碱酯酶敏感性的变化与家蝇抗药性的关系

结合抗性机理, 对四个家蝇(Musca domestica vicina)品系头部的乙酰胆碱酯酶(AchE)对底物和抑制剂反应的动力学进行了研究.结果表明, AchE敏感性的降低是引起两个有机磷药剂(OP)抗性品系DDVP-R和Trichl-R对OP交互抗性的一个主要因子.Trichl-R对二氯苯醚菊酯无抗性, 而二氯苯醚菊酯抗性品系2Cl—R对所测定的OP有负交互抗性, 并且它的AchE对OP的敏感性较正常品系(NP)AchE的敏感性要高.AchE敏感性的变化, 反应在酶结构上, 主要是酶对抑制剂的亲和性(K_d)的变化, 而磷酸化速率(K₂)影响不大.同时对AchE的底物和抑制剂结合位点及结构变化进行了分析和探讨.     

黑曲霉突变株葡萄糖淀粉酶的化学组成及其光谱学性质

黑曲霉突变株葡萄糖淀粉酶中一型GAI舍糖量为17.6%。氨基酸分析表明,天门冬氨酸和谷氨酸(包括酰胺)占20.3%,苏氨酸和丝氨酸占25.1%,三种碱性氨基酸占6%。紫外光谱在278nm和250nm处分别有最大和最小吸收;其荧光光谱的最大激发波长和发射波长分别为284nm与342nm;远紫外CD谱表现为一双负峰;在溶液中的构象是α-螺旋10.6%,β折叠16.3%和无规卷曲73.1%。     

家蚕抗菌肽的抗癌作用

从家蚕（Ｂｏｍｂｙｘｍｏｒｉ）免疫蛹血淋巴中提取抗菌肽,以Ｓ１８０荷瘤小鼠和艾氏腹水瘤荷瘤小鼠为模型,研究抗菌肽的抗癌效应,结果表明,抗菌肽明显抑制Ｓ１８０瘤重,３７９２,４５４２和４９８０Ｕ３种剂量抑瘤作用分别为４２．８６％,３９．１３％和３７．８９％,抗菌肽对外周血白细胞数没有影响。病理切片显示,注射抗菌肽荷瘤小鼠癌瘤组织大面积坏死,癌瘤周围组织内有大量炎细胞（单核细胞,中性粒细胞和淋巴细胞）     

红茶菌抗菌蛋白产生方式的初步研究*

从红茶菌液中分离得到膜醋酸菌与裂殖酵母。采用单菌培养与混合菌培养,探讨了各菌对红茶菌抗菌蛋白的产生所起的作用。初步推断,裂殖酵母先合成相关蛋白,该蛋白经膜醋酸菌产生的酶修饰后,抗菌活力显著提高。不同属酵母与膜醋酸菌共培养,结果表明裂殖酵母优于其它酵母。     

家蚕抗菌肽对癌细胞的杀伤作用及其超微结构的观察

从家蚕蛹血淋巴中分离纯化的抗菌肽β组分对体外培养的癌细胞有选择性杀伤作用,而对正常人Ｂ淋巴细胞无不良影响。抗菌肽与巨噬细胞淋巴瘤细胞Ｕ９３７体外培养一段时间后,用扫描和透射电镜观察细胞膜和细胞器的变化,发现细胞膜和核被膜局部溶解,线粒体肿胀、发空,胞内物质大量外泄,从而导致细胞死亡。