烷基胺玻璃固定化葡萄糖氧化酶测定血糖

定量分析血糖在门诊和许多疾病如糖尿病,甲状腺机能抗进,粘液腺癌．垂体机能减退。肾上腺机能减退和妨碍葡萄糖吸收等疾病的诊断有重要意义。测定葡萄糖有很多方法,采用葡萄糖氧化酶比色法,由于操作简便．专一性强,灵敏度高,因此比较适合用于常规测定⑴。但是葡萄糖氧化酶的价格高。把酶固定在不溶于水的支持物上,酶可以重复使用,因此可以降低成本。虽然葡萄糖氧化酶固定在烷基胺玻璃上。在连续流动系统中测定葡萄糖,但烷基胺固定的酶还没有用来测定血糖。一般来说．烷基胺玻璃抗微生物的腐蚀。有很广的pH适应性和不同溶剂如乙醇和丙酮的稳定性。本文报道利用烷基胺玻璃珠固定葡萄糖氧化酶常规分析血糖。     

相转移催化合成α-烷基氨基酸

简述了相转移催化反应在α 氨基酸烷基化反应中的应用。     

盐酸己烷基双胍对肌酸激酶的活力及构象的影响

测定了盐酸己烷基双胍(C_6H_(13)C_2N_5H_(?)HCl;记为HBGC)对肌酸激酶(Creatine Kinase;记为CK)的活力的影响;同时利用荧光光谱,紫外差光谱.付里叶红外光谱等手段测定了HBGC对CK构象的影响,结果表明.HBGC为0.07mol时就使CK完全失活、而且在高浓度的HBGC中变性后的CK.稀释时即可完全复活;CK的活力丧失明显先于构象的变化,与溴化+烷基三甲铵不同,HBGC可以破坏CK的二级结构,使之完全无序化.     

溴化十烷基三甲铵对肌酸激酶的变性及复性

测定了溴化十烷基三甲铵(C_(10)H_(21)N(CH_3)_3Br;记为C_(10)NM_3)对肌酸激酶(Creatine Kinase;记为C.K.)的活力及构象的影响,以及变性后C.K.的复性。实验结果表明:C_(10)NM_3对C.K.有很强的变性能力,在0.06M时,就可以使C.K.完全失活;在0.08M时,就可使C.K.内部的6个巯基有4个暴露出来;与SDS变性剂不同,C.K.在高浓度的C_(10)NM_3中变性以后,直接冲稀时就可以完全复性。FTIR以及CD等实验方法证明,尽管C_(10)NM_3能使C.K.的构象发生明显变化,但C.K.的二级结构几乎不受C_(10)NM_3的影响。     

用改进的十六烷基溴化铵法提取顽拗性种子DNA

近年来，随着种子生理研究的深入，有时需要从顽拗性种子中提取高纯度的DNA或RNA来进行一些重要基因的克隆和表达研究。但由于这类种子大多富含酚类物质”’，用常规的酚／氯仿法提取DNA时很难将它们除去。因为酚类物质的干扰，所得的DNA不能被限制性内切酶彻底水解，也不能进行后续的Southern杂交和基因克隆步骤。尽管用氯化绝密度梯度离心的方法可能会克服这一问题，但这一方法费时、费力，且受超离心条件的限制，有些实验室还不能采用。因此，我们在反复试验的基础上，建立了适于富含酚类植物材料DNA纯化的CTAB（cetrylmethylam…     

溴代十六烷基吡啶对香石竹切花的保鲜效应

研究切花瓶插液中加入0．3g．L^-1季铵盐化合物溴代十六烷基吡啶（CPB）后,瓶插液中微生物密度和切花茎杆基部病原菌分离频率下降,切花后期的水分平衡和鲜重能较好地维持,花冠直径增大,观赏寿命延长。     

