中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）肌肉中粗脂肪含量与死亡,产 …

本文报道了中华螯蟹越冬时,越冬后不同性别、不同生活状况肌肉中粗脂肪含量及变化。越冬时、越冬后死亡的♂♀河蟹肌肉中粗脂肪的含量均不到８％,而同时越冬成活的♂♀蟹肌肉中粗脂肪含量均高于１０％。顺利越冬并能产卵的雌蟹肌肉中粗脂肪含量为４．９６％,顺利越冬并交配的♂性肌肉中粗脂肪含量为４．１８％。产卵并抱卵孵化的♀蟹肌肉中粗脂肪含量为５．８５％,产卵但♀蟹中途死亡的其肌肉中粗脂肪的含量为５．４７％。交配不     

中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）体内维生素C含量与死亡和产卵的关系

本文报道了中华绒螯蟹越冬后肝胰脏、肌肉和生殖腺维生素Ｃ的含量及变化。肝胰脏为中华绒螯蟹储存维生素Ｃ的器官;越冬后的雌性中华绒螯蟹,其肌肉和生殖腺的维生素Ｃ高于雄性;正常活动雌性或雄性,其肝胰脏、肌肉和生殖腺的维生素Ｃ含量均高于死亡的个体的维生素Ｃ含量;产卵且抱卵孵化的雌体,其肝脏维生素Ｃ的含量高于那些不产卵的雌体,维生素Ｃ含量的降低是越冬时或越冬后中华绒螯蟹死亡的主要原因之一。     

中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）体内维生素C含量与死亡和产…

本文报道了中华绒螯蟹越冬后肝胰脏、肌肉和生殖腺维生素Ｃ的含量及变化。肝胰脏为中华绒螯蟹储存维生素Ｃ的器官;越冬后的雌性中华绒螯蟹,其肌肉和生殖腺的维生素Ｃ高于雄性;正常活动雌性或雄性,其肝胰脏、肌肉和生殖腺的维生素Ｃ含量均高于死亡的个体的维生素Ｃ含量;产卵且抱卵孵化的雌体,其肝脏维生素Ｃ的含量高于那些不产卵的雌体。维生素Ｃ含量的降低是越冬时或越冬后中华绒螯蟹死亡的主要原因之一。     

中华绒螯蟹一龄幼蟹(Eriocheir sinensis)越冬前后脂肪酸和4种类胡萝卜素含量的变化

实验以越冬前后的中华绒螯蟹一龄幼蟹作为研究对象,利用高效气相色谱法分别检测一龄幼蟹越冬前后肝胰腺及头胸甲中脂肪酸含量变化、利用液相二级质谱法分别测定一龄幼蟹越冬前后肝胰腺、头胸甲和血淋巴中4种类胡萝卜素含量变化。结果表明:肝胰腺中的饱和脂肪酸(SFA) C20:0、单不饱和脂肪酸(MUFA) C18:1n9作为主要能量脂肪酸被动用,其含量越冬后显著下降(p0.05),多不饱和脂肪酸(PUFA)中的C18:3n3、C22:6n3越冬后含量显著升高(p0.05)。头胸甲的饱和脂肪酸(SFA) C16:0、C18:0,单不饱和脂肪酸(MUFA)中的C18:1n7作为主要能量脂肪酸被动用,越冬后含量下降显著(p0.05)。多不饱和脂肪酸(PUFA) C18:2n6、C20:3n6越冬后含量显著升高(p0.05)。越冬后头胸甲中4种类胡萝卜素含量均极显著下降(p0.01)。其中,血淋巴中虾青素、叶黄素含量极显著升高(p0.05),β-胡萝卜素含量极显著下降(p0.05)。肝胰腺中虾青素与叶黄素、β-胡萝卜素变化趋势与血淋巴的一致,角黄素含量显著下降(p0.05)。越冬期间气温、水温的短暂升高可能使一龄幼蟹短暂摄食。越冬前经育肥的扣蟹越冬后能量物质无显著变化,越冬后根据肝胰腺颜色来判断一龄幼蟹质量的方法不科学。     

