染料木素体外抑制人低密度脂蛋白氧化修饰作用

为探讨染料木素对人低密度脂蛋白(LDL)氧化修饰的影响,采用铜离子(10 umol/L)体外氧化LDL的方法,观察大豆异黄酮主要成分染料木素(genistein)对LDL氧化过程中脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量和维生素E(VitE)水平的影响。结果:10 umol/LCuSO4与100 mg/L LDL共同孵育18 h,MDA含量明显升高,VitE含量明显降低,染料木素(0.25、1.25、2.5、12.5、25、50、125、250 umol/L)能显著降低MDA含量,升高VitE含量(P<0.01,P<0.05,P<0.02),且呈剂量依赖性。提示一定浓度范围的染料木素体外有抗LDL氧化修饰作用。     

光动力疗法对体外培养人胰腺癌细胞株PANC-1作用

目的:探讨血卟啉注射液(Hematoporphyrin Derivative,HPD)光动力疗法(Photodynamic Therapy,PDT)对体外培养的人胰腺癌细胞株PANC-1的生物作用。方法:实验分为4组,空白对照组、单纯HPD组、单纯光照组及HPD+PDT组。采用MTT法检测光动力作用后细胞的存活率,并用Annexin V-FITC/P I双染法检测其凋亡率。结果:在光敏剂浓度为5mg/L,光照剂量为10J/cm2时,光动力对PANC-1细胞达到最佳的实验效果,与对照组相比差异有显著性。在此实验参数条件下,流式细胞术(FCM)检测各组人胰腺癌细胞PANC-1凋亡率:HPD+PDT实验组达(36.40±4.21)%,明显高于单纯HPD(6.76±0.44)%,单纯PDT组(8.30±0.32)%及空白组(5.00±0.53)%三个对照组(P<0.05),三个对照组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:PDT光动力作用对体外培养人胰腺癌细胞PANC-1有明确抑制效应,并与HPD浓度及光照强度相关。     

姜黄素诱导人胰腺癌PANC-1细胞凋亡的机制研究

目的：胰腺癌恶性程度高、进展快、预后差,姜黄素对于抑制恶性肿瘤的发生和进程具有广泛的生物学效应。但姜黄素能否诱导人胰腺癌细胞凋亡,其具体作用机制如何？目前仍无报道。本研究拟观察姜黄素对人胰腺癌PANC．1细胞凋亡的影响,探讨姜黄素诱导PANC．1细胞凋亡的机制。方法：不同浓度姜黄素处理人胰腺癌PANC-1细胞,流式细胞仪检测PANC-1细胞凋亡率,并分析Caspase-9和Caspase-3活性的变化,同时通过RT—PCR和Westemblot分析PANC-1细胞中P53表达的变化。结果：PANC-1细胞经不同浓度的姜黄素处理后,可以显著诱导细胞凋亡,并呈现一定的剂量依赖性,提示姜黄素具有一定抗肿瘤活性。姜黄素能够同时增加Caspase-9和Caspase-3的活性,并呈现一定的剂量依赖性,提示姜黄素可能通过Caspase-9和Caspase-3途径来诱导PANC．1细胞凋亡的发生。RT—PCR和westernblot结果显示,姜黄素可以显著增加PANC-1细胞中P53蛋白表达水平。结论：姜黄素可以显著诱导PANC-1细胞凋亡的发生,提高Caspase-9和Caspase-3的活性,同时增加的P53表达,并呈现一定的剂量依赖性,提示姜黄素诱导PANC-1细胞凋亡的过程可能与增加细胞中Caspase-9,Caspase-3以及P53的表达有关。本研究探讨了姜黄素诱导PANC-1细胞凋亡的分子机制,为姜黄素的进一步应用提供了新的思路和理论支持,在人胰腺癌的临床治疗中具有一定的潜在应用价值。     

染料木素乙酰阿魏酸酯的合成

基于Schotten-Bamann反应原理,以阿魏酸和染料木素为起始原料,首次合成得到两种新化合物:染料木素-7-乙酰阿魏酸酯(即5-羟基-3-(4-羟苯基)-4-羰基-4H-苯并吡喃-7基3-(4-乙酰基-3-甲氧苯基)丙烯酸酯,1)和染料木素-7,4′-二-乙酰阿魏酸酯(即3-{4-[3-(4-乙酰氧基-3-甲氧苯基)丙烯酰氧基]苯基}-5-羟基-4-羰基-4H-苯并吡喃-7基3-(4-乙酰基-3-甲氧苯基)丙烯酸酯,2),对其进行了UV,IR,1H,13C NMR和MS结构表征.     

