异种“免疫”核糖核酸介导人肝癌细胞的免疫细胞溶解

从人肝癌细胞(BEL-7402)高度免疫过的绵羊的淋巴器官中抽提的肝癌“免疫”RNA,和正常人外周血淋巴细胞温育后,在体外能介导肝癌细胞的免疫细胞溶解。用5-~(125)碘-2′-脱氧尿嘧啶核苷标记人肝癌靶细胞的微量细胞毒性试验进行测定时观察到,正常人淋巴细胞经肝癌“免疫”RNA处理后,其细胞毒性指数在16次实验中有10次有显著增高,但是,在与对照RNA温育后其细胞毒性指数(除一次实验外)均未出现有显著意义的变化。肝癌“免疫”RNA在用RNA酶降解后,传递细胞毒性免疫反应的活性即消失,而用DNA酶或灰链霉菌蛋白酶处理,却仍保持这种传递能力。由此证明,异种“免疫”RNA能够把针对人肝癌细胞表面抗原的细胞免疫性传递给正常人淋巴细胞。     

人体白细胞转移因子和“免疫”核糖核酸的联合抽提法——Ⅱ.“免疫”核糖核酸

本文继续介绍联合抽提法的第Ⅱ部分“免疫”核糖核酸(iRNA)的抽提。将白细胞匀浆沉淀残渣按Scherrer 和Darnell 的十二烷基磺酸钠加苯酚的热抽提法抽提。每克白细胞可得iRNAl～2毫克。A_(260)/A_(230)=2.05～2.26,A_(260)/A_(280)=2.03～2.20。RNA 含量为48.33±4.72%,DNA 含量为4.31±2.53%,蛋白质为2.76±0.32%,糖原含量为42.92±9.92%。聚丙烯酰胺凝胶电泳显示五条区带,相当于4S、8S、9S、15S 和20S。冻干的iRNA 制剂经动物实验证明无毒性、无热原和无过敏性,但对家兔具有抗原性。制剂经RNase、DNase 或pronase 处理后与抗血清仍有沉淀反应,但经唾液淀粉酶处理后沉淀线消失。所以认为抗原性系由制剂中所含糖原所引起。溶于肝素溶液的制剂注射于病人,能提高其迟发型皮肤变态反应及细胞免疫反应。     

人体白细胞转移因子和“免疫”核糖核酸的联合抽提法——Ⅱ.“免疫”核糖核酸

本文继续介绍联合抽提法的第Ⅱ部分“免疫”核糖核酸(iRNA)的抽提。将白细胞匀浆沉淀残渣按Scherrer和Darnell的十二烷基磺酸钠加苯酚的热抽提法抽提。每克白细胞可得iRNA1～2毫克。A_(260)/A_(230)=2.05～2.26,A_(260)/A_(280)=2.03～2.20。RNA含量为48.33±4.72%,DNA含量为4.31±2.53%,蛋白质为2.76±0.32%,糖原含量为42.92±9.92%。聚丙烯酰胺凝胶电泳显示五条区带,相当于4S、83、9S、15S和20S。冻干的iRNA制剂经动物实验证明无毒性、无热原和无过敏性,但对家兔具有抗原性。制剂经RNase、DNase或pronase处理后与抗血清仍有沉淀反应,但经唾液淀粉酶处理后沉淀线消失。所以认为抗原性系由制剂中所含糖原所引起。溶于肝素溶液的制剂注射于病人,能提高其迟发型皮肤变态反应及细胞免疫反应。     

淋巴细胞单抗致敏的红细胞花环试验和荧光染色法检测人外周血液的淋巴细胞

本文应用T、B淋巴细胞和T细胞亚群单抗致敏的红细胞花环试验结合荧光染色法,检测了50例健康人外周血液内的淋巴细胞。人外周血液中与T_3单抗致敏红细胞形成花环的T_~+细胞平均百分率为61.29±11.686,与T_4单抗致敏红细胞形成花环的T_4~+细胞平均百分率为32.76±8.974,与T_8单抗致敏红细胞形成花环的T_8~+细胞平均百分率为21.66±7.443,B细胞以单抗致敏红细胞识别的B细胞平均百分率为19.55±10.018,但标准差过高,个体间淋巴细胞的百分率波动范围相当大。用同一方法和试剂连续检测同一个体的淋巴细胞和T细胞亚群的百分率亦很难得到重复性结果。我们对检测人外周血液中的淋巴细胞的方法判断人体的免疫状态,和作为各种疾病的诊断指标进行了讨论。     

传代人淋巴细胞免疫猪的免疫效果初探

目的用传代人淋巴细胞替代人T淋巴细胞进行猪的免疫,用于试制抗人T细胞猪免疫球蛋白(anti-human T lymphocyte porcine immunoglobulin,P-ATG)免疫猪血浆,并评价其免疫效果。方法大量培养传代人淋巴细胞至免疫所需浓度及数量,采用常规猪免疫程序进行2次基础免疫及1次加强免疫,获得免疫猪血浆,用E玫瑰花环形成抑制试验和淋巴细胞毒试验进行效价检测。结果 3批免疫猪血浆的E玫瑰花环形成抑制试验结果均达到1∶1 000(花环形成率均小于对照组平均花环形成率的75%),淋巴细胞毒试验结果均达到1∶500(淋巴细胞死亡率均大于20%),效价均达到《中华人民共和国药典》2015版(三部)中生产用免疫猪血浆的效价标准。结论传代人淋巴细胞可作为人T淋巴细胞的替代免疫原进行猪的免疫,获得了效价合格的免疫猪血浆,用于P-ATG的制备。     

