大豆黄酮促进妊娠大鼠乳腺发育和泌乳的实验研究

研究大豆黄酮（Ｄａ）对妊娠大鼠乳腺发育和泌乳的作用及其与神经内分泌的关系，结果表明；妊娠期口服大豆黄酮，能显著提高泌乳前期大鼠乳腺重量、ＤＮＡ、ＲＮＡ含量和ＲＮＡ／ＤＮＡ值，同时极显著地提高大鼠的泌乳量、血清ＧＨ和ＰＲＬ含量及乳腺胞浆雌二醇受体的数目和亲和力；相反．妊娠后期口服多巴胺激动剂溴隐亭，能显著降低泌乳前期乳腺重量、ＤＮＡ和ＲＮＡ含量及泌乳量，并显著降低血清ＧＨ和ＰＲＬ含量及乳腺雌二醇受体的数目和亲和力；但连续两周口服Ｄａ后再口服澳隐亭一周，溴隐亭的上述作用被阻断。结果提示：Ｄａ促进大鼠乳腺发育和泌乳的作用与其抑制或站抗多巴胺对垂体ＰＲＬ、ＧＨ分泌的抑制作用有关。     

大豆黄酮对母猪免疫功能和血清及初乳中GH、PRL、SS水平的影响

研究口服大豆黄酮对妊娠母猪及其仔猪的免疫功能和血清、初轧中生长激素（ＧＨ）、催乳素（ＰＲＬ）、生长抑素（ＳＳ）水平的影响，结果表明：１）大豆黄酮能明显提高母猪血清和初乳中特异性抗体（猪瘟抗体或溶血素）的水平，表明母猪整体和乳腺器官的体液免疫功能明显增强。２）通过对初乳的吸收，其新生仔猪血清中母源抗体水平明显高于对照组。３）母猪血清和初乳中ＧＨ、ＰＲＬ含量明显高于对照组，而血清ＳＳ含量显著低于对照组。本实验结果提示：垂体ＰＲＬ、ＧＨ和体内ＳＳ可能参与了大豆黄酮对猪免疫功能的调节过程。     

大豆黄酮的对母猪免疫功能和血清及初乳中GH,PRL,SS水平的影响

研究口服大豆黄酮对妊娠母猪及其仔猪的免疫功能和血清,初乳中生长激素、催乳素、生长抑素水平的影响,结果表明：１）大豆黄酮能明显提高母猪血清和初乳中特异性抗体的水平,表明母猪整体乳腺器官的体液免疫功能明显增强。２）通过对初乳的吸收,其新生仔猪血清中母源抗体水平明显对照组。３）母猪血清和初乳中ＧＨ、ＰＲＬ含量明显高于对照组,而血清ＳＳ含量显著低于对照组。本实验结果提示：垂体ＰＲＬ、ＧＨ和体内ＳＳ可能参与     

电场刺激对离体温育垂体前叶促肾上腺皮质激素分泌的影响

本实验应用离体温育大鼠垂体前叶组织块结合电场刺激及放射免疫测定方法,观察了垂体前叶内的神经纤维兴奋对促肾上腺皮质激素（ＡＣＴＨ）分泌的影响以及其它因素的作用。结果表明,一定参数的电场刺激使温育的大鼠四分之一垂体前叶组织块ＡＣＴＨ分泌增加,能被河豚毒素（ＴＴＸ）和藜芦碱部分阻断,此效应也可被地塞米松显著抑制,而同一参数的电场刺激与促肾上腺皮质激素释放激素（ＣＲＨ）诱发的ＡＣＴＨ分泌没有相互作用。经典神经递质受体阻断剂阿托品、心得安、酚妥拉明对电场刺激诱发的ＡＣＴＨ分泌没有显著影响;ＧＡＥＡ＿Ａ受体拮抗剂荷包牡丹碱明显促进此效应。该作用不受Ｐ物质拮抗剂ｓｐａｎｔｉｄｅ的影响,而降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）受体拮抗剂ＣＧＲＰ片段８－３７能部分阻断这一作用。上述结果提示电场刺激所诱发的ＡＣＴＨ分泌可能部分由垂体前叶内ＣＧＲＰ能神经纤维介导。     