饥饿对中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)幼体发育的影响

对刚孵化的中华绒螯蟹第一期的蚤状幼体经不同时间的饥饿后再投喂,发现饥饿可以明显降低幼体的存活率和延长幼体的发育期。实验表明:对中华绒螯蟹第一期的蚤状幼体的饥饿时间(t)和发育期长(D)呈线性关系(D=4.6303+1.3226t r=0.970p<0.01)。对于中华绒螯蟹第一期的蚤状幼体,当起始饥饿时间超过了4d,再予以投饵,幼体均不能恢复正常的发育和蜕皮功能,得出中华绒螯蟹的不可恢复点(the point of no-return,PNR)大约为4d。通常以产生50%的幼体死亡的饥饿期即PNR₅₀,来表明幼体对饥饿的抵抗能力,实验得出中华绒螯蟹第一期的蚤状幼体的PNR₅₀大约为48h。     

急性逐步低氧对中华绒螯蟹呼吸率的影响

本文用密闭式呼吸仪研究了急性逐步低氧对中华绒螯蟹（又名河蟹）呼吸率的影响。研究发现,河蟹是一种很好的氧调动物。当溶氧在一定范围内下降时,河蟹能维持其呼吸率不变,直到临界氧浓度,或临界点。而后,随着溶氧的进一步下降,其呼吸率迅速降低,并在溶氧未至零值时,呼吸率为零。作者将呼吸率为零时的氧浓度称为零呼吸氧浓度,或零呼吸点。鉴于零呼吸点的存在,作者提出了一种能更好地描述水生动物呼吸率和溶氧关系的双曲线方     

中华绒螯蟹受精卵、流产卵氨基酸及脂肪酸组成的比较研究

采用气相色谱仪和氨基酸分析仪测定中华绒螯蟹不同种群 (太湖种群和温州种群 )受精卵和温州种群流产卵脂肪酸及氨基酸的组成。结果表明 ,中华绒螯蟹太湖种群受精卵、温州种群受精卵和温州种群流产卵在必需氨基酸和半必需氨基酸的含量上无显著差异 ,而谷氨酸 (Glu)、胱氨酸 (Cys)和丝氨酸 (Ser)三种非必需氨基酸的含量差异显著。太湖种群受精卵、温州种群受精卵及温州种群流产卵的脂肪酸种类分别为 16、13和 14种。饱和脂肪酸(SFA)占脂肪酸总量的 18 96 %— 2 3 0 9% ,单烯酸 (MUFA)占 5 1 76 %— 6 2 6 5 % ,多不饱和脂肪酸 (PUFA)占14 2 7%— 2 8 96 % ,其中最主要的脂肪酸为C16∶0、C16∶1和C18∶1。除C2 0∶1外 ,其他脂肪酸含量在三者之间都有显著差异。太湖种群受精卵的C18∶2、C18∶3显著高于温州种群受精卵 ,而温州种群流产卵的DHA要显著高于太湖种群受精卵。温州种群受精卵和流产卵在C16以下的脂肪酸 ,其含量均无显著差异。此外 ,本文还讨论了脂肪酸及氨基酸含量与流产的关系及脂肪酸组成对出苗率的影响。     