免疫核糖核酸研究的进展

从定型的免疫活性细胞中抽提出的核糖核酸制品称为免疫核糖核酸。各种体内或体外的试验证明免疫核糖核酸能超越种间屏障特异地传递免疫反应。现在有证据表明,免疫核糖核酸可能具有信息核糖核酸的分子特征;它的主要来源是巨噬细胞,而受其作用后产生效应的细胞是 T 淋巴细胞或 B 淋巴细胞。免疫核糖核酸研究是一项意义重大而探索性较强的工作,本文着重讨论了关于其化学本质、细胞来源和作用机理等方面的新近进展,并且指出了今后工作中有待解决的若干关键问题。     

鸡淋巴细胞与鹌鹁红细胞的花环形成

人T淋巴细胞与绵羊红细胞花环形成的特性已广泛用为分离淋巴细胞的重要手段。也曾有人报道数种哺乳动物淋巴细胞可与异种动物     

生物材料对淋巴细胞转化及花环形成影响的实验研究

淋巴细胞转化能力可反映机体的细胞免疫反应现象,我们选用六种生物材料与正常人全血接触,三种材料与植入相应的材料大鼠外周血再次接触,经培养７２小时后,计数其淋巴细胞的转化率和Ｔ细胞环花形成率,结果表明,不同的生物材料所引起的淋巴细胞转化率和花环形成率有所不同,其中醋酸纤维素和硅橡胶与正常人血接触时分别有促进淋巴细胞转化的现象,牦牛心包动物体内植入后外周血再接触培养淋巴细胞转化率和Ｔ细胞花环形成率明显高     

用Ig—SPA花环法检测人末稍血淋巴细胞的初步探讨

目前国内外多采用荧光抗体法检测 B淋巴细胞。即用 FITC 标记抗人免疫球蛋白(Ig),然后和人淋巴细胞作用,因 B细胞上有特异的膜表面免疫球蛋白(SmIg)可与抗人 Ig 结合,从而使 B 细胞显示荧光,借助荧光显微镜计算阳性细胞的百分率。此法由于标记荧光的抗人     

免疫核糖核酸——转移免疫信息的物质

致敏淋巴细胞含有两类转移免疫信息的物质,一类为可透析的转移因子(Transfer factor, TF);另一类为不可透析的免疫核糖核酸(Immune RNA, iRNA),这是两类具有重要潜能     

抗绿脓杆菌核糖核酸的免疫活性研究

在应用抗菌素比较容易地解决了各种细菌感染的治疗之后,临床上出现了“条件致病菌”的感染问题。在革兰氏阴性杆菌中,绿脓杆菌是分布广、自然抗药性发生率高的一类条件致病细菌。它所引起的感染性疾病,近来有逐年增加的趋势,已经成为死亡率较高的难治病之一。绿脓杆菌感染常在机体防御功能低下时发生。虽然临床上不断使用新的抗菌素,但如果机体条件不改善,疗效就受到一定限制。因此国内外都在研究应用各种免疫制剂治疗和予防绿脓杆菌的感染,以便给临床控制和治疗绿脓杆菌感染寻找新途径。鉴于免疫核糖核酸有特异促进噬菌细     

肺癌个体基因型免疫核糖核酸的研制

为进一步研究肿瘤的免疫治疗,探索一种型特异、体专一的肿瘤免疫核糖核酸的制备方法。取一供体肺癌患者术后切下的病变组织免疫羊,再用羊的免疫器官提制核酸,然后回注射于供体。实验中制备的型、体特异性免疫核糖核酸,各种药理指标能够达到国家同类药品标准。此法可获得有实用价值的肿瘤免疫核糖核酸,为临床应用提供了理论依据。     

抗呼吸道合胞病毒免疫核糖核酸免疫活性的研究

本文在小鼠模型系统中,应用ELISA和~(125)IUdR释放试验分别研究抗呼吸道合胞病毒免疫核糖核酸(RSV—i—RNA)诱生血清特异性抗体活性和以细胞毒活性为指标检测其增强细胞免疫的作用。实验结果表明:RSV-i-RNA能诱生血清特异性抗体和提高鼠脾细胞对靶细胞的杀伤作用,且明显高于正常核糖核酸对照组。 RSV-i-RNA的上述作用可被RNase所阻断,但不受DNase和Pronase的影响。     

抗人淋巴细胞免疫球蛋的临床应用进展

抗人淋巴细胞免疫球蛋白制品已经临床研究,证实有效,其中包括在肾,心脏,肝等器官移植的免疫排斥预防和治疗,骨髓移植的移植物抗宿主反应的预防,以及再生障碍性贫血的治疗等。     

