无花粉蛋白在体内定位的放射自显影研究

天花粉蛋白是从中草药发掘出来的一个植物蛋白性的中期引产和抗增生性滋养层细胞疾病的药物。在临床应用中已累积了大量经验。关于作用机理的研究也进行了各方面的工作(上海实验生物研究所第二研究室,1976)。在小白鼠以间接荧光标记抗体法,追踪了给药后不同时间,“纯制天花粉”抗原分布的动态。结果证明,天花粉蛋白的原     

植物的放射自显影法

一、前言自从贝克勒耳(H.Becguerel)于1886年发现天然放射性以后,俄国学者于1904年就首次的应用自显影方法研究了天然放射性物质在动物机体内不同组织的分布,但是这     

植物组织中光合产物的放射自显影定位

植物光合产物,都为水溶性,不能用常规石腊制片技术进行放射自显影研究。为了定位研究这类水溶性化合物在植物组织中的分布,参考Appleton、Stumpf等的方法,利用我国现有条件,试验了冰冻制片、冻装核4乳胶干板技术,取得了自显影定位照片。其方法如下。     

电镜放射自显影术

<正> 电镜放射自显影术是指用电子显微镜观察的放射自显影术。与用光学显微镜观察的放射自显影术比较,具有下列优点:(一)分辨力高,可达0.1微米,比光学的高10倍,因此,能更精确地确定放射源的位置;(二)能把放射性和亚显微结构相联系,因而可用于研究细胞器的功能活动。     

植物组织中光合产物的放射自显影定位——冷冻取代树脂包埋法

本文采用以简易的广口冰瓶内加干冰作冷冻剂,以替代超低温(-80℃)冰箱。用以冷冻无水丙酮作取代液,对植物材料进行冷冻取代脱水,固定。经无水GMA预聚合后浸透、包埋、低温紫外线照射聚合,半薄切片、制片和涂敷核_4型乳胶,曝光后显、定影等操作。为植物体中溶性物质(包括引进外源溶性物质)放射自显影定位、定向研究、提供技术方法。     

电子显微镜放射自显影操作方法的比较

电子显微镜放射自显影方法,能够把结构和功能联系起来,对研究某一标记物在细胞内的部位及动力学问题等提供了良好的方法。但此方法有很多细节掌握不好就会影响结果。下面分六个问题谈谈:     

薄切片的放射自显影术

薄切片是指厚度为0．5～1μm的树脂类切片。文献中称它为厚切片（thicksection）或半薄切片（semithinsectio）,籍以与电镜观察用的薄切片（thinsection）区别。我国已习惯称电镜用的切片为超薄切片,因此,把这类切片称薄切片就能说明其比超薄切片厚,比普通石蜡切片薄的特性。用薄切片作放射自显影具有下列优点：（1）改善分辨力：放射自显影象的分辨力与样品的厚度成反比,薄切片的厚度低于普通石蜡切片,所以其分辨力高于用石蜡切片制作的放射自显影象的。（2）减少人工假象：用薄切片作放射自显影,不需去除包埋剂,因此,提供了平正…     

放射自显影在医学研究中的应用

放射自显影是利用感光乳胶记录被研究材料中放射性物质分布和定位的方法。它的原理和普通照象一样,由于被研究材料中的放射性同位素放出的射线作用于感光乳胶,使感光乳胶中的卤化银感光形成潜影,经显影剂作用后感光的卤化银还原成为黑色的银元素     

生物学中的电镜放射自显影术

放射自显影是利用放射性同位素发射的带电粒子(α或β粒子),作用于感光材料的卤化银晶体而产生潜影,再经显影把“像”显示出来,以研究该放射性物质在生物机体(整体的、组织的或细胞的和亚细胞水平的)内的径迹或颗粒定位的一种技术。由于采用各种     