饥饿胁迫对中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)仔蟹的影响

在26.2 ～28.4℃水温条件下,研究了饥饿对中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)仔蟹的形态、行为、存活及体重损失的影响,同时确定了仔Ⅱ的营养饱和储存点(PRS)和不可恢复点(PNR).结果表明:饥饿胁迫下中华绒螯蟹仔Ⅰ、仔Ⅱ、仔Ⅲ的初次死亡时间(T1)分别为8.0、14.0和20.3 d,50％死亡时间(Ts0)分别为11.4、16.0和25.5 d,100％死亡时间(T100)分别为15.0、22.0和32.3 d,耐饥饿能力为仔Ⅲ＞仔Ⅱ＞仔Ⅰ;饥饿期间中华绒螯蟹体内水分含量持续升高,干重量降低显著,干重损失速率也随时间延长逐渐减小;先饱食后饥饿的给饵模式中仔Ⅱ蜕皮率随初始饱食时间延长而升高,50％个体完成蜕皮所需饱食时间(PRS50)为2.10d,各处理组仔Ⅱ的蜕皮周期与持续饱食组均无显著差异(P＞0.05),但只有饱食3d以上才能达到持续饱食饲养蟹的增重率;先饥饿后饱食的给饵模式中,仔Ⅱ的蜕皮率随着初始饥饿时间的延长而下降,其中仔Ⅱ50％不能蜕皮的初始饥饿时间(PNR50)和100％不能蜕皮的初始饥饿时间(PNR100)分别为10 d和14 d,并且蜕皮周期相对延长,延长时间约等于初始饥饿时间,不存在额外的摄食时间来弥补饥饿期间损失的能量,各处理组蜕皮后仔蟹与对照组体重无显著差异(P＞0.05).     

中华绒螯蟹与合浦绒螯蟹两地理亚种的线粒体DNA序列变异

根据线粒体16SrDNA的PCR／RFLP鉴定和对Cyt b基因全序列的分析对中国大陆7水系绒螯蟹地理种群的遗传分化进行探讨。结果表明：中华绒螯蟹与合浦绒螯蟹两亚种在17条Cyt b全序列上以40个固定的碱基变异位点相区别。前者分布在瓯江及其以北的水系;后者主要分布在瓯江及其以南的水系。发现了4种在鸭绿江以南的北方水系中生活的合浦亚种单元型,对这些单元型的形成提出了3种可能的解释[动物学报51（5）：862—866,2005]。     

养殖中华绒螯蟹肠道内优势细菌群组成分析

采用荧光染色计数法对养殖中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)肠道内微生物进行定量分析。结果表明肠道内细菌数量为(2.5±0.9)×106/μL。同时采用分离培养与16S rDNA基因克隆测序相结合的方法对其进行多样性分析,旨在揭示其中可培养细菌的组成结构。结果发现,分离自养殖中华绒螯蟹肠道内的49株代表性细菌均属于γ-变形菌纲(Gammaproteobacteria),其中假单胞菌属(Pseudomonas)、气单胞菌属(Aeromonas)和肠杆菌科(Enterobacteriales)为优势菌群。     

三种饵料模式对中华绒螯蟹蟹种早期养殖性能、非特异免疫性能及抗病力的影响

为评估不同投喂模式对中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)蟹种质量的影响,采用养殖实验、非特异性免疫指标分析和攻毒实验方法,比较了配合饲料、传统饵料和混合投喂模式培育扣蟹在成蟹养殖早期的养殖性能、免疫性能和攻毒后死亡率的变化。所检测的非特异性免疫指标包括碱性磷酸酶(ALP)、酸性磷酸酶(ACP)、γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)、总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、酚氧化酶(PO)、过氧化物酶(POD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽还原酶(GR)及血蓝蛋白(Hc)活性或含量。采用毒力较强的嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophilia)Y-2-L-1菌株进行攻毒实验。结果显示:(1)无论雄蟹还是雌蟹,配合饲料组第一次蜕壳间期均短于传统投喂和混合投喂模式,且配合饲料组增重率(WGR)及体重特定增长率(SGR)均显著高于另外两组(P0.05);(2)就肝胰腺中非特异性免疫指标而言,无论雄蟹还是雌蟹,配合饲料组γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)、总抗氧化能力(T-AOC)和超氧化物歧化酶(SOD)活性均高于另外两组,其中γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)差异显著;传统投喂组酸性磷酸酶(ACP)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)和过氧化物酶(POD)含量均高于另外两组,其中酸性磷酸酶(ACP)和一氧化氮(NO)含量差异显著;(3)就血清中各免疫指标而言,配合饲料组谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和总抗氧化能力(T-AOC)活性高于另外两组,但差异均不显著(P0.05),传统投喂组碱性磷酸酶(ALP)、酸性磷酸酶(ACP)、丙二醛(MDA)及血蓝蛋白(Hc)等指标含量均高于另外两组,其中丙二醛(MDA)差异显著;(4)无论雄蟹还是雌蟹,传统投喂组扣蟹攻毒后12~96 h的累计死亡率一直高于配合饲料组和混合投喂组,配合饲料组和混合投喂组雄体攻毒后的累计死亡率接近,混合投喂组雌体累计死亡率居于传统投喂组和配合饲料组之间。综上,投喂配合饲料可以提高扣蟹在成蟹早期的养殖性能、免疫性能和攻毒后的成活率,有利于提高蟹种质量。     

