硫化氢对大鼠内毒素性急性肺损伤肺泡表面活性物质的影响

目的：观察脂多糖（LPS）所致内毒素性急性肺损伤（ALI）大鼠肺泡表面活性物质（PS）的变化及硫化氢（H2S）对PS的影响,探讨H2S对肺脏的作用机制。方法：雄性SD大鼠共48只,随机分为6组（n=8）：空白对照组、LPS组、LPS＋NaHS低、中、高剂量组、LPS＋PPG组。空白对照组给予生理盐水,LPS组给予LPS,LPS＋NaHS低、中、高剂量组和LPS＋PPG组分别在给予LPS3h时腹腔注射低、中、高剂量氢硫化钠（NariS）或炔丙基甘氨酸（PPG）。各组均于给予生理盐水或LPS6h时电镜下观察肺泡Ⅱ型上皮细胞（AEC-Ⅱ）的形态改变,检测血浆中H2S含量、肺组织中胱硫醚-γ-裂解酶（CSE）活性、肺泡灌洗液（BALF）中总蛋白（1P）和总磷脂（TPL）含量、及肺组织中肺泡表面活性蛋白A、B、C（SP-A、B、C）mRNA表达的变化。结果：①与空白对照组比较,LPS组AEC-Ⅱ超微结构明显受损,血浆中H2S含量、肺组织中CSE活性、BALF中TPL的含量、及肺组织中SP-A、B、CmRNA表达均明显降低（P〈0．05,P〈0．01）,BALF中TP的含量明显增加（P〈0．01）;②与LPS组比较,LPS＋NaHS低、中、高剂量组,AEC-Ⅱ超微结构均有所恢复,血浆中H2S含量、肺组织中CSE海性、SP-AmRNA表达均明显升高（P〈0．05,P〈0．01）;LPS＋NaHS中、高剂量组BALF中吼含量明显增高,SP-BmRNA表达升高（P〈0．05）;LPS＋NaHS高剂量组BALF中,IP含量明显降低（P〈0．05）;LPS＋NaHS各剂量组SP-CznRNA表达无明显变化;③与LPS组比较,LPS＋PPG组AEC-Ⅱ超微结构仍损伤严重,血浆中H2S含量、肺组织中CSE活性、BALF中TPL的含量、及肺组织中SP-A、B、CmRNA表达均明显降低（P〈0．05）,BALF中TP的含量明显升高（P〈0．05）。结论：PS降低是内毒素性ALI的重要病理生理过程,H2S对LPS诱导的ALI有保护性作用,其机制可能与H2S对PS的调节有关。     

海水淹溺致大鼠急性肺损伤模型的建立

目的：建立海水淹溺肺损伤（SWD-ALl）的大鼠模型,为SWD—ALl的基础及救治研究提供平台。方法：128只健康SD大鼠随机分为4组,即对照（CG）组和海水灌注（SGI、SG2、SG4）组（分别气管内注入1、2、4mL／kg海水）。观察大鼠气管内海水灌注后症状以及各组呼吸频率、心率、动脉血气、肺湿／干重r~（W／D）,留取肺组织病理标本观察病变。结果：与对照组比较,海水灌注组大鼠心率、呼吸频率明显加快,气道有白色泡沫渗出物,口唇发绀,肺部满布湿罗音。动脉血气分析氧分压（PaO2）和二氧化碳分压（Pa—CO2）显著降低（P〈0．01）;SGl、SG2组30min测氧合指数（Pa02／FiO2）低于300mmHg,之后逐渐升高至接近正常,SG4组各时间点测PaOJFi02得均在300mmHg以下;各组间比较,SG4组肺组织湿／干重比（W／D）明显高于其他组（P〈0．01）。肺组织病理观察,光镜下肺间质水肿,肺泡隔断裂,大量的红细胞及炎性细胞浸润。结论：经气管内灌注海水4mL／kg,可成功建立海水淹溺急性肺损伤的动物模型。     

大鼠胰腺炎相关性急性肺损伤模型的探讨

目的研究5%牛磺胆酸钠(TAC)逆行胆胰管注射诱发急性胰腺炎相关肺损伤的大鼠模型。方法采用改进的胆胰管逆行注射TAC造成大鼠急性出血坏死型胰腺炎(AHNP)模型,将大鼠随机分为3组:AHNP组、假手术组、地塞米松(DXM)治疗组。造模成功后,立即静脉注射大剂量DXM(5 mg/kg)。术后于3、6、12 h处死,留取外周血测定血清淀粉酶、脂肪酶,取右肺中叶测定肺湿干比值及作病理切片,计算等级评分评价肺损伤;行支气管肺泡灌洗,以灌洗液白蛋白与血清白蛋白含量比值计算肺指数。结果AHNP组36、、12 h肺通透性指数、湿干比值及病理学评分逐渐增加,经单因素方差分析,61、2 h组高于3 h组(P<0.05),前两者于6、12 h组组内比较差异不显著(P>0.05)。DXM组于术后61、2 h,各项肺损伤指标均低于AHNP组(P<0.05)。结论TAC胆胰管逆行注射造成AHNP模型大鼠于术后6 h即出现明显的肺损伤表现,符合PALI病理改变,与临床AHNP合并急性肺损伤(ALI)的病理过程相似,可于此时相点作为研究AHNP合并肺损伤的模型。     

