TGF-βⅡ型受体在实验性IgA肾病肾小管的表达

用免疫组织化学方法研究了ＴＧＦ－βⅡ型受体在实验性ＩｇＡ肾病及正常小鼠肾内的表达。结果表明ＴＧＦ－βⅡ型受体在实验性ＩｇＡ肾病及正常小鼠肾内均有表达,但最明显的是ＩｇＡ肾病的肾小管。该结果提示ＩｇＡ肾病时,肾小管有可能在ＴＧＦ－β的作用下增加细胞外基质的合成,从而导致肾小管间质的纤维化     

G蛋白偶联受体激活丝裂原活化蛋白激酶的机理

多种Ｇ蛋白偶联受体的均能激活丝裂原活化蛋白激酶。Ｇｉ蛋白偶联受体主要通过其βγ亚基,依赖Ｒａｓ蛋白途径;在大多数哺乳类细胞中Ｇｓ蛋白偶联受体通过ＰＫＡ途径抑制Ｒａｓ依赖的ＭＡＰＫ活化,但在ＣＯＳ－７细胞,Ｇｓ蛋白偶联受体通过ＰＫＡ途径使表达的ＭＡＰＫ活化;Ｇｑ蛋白偶联受体主要通过ＰＫＣ途径依赖或非依赖于Ｒａｓ使ＭＡＰＫ活化。ＭＡＰＫ信号途径中ＥＧＦ受体,酪氨酸激酶及调节蛋白Ｓｈｃ等联级反应蛋白可能     

Hib在调理过程中补体成分C_3的外膜蛋白结合位点

Ｈｉｂ在调理过程中补体成分Ｃ_３的外膜蛋白结合位点用从正常人血清（ＮＨＳ）分离出的不同浓度的ＩｇＧ抗体调理Ｉ（１２５）标记的ｂ型流感嗜血杆菌（Ｈｉｂ）菌体,分离纯化出ＩｇＧ－外膜蛋白（ＯＭＰ）复合物。用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和放射免疫沉淀试验进行分析,结果...     

急性低氧下β-内啡肽参与对大鼠体液免疫的抑制性调节

正常大鼠脑室注射β－内啡肽（β－ＥＰ）（１ｎｇ／ｒａｔ）使溶血素生成和鸡卵白蛋白的ＩｇＧ抗体产生受到明显抑制,脾脏单个核细胞ＤＮＡ含量也下降,７ｋｍ４８ｈ低氧同样使溶血素的产生明显下降,大鼠脑室注射阿片受体阻断剂钠屈酮（ｎａｌｔｒｅｘｏｎｅ）可使低氧造成的ＩｇＧ和溶血素生成抑制翻转,低氧抑制的脾脏单个核细胞ＤＮＡ合成得到部分阻断,脑室注射β－ＥＰ与７ｋｍ低氧１２ｈ一样使脾脏中儿茶酚胺含量增加,因而     

Rho蛋白

常见的异源三聚体ＧＴＰ结合蛋白 ,是通过其 (亚基在无活性的ＧＤＰ结合状态和有活性的ＧＴＰ结合状态之间的转换来完成对膜相关受体传来的信号反应 ,而与之同样起“分子开关”作用的另一类小分子Ｇ蛋白 (ｓｍａｌｌＧｐｒｏｔｅｉｎ ,又称ＧＴＰａｓｅ ,即ＧＴＰ酶 ) ,它们的激活不是直接通过与激动型的Ｇ蛋白偶联受体 (Ｇｐｒｏｔｅｉｎ ｃｏｕｐｌｅｄｒｅｃｅｐｔｏｒ,ＧＰＣＲ)相互作用而调节其活性 ,而是通过鸟嘌呤核苷交换因子(ｇｕａｎｉｎｅｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｅｘｃｈａｎｇｅｆａｃｔｏｒ,ＧＥＦ)来控制这类小分子Ｇ蛋白的ＧＴ…     

G蛋白对离子通道的调控

Ｇ蛋白对离子通道的调控鲍国斌濮璐裴钢（中国科学院上海细胞生物学研究所,上海２０００３１关键词Ｇ蛋白Ｇ蛋白偶联受体离子通道Ｇ蛋白（Ｇｐｒｏｔｅｉｎ）由α、β、γ三个亚基组成,位于细胞膜的胞液侧。Ｇα亚基具有ＧＴＰ酶活性,使Ｇ蛋白偶联受体和效应分子发生可...     