~3H-硝硫氰胺在血吸虫体内分布的放射自显影的研究

硝硫氰胺有较好的杀血吸虫效果,研究它在虫体内的分布,对探讨其杀虫机制有一定意义。 ~3H-硝硫氰胺O_2N—(?)—NH—(?)—NCS比放射性强度为1.9居里/毫克分子,制成储存丙酮溶液1毫居里/毫升。放化纯度在99％以上。 用两只感染血吸虫尾蚴约1 1/2月的小白鼠,按80毫克/公斤给予非氚标记的硝硫氰胺加500微居里氚标记硝硫氰胺,一次灌胃完毕。后分别在灌药两小时及24小时后断头处死,从其肝内取出已肝移的     

放射自显影技术应用的现状及未来趋势

放射自显影通常指结合了放射标记探针的分子或组织通过感光材料（如X光胶片）曝光、显影、定影获得金属银颗粒图像的实验技术，它是定性、定量分析与探针结合的靶分子含量及其在组织中分布的传统手段，在生物学基础研究以及临床前新药研究等方面有着广泛的应用。近年来磷屏成像技术的普及显著缩短了放射自显影技术的实验周期，并拓展了在短半衰期正电子放射核素中的应用。本文重点介绍放射自显影技术应用中尚不能全面被非放射性替代技术取代的一些实验工作进展，主要包括某些酶活性的测定、磷酸化位点分析、低丰度核酸检测以及与放射性探针特异结合的靶点（如受体等）在组织中的分布等实验技术工作。适应当前应用趋势的变化对放射示踪共用技术平台的建设，对帮助技术支撑人员提供更好的、具有针对性的技术性服务具有一定的指导意义。     

冷冻取代和干膜显微放射自显影

显微放射自显影技术已经在生物学研究中得到广泛的应用。但由于常规制片一系列操作中出现有各种溶液的取代更替,从而难以对一些水溶性放射性化合物在组织和细胞内的定位予以确切鉴定,同时放射性化合物     

用放射自显影法测定局部胃粘膜血流量最好

测定胃粘膜血流量的方法很多,但都各有缺点,如氨基比林清除法仅限于测定全胃或小胃粘膜血流量。在局部胃粘膜血流量测定方法中,放射微球法在统计误差和分辨能力方面有一定的缺陷,而多普勒测速计的测定需要插入胃腔;氢气清除法虽然有较高的定位能力,但也仅限于一定数量预先选定的部位,并且要求组织和电极之间有物理性接触。最近W.J.Angerson等采用放射自显影方法测定局部胃粘膜血流量,可     

用阿片受体放射自显影法研究电针对电惊厥的作用

采用大鼠脑切片的阿片受体结合和放射自显影技术,分析了与电惊厥发作有关的脑内结构及其阿片受体在电针抑制惊厥发作时的变化。图象处理和光密度测定的结果表明,反复电惊厥使尾核、海马、缰核和杏仁核内的阿片受体密度增加。而经电针处理后再给予电惊厥,与电惊厥组相比,海马、缰核和杏仁核内的受体密度降低,在尾核亦显示了受体密度降低的趋势。这一结果为这些结构内的阿片受体参与电惊厥发作和针刺制痫的过程提供了形态学方面的证据。     

胰岛素作用原理的研究——Ⅳ.胰岛素受体定位的放射自显影观察

胰岛素是一种代谢功能比较广泛的激素。早期许多工作,主要是研究它对脂肪和糖代谢的调节作用和途径;近年来,又认识到它能刺激核酸和蛋白质的合成,有促进细胞生长的功能。但对它的原发作用部位一直不清楚,这是许多人关心的一个问题。Sutherland(1972)提出蛋白质激素作用方式的假说,认为首先是激素与细胞膜上的特异性部位结合,激发了细胞内cAMP的改变,这种变化做为第二信使再引起细胞产生一系列生理效应。Cuatrecasas(1969,1972)的一系列工作更进一步证明胰岛素的特异性受体是在细胞膜上,最后并得出一结论认为细胞质内没有胰岛素的特异性结合物质,这样就使人们形成一个     