雌激素诱发大鼠原位与移植垂体催乳素瘤中催乳素基因与TGFα和TGF …

利用本实验室建立的１７β－雌二醇诱致Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ（ＳＤ）大鼠原位垂体和异体移植于肾囊的垂体同时形成催乳素瘤的动物模型,采用Ｎｏｒｔｈｅｍ印迹杂交方法,我们观察了Ｅ２长期作用（１２０ｄ）后诱发的原位与移植垂体ＰＲＬ瘤中ＰＲＬ基因和两种转化生长因子ＴＧＦα和ＴＧＦβ１基因表达水平的改变。结果表明：在Ｅ２长期作用后,原位垂体与异体移植于肾囊,从而远离下丘脑的垂体均可形成垂体ＰＲＬ瘤;原位     

日粮添加塞曼特罗（CIM）对大鼠生长胴体组成及GH水平的影响

选用２４只２月龄ＳＤ处女鼠配对分组,实验组日粮添加１０μｇ／ｇ塞曼特罗（ＣＩＭ）,试验期３０天。与对照组比较,ＣＩＭ显著提高大鼠生长速度（２７．３０％,Ｐ＜０．０１）和胴体比率,降低腰胁部脂肪重,提高腓肠肌、比目鱼肌和趾浅屈肌的鲜重和ＲＮＡ合量及ＰＮＡ／ＤＮＡ值,同时提高大鼠垂体和血清ＧＨ水平分别达３６．７０％（Ｐ＜０．０１）和２３．７７％（Ｐ＜０．０５）,降低血清脲氮含量。表明ＣＩＭ可显著促进大鼠生长,降低体脂含量,促进肌肉肥大,促进蛋白沉积。其作用机理可能还与其促进ＧＨ的合成和分泌有关。     

MLT抑制E2诱发的大鼠垂体PRL瘤的增生涉及雌激素受体的作用

目的：探讨褪黑素（melatonin,MLT）抑制17-β-雌二醇（17-β-estradiol,E2）诱发垂体催乳素（prolactin,PRL）瘤的增生及其机制的初始阶段,MLT对雌激素受体的作用。方法：在体实验采用每日定时给各组SD大鼠分别皮下注射不同浓度的MLT,建立MLT抑制E2诱发的垂体PRL瘤增生的动物模型。离体实验采用原代培养细胞原位杂交方法,探讨垂体PRL瘤细胞MLT受体的表达、MLT对雌激素受体（ER）表达的作用;应用电泳迁移率改变（EMSA）的方法,观察MLT对雌激素受体（ER）与雌激素反应元件（ERE）结合的效应。结果：每只大鼠每日定时皮下注射0．25或0．50mg MLT能显著抑制E2诱发的垂体PRL瘤的增生（分别P〈0．01、P〈0．05）;F4诱发的垂体PRL瘤细胞内有MLT受体MLT1a和MLT1b;给0．25mg／day／rat MLT组的大鼠垂体PRL瘤细胞内ER的表达显著减少（P〈0．01）、ER与ERE的结合量显著降低（P〈0．01）。结论：一定剂量的MLT能显著抑制E2诱发的SD大鼠垂体PRL瘤的增生,其作用机制之一可能与MLT抑制ER的表达、及其部分阻断ER与ERE的结合有关。     

大豆黄酮对大鼠肌肉生长和几种内源激素水平的影响

给雄性、雌性和雄性去势大鼠皮下注射大豆黄酮［３ｍｇ／（１００ｇ体重·天）］１６天。结果：雄性大鼠日增重提高１４．７％（Ｐ＜０．０５）,耗料与增重比降低１２．０％,后腿肌重和后腿肌总ＲＮＡ含量显著增加,而总ＤＮＡ含量无显著变化;血清脲氮水平显著下降,血清睾酮、雌二醇、生长激素和β－内啡肽含量显著提高。雄性去势大鼠日增重、后腿肌重无显著变化,血清睾酮、生长激素和β－内啡肽水平虽显著高于对照组,但睾酮水平仅为同等条件下完整大鼠的８％左右。雌性大鼠日增重降低１９．０％（Ｐ＜０．０１）,耗料与增重比提高１７．８％,血清睾酮、雌二醇和生长激素水平显著降低。试验结果表明：大豆黄酮对大鼠肌肉生长和几种内源激素水平的影响呈现性别差异,对雄性大鼠肌肉生长的促进作用依赖于睾丸的内分泌机能。     

