云芝菌丝体多糖的分离纯化研究

利用热水抽提从云芝菌丝体中提取胞内多糖,初步纯化后,用DEAE-Sepharose CL-6B进行分离,从中分离出两个带电荷多糖组分即CVP-I和CVP-Ⅱ,对这两个组分分别用Sepharose CL-6B凝胶柱层析进行纯度鉴定,均出现单一峰,然后用紫外扫描发现这两个组分均出现蛋白多糖的特征吸收,从而可以判断这两个组分是蛋白结合多糖。     

马来眼子菜多糖的提取纯化及组成性质

本文通过正交实验研究马来眼子菜多糖的提取工艺,并初步研究其组成性质.采用热水提取马来眼子菜多糖(Potamogeton malaianus polysaecharide PMPS),经乙醇沉淀,活性碳脱色,Sevage法去蛋白,DEAE-Cellulose离子交换和Sephadex G-25柱层析纯化,电泳鉴定纯度和纸层析分析其组成.确定最佳提取条件为加10倍体积的水,80℃提取3 h,所得二个多糖电泳均为单一组分,层析证明马来眼子菜多糖I(PMPS I)由D-果糖和D-木糖组成,马来眼子菜多糖Ⅱ(PMPSⅡ)则含有D-葡萄糖、D-果糖和另一未知单糖成分.     

当归多糖的分离纯化及其部分性质的研究

中药当归经热水提取、乙醇分级沉淀、ＤＥＡＥ纤维素和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ１５０柱层析,得ＡｓⅢａ和ＡｓⅢｂ两个多糖级份。ＡｓⅢａ和ＡｓⅢｂ经醋酸纤维薄膜电泳、玻璃纤维纸电泳和凝胶柱层析分析,证明都是均一的,经琼脂糖凝胶柱层析测得ＡｓⅢａ和ＡｓⅢｂ的分子量分别为８５ＫＤ和４９ＫＤ左右。组成分析表明ＡｓⅢａ由葡萄糖组成,ＡｓⅢｂ由葡萄糖、甘露糖和阿拉伯糖组成,三者比为１０∶１０∶４。     

明党参多糖的分离、纯化及其理化性质

伞形科植物明党参根的热水提取液经乙醇沉淀、去蛋白、逆向流水透析,DEAE-纤维素柱层析和 Sephadex G-100柱层析得纯品明党参多糖(CSP)。凝胶过滤及聚丙烯酰胺凝胶电泳证明为单一均匀成分。CSP 的比旋度为〔α〕_D~(20)=+170.9(C=0.4,H_2o),不含氮,分子量52000,具有845cm~(-1)红外吸收峰。经纸层析和气相色谱分析,CSP 含鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖,其摩尔比为0.09:0.25:0.17:1.0:1.56:11.94。     

半枝莲多糖的分离、纯化及其理化性质

唇形科植物半枝莲全草的热水提取液经乙醇沉淀、去蛋白、逆向流水透析、DEAE-纤维素柱层析和Sephadex G-100柱层析得纯品半枝莲多糖(S-BP)。凝胶过滤及聚丙烯酰胺凝胶电泳证明为单一均匀成分。SBP的比旋度为[α]_D~(20)=+26.2°,不含氮,分子量13000,具有890cm~(-1)红外吸收峰。经纸层析和气相色谱分析,SBP含鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖,其克分子比为1.14:1.50:0.20:0.75:1.0:2.18。     

芦荟多糖的分离纯化及性质研究

采用水提醇沉法提取芦荟多糖,经DEAE-C32柱层析分离,Sephades G-100进一步纯化,得AⅠ、AⅡ和AⅢ三种芦荟多糖。Sephadex G-100凝胶色谱表明,AⅠ组分为均一组分,其分子量约为3.8×10~4。借助气相色谱技术,研究了芦荟粗多糖和AⅠ组分的单糖组成。另外,红外光谱鉴定芦荟多糖主要为吡喃多糖。     

箬叶多糖的分离纯化及其理化性质的研究

采用分步提取的方式从中药箬叶中分离得到８种多糖组分：酸性杂多糖ＦＳ、ＦＥ、ＦⅠ,β－Ｄ－葡萄糖醛酸聚糖ＦⅡ和四种半纤维素多糖α－Ｄ－木聚糖ＦⅢ－ａ、ＦⅢ－ｂ、ＦⅣ－ａ及ＦⅣ－ｂ．紫外光谱、红外光谱、凝胶色谱、元素分析等结果表明８种箬叶多糖为纯品．并采用纸层析,气相色谱分析确定其单糖组成．采用高效凝胶渗透色谱ＧＰＣ法测定了４种箬叶多糖ＦＥ、ＦⅠ、ＦⅢ－ａ及ＦⅣ－ａ的重均分子量Ｍｗ、数均分子量Ｍｎ,均为大分子,分子量分布较窄,纯度较高．     

