聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)法诊断轮状病毒腹泻的研究

轮状病毒是致人及动物腹泻的一个重要病原,从Bishop等用电镜从粪便中发现了该病毒以来,相继出现了许多有效的检测方法。由于轮状病毒的基因组是具有11节段的双股RNA,因此可用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)法进行检测。轮状病毒的RNA在电泳中形成了11个片段的迁移区带图,称为电泳型(electropherotype),不同种型的轮状病毒其电     

小鼠皮肤黑色素瘤细胞在三种不同基质上的趋电性比较

微小直流电场具有指导细胞进行定向迁移的作用。各种细胞外基质的物理、化学性质会影响细胞的迁移。该研究以小鼠皮肤黑色素瘤细胞（B16-F10）为模型,比较微直流电场（250mV／mm）指导下细胞在平滑基底与两种不同市售基质Matrigel及FNC上的趋电性。结果显示,黑色素瘤细胞在三种基底上均有明显的向电场阴极迁移的趋电运动,但在不同基质上细胞趋电的方向性无显著差异,但细胞迁移速度及在细胞沿电场进行定向迁移的持续性有显著差异。     

人胃液乳酸脱氢酶同工酶定量电泳测定方法

本文介绍一个琼脂糖凝胶电泳定量测定胃液乳酸脱氢酶(LDH)同工酶的简易方法。包括一个灵敏的染色程序和光密度扫描,或洗脱比色。并完全适用于血清和组织抽提液中LDH同工酶分析。血清和组织提取液LDH同工酶的分离检测,最初用淀粉凝胶和琼脂凝胶电泳,四氮唑蓝(NBT)染色,以后用醋酸纤维薄膜电泳1961年提出的琼脂糖凝胶电泳,优于纸电泳和琼脂电泳的是:(1)无吸附作用,(2)含荷电基团少,电     

1982—1984年上海市秋冬季婴幼儿急性胃肠炎病例中人轮状病毒分子流行病学的研究

1982—1984年上海市二个医院收集的小儿腹泻标本150份,用RNAPAGE银染法分析轮状病毒RNA迁移图谱;在阳性标本74例中72例为2L电泳型,2例不能分为2L或2S电泳型。RNA电泳带迁移差别较明显的为2、3和7、8、9RNA片段。根据7、8、9三条带迁移率之不同,将RNA迁移图谱分成3种电泳亚型。统计学检验说明82年以第2电泳亚型为主,83年以第1电泳亚型为主,84年均为第1电泳亚型(P<0.05)。提示82—84年RNA迁移图谱有明显的变迁。二个医院相距甚远,但每年的RNAPACE图谱分布趋势基本一致。     

寡糖8-氨基萘基-1,3,6-三磺酸衍生物在毛细管区带电泳中迁移时间相互关系

确定了寡糖８－氨基萘基－１,３,６－三磺酸（ＡＮＴＳ）衍生物在毛细管区带电泳中迁移时间的相互关系．分别将葡聚糖、甘露聚糖、木聚糖和甲壳质部分酸水解产生的不同聚合度寡糖的混合物,用ＡＮＴＳ胺化还原衍生,然后用毛细管电泳,在５０ｍｍｏｌ／Ｌ,ｐＨ２．５磷酸缓冲液中分离衍生物,分别得到１至２１个聚合度的寡聚葡糖衍生物电泳梯度图,以及聚合度均为１至７的寡聚甘露糖、寡聚木糖和寡聚Ｎ－乙酰氨基葡糖衍生物电泳梯度图．同类寡糖衍生物相对迁移时间（ｔｍ）ｒ与聚合度ｎ均成线性关系．寡聚葡糖衍生物相对迁移时间与其他３类寡糖衍生物的相对迁移时间存在线性关系     

我国不同地区东亚钳蝎(Buthus martensii Karsch)毒在三种类型电泳中的比较研究

用SDS—不连续聚丙烯酰胺凝胶板电泳、pH4.5—不连续聚丙烯酰胺凝胶板电泳和聚丙烯酰胺凝胶圆盘等电聚焦电泳,分离我国不同地区东亚钳蝎毒。其图谱表明:不同产地的东亚钳蝎毒蛋白的种类及含量存在一定的差异,地区相近,差异较小,反之亦然。     

基因工程

961211 利用脉冲场毛细管电泳分离DNA大分子[会,英]/Sudor, J.…//Abstr. Pap. Am. Chem. Soc. -1995,209Meet.,Pt.1.-ANYL003[译自DBA,1995,14(22),95-12943] 利用复杂聚合物溶液脉冲场毛细管电泳研究了ds DNA大分子的电迁移特性。研究了输入交替电场的2种不同形式(正弦波和方波输入信号)。以输     

琼脂糖电内渗对电泳的影响

用电内渗不同(0、0.03、0.08、0.20mr)的琼脂糖制成凝胶或电极缓冲液凝胶条,观察对电泳行为的影响.结果表明等电聚焦电泳必须使用无电内渗琼脂糖.不同电内渗的琼脂糖制成的电极缓冲液凝胶条对SDS电泳无显著影响,但对常规聚丙烯酰胺凝胶电泳有不同程度的影响,电内渗越高,越不利于电泳的进行.     