半胱胺对大鼠泌乳量及血液,组织几种激素含量的影响

选用４０只Ｗｉｓｔａｒ泌乳大鼠进行配对实验。哺乳期第８天起,实验母鼠灌服半胱胺（ｃｙｓｔｅａｍｉｎｅ,ＣＳ）８０ｍｇ／ｋｇＢ．Ｗ,每隔５天一次,直至哺乳第３０天。实验中记录泌乳量、仔鼠体重及采食量,并用放免法测定血液及组织生长抑素（ＳＳ）、生长激素（ＧＨ）、催乳素（ＰＲＬ）的含量。结果表明,ＣＳ使母鼠哺乳期第１０、１５、２０天的泌乳量明显提高（Ｐ＜０．０５）,第２５天泌乳量有所增加（Ｐ＞０．０５）,第３０天差异不明显;母鼠哺乳期采食量略有增加（Ｐ＞０．０５）,料／奶比明显下降（Ｐ＜０．０５）;哺乳期第１５天的血液、下丘脑和大脑皮层ＳＳ含量明显下降,血液ＧＨ含量显著升高（Ｐ＜０．０５）,但第２５天无明显变化;母鼠哺乳期血液ＰＲＬ含量明显下降（Ｐ＜０．０５）。提示,ＣＳ能促进大鼠泌乳,而抑制体内ＳＳ,提高内源性ＧＨ水平,可能为ＣＳ的主要作用机制。     

大鼠运动病敏感性性别差异与血浆和垂体中AVP水平及垂体V1b受体表达水平的关系

目的：观察不同性别大鼠旋转前后不同时间点血浆和垂体精氨酸加压素（AVP）的含量以及垂体AvP—V1b受体阳性神经元数目和受体表达量,探讨AVP与运动病性别差异间的联系,为进一步认识运动病的发病机制提供实验依据。方法：采用条件性厌食症作为运动病模型。98只SD大鼠,雌雄各半,分别用放射免疫分析法、免疫组化及Western—blot法测定血浆、垂体AVP含量和垂体V1b受体表达水平。结果：旋转刺激后雌性大鼠糖精水（0．15％）饮用量的减少程度高于雄性大鼠。雌性大鼠血浆AVP含量在基础状态下高于雄性大鼠,旋转刺激后下降,而雄性大鼠无显著性变化。雌性大鼠垂体AVP含量在基础状态下也高于雄性大鼠,旋转刺激后8h下降。24h降低有显著性;雄性大鼠旋转后8h垂体AVP含量较旋转前明显下降,但降幅不及雌性大鼠,旋转后24h已近恢复。与应激反应密切相关的垂体V1b受体表达为阳性的神经元数目及V1b受体表达水平,在基础状态下,雌性大鼠显著高于雄性;旋转刺激后,雌性大鼠V1b受体表达为阳性的神经元数目和表达水平均明显降低,而雄性大鼠则无显著性改变。结论：运动病诱发刺激后,雌雄性大鼠血浆和垂体中AVP含量及垂体V1b受体表达均有差异,提示AVP的内分泌状态与运动病敏感性性别差异可能有某种关联。     

金鱼精子质膜和核膜的区域特异性

本文结合采用扫描和透射电子显微镜(包括冷冻断裂-蚀刻、超薄切片以及细胞化学染色法),研究了金鱼精子的超微结构特征,结果表明金鱼精子的质膜和核膜都具有区域特异性:1)精子质膜内大部分区域含有许多蛋白颗粒,但在特定区域内,蛋白颗粒呈有序排列,构成晶格状结构。2)精子头颈部和尾部均有液泡密集之处,凡是覆盖着液泡区的质膜内,几乎都不含有蛋白颗粒。3)液泡区能被细胞化学方法染成致密色,表明内含糖蛋白。4)核膜孔只集中存在于靠近颈部的核膜上,而其他部分则没有。本文对上述诸点进行了讨论。     