海藻酸钠与十二烷基聚氧乙烯醚硫酸钠复配体系泡沫及流变性能的研究

采用罗氏泡沫仪和流变仪对海藻酸钠(NaAlg)/十二烷基聚氧乙烯醚硫酸钠(AES)复配体系的起泡稳泡性能及流变行为进行研究,以探索NaAlg对AES起泡稳定性的影响及作用机理。泡沫性能试验显示,NaAlg的加入,提高了AES溶液的起泡能力及泡沫稳定性,溶液的pH值由7.0降到5.0,混合体系的起泡稳泡性明显增加。流变性研究展示,随着NaAlg浓度的增加,溶液的粘度呈增大的趋势,溶液总体呈现牛顿流体性质,当NaAlg浓度大于0.5%时,低剪切速率区,溶液仍呈现牛顿流体性质,而在高剪切速率区,有剪切变稀的现象出现。总体来看,各试液的G’相似文献   

氯代十六烷基吡啶在聚唾液酸分离纯化中的应用

利用氯代十六烷基吡啶对聚唾液酸特异性的络合效应,分离E．Coli发酵液中的聚唾液酸。通过单因素实验和正交实验分析确定氯代十六烷基吡啶与聚唾液酸发生络合和解离反应的最优工艺条件：络合时NaCl浓度0．05mol／L,pH6．0,加入的氯代十六烷基吡啶的质量为聚唾液酸质量的3倍;解离时NaCl浓度0．8mol／L,解离温度50℃。得到的聚唾液酸纯度大于95％,回收率大于80％。     

链霉菌Streptomyces sp.KIB-H1424中的一个新的烷基间苯二酚类化合物

运用色谱学方法对一株来自云南省玉溪市元江县的土壤链霉菌Streptomyces sp.KIB-H1424的次级代谢产物进行分离纯化,得到6个单体化合物。运用NMR、MS及与文献数据对比等手段,确定其为一系列的烷基间苯二酚类似物,其中包括1个新的烷基间苯二酚类化合物Adiposatatin E(1)以及5个已知的烷基间苯二酚类似物Adipostatin A(2)、Adiposatin B(3)、Adipostatin C(4)、Adipostatin D(5)和5-Heptadecyl-1,3-benzenediol(6)。运用滤纸片法测定6个化合物对几种病原细菌和真菌的抑菌活性,发现化合物1~6不具有显著的抑菌活性。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定血浆中烷基间苯二酚

目的：建立超高效液相色谱-串联质谱法测定血浆中2种全麦食品生物标志物烷基间苯二酚（ARs）的方法。方法：血浆加入内标，经丙酮提取，离心取上清液过滤，滤液吹干异丙醇定容，使用实心核色谱柱（2.1mm×100mm，1.6μm）为分离柱，以异丙醇∶乙腈=30∶70为流动相，等度洗脱，质谱采用电喷雾负离子模式，多反应监测模式进行检测，用内标法定量。结果：2种ARs在2~200ng/mL浓度范围内线性良好，r2>0.998 0。方法检出限为0.1ng/mL，定量限为0.3ng/mL，加标回收率为88.2%~110%，相对标准偏差为2.48%~13.2%（n=6）。结论：该方法快速准确、灵敏度高、前处理简单，能够有效测定血浆中2种ARs的含量。     

溴化+烷基三甲基铵滴定时氨基酰化酶的失活与构象变化的比较

研究了阳离子去污剂-溴化+烷基三甲基铵变性时氨基酰酶的失活与构象变化.当用溴化+烷基三甲基铵滴定氨基酰化酶时,随着去污剂浓度增大,酶的活力逐渐丧失,至50mmolL时酶完全失活.用荧光发射光谱(295nm激发)的方法监测了氨基酰化酶的构象变化.发现氨基酰化酶失活先于构象变化.从这一结果看来.金属酶的活性部位构象可能也是比整个分子的构象具有较大的柔性或运动性.     