Development and characterization of new microsatellite loci from Chinese mitten crab (Eriocheir sinensis)

A set of new microsatellite loci were isolated from Chinese mitten crab and characterized in two Chinese mitten crab populations. The number of the alleles ranged from 3 to 8 and observed and expected heterozygosity varied from 0.0870 to 0.9565 and 0.3092 to 0.8367 in each population, respectively. Loci HLJEsin1, HLJEsin4, HLJEsin30 in CLN population and HLJEsin6 in CJS population presented significant deviation from Hardy–Weinberg equilibrium (PHWE < 0.001). These markers will be useful for population studies.     

Microsatellite analysis of genetic diversity and population structure of Chinese mitten crab （Eriocheir sinensis）

Chinese mitten crab (Eriocheir sinensis) has higher commercial value as food source than any other species of Eriocheir in China.To evaluate the germplasm resources and characterize the genetic diversity and population structure of the crabs in different water systems,two stocks and two farming populations were assessed with 25 polymorphic microsallite loci available in public GenBank.Basic statistics showed that the average observed heterozygosity (Ho) amongst populations ranged from 0.5789 to 0.6824.However,a remarkable presence of inbreeding and heterozygote deficiencies were observed.To analyze population structure,pairwise FST coefficients explained only ～10.3% variability from the subdivision of mitten crab populations,the remaining variability stems from the subdivision within subpopulations.Although the four populations had slight differentiation,different allelic frequencies resulted in distinct population structures.Two stocks and one farming population were clustered together to the phylogenetic branch of Yangtze crab,with an approximate membership of 95%.Whereas,another fanning population was clustered singly to the phylogenetic branch of the Liaohe crab,with a membership of 97.1%.The tests for individual admixture showed that Yangtze crab had probably been contaminated with individuals from other water systems.Genetic relationships between populations also supported the conclusion that Yangtze crab and Liaohe crab had different gene pools in spite of the origins of the same species.     

混合植物油替代鱼油对中华绒螯蟹成体雄蟹常规成分和脂肪酸组成的影响

为研究育肥饲料中混合植物油替代鱼油对中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)成体雄蟹常规成分和脂肪酸组成的影响,采用豆油和菜籽油混合物替代鱼油制成5种不同鱼油替代水平(0%、25%、50%、75%和100%)的等氮等脂育肥饲料(分别记为1#~5#饲料组)饲喂雄蟹,测定5组雄蟹肝胰腺、肌肉和性腺中的常规成分和脂肪酸组成,并对实验数据进行方差分析。结果显示:(1)饲料1#组性腺灰分含量显著高于饲料4#和5#组(P0.05),但各组性腺中的水分、总脂和蛋白含量均无显著差异(P0.05);饲料1#组肝胰腺中的水分和灰分最高,但其总脂含量低于其他组,各组肝胰腺的蛋白含量无显著差异(P0.05);除1#饲料组外,肌肉中的总脂和灰分含量随鱼油替代水平的升高而显著上升(P0.05),而水分和蛋白含量均无显著差异(P0.05)。(2)各饲料组精巢中总饱和脂肪酸(∑SFA)、总多不饱和脂肪酸(∑PUFA)和总高度不饱和脂肪酸(∑HUFA)含量无显著差异(P0.05),其总n-6多不饱和脂肪酸(∑n-6PUFA)含量随鱼油替代水平升高而升高,而总n-3多不饱和脂肪酸(∑n-3PUFA)含量和∑n-3PUFA/∑n-6PUFA比值呈显著下降趋势(P0.05)。(3)肝胰腺中∑n-3PUFA和∑HUFA含量具有显著的组间差异,且均以饲料3#组最高。但各组的∑PUFA和∑n-6PUFA含量差异并不显著(P0.05)。(4)肌肉中大部分脂肪酸组成无显著差异,仅∑n-6PUFA含量随鱼油替代水平升高而升高。综上,中华绒螯蟹育肥饲料中植物油(豆油与菜籽油含量为1︰1)替代鱼油对成体雄蟹可食组织中水分和蛋白含量并无显著影响,但会对其脂肪酸组成造成显著的影响,50%的鱼油替代水平有利于雄蟹肝胰腺和肌肉中的脂肪沉积。     