电泳滴定曲线及其应用

电泳滴定曲线法是一种双向电泳法,第一向等电聚焦,以获得固定的pH梯度;然后加样,进行第二向电泳,得到的电泳滴定曲线图,直接反映了在各种pH下,各蛋白质组分之间在迁移率上的差异。该法在选择蛋白质分离纯化的最佳条件;研究蛋白质的突变;研究分子间相互作用等领域,已表现出广阔的应用前景。     

我国不同地区东亚钳蝎（Buthus martensii Karsch）毒在三种…

用ＳＤＳ－不连续聚丙烯酰胺凝胶板电泳、ｐＨ４．５－不连续聚丙烯酰胺凝胶板电泳和聚丙烯酰胺凝胶圆盘等电聚焦电泳,分离我国不同地区东亚钳蝎毒。其图谱表明：不同产地的东亚钳蝎毒蛋白的种类及含量存在一定的差异,地区相近,差异较小,反之亦然。     

大熊猫子宫钙调素的分离纯化和性质的研究

以大熊猫子宫为材料分离纯化了钙调素(Calmodulin,CaM),经SDS-PAGE,PAGE和等电聚焦电泳鉴定,表现均一。分子量为18800道尔顿,等电点为3.6。该蛋白质分子的N-末端为封闭的。大熊猫子宫钙调素具有其它来源钙调素所特有的一些性质。对环核苷酸磷酸二酯酶有明显的激活作用,还发现对超氧化物歧化酶也有一定的激活作用。电泳行为受Ca~(2+)影响而出现特征性电泳改变,在含有Ca~(2+)的SDS凝胶电泳中,电泳速度比EGTA存在对略快,在PAGE中,有Ca~(2+)比无Ca~(2+)对电泳速度略慢。大熊猫子宫钙调素的氨基酸组成中,Phe/Tyr为8:2,可观察到钙调素特征性紫外吸收光谱。     

电泳滴定曲线的制备方法

电泳滴定曲线法是运用第一向等电聚焦,再进行第二向电泳,反映各pH下,各蛋白质组分之间在迁移率上的差异.该法在选择蛋白质分离纯化的最佳条件、离于交换剂的类型等方面已表现出广阔的应用前景.作者制备了小牛血清白蛋白和羊抗兔IgG血清的电泳滴定曲线,取得满意结果.     

核酸染料Genefinder使用方法的比较

目的:使用核酸染料Genefinder检测琼脂糖凝胶中的核酸,通过比较预染样品法、胶内染色法和后染法三种染色方法的染色效果,了解该染料的染色特性,以期找到性能稳定,染色效果好的染色方法.方法:在琼脂糖凝胶电泳中,以不同的染色方法使用核酸染料Genefinder进行染色,对染色结果进行比较分析.结果:使用电泳后染色方法染色效果较好,胶内染色法次之,预染样品法效果最差.结论:核酸染料Genefinder会干扰DNA的迁移效率,因此,使用Genefinder进行电泳后染色是一种较好的染色方法.     

柔性载药纳米颗粒在毛细血管中输运特性的数值模拟研究

基于柔性纳米颗粒的载药系统由于其诸多优势而具有广泛的应用前景.本文采用格子玻尔兹曼方法和浸入边界法建立了柔性纳米颗粒和红细胞在毛细血管中的三维输运模型,研究了柔性纳米颗粒的迁移机制与特性,并分析了红细胞比容、变形能力及纳米颗粒刚度的影响规律.结果表明,在微血管中柔性纳米颗粒自身有向血管中心迁移的趋势,其径向迁移量随颗粒刚度的增强而减小.红细胞的径向迁移运动及变形,会导致纳米颗粒受排挤而趋向血管壁面的无细胞层;红细胞比容、变形能力及纳米颗粒刚度的增加,能提高纳米颗粒的趋壁率.在混合颗粒输送方案中,颗粒间及颗粒与红细胞间的相互作用使得较低刚度颗粒的趋壁率减小并增加刚度较高颗粒的趋壁率.研究结果对纳米载体药物输送系统的设计具有理论指导意义.     