细胞因子受体的组成,结构功能及信号传导机制

细胞因子受体种类繁多,分属于不同受体超家族。活化受体的功能可分为：ＰＴＫ型受体或其结合蛋白具有ＰＴＫ活性、丝／苏氨酸蛋白激酶型受体以及与Ｇ蛋白耦联的受体等。不同受体与其配体结合后,通过对受体后信号传导成分的可逆的磷酸化反应传递信号,最终通过对其终端成分,如酶活力、基因表达、细胞骨架蛋白的功能、膜通透性等的调节,导致细胞的生物效应。     

人γ干扰素（IFN－γ）－表皮生长因子（EGF）融合蛋白的抗肿瘤细胞增殖作用与靶细胞的EGF受体有关

采用表皮生长因子（ＥＧＦ）受体丰富的Ａ４３１细胞进一步研究了人ＩＦＮ－γ－ＥＧＦ３融合蛋白￣〔１〕的抗细胞分裂活性,以及它和靶细胞ＥＧＦ受体的关系。结果表明,ＩＦＮ－γ－ＥＧＦ３融合蛋白的抗肿瘤细胞增殖作用明显高于其母体分子。￣１２５Ｉ－ＥＧＦ受体竞争抑制试验表明,ＩＦＮ－γ可与ＥＧＦ竞争Ａ４３１细胞的ＥＧＦ受体,而ＩＮＦ－γ－ＥＧＦ３融合蛋白的ＥＧＦ受体竞争抑制作用更为明显,说明人ＩＦＮ－γ和ＩＦＮ－γ－ＥＧＦ３融合蛋白的抗肿瘤细胞分裂活性,与靶细胞ＥＧＦ受体被竟争抑制密切相关。     

血管内皮细胞生长因子受体Flt—1胞外区基因的克隆及其在中国仓？…

朋原代培养的人脐静脉血管内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）提取细胞总ＲＮＡ,采用逆转录ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ）方法得到ＶＥＧＦ受体Ｆｌｔ－１胞外区前３个ＩｇＧ样区域ｃＤＮＡ片段（Ｆｌｔ－１ｎ３）。将获得的受体基因克隆到真核表达载体ｐｃＤ－ＮＡ３．１中,得到重组质粒ｐｃＤＮＡ３．１／Ｆｌｔ－１ｎ３,通过南体转染方法将其转入中国仓鼠卵巢细胞（ＣＨＯ）,用Ｇ４１８筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞砍隆。经固相结合实验筛选     

降钙素基因相关肽（CGRP）受体的纯化和鉴定

降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）为３７肽,它在体内主要分布于神经系统和心血管系统,是较强的扩张血管物质。人们已认识到脑部的ＣＧＲＰ最多,由于新鲜猪脑来源丰富,故我们选用猪脑为材料来纯化ＣＧＲＰ受体。以期为该受体的深入研究提供足够的材料和奠定基础,纯化的受体将用于制备抗ＣＧＲＰ受体的单克隆抗体,为了从猪脑中纯化ＣＲＲＰ受体,首先用含有胆盐的磷酸盐缓冲液将该受体从猪脑细胞膜上解离下来,解离下来的受体量较多,而杂蛋白较少,且受体活性可保持较长时间不降低。以离子交换柱层析（ＱＡＥ－Ｓｅｐｈａｄｅｘ－Ａ－２５）进行初步分离纯化,再用化学合成的ＣＧＲＰ与活化的琼脂糖（Ａｆｆｉ－Ｇｅｌ－１０,Ｂｉｏ－Ｒａｄ公司产品）制备的亲和层析柱进行亲和层析,取得的纯化受体保留了与１２５Ｉ－ＣａＧＲＰ结合的能力,而与降钙素（Ｃａｌｃｉｔｏｎｉｎ）神经肽Ｙ（ＮｅｕｒｏｐｅｐｔｉｄｅＹ）和Ｋａｔａｃａｌｃｉｎ等无交叉反应,但与有４６％氨基酸序列同源性的Ａｍｙｌｉｎ有一定交叉反应。纯化的受体经ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳和高压液相色谱（ＨＰＬＣ）鉴定呈现单一蛋白条带或蛋白峰,其位置对应分子量为６６ｋＤ。     