Phylogenetic analysis of intestinal bacteria in the Chinese mitten crab (Eriocheir sinensis)

AIMS: To identify the dominant intestinal bacteria in the Chinese mitten crab, and to investigate the differences in the intestinal bacteria between pond-raised and wild crabs. METHODS AND RESULTS: The diversity of intestinal bacteria in the Chinese mitten crabs was investigated by denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE) fingerprinting, 16S rRNA gene clone library analysis and real-time quantitative PCR. The principal component analysis of DGGE profiles indicated that substantial intersubject variations existed in intestinal bacteria in pond-raised crab. The sequencing of 16S rRNA genes revealed that 90-95% of the phylotypes in the clone libraries were affiliated with Proteobacteria and Bacteroidetes. Some genera were identified as unique in wild crabs and in pond-raised crabs, whereas Bacteroidetes was found to be common in all sampled crab groups. Real-time quantitative PCR indicated that the abundance of Bacteroides and the total bacterial load were approximately four-to-10 times higher in pond-raised crabs than in wild crabs. A significant portion of the phylotypes shared low similarity with previously sequenced organisms, indicating that the bacteria in the gut of Chinese mitten crabs are yet to be described. CONCLUSIONS: The intestinal bacteria of pond-raised crabs showed higher intersubject variation, total diversity and abundance than that observed in wild crabs. The high proportion of the clones of Proteobacteria and Bacteroidetes in the clone library is an indication that these bacteria may be the dominant population in the gut of the Chinese mitten crab. SIGNIFICANCE AND IMPACT OF THE STUDY: This study demonstrated obvious differences in the intestinal bacterial composition of pond-raised crabs and wild crabs. This knowledge will increase our understanding of the effects of aquaculture operations on bacterial community composition in the crab gut and provide necessary data for the development of probiotic products for crab cultivation.     

中华绒螯蟹肉碱乙酰转移酶（CAT）基因表达分析

肉碱乙酰转移酶（CAT）是一种作用于短链脂肪酸的酶。本研究克隆了中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）CAT基因的开放阅读框序列（ORF）,并采用实时荧光定量PCR（q-PCR）分析其在雌雄不同组织中的表达模式以及不同卵巢发育时期肝胰腺和卵巢的表达变化。结果表明,CAT的ORF长为1 929 bp,编码642个氨基酸,无跨膜域和信号肽,预测的蛋白含有一个Acyltransferases ChoActase保守结构域（40 ~ 56 aa）,和一个Carn-acyltransf superfamily典型结构域（43 ~ 626 aa）。CAT在雌雄蟹所有组织中均有表达,雄蟹中肝胰腺和肌肉组织的表达量较高,在其他组织中的表达量相对较低;雌蟹中肝胰腺的表达量最高,其次为卵巢和肌肉。肝胰腺以及卵巢的CAT表达量在不同卵巢发育时期之间差异显著（P < 0.05）,表明CAT在卵巢发育过程中起着重要作用。