氧化石墨烯/十二烷基二甲基苄基氯化铵复合物的制备和抗菌性能研究

本文研究了氧化石墨烯/十二烷基二甲基苄基氯化铵( GO-1227)复合抗菌材料的制备及其抗菌性能。通过傅立叶红外光谱的检测,确定GO-1227复合物已经成功合成。为了研究复合物的抗菌活性,以大肠杆菌为代表,通过观察大肠杆菌的表面形貌变化和细菌体外离子浓度变化,证明GO-1227复合物具有相对于原材料更好的抗菌性能。     

溪黄草的苯丙素、大柱香波龙烷、生物碱和烷基糖苷类成分

为阐明溪黄草[Isodon serra(Maxim.)Kudo]地上部分的化学成分,采用色谱分离方法从其乙醇提取物中得到9个化合物。经光谱数据对比,它们的结构分别鉴定为迷迭香酸甲酯(1)、3,3′-双(3,4-二氢-4-羟基-6,8-二甲氧基-2H-1-苯并吡喃)(2)、7-大柱香波龙烯-3,5,6,9-四醇(3)、7-大柱香波龙烯-3,5,6,9-四醇9-O-β-D-葡萄糖苷(4)、5,6-环氧-7-大柱香波龙烯-3,9-二醇(5)、(-)-黑麦草内酯(6)、3-醛基吲哚(7)、乙基α-L-呋喃阿拉伯糖苷(8)和乙基β-D-木糖苷(9)。化合物1和2为苯丙素类、3~6为大柱香波龙烷类、7为生物碱类、8和9为烷基糖苷类。化合物2~9为首次从该植物中报道。     

表面活性剂溴化十六烷基吡啶对 产膜表皮葡萄球菌粘附作用的影响

目的通过表面活性剂溴化十六烷基吡啶抗表皮葡萄球菌生物被膜菌粘附作用的研究,为临床针对产膜表皮葡萄球菌引起的相关感染提供可能的探索方向和防治途径。方法以万古霉素为阳性对照,利用XTT减低法,评价溴化十六烷基吡啶对表皮葡萄球菌初始粘附的影响。结果浓度为4、2和1 mg/L的溴化十六烷基吡啶对表皮葡萄球菌初始粘附均有显著的抑制作用,与阴性对照组比较差异有统计学意义(t=0.4555~34.9664,P0.01);用浓度为32、16、8和4 mg/L的溴化十六烷基吡啶对实验材料预处理后,对表皮葡萄球菌初始粘附抑制作用明显,与阴性对照组比较差异有统计学意义(t=1.1125~21.9246,P0.001)。结论溴化十六烷基吡啶无论是直接作用或是对实验材料预处理,对表皮葡萄球菌形成生物被膜的初始粘附过程具有显著抑制作用。     

溴化+烷基三甲基铵滴定时氨基酰化酶的失活与构象变化的比较

研究了阳离子去污剂-溴化+烷基三甲基铵变性时氨基酰酶的失活与构象变化.当用溴化+烷基三甲基铵滴定氨基酰化酶时,随着去污剂浓度增大,酶的活力逐渐丧失,至50mmolL时酶完全失活.用荧光发射光谱(295nm激发)的方法监测了氨基酰化酶的构象变化.发现氨基酰化酶失活先于构象变化.从这一结果看来.金属酶的活性部位构象可能也是比整个分子的构象具有较大的柔性或运动性.     