Chlorophyll isolation,structure and function: major landmarks of the early history of research in the Russian Empire and the Soviet Union

This paper covers major events of the early history of chlorophyll research in the Russian Empire and the Soviet Union from 1771 until 1952, when the modern period of studies on photosynthesis began in full swing. Short biographical sketches of key scientists, reviews of their major research contributions and some selected photographs are included. This revised version was published online in August 2006 with corrections to the Cover Date.     

注射装载孕酮的红细胞膜泡诱发蟾蜍卵成熟的研究

中华大蟾蜍长足的卵母细胞,经注入装载水相孕酮的红细胞膜泡,能被诱发成熟;直接注入水相孕酮的卵母细胞,无能恢复成熟分裂。将蛋白酶处理的红细胞制备成装载水相孕酮的膜泡,注入卵内,照样能诱发其成熟分裂;然而,分别用根皮素结合或磷脂酶A_2水解红细胞膜磷脂,制备的膜泡,虽亦包裹着水相孕酮,但注射的卵母细胞都未能被诱发成熟。这些结果表明,在通过红细胞膜转运孕酮诱发卵母细胞成熟过程中,红细胞膜上的某些膜蛋白可能不是必要的成份,而膜磷脂类却是关键成份,它不仅可能保证孕酮不被迅速代谢,且保证孕酮从卵母细胞内部诱发成熟分裂。     

多种神经活性物质在幼年猫和鸡视网膜神经细胞中的共存(简报)

视网膜起源于前脑泡,结构简单层次分明,因此常被视为脑的简化模型。但近期工作证明,视网膜包含的神经活性物质(神经递质、调质和神经肽)种类之多、分布之复杂并不亚于脑。尤其是无长突细胞不仅包含多种递质和肽类,而且还有递质与肽类或肽类与肽类在一个细胞中的共存。对视网膜神经递质、调质和神经肽的研究将是探索脑奥秘的有效途径。     

低分子量神经丝蛋白(NF-L)的体外组装

利用超速离心和离子交换层析技术,从牛脊髓中分离纯化了神经丝蛋白三组分:NF-L,NF-M和NF-H。应用电镜负染色和金属投影方法研究神经丝的形态结构与NF-L的体外组装,结果表明:神经丝由10nm的核心纤维与外周的丝状突起组成;在近似生理条件下,NF-L可在60min内组装成10nm纤维,纤维由4根亚丝缠绕而成;在碱性缓冲液中,NaCl能促进NF-L装配成短纤维,这种10nm的短纤维无法连接成长纤维。     

血管内皮生长因子蛋白在大鼠睾丸和附睾的表达和定位研究

为探讨血管内皮生长因子(VEGF)在雄性生殖系精子发生发育和成熟过程中的调控作用,应用免疫组化、Periodic acid-Schiff(PAS)染色及蛋白质免疫印迹技术,检测VEGF蛋白在成年大鼠睾丸和附睾的表达和定位情况。Western-blots显示,在大鼠睾丸和附睾内均有VEGF蛋白(约45kD)的表达;免疫组化显示,睾丸内VEGF见于圆形和长形精子细胞、Sertoli细胞和Leydig细胞,免疫阳性产物位于细胞质内。精子细胞的VEGF表达伴随精子细胞顶体发育的全过程,精子残余体呈强阳性。附睾内VEGF表达于附睾管上皮,且有区域和细胞特异性。附睾起始段的所有上皮主细胞内都有VEGF阳性颗粒;头、体、尾各段的VEGF阳性细胞多数与含PAS阳性颗粒的细胞重合,证明为亮细胞;近端附睾的管腔内可见精子头部呈VEGF阳性染色。睾丸、附睾间质血管内皮为VEGF阴性。上述结果表明,VEGF蛋白可由生殖细胞和附睾管上皮细胞直接产生,它可能以自分泌和/或旁分泌的形式共同作用于睾丸和附睾的生殖细胞和血管内皮,直接或间接影响精子的发生、发育和成熟过程,特别是精子顶体的形成过程,并可能与精子在附睾内的成熟有关。     