染料木素抗结直肠癌分子机制的研究进展

结直肠癌是世界范围内的恶性肿瘤,发病率逐年上升,预后差且尚无有效治疗药物。迫切需要探索挖掘结直肠癌发生发展的机制及寻找新的治疗药物。染料木素已被大量研究证明可用于结直肠癌的治疗。它是一种多酚异黄酮化合物,大量存在于大豆或大豆制品中,在亚洲人群中被广泛食用。具有多种生物活性,包括抗糖尿病、抗炎症、抗肥胖和抗血管生成、心脏保护功能及抗癌,其中抗癌作用研究最为广泛。染料木素抗结直肠癌的分子机制涉及多个方面：抑制肿瘤细胞增殖、侵袭及迁移,抗凋亡、氧化应激和炎症等。本文将围绕以上几个方面展开论述,将近年研究成果进行总结,以开发具有良好抗癌潜力的新型治疗药物,为结直肠癌的治疗提供理论基础。     

雷公藤甲素诱导胰腺癌细胞凋亡

目的：观察雷公藤甲素对胰腺癌细胞BxPC-3和PANC-1生长抑制及诱导细胞凋亡作用,探讨雷公藤甲素抗胰腺癌的机制。方法：雷公藤甲素处理BxPC-3和PANC—1细胞后,用M1rr法检测细胞的生长抑制,用流式细胞术检测细胞的凋亡率,用罗丹明123和DCFH—DA染色方法测定细胞线粒体膜跨膜电位变化和活性氧（ROS）的产生,用Western印迹检测Bcl-2、Bax蛋白表达的变化。结果：雷公藤甲素对胰腺癌细胞BxPC-3和PANC—1具有生长抑制和诱导细胞凋亡的作用,且呈时间和剂量依赖关系;处理72h后,胰腺癌细胞线粒体跨膜电位明显下降,Bax表达上调,Bcl-2表达下降。结论：雷公藤甲素能有效抑制胰腺癌细胞增殖,通过增强线粒体通透性诱导细胞凋亡。     

高效液相色谱法测定大鼠血清染料木素浓度

目的:建立大鼠血清中染料木素浓度的HPLC测定方法.方法:大鼠血清以叔丁基甲醚萃取,萃取物用氮气吹干后,用甲醇溶解用于色谱分析.色谱条件:采用Thermo C18柱(250ram×4.6mm,5μm);以乙腈-0.02mol/L磷酸二氢钾(35:65,pH=4.3)为流动相;流速为1.0mL/min;检测波长为260hm;柱温为40℃;进样量为10μL.结果:染料木素最低检测浓度为0.01mg/L;标准曲线线性范围为0.01～10.00μg/mL(r=0.9998);相对回收率为(101.31±3.47)%;日内RSD与日间RSD均小于10.00%.结论:该方法简便、快速、灵敏度高,重现性及稳定性较好,适用于大鼠血清染料木素浓度测定和药代动力学的研究.     

微波辅助提取木豆根中染料木素工艺

以木豆根为原料,利用微波辅助提取技术进行提取,在单因素实验的基础上对提取条件进行了考察,根据BBD(Box-Behnken design)实验设计原理,采用3因素3水平的响应面分析法,以木豆根中主要异黄酮染料木素(genistein)为指标,对提取过程进行优化,得到最佳工艺参数为：提取温度为68℃,固液比为32∶1 mL·g^-1,乙醇浓度为78%,提取功率700 W,提取时间15 min。在最佳提取条件下染料木素的提取率可达到0.465±0.032 mg·g^-1。本研究对于微波提取技术的应用及木豆根的开发和利用都具有显著的意义。     

新型染料木素磺酸酯的合成及对小鼠血吸虫病肝肉芽肿的影响

为寻找抗血吸虫病的新候选化合物,通过正交实验,高选择性、高产率地合成了染料木素的磺酸酯衍生物。结果表明:小鼠感染血吸虫病,经过衍生物治疗后,由血吸虫导致的肉芽肿面积有不同程度的降低,其中低剂量组降低到23.2%,与溶剂组比较,差异显著(P<0.05),优于原药的27.1%及阳性对照组秋水仙碱的27.0%。说明该化合物对血吸虫导致的肉芽肿有一定抑制作用,该化合物有进一步研究价值。     

基于文献计量的染料木素最新研究现状分析

目的:通过分析SCIE中染料木素领域相关论文,了解目前染料木素研究的现状与发展趋势。方法:利用Web of Science,从载文量、作者、地区与机构、关键词等角度统计分析;结果:共检索出9,446篇相关文献,涉及26222位作者及18个国家(地区)与4015个科研机构;染料木素专题学科发展趋于成熟,拥有一支实力雄厚、造诣较深的影响力较大的核心作者群。美国、日本、德国、中国、韩国、英格兰、加拿大、意大利、法国、台湾成为染料木素研究的中心国家和地区。染料木素生理学功能、提取分离方法、分析方法、药理作用、结构修饰等方面的研究为目前染料木素专题研究的主要内容。结论:染料木素该学科需要在临床实践中进一步发展成熟,生物利用度需得到进一步的提高。     