水霉Saprolegnia菌丝内细胞颗粒运动的特征

水霉菌丝内细胞颗粒的运动有布朗运动和跳跃运动两种形式,跳跃运动的速度在０．０９至４μｍ／ｓ之间。细胞颗粒运动的速度时制改变．不是匀速运动。在同一根菌丝内细胞颗粒运动的速度与颗粒大小无明显相关性;在不同的菌丝内细胞颗粒运动的速度差异明显。细胞颗粒有共同的运动轨道,运动轨道弯曲,并与细胞长轴基本平行。在同一运动轨道上,不同细胞颗粒的运动速度不同。     

牦牛血超氧化物歧化酶电泳多谱带现象研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳、ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳、线性梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳、制备电泳、等电聚焦电泳以及不同试剂处理等多种方法对牦牛血铜锌超氧化物歧化酶电泳多谱带现象进行了研究。结果表明在不同的实验条件下,各带会发生相互转化。该多谱带现象是由聚合和构象异构体两种原因造成。     

小麦品种电泳分类鉴定技术的标准化研究

在甘氨酸-乙酸缓冲系统(pH 3.10)下采用9％聚丙烯酰胺凝胶电泳,比较研究了小麦(Triticumaestivum L.)“烟农15”、“济南13”、“莱州95”和“Marquis”品种的醇溶蛋白图谱误差变化及其有关控制方法。在每个凝胶板上误差呈规律性变化,迁移距离越大,谱带误差越大。同2.05cm谱带相比,9.25cm谱带标准误为0.0332,增大2倍;极差由1.5mm增大到4.5mm。国内3个小麦品种“莱州953”、“济南13”和“烟农15”群体内不存在电泳生物型。“莱州953”由于深色谱带多、分布合理,可作为基本电泳参照品种;“济南13”则由于总带数和特有谱带多,可作辅助参照品种。根据筛选的2.05、3.15、6.05和9.25cm标志带及其实际迁移大小,计算各电泳道谱带的矫正系数和矫正迁移距离。这种移动矫正法能使图谱误差降低约2/3。     

N-糖基化对TNFR-Fc融合蛋白结构稳定性和生物活性的影响

目的:探究糖基化对TNFR-Fc融合蛋白结构、稳定性和生物活性的影响。方法:经N-糖酰胺酶F(PNGase F)切除TNFR-Fc融合蛋白所连的糖链,用SEC-HPLC、傅里叶变换红外光谱法和荧光光谱法等方法分析N-糖基化和去糖基化后重组蛋白的结构变化,通过加速稳定性实验和毛细管电泳检测对比其酶切前后稳定性变化,其生物活性的差异经细胞杀伤实验进行比较。结果:去糖基化后TNFR-Fc融合蛋白质分子质量略有降低,其构象、荷电性质及生物活性没有明显差异;然而切除N-糖链,TNFR-Fc二聚体的稳定性降低,蛋白质降解物明显增加。结论:去N-糖基化对TNFR-Fc的构象、荷电性质和生物活性的影响并不显著,但会影响TNFR-Fc融合蛋白的稳定性。     

利用毛细管电泳法分析甜菊糖苷的含量

本文介绍了一种用毛细管区带电泳法筛选甜菊糖苷突变体的有效方法。根据实验结果,优化的电泳条件为60mmol/LTris-硼酸缓冲液(pH8.0),柱温30℃,工作电压25kV。优化条件下,甜菊苷(Stevioside)迁移时间的R.S.D为0.45%(15次),且在7.45×10     

电泳亲和色谱技术分离蛋白质*

亲和色谱利用亲和配体与目标组分间的特异性结合作用实现对目标组分的纯化,该分离方法分辨率高．在生物物质的分析和分离领域得到日益广泛的应用[1]。亲和色谱在分离过程每一步操作中,液相主体中的溶质分子必须经过一系列扩散过程才能进入到固定相颗粒孔内完成吸附或解吸等质量置换反应,被置换出的物质再由颗粒内扩散出固定相颗粒进入流动相。与质量置换反应过程相比,扩散过程由于速度较慢而常成为亲和色谱分离过程的速度控制步[2]。开发新型介质以强化扩散过程成为近年来色谱分离技术研究的热点,典型成果有灌注色谱介质(Perfllsion clnromatogr;tph>r)13,引。基于制备电泳技术方面的研究成果[5.6],我们提出将多通道流动电泳与亲和色谱相结合形成一种新型制备规模的生物分离技术即电泳亲和色谱技术,其基本思想是利用电场强化扩散过程以加速分离过程的进行。我们的前期工作已证明该方法的可行性[7]。本文以人血清清蛋白(Human seguigt albllmm．以下简称has)和Blue Sepharose 6 Fkt F10wⅢ介质(以下简称Blue介质)为例,通过实验系统地考察电流强度对电泳亲和吸附和电泳洗脱过程的影响,并用电泳亲和色谱的方法纯化has。