抗丙肝病毒核心抗原单克隆抗体的研制与初步鉴定

用基因工程重组技术获得的丙肝病毒（ＨＣＶ）核心蛋白抗原与鼠血清白蛋白交联后免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠,用杂交瘤技术成功地建立了４株稳定分泌抗核心抗原单克隆抗体的杂交瘤细胞,试验结果表明,该４株ＭｃＡｂｓ与免疫抗原及核心区Ｃ３３肽、ＣＰ９、ＣＰ１０抗原有较强的抗原－抗体反应,与ＨＣＶ ＮＳ３、ＮＳ４、ＮＳ５无反应,在竞争ＥＬＩＳＡ中,对ＨＣＶ－ＩｇＧ阳性血清有较好的抑制作用。４株ＭｃＡｂｓ中３株为ＩｇＧ２     

加热对IgG结合DNA能力的影响

 加热对ＩｇＧ结合ＤＮＡ能力的影响梁俊峰,郑昌学（清华大学生物科学与技术系,北京１０００８４）聚集免疫球蛋白Ｇ（ＡｇｇｒｅｇａｔｅｄｌｇＧ）是指在某些条件（如温度、自由基等）影响下,ＩｇＧ自身聚集所形成的ＩｇＧ的多聚体．聚集不仅影响ＩｇＧ的免疫反应活性...     

乙型肝炎IgM和IgG—补体双特异性循环免疫复合物的意义

对不同临床类型的乙型肝炎患者,采用捕捉法ＥＬＩＳＡ,以ＩｇＭ和ＩｇＧ类抗体排除抗原性异物的免疫反应进行比较研究。结果发现,两种反应能力在慢性ＨＢＣ感染中基本相同,表现出明显的病型差异,而在急性ＨＢＶ感染中则不同,前者反应强度显著主于后者;二者阳性率在慢性ＨＢＶ感染的临床类型中虽均随其肝损害加重而显著上升,但ＩｇＧ／Ｃ３双特异性循环免疫复合物与ＡＬＴ有关,而ＩｇＭ／Ｃ３－ＴＣＩＣ与ＡＬＴ无关;二者阳     

精氨酸加压素对大鼠抗体产生和淋巴细胞增殖的上调作用

大鼠侧脑室注射１００ｎｇ精氨酸加压素（ＡＶＰ）,用ＥＬＩＳＡ法检测血中对鸡卵白 白抗原产生的ＩｇＧ抗体水平。结果显示,ＩｇＧ水平高于对照,而ＡＶＰ的Ｖ１受体阻断剂ＤＰＡＶＰ则可阻断此作用;ｉｃｖ８００ｎｇＡＶＰ,大鼠的ＳＲＢＣ溶血素 水平高于对照;ｉｃｖ１００ｎｇ、８００ｎｇＡＶＰ２ｈ后,脾淋巴细胞对ＭＴＴ产生的颜色反应均比对照增加,而ＤＰＡＶＰ可阻断之;ｉｃｖ８００ＡＶＰ２ｈ后,脾淋巴细胞对ＭＴ     

人肿瘤坏死因子可溶性受体I与人IgG：Fc的融合基因的构建及其在大？…

采用ＰＣＲ方法引入编码氨基酸残基序列为ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ的镜头,将ｓＴＮＦＲ１ ｃＤＮＡ与人ＩｇＧ：Ｆｃ ｃＤＮＡ片段连接,构成融合基因ｆｕｓｉｏｎ １。将ｆｕｓｉｏｎ １克隆在ｐＢＳⅡ ＳＫ＾＋载体上。测定序列后,转入ｐＲＳＥＴ－Ｂ表达载体,在大肠杆菌中表达,得到分子量为４５ｋＤａ的蛋白,超声破碎后电泳证明表达的蛋白为包涵体,经免疫蛋白印迹证实为我们构建的融合蛋白。     