紫草素对人肝癌HepG2细胞增殖的抑制及诱导凋亡作用

目的:观察紫草素抑制人肝癌HepG2细胞增殖及凋亡诱导的作用。方法:用不同浓度的紫草素处理HepG2细胞,MTT检测紫草素对HepG2细胞生长增殖的抑制作用;比色法测定Caspase-3酶活性;Western blot法检测磷酸化Akt蛋白(pAkt)的表达。结果:紫草素能够抑制人肝癌HepG2细胞的增殖,并呈浓度、时间依赖性,紫草素与HepG2细胞作用24小时后Caspase-3酶活性显著增强,显示紫草素诱导的调亡作用随时间的延长而增加;同时,紫草素处理HepG2细胞后,随着药物浓度的增加,磷酸化Akt蛋白表达下降。结论:紫草素可抑制人肝癌细胞HepG2的增殖,诱导HepG2细胞凋亡,凋亡机制可能与紫草素抑制PI3K/Akt信号途径有关。     

RP-HPLC法测定怀槐中染料木素和芒柄花黄素含量

怀槐(Maackia amurensis Rupr.et Maxim.)广泛分布于中国东北三省及内蒙古等地,尤以黑龙江省为多.怀槐作为民间药,其茎、枝可治疗风湿性关节炎; 叶、枝皮可治疗肿瘤; 内皮可治疗深度伤口及久不愈合的溃疡.另外,怀槐树皮在民间还作为祛风湿、消炎、镇痛、健胃、止血等药广泛应用,疗效甚佳.从怀槐的根、枝、叶、果实和心材中分别分得异黄酮、生物碱、NC442类化合物,据报道,其中的异黄酮类化合物表现出对心血管系统的复合作用和明显的抗肿瘤活性[1].作者在对怀槐进行系统的化学成分研究过程中,分离鉴定了9个异黄酮类化合物[2,3],并进行了抑制肿瘤细胞增殖作用研究[4],其中,染料木素(genistein)对胃腺癌细胞(BGC)增殖有一定程度的抑制作用,芒柄花黄素(formononetin)则对白血病细胞(HL-60)增殖有一定的抑制作用.染料木素和芒柄花黄素作为马鞍树属(Maackia Rupr.)植物中普遍存在的2个异黄酮类化合物,其活性研究日益受到重视.采用HPLC法测定染料木素等异黄酮类化合物含量在大豆等其他植物中曾有文献报道[5].为了尽早开发怀槐资源,同时为其资源的综合利用提供科学依据,本文采用HPLC法对怀槐不同部位的染料木素和芒柄花黄素2个有效成分进行了含量测定.     

染料木素4′-O-β-D-吡喃木糖苷的合成与表征

以染料木素为原料,采用相转移催化法与乙酰溴代木糖反应,首次选择性地合成了染料木素4′-O-β-D-吡喃木糖苷.采用聚酰胺柱层析、制备高效液相色谱进行分离纯化得到产物并对其进行了IR、1H、13C NMR和MS结构表征.     

染料木素4＇-O-β-D-吡喃木糖苷的合成与表征

以染料木素为原料,采用相转移催化法与乙酰溴代木糖反应,首次选择性地合成了染料木素4＇-O-β-D-吡喃木糖苷。采用聚酰胺柱层析、制备高效液相色谱进行分离纯化得到产物并对其进行了IR、^1H、^13CNMR和MS结构表征。     

染料木素的乳糖糖苷化修饰及其产物的结构表征

为了改善染料木素在机体内作用的靶向性,本文研究了用具有与肿瘤细胞表面受体定向结合的乳糖来修饰染料木素。采用相转移催化法,首次合成了两种新的化合物:染料木素7-O-β-D-吡喃乳糖苷(4)和染料木素7,4′-二-O-β-D-吡喃乳糖苷(5),并对其进行了IR、MS、1HNMR和13C NMR结构表征。     

茉莉酸甲酯对木豆不定根染料木素含量及抗氧化系统影响

为探讨茉莉酸甲酯(Methyl Jasmonate,MJ)对木豆不定根影响,研究了茉莉酸甲酯的不同浓度及处理时间对木豆不定根中染料木素的含量及抗氧化系统的影响。研究结果表明,诱导子的浓度和处理时间对不定根中染料木素的含量有重要影响。在MJ浓度为100μmol·L^-1,处理时间为48 h时,染料木素的含量最高,为1.38 mg·g^-1,是对照组的4.03倍。在此基础上,研究了100μmol·L^-1的MJ处理对木豆不定根抗氧化系统的影响,结果表明,MJ处理的木豆不定根明显发生了氧化胁迫,O_2^-速率、H_2O_2和MDA含量明显升高,同时不定根中SOD和POD活性明显升高,但是抗氧化酶活性的提高并未消除不定根的氧化胁迫,这种氧化胁迫导致了木豆不定根次生代谢产物合成能力提高。     