可溶性核糖核酸的研究——Ⅱ.脱氨作用对可溶性核糖核酸性质的影响

(1)脫氨SRNA的ε(p)及超离心沉降行为皆与SRNA相似。脫氨SRNA的紫外吸收高峰及低峰皆稍向短波长方向移动。Mg~(++)使SRNA产生紫外低吸收效应,尿素使SRNA的光吸收值增高;在同样条件下,Mg~(++)及尿素对脫氨SRNA紫外吸收值影响极小。脫氨SRNA易为Ba~(++)等金属离子所沉淀,在pH5—7.2范圍內,0.083MBaCl_2即可使脫氨SRNA沉淀約90%,而SRNA的沉淀尚不足10%。脫氨SRNA經碱或牛胰RNase水解后,則不再能为BaCl_2所沉淀。温度对BaCl_2沉淀脫氨SRNA与SRNA有显然不同的影响。(2)用大腸杆菌RNase和牛胰RNase两种酶水解脫氨SRNA与SRNA时,Mg~(++)可以提高这两种酶对前者的降解速度,而对后者起稳定作用。(3)大腸杆菌RNase降解脫氨SRNA可以得到黄嘌呤、次黄嘌呤及尿嘧啶三种单核苷酸,降解SRNA可以得到腺嘌呤、胞嘧啶、鳥嘌呤及尿嘧啶四种单核苷酸。     

可溶性核糖核酸的研究 Ⅰ.金属离子对可溶性核糖核酸酶解稳定性的作用

(1)各种金属离子对大腸杆菌RNase活力的影响不同,Mg~++不仅沒有抑制作用而且是大腸杆菌RNase表現活力的必需因素。Ca~(++)与Ag~(++)相似,Co~(++)对酶活力影响較小,而Ni~(++)則有抑制作用。(2)在Mg~(++)、Ca~(++)或Na~+等存在下,大腸杆菌RNase和牛胰RNase降解SRNA的速度远比HRNA为慢;利用Mg~(++)对这两种RNase活力的影响不同,在Mg~(++)存在与否下,比較SRNA与HRNA降解速度的結果指出,SRNA的二級結构是其酶解緩慢的主要原因,而Mg~(++)等金属离子对稳定其二級結构起着重要的作用。这种作用在60℃仍然存在。(3)SRNA影响RNase对HRNA的降解。这种現象可能用酸溶性核苷酸与RNA一起沉淀的作用解释,但也不能完全排除两个結构相似底物(SRNA与HRNA)同时存在相互竞爭的可能性。(4)对SRNA不能为其他核酸降解酶完全降解或降解速度緩慢的原因及其生理意义进行了討論。     

地塞米松对大鼠坐骨神经损伤后运动神经元的恢复作用

本实验使用120只Wistar系大鼠,采用定位、定量、定时的方法压挫坐骨神经后。给予治疗剂量的地塞米松,动态观察脊髓腰段伤侧前角运动神经元的SDH、AChE和ACP的酶组织化学及细胞超微结构的变化。结果提示,地塞米松对受伤害神经元具有稳定细胞酶活性和细胞超微结构的作用,可以减轻继发性损害,对神经元的恢复有积极作用。     

抗细菌免疫核糖核酸i-RNA进入细胞后活性表达的动态研究

在证明抗菌i—RNA治疗条件致病性细菌感染有明显疗效后,i—RNA的活性传递和表达受到了重视。虽然可以用敏感的ELISA法从体液中或把i—RNA注入细胞后在细胞培养上清液中检测出特异抗体,但有关i—RNA进入生体或细胞后的活性动态,特别是抗体在细胞内出现和消失的规律尚不清楚。弄清i—RNA进入生体细胞或培养细胞后抗体活性表达的开始和持续时间,不仅为探索i—RNA作     

人核糖核酸酶A超家族抗微生物活性及其作用机制

人核糖核酸酶A(human RNase A)超家族包含13个具有不同生物活性的成员(RNase 1～RNase 13),其蛋白质结构除具有催化保守序列外,还具有显著多样性的序列,决定了人类核糖核酸酶A可发挥核糖核酸酶活性之外的生物学功能。人核糖核酸酶A超家族成员在多种免疫细胞例如嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、单核细胞和巨噬细胞中表达,并可被分泌以发挥多种多样的生物学功能,包括抗微生物活性、促进宿主防御、参与血管生成及精子成熟等。其中,人核糖核酸酶A超家族部分成员,可通过水解病毒RNA、抑制病毒复制、破坏细菌细胞壁、促进微生物凝集、损伤寄生虫细胞膜和线粒体膜等直接作用,以及通过宿主天然免疫细胞介导的间接作用,发挥抗微生物及寄生虫活性,参与宿主防御。本文对人核糖核酸酶A的抗微生物(包括病毒、细菌、真菌)和抗寄生虫活性及其作用机制进行综述,并对人核糖核酸酶A作为抗微生物活性物质和天然免疫分子,用于治疗严重和耐药微生物感染的前景进行展望。