嗜热丁烷氧化古菌Candidatus Syntrophoarchaeum烷基转移酶MtaA催化丁基辅酶M的分子机制研究

【背景】嗜热古菌Candidatus Syntrophoarchaeum可以与硫酸盐还原细菌共生,通过逆转产甲烷途径进行正丁烷的氧化,但在该过程中负责催化丁基辅酶M氧化的酶尚未确定。【目的】利用分子动力学模拟证明Ca.Syntrophoarchaeum中mta A基因编码的蛋白可以特异性催化丁基辅酶M中丁基的转移,并非转移甲基。【方法】使用Methanosarcina mazei辅酶M甲基转移酶Mta A的晶体结构(PDB ID:4ay8)作为模板,对Mta A_1 (Gen Bank登录号OFV65993.1)和Mta A_2 (Gen Bank登录号OFV65678.1)进行同源建模。使用分子对接得到两者分别结合CH_3-Co M和C_4H_9-Co M时的结构,并用AMBER18进行分子动力学模拟。【结果】当Mta A_1和Mta A_2分别结合C_4H_9-Co M时,表现出与4ay8晶体结构类似的TIM-Barrel折叠三维结构,但在活性中心形状、Zn~(2+)与底物距离以及活性位点附近氨基酸配位方式等方面存在差异,这可能是导致Ca.Syntrophoarchaeum中mta A基因编码的蛋白催化丁基辅酶M氧化的原因。其中Mta A_2与4ay8结构更相似,活性中心氨基酸配位更完整,暗示其更可能具备催化活性。然而当Mta A_1和Mta A_2分别结合CH_3-Co M时,整体结构不合实际,活性中心Zn~(2+)与底物距离过远,表明底物几乎不可能与酶结合。【结论】Ca.Syntrophoarchaeum中的Mta A_1和Mta A_2很可能是特异性的丁基转移酶,而非催化甲基的转移,其中Mta A_2具备活性的可能性更高。     

大孔吸附树脂AB-8和十八烷基硅胶色谱分离纯化蛹虫草发酵液中虫草素工艺研究

主要研究了从蛹虫草发酵液中提取虫草素的工艺,确定了大孔吸附树脂AB-8及十八烷基键合硅胶反相层析柱对蛹虫草发酵液中虫草素的分离条件;吸附最佳工艺条件为上样液p H6,上样浓度0.4mg/m L,上样量5BV,吸附流速1.0BV/h;解吸最佳工艺条件包括解吸液20%乙醇,解吸体积15BV,解吸流速4BV/h。得到的解吸液进一步以十八烷基键合硅胶分离,条件为上样液p H6,梯度洗脱,流动相为p H6的水和p H6的乙醇。洗脱液通过结晶和重结晶得到精制虫草素。三步得到的虫草素纯度分别达到40%、90%和99%以上。     

以三级胺天然产物改构物纳洛酮和纳曲酮为底物的N-脱烷基的反应研究与分析

三级胺纳洛酮和纳曲酮进行N-脱烷基反应试图得到二级胺去甲羟吗啡酮的反应曾用过氯甲酸乙酯,产率很低。我们正在进一步探索这类反应。     

内消旋-二氨基庚二酸脱氢酶关键氨基酸位点的改造提高对烷基取代2-酮酸的催化活力

【背景】高效实现D-氨基酸的生物合成一直是人们关注的热点。内消旋-二氨基庚二酸脱氢酶(meso-diaminopimelate dehydrogenase,DAPDH)能够直接催化2-酮酸和氨合成D-氨基酸。【目的】提高DAPDH对烷基取代2-酮酸的催化活力,并解释其催化机制。【方法】以来源于嗜热共生杆菌(Symbiobacteriumthermophilum)的内消旋-二氨基庚二酸脱氢酶(StDAPDH)为模板,在前期结构分析结合被选择位点突变结果的基础上,确定对H227位进行定点饱和突变,并以D-丙氨酸、D-2-氨基丁酸、D-正缬氨酸、D-谷氨酸为底物进行筛选。【结果】获得突变体H227Q和H227N。突变体H227Q对丙酮酸、2-氧代丁酸、2-氧代戊酸、2-酮戊二酸的比活力比野生型分别提高了10.9、11.5、8.6和7.6倍。动力学参数表明,突变体H227Q同时提高了酶对底物的亲和力及催化常数,使其对丙酮酸的催化效率(k_(cat)/K_m)相较于野生型提高了9.4倍。利用分子模拟技术分析突变体H227Q与产物氨基酸之间的相互作用表明,227位的谷氨酰胺通过与氨基酸的羧酸形成氢键,使得氨基酸产物Cα上的氢和辅酶烟酰胺环C4原子之间的距离缩短。【结论】利用定向进化技术提高DAPDH对烷基取代2-酮酸的催化活力,有助于开发新型的高效生物催化剂,这些工作也为下一步继续进行更具挑战性的D-氨基酸研究提供了基础。