木黄酮对人催乳素瘤细胞增殖及其凋亡影响的实验研究

目的：观察木黄酮（genistein,GST)对培养的人垂体催乳素瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法：将CST、β-雌二醇（E2）作用于体外培养的人催乳素瘤细胞,测定MTT值及^3H-TdR掺入量,流式细胞仪测定细胞周期,并用TUNEL法观察细胞凋亡情况。结果：不同浓度的GST可抑制催乳素瘤细胞的增殖,并存在着剂量效应,10^-5mol.L^-1GST可使G1期的细胞比例从对照组的55.3%上升为90.3%;不同浓度的E2以剂量依赖方式刺激催乳素瘤细胞的增殖,并使G2期的细胞比例从对照组的15.6%上升为41.8%,GST和E2的共同作用仍可抑制催乳素瘤细胞的增殖,但抑制程度降低,不同浓度的GST均明显促进催乳素瘤细胞的凋亡,E2对GST的促凋亡作用无明显影响。结论：GST在体外能明显抑制培养人催乳素瘤细胞的增殖,并促进其凋亡,E2可部分拮抗GST的抑制增殖作用,但对其促凋亡作用无明显影响。     

瘤体内注射凋亡素基因诱导人骨肉瘤S180细胞株凋亡研究

观察瘤体内注射凋亡素基因诱导人骨肉瘤S180细胞株凋亡的效果。利用脂体介导将重组质粒pCDNAVP3转染至荷瘤裸鼠肿瘤结节内。PCR和RT PCR检测结果表明 ,质粒可存在和持续表达 14d以上。抑瘤试验结果证实 ,凋亡素可抑制S180细胞的生长 ,抑瘤率达 2 7.2 %。TUNFL染色法检测结果表明 ,试验组的TUNEL阳性细胞率明显高于对照组。上述结果显示 ,所注射的凋亡素基因可诱导人骨肉瘤S180细胞株凋亡。     

苜蓿素对人直肠癌SW1116细胞增殖和凋亡的作用及其机制

本文探讨苜蓿素对人直肠癌SW1116细胞增殖和凋亡的作用及其机制.采用MTr法检测苜蓿素对SW1116细胞生长的抑制作用;AO/EB染色后观察凋亡细胞形态;流式细胞术检测对细胞周期的影响;DNA片段化分析对细胞凋亡的作用;Westem blot检测对Bcl-2和Bax蛋白表达的影响.结果显示,苜蓿素可明显抑制SW1116细胞的增殖,呈剂量依赖性;AO/EB染色观察到给药组出现细胞凋亡特征;苜蓿素可阻滞细胞于G1/G1期和增加SW1116细胞凋亡率;凝胶成像分析仪检测到典型的DNA阶梯状条带;苜蓿素可呈剂量依赖地减弱Bcl-2和增强Bax蛋白表达.上述结果表明,苜蓿素可显著抑制人直肠癌SW1116细胞的增殖,使细胞阻滞于G1/G1期,并可诱导细胞凋亡,其机制可能与下调Bcl-2和上调Bax蛋白有关.     

木黄酮对人催乳素瘤细胞增殖及其凋亡影响的实验研究

目的观察木黄酮(genistein,GST)对培养的人垂体催乳素瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法将GST、β-雌二醇(E2)作用于体外培养的人催乳素瘤细胞,测定MTT值及3H-TdR掺入量,流式细胞仪测定细胞周期,并用TUNEL法观察细胞凋亡情况。结果不同浓度的GST可抑制催乳素瘤细胞的增殖,并存在着剂量效应,10-5mol*L-1GST可使G1期的细胞比例从对照组的55.3%上升为90.3%;不同浓度的E2以剂量依赖方式刺激催乳素瘤细胞的增殖,并使G2期的细胞比例从对照组的15.6%上升为41.8%。GST和E2的共同作用仍可抑制催乳素瘤细胞的增殖,但抑制程度降低。不同浓度的GST均明显促进催乳素瘤细胞的凋亡,E2对GST的促凋亡作用无明显影响。结论GST在体外能明显抑制培养人催乳素瘤细胞的增殖,并促进其凋亡。E2可部分拮抗GST的抑制增殖作用,但对其促凋亡作用无明显影响。