蛇床子素在大鼠肠缺血再灌注肺损伤模型中的肺保护机制研究

目的：探讨蛇床子素（Osthole）在大鼠肠缺血再灌注肺损伤（IIRI）中的保护机制。方法：健康雄性SD大鼠40只随机分为假手术组（sham组）、缺血再灌注组（I／R）和两个不同剂量给药组（Ost）,其中缺血再灌注组和给药组采用夹闭大鼠肠系膜上动脉60min后松开动脉夹形成缺血再灌注模型。各给药组于缺血再灌注30min后分别给予5mg／kg、25mg／kg蛇床子素腹腔注射治疗。各实验组动物分别采用HE染色、肺组织水肿（W／D）比值、ELISA检测和免疫组化评价蛇床子素在缺血再灌注肺损伤后的肺保护机制。结果：缺血再灌注30min后,给药组大鼠HE,W／D、IL-1B和TNF—α结果均明显优于对照组（P〈0．05）,并在25mg／kg剂量时表现出最大保护效果,同时Caspase-3蛋白表达水平也显著降低。结论：蛇床子素在大鼠肠缺血再灌注肺损伤后有一定的肺保护作用。     

大潮气量致急性肺损伤犬呼吸机相关性肺损伤模型的构建

目的建立大潮气量致急性肺损伤（ALI）犬呼吸机相关性肺损伤（VILI）模型。方法健康雄性杂种犬12只用油酸静脉注射法制备犬ALI模型,造模成功后进行支持通气15min过渡,然后随机分为VILI组及对照组行机械通气6 h,每组6只。VILI组潮气量（Vt）=20 mL/kg,对照组Vt=6 mL/kg,两组呼气末正压（PEEP）均为10 cmH2O。动态观察各组血气交换指标变化。通气6 h后取支气管肺泡灌洗液（BALF）作白蛋白浓度检查,取肺组织作病理切片肺损伤评分。结果各组在油酸静脉注射后（2.50±0.80）h达到ALI标准。VILI组在犬机械通气6 h后PaO2、SaO2及氧合指数（OI）较对照组略下降（P〈0.05）,而PaCO2波动不大,且心率、血压波动也较对照组小（P〈0.05）。VILI组BALF中蛋白浓度和肺组织损伤评分均较对照组显著升高（分别P〈0.05,P〈0.01）。结论本实验成功建立了大潮气量致ALI犬VILI模型。     

Sodium Hydrosulphide Alleviates Remote Lung Injury Following Limb Traumatic Injury in Rats

Hydrogen sulphide (H₂S) was found to attenuate ventilator or oleic acid induced lung injury. The aim of this study was to explore the effects of exogenous H₂S donor, sodium Hydrosulphide (NaHS), on lung injury following blast limb trauma and the underlying mechanisms. For in vitro experiments, pulmonary micro-vessel endothelial cells (PMVECs) were cultured and treated with NaHS or vehicle in the presence of TNF-α. For in vivo, blast limb traumatic rats, induced by using chartaceous electricity detonators, were randomly treated with NaHS, cystathionine gamma-lyase inhibitor (PAG) or vehicle. In vitro, NaHS (100 µM) treatment increased PMVECs viability and decreased LDH release into culture media after tumor necrosis factor (TNF) α challenge. In addition, NaHS treatment prevented the increase of nitric oxide, Intercellular Adhesion Molecule 1(ICAM-1) and interleukin (IL)-6 production and inducible nitric oxide synthase activation induced by TNF-α. Knock-down of NF-E2-Related Factor 2 (Nrf2) partially abolished the protective effect of NaHS. In vivo, NaHS treatment significantly alleviated lung injury following blast limb trauma, demonstrated by a decreased histopathological score and lung water content. Furthermore, NaHS treatment reversed the decrease of H₂S concentration in plasma, prevented the increase of TNF-α, IL-6, malondialdehyde and myeloperoxidase, increased the Nrf2 downstream effector glutathione in both plasma and lungs, and reversed the decrease of superoxide dismutase in both plasma and lungs induced by blast limb trauma. Our data indicated that NaHS protects against lung injury following blast limb trauma which is likely associated with suppression of the inflammatory and oxidative response and activation of Nrf2 cellular signal.     