系统性红斑狼疮患者和正常人血清IgG结构的光谱学研究

园二色谱和萤光光谱的研究表明,ＳＬＥ患者和正常人血清ＩｇＧ分子以及ＩｇＧ－Ｆ（ａｂ＇）２片段在结构上都存在明显的差异．同正常人相比,ＳＬＥ患者血清ＩｇＧ园二色谱中２１３ｎｍ处负峰的椭园值比正常人的高出近一倍,ＩｇＧ分子中的疏水基团（如Ｔｒｐ等）处于正电区,并且趋向于分布在蛋白质分子的表面．ＤＮＡ时ＩｇＧ空间结构影响很小,虽然高浓度的ＤＮＡ有熄灭ＩｇＧ分子萤光的作用,但是低浓度ＤＮＡ对正常人血清ＩｇＧ的萤光几乎没有影响．Ｆｅ２＋引起ＳＬＥ患者和正常人ＩｇＧ的紫外吸收光谱出现明显的差别。     

转基因烟草生产霍乱毒素B亚单位的纯化

提取转基因烟草叶片总蛋白,用经溴化氰活化的Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ４Ｂ偶联有抗ＣＴ ＩｇＧ色谱柱,得到了表达产物ＣＴＢ蛋白质。经ＰＡＧＥ、Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ、琼脂糖免疫扩散和免疫电泳等方法鉴定表明该蛋白与天然ＣＴＢ相同。     

M受体亚型与G蛋白

５种不同的Ｍ受体亚型的基因已被克隆，用免疫沉淀法观察了它们在体内的分布；Ｇ蛋白调节许多膜受体介导的细胞内功能，在牛的中枢神经系统中发现至少有５种独立的Ｇ蛋白，且每种Ｇ蛋白都由３个亚基构成。实验表明，５种Ｍ受体亚型通过不同的Ｇ蛋白，可同时与ｃＡＭＰ改变和ＰＩ翻转发生偶联作用。     

HCV/HBV复合抗原基因的克隆、表达及免疫应答研究

为探讨ＨＣＶ／ＨＢＶ 复合疫苗的可行性,将合成的丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）复合多表位抗原基因ＰＣＸ与ＨＢｓＡｇ 基因连接成ＰＣＸＳ基因,与β－半乳糖苷酶（ＧＺ）基因融合后在大肠杆菌及减毒鼠伤寒沙门氏菌中获得表达．目的蛋白ＧＺ－ＰＣＸＳ可被抗－ＨＢｓ 及抗－ＨＣＶ 抗体所特异识别．ＧＺ－ＰＣＸＳ抗原皮下注射免疫ＩＣＲ小鼠后,诱发了较高水平的抗－ＧＺ－ＰＣＸＳＩｇＧ反应．构建的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌ＳＬ３２６１（ｐＷＲ／ＰＣＸＳ）口服免疫小鼠后,诱发了高水平的ＣＤ８＋ Ｔ细胞增殖反应及抗ＧＺ－ＰＣＸＳＩｇＧ反应．所有免疫小鼠均未见明显的毒副作用．该研究揭示,ＨＣＶ／ＨＢＶ 复合抗原可诱发特异性体液免疫及细胞免疫应答,而活菌苗口服可能是理想的免疫途径,为ＨＣＶ／ＨＢＶ 双价疫苗研究提供了一定的理论及实验依据．     

Ｇ蛋白偶联受体失敏及内吞相关蛋白的研究进展

Ｇ蛋白偶联受体的失敏和内吞对受体功能的调节非常重要,但其具体机制并不十分清楚,在某些方面还存在分歧。近年来的研究发现,第二信使激酶、Ｇ蛋白偶联受体激酶、arrestin及笼形蛋白等在此过程中扮演了重要的角度,本文就与受体失敏和内吞关系密切的几种蛋白的研究进展进行综述。