大鼠精子细胞的糖蛋白合成——电镜放射自显影研究

本实验用电镜放射自显影技术,在注射~3H-岩藻糖后30分钟和1、4、8、24小时示踪大鼠精子细胞合成糖蛋白的情况以及新合成糖蛋白的去路。实验结果表明: 1.在注射~3H-岩藻糖后30分钟到1小时,放射自显影标记最初出现在高尔基体上。岩藻糖分子首先在高尔基体的外周(皮质)部位掺入糖蛋白,随后,新合成的糖蛋白并不直接转运到别处,而在高尔基体中央(髓质)部位作短暂贮存。说明中央部位在功能上是高尔基体的一个重要组成部分。2.~3H-岩藻糖不仅掺入高尔基期和顶帽期精子细胞的高尔基体,而且掺入顶体期精子细胞的高尔基体,说明顶体期的高尔基体仍有合成糖蛋白的功能。3.新合成糖蛋白的去路,在精子细胞发育的不同阶段是不一样的。在高尔基期和顶帽期精子细胞中,新合成的糖蛋白     

小麦花药培养中小孢子DNA合成的放射自显影研究

用放射自显影术研究小麦花药培养中小孢子的雄核发育,发现培养24小时后3H－胸腺嘧啶核苷掺入单核晚期小孢子,2．5天后营养细胞核中有3H－胸腺嘧啶核苷掺入,由A和B途径形成多细胞花粉的过程中,超始几次孢子体分裂,细胞的DNA合成是同步进行的。在多细胞花粉形成时逐渐变为不同步,生殖核的DNA合成不活跃,偶而能被标记上,个别合成DNA的生殖细胞形成类胚柄结构,当培养基中蔗糖浓度低（3％）时,培养早期小孢子内核的DNA合成正常进行,3H－胸腺嘧啶核苷比高糖浓度（9％）更易惨入小孢子,但经1－2次分裂后,核不再分裂,细胞壁不形成,所以3％的糖浓度中,多细胞花粉不能形成,主要不是DNA不能复制,而是细胞分裂和细胞壁的形成受阻所致。     

小麦花药培养中小孢子DNA合成的放射自显影研究

用放射自显影术研究小麦花药培养中小孢子的雄核发育,发现培养24小时后3H－胸腺嘧啶核苷掺入单核晚期小孢子,2．5天后营养细胞核中有3H－胸腺嘧啶核苷掺入,由A和B途径形成多细胞花粉的过程中,超始几次孢子体分裂,细胞的DNA合成是同步进行的。在多细胞花粉形成时逐渐变为不同步,生殖核的DNA合成不活跃,偶而能被标记上,个别合成DNA的生殖细胞形成类胚柄结构,当培养基中蔗糖浓度低（3％）时,培养早期小孢子内核的DNA合成正常进行,3H－胸腺嘧啶核苷比高糖浓度（9％）更易惨入小孢子,但经1－2次分裂后,核不再分裂,细胞壁不形成,所以3％的糖浓度中,多细胞花粉不能形成,主要不是DNA不能复制,而是细胞分裂和细胞壁的形成受阻所致。     

放射自显影技术(Autoradiography)在昆虫学中的应用

一、基本原理 利用放射性物质放射出来的粒子,打到照象底片或带有乳胶层的玻璃底板上,使乳胶中银盐还原而出现黑点。放射性强的银盐还原多,故洗出象片黑点密集,放射性弱的则黑点少而稀。首次用生物材料作放射自显影是远在1895年法国物理学家H.Bee-querel观察到铀矿石能使照相底片感光后,就有人在蛙皮上涂以镭的化合物,然后放在照象底片上,洗出后就明显地看到蛙体上镭涂过的部位。放射性同位素放出的粒子为α-、β-粒子(或软β-和硬β-粒子),放射出的射线为γ-射线。α-粒子是电离很密的粒子,能量大、射程很短,可以得到很明显的影象,在组织化学上应用较多的为放射β-粒子及γ-射线的元素。β-粒子小、轻、射程大,能量高,但造成影象的清晰度则随能量加大和射程增远而降低,如P~(32)放射的β-粒子要比S~(35)的高16倍以上,放射的能量愈大,射程愈远,β-粒子