NDRG2 和ZC3H12D在大鼠急性肺损伤中的表达及其相关性的研究

目的:通过建立LPS诱导的大鼠急性肺损伤模型,观察大鼠肺组织中N-myc下游调节基因2(NDRG2)和具有CCCH锌指结构域的蛋白质12d(ZC3H12D)表达水平的变化来讨论二者相互作用的机制。方法:40只健康成年雄性SD大鼠随机分成对照组、LPS注射60 min、120 min和180 min组,获取各组大鼠肺组织,行湿干重比值(W/D)检测、ELISA检测、病理(HE)检测确定肺损伤模型是否建立成功;免疫组化、RT-PCR和Western-blot对NDRG2和ZC3H12D在m RNA水平和蛋白水平进行检测。结果:各LPS损伤组与对照组相比,W/D比值显著升高,180 min组比值最高,为5.68±0.52(P0.05),血清和肺匀浆中TNFα和IL-1β含量明显增加(P0.05);损伤组肺泡壁增宽,炎细胞浸润明显;肺组织NDRG2和ZC3H12D在m RNA水平和蛋白水平的表达都呈相降低后回升的趋势,180 min组NDRG2和ZC3H12D,蛋白含量分别为对照组的0.37和0.44倍(P0.05)。结论:LPS诱导的大鼠急性肺损伤可同时下调肺组织中NDRG2和ZC3H12D的表达,并且NDRG2和ZC3H12D具有潜在的相关性,提示两者可能存在互相调节的机制,并通过调节NF-κB通路对肺损伤的大鼠起保护作用。     

Genetic Defects in Surfactant Protein A2 Are Associated with Pulmonary Fibrosis and Lung Cancer

Idiopathic pulmonary fibrosis (IPF) is a lethal scarring lung disease that affects older adults. Heterozygous rare mutations in the genes encoding telomerase are found in ~15% of familial cases. We have used linkage to map another disease-causing gene in a large family with IPF and adenocarcinoma of the lung to a 15.7 Mb region on chromosome 10. We identified a rare missense mutation in a candidate gene, SFTPA2, within the interval encoding surfactant protein A2 (SP-A2). Another rare mutation in SFTPA2 was identified in another family with IPF and lung cancer. Both mutations involve invariant residues in the highly conserved carbohydrate-recognition domain of the protein and are predicted to disrupt protein structure. Recombinant proteins carrying these mutations are retained in the endoplasmic reticulum and are not secreted. These data are consistent with SFTPA2 germline mutations that interfere with protein trafficking and cause familial IPF and lung cancer.     

五味子乙素对二氧化硅致大鼠肺损伤的保护作用

目的探讨五味子乙素（schisandrin B,Sch-B）对二氧化硅致大鼠肺损伤的保护作用。方法将64只大鼠随机分为对照组、染矽尘组、Sch-B干预组。非暴露气管法建立大鼠二氧化硅矽肺模型,灌胃给予Sch-B80 mg/kg/d。药后3、7、14和21 d,对照组、染矽尘组和Sch-B干预组分别随机安乐死4、6和6只大鼠,取其肺组织,测定肺系数;光镜观测其病理8切片;紫外分光光度计检测大鼠肺组织匀浆中羟脯氨酸（hydroxyproline,HYP）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）、谷胱甘肽（glutathione,GSH）的含量变化。结果Sch-B对矽肺病理形态学有明显的改善作用,可以降低染矽大鼠的肺系数,降低肺组织匀浆中HYP和MDA含量,提高GSH含量,与染矽尘组比较,具有统计学差异（P〈0.05或P〈0.01）。结论Sch-B可以提高机体的抗氧化能力,对二氧化硅致大鼠肺损伤具有保护作用。     

葡萄籽原花青素对大鼠烟雾吸入性肺损伤的保护作用

目的:探讨葡萄籽原花青素(grape seed proanthocyanidin extract,GSPE)对大鼠烟雾吸入性肺损伤的保护作用。方法:将48只大鼠随机分为正常对照组、烟雾吸入性肺损伤模型组、GSPE治疗组(500mg/kg),分别于致伤后2、4、12、24h监测动脉血气分析,分批处死大鼠,分别进行肺组织湿/干重测定,制备组织匀浆测超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、一氧化氮合酶(NOS)活性及一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)含量和HE染色。结果:与模型组比较,GSPE治疗组各时间点动脉血氧分压均显著升高(P<0.01),肺组织含水量显著降低(P<0.05),肺组织中SOD活性均明显升高(P<0.01),GSH-Px活性均明显升高(P<0.05),NOS活性及NO、MDA含量均明显降低(P<0.05)。肺组织病理学观察GSPE治疗组较模型组肺间质水肿减轻,炎性细胞浸润减少。结论:GSPE可能通过其显著增加组织的抗氧化能力而对烟雾吸入性肺损伤起到一定保护作用。