白芍多糖分离纯化及性质分析

采用热水浸提.乙醇沉淀法中药白芍(Paeonia Albiflora Pall)水提取液中分离纯化得到一种多糖蛋白复合物,命名为PAⅡ(Paeonia Albiflora Pall PolysaccharideⅡ,PAⅡ).电泳、FPLC和HPLC检测其纯度;红外光谱和气相色谱法对其结构和组成进行初步分析.结果表明PAⅡ为均一多糖组分,是以D-葡萄吡喃糖为主的多糖-蛋白复合物,总糖含量为85.0%,蛋白含量为13.2%;该糖为吡喃型结构,糖肽键为非O-型;单糖组分为葡萄糖、阿拉伯糖、甘露糖、鼠李糖、木糖,摩尔比为153:2.6:1.25:1:1,平均分子量为5.25×104.     

阿魏侧耳多糖的分离纯化与抗肿瘤活性的研究*

从阿魏侧耳 (Pleurotusferulae)子实体中用热水浸提出粗多糖PFW ,将PFW脱蛋白后 ,经DEAE—纤维素柱层析 ,得两种多糖PF1 和PF2 。用光散射和GPC联机测定 :PF1 含有两种组分其重均分子量分别为 7 875× 1 0 5 和 3 2 4 5× 1 0 4 ;PF2 重均分子量为 3 1 87× 1 0 6。用IR和GC分析它们组成和结构 ,结果表明 :PF1 由鼠李糖、葡萄糖、半乳糖和甘露糖组成 ,含有 β 糖苷键和甘露糖苷 ;PF2 由鼠李糖、木糖、葡萄糖、半乳糖和甘露糖组成 ,含有α 糖苷键。给小鼠腹腔注射多糖 ,对移植性肿瘤S 1 80均有一定的抑制作用     

柱状田头菇(茶薪菇)金属硫蛋白的分离纯化与特性研究*

应用快速灌注色谱系统首次从经Cd2+诱导的柱状田头菇(茶薪菇)Agrocybecylindracea(DC.:Fr:)R.Maoire菌丝体中分离得到一种镉结合蛋白。通过SephadexG-75凝胶过滤层析,原子吸收光谱分析(AAS),巯基含量测定及紫外吸收光谱分析表明这种镉结合蛋白具有金属硫蛋白(metallothionein,MT)的理化性质:即分子量为6kDa、每分子MT含18个半胱氨酸残基并结合7个镉原子、具有镉硫金属簇的特征紫外吸收光谱,初步鉴定为茶薪菇Cd-MT。     

柱状田头菇(茶薪菇)金属硫蛋白的分离纯化与特性研究

应用快速灌注色谱系统首次从经Cd2+诱导的柱状田头菇(茶薪菇)Agrocybecylindracea(DC.:Fr:)R.Maoire菌丝体中分离得到一种镉结合蛋白。通过SephadexG-75凝胶过滤层析,原子吸收光谱分析(AAS),巯基含量测定及紫外吸收光谱分析表明这种镉结合蛋白具有金属硫蛋白(metallothionein,MT)的理化性质:即分子量为6kDa、每分子MT含18个半胱氨酸残基并结合7个镉原子、具有镉硫金属簇的特征紫外吸收光谱,初步鉴定为茶薪菇Cd-MT。     

酵母菌类金属硫蛋白的分离、纯化及性质鉴定

经过对酵母菌的金属抗性试验和培养条件试验,确定了高产类金属硫蛋白的酿酒酵母菌株Cu-21（Saccharomyces cerevisiae Cu-21）及其最佳培养条件。对该菌株的菌体蛋白进行SephadexG-100、DEAE-52结合的两次柱分离纯化,获得了类金属硫蛋白的三个亚型,蛋白性质鉴定结果表明含三个亚型、分子量小、富含半胱氨酸和金属元素,具有典型的巯基吸收特性。     

酵母菌类金属硫蛋白的分离、纯化及性质鉴定*

经过对酵母菌的金属抗性试验和培养条件试验,确定了高产类金属硫蛋白的酿酒酵母菌株Cu-21（Saccharomyces cerevisiae Cu-21）及其最佳培养条件。对该菌株的菌体蛋白进行SephadexG-100、DEAE-52结合的两次柱分离纯化,获得了类金属硫蛋白的三个亚型,蛋白性质鉴定结果表明含三个亚型、分子量小、富含半胱氨酸和金属元素,具有典型的巯基吸收特性。     