花背蟾蜍蝌蚪发生类坏死的皮肤在恢复过程中的超微结构

本实验以花背蟾蜍后肢芽期的蝌蚪为材料,用0.001 mol/L氨水(氨水组)和0.01mol/L醋酸(醋酸组)处理皮肤使之发生类坏死。以细胞核、细胞表面、细胞质及细胞间隙等的超微结构变化为指标,研究了各组皮肤发生类坏死后恢复过程中的可逆变化。结果观察到:两组均能引起核染色质浓缩,粘液分泌,液泡增多,线粒体及内质网膨大变形,细胞间隙变窄;醋酸还引起张力原纤维的凝集及紊乱等。恢复过程中,细胞核内染色质的分布趋于均匀,粘液的分泌渐正常,液泡减少,线粒体及内质网的形态逐步恢复,但细胞间隙一直很??窄;醋酸组中张力原纤维恢复成束且排列较整齐。作者认为氨水及醋酸引起蝌蚪皮肤发生类坏死后,在一定时间内是可以恢复的,而且此可逆变化也反映在超微结构的变化上。     

磁场对丘脑下部一氧化氮含量的影响及与丘脑下部神经内分泌核团的关系

应用硝酸还原酶反应—分光光度法测定和NADPH-d组织化学技术,对磁场处理后丘脑下部一氧化氮量的变化及其可能的原因进行了研究,发现磁场可促使丘脑下部一氧化氮量(OD值)显著升高,并具有显著滞后效应。NADPH-d阳性神经细胞及NADPH-d和血管加压素(AVP)双染阳性神经细胞集中分布在丘脑下部室旁核、室周核和视上核,但不存在 于视交叉上核,提示室旁核、室周核和视上核一氧化氮能神经细胞是丘脑下部的一氧化氮的主要来源。磁场处理后大鼠丘脑下部一氧化氮含量(OD值)较正常对照组显著升高应归因于这些神经细胞受磁场作用表达增强。一氧化氮和血管加压素的共存可能对磁场调节内分泌具有一定意义。     

重组人pLXSN-CD80逆转录病毒载体的构建及在CHO和PA317细胞中的表达

CD80是表达于抗原提呈细胞表面的分化抗原,它提供T细胞活化的协同刺激信号,并在抗肿瘤免疫应答中起着重要作用。我们在克隆了CD80全长。cDNA的基础上,将其与逆转录病毒pLXSN表达载体连接,构建成表达质粒,并用磷酸钙沉淀法将其转染PA317和CHO细胞,经G_(418)筛选获得抗G_(418)的PA317和CHO细胞克隆。以RIA,FACs和Westernblot检测CD80分子在PA317和CHO细胞上的表达、分布和分子量,结果显示,pLXSN-CD80转染的CHO细胞可表达较高丰度的CD80分子,其表观分子量为40kD。pLXSN-CD80转染的PA317和CHO细胞经5个月连续传代培养,无论存在G_(418)的选择压力与否,仍然持续表达CD80分子,表明我们构建的pLXSN-CD80表达载体具有应用于试验性治疗的潜能。     

荧光脂质体导入黄瓜悬浮细胞原生质体的研究

用“脱水再加水法”制成包裹荧光黄的脂质体,通过PEG诱导融合或保温共培养法,成功地将脂质体导入了黄瓜悬浮细胞原生质体。PEG处理组摄入脂质体的细胞可达80—90%,其中50—60%的细胞荧光较强,均匀一致。脂质体/原生质体保温共培养半小时,荧光细胞达95%以上,荧光较弱,在细胞中呈点状分布,3—4天后脂质体逐渐破裂,点状荧光变为均匀一致的荧光。导入荧光黄脂质体的原生质体经持续分裂形成愈伤组织和胚状体,进一步分化出芽和根。