猴头菌子实体和菌丝体多糖的分离纯化与理化特征的比较*

人工栽培的猴头菌子实体和固体培养的菌丝体分别经热水提取,浓缩、醇析后得子实体粗多糖（HFP）和菌丝体粗多糖（HMP）,HFP的得率和多糖含量均高于HMP;两者再经透析、Sevag法脱蛋白、乙醇分级沉淀、SephadexG-100柱层析纯化,得子实体纯多糖hfp-1和菌丝体纯多糖 hmp-2,经HPLC检测hfp-1和hmp-2为单一均匀多糖。气相色谱分析表明hfp-1的单糖组成为阿拉伯糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖,摩尔比为：0.12：0.04：1.00：0.71;hmp-2的单糖组成为阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖,摩尔比为：0.25：0.41：0.31：1.00：0.29。紫外光谱分析表明组成中不含核酸和蛋白质,红外光谱分析二者均有多糖特征吸收峰,hfp-1有β-型连接的吸收峰,hmp-2无明显的β-型连接的吸收峰;经HPLC进行分子量测定,hfp-1的分子量为54000,hmp-2的分子量为68000。猴头菌子实体多糖和菌丝体多糖在化学组成上有一定的差异。     

虫花菌胞外糖蛋白的分离、纯化及其性质研究

虫花菌(Isaria farinosa(Dicks)Fr.)发酵液经超滤浓缩、乙醇沉淀、弱酸性阳离子交换树脂和弱碱性阴离子交换树脂去杂蛋白后,又经Sephadex G-150纯化得到PG。PG经醋酸纤维膜电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳和Sepharose 4B柱层析,证明是单一均匀的糖蛋白。PG的分子量为11.1万。PG的糖含量为92.35％、蛋白含量为7.61％。PG用气相色谱、红外光谱分析表明含有D-甘露糖、D-半乳糖,其摩尔比是5.93:1。推测PG主要含α-型糖苷键。PG对小鼠实体瘤S-180有一定的抑制作用,抑瘤率为22.2％。     

艰难梭菌荚膜多糖的提纯和分析

本文采用改进的丙酮法制备了艰难梭菌荚膜多糖。制备的荚膜多糖纯品含荚膜多糖达72％,在Sepharope-4B凝胶层析中,该英膜多糖的分配系数(Kd)为0.77。经对流免疫电泳法鉴定,纯化后的荚膜多糖仍保持着原性,用制备的艰难梭菌荚膜多糖免疫小白鼠,经间接法ELISA检测,未见抗荚膜多糖抗体明显增高。     

绒毛石耳多糖UV—2和UV—3的分离纯化及其性质

从绒毛石耳（Ｕｍｂｉｌｉｃａｒｉａ　　ｖｅｌｌｅａ（Ｌ）Ａｃｈ．）提取的水溶性粗多糖,经乙醇分级沉淀和ＤＥＡＥ一纤维素柱层析得到两个组分（ＵＶ－２和ＵＶ－３）,经ｓｅｐｈａｒｏｓｅ６Ｂ柱层析和超速离心沉降鉴定为均一组分。通过糖组成分析、高碘酸盐氧化、Ｓｍｉｔｈ降解和甲基化分析证明,它们是带有部分乙酰基团的多分枝结构的杂多糖,ＵＶ－２的主链是由β（１→３）连接的葡萄糖和甘露糖残基构成,ＵＶ－３的主链是由β（１→３）（１→４）连接的葡萄糖残基构成。药理试验结果表明,ＵＶ－２具有增强免疫作用,能够明显促进小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能,提高淋巴细胞的转化率。     

极大螺旋藻多糖的分离,纯化及其抗氧化特性的研究

对极大螺旋藻(Spirulina maxima)用热水抽提、脱蛋白、醇析得粗多糖,再经DEAE-Sephadex A-25柱层析纯化得到2个组分的多糖精品(SPSⅠ和SPSⅡ),分别经Sephadex G-150柱层析鉴定为单一组分,它的紫外可见光谱只出现195.00nm的单峰。在体外设计产生超氧阴自由基(O_2~ )、脂质自由基(R·)和羟自由基(OH·)等3个体系,分别加入2个组分不同浓度的多糖,结果表明:极大螺旋藻多糖具有显著的清除OH·的活性(P<0.05),但对O_2~ 没有显著作用(P>0.1);在低浓度条件下(2.5×10~(-4)g/L),它们可以清除R·(P<0.05),SPSⅠ比SPSⅡ的活性显著;在较高浓度下清除R·的活性有所降低(P>0.2)。说明极大螺旋藻多糖的显著抗氧化作用主要表现在清除活性氧中最活泼的OH·方面。