金黄色葡萄球菌分子检测技术的常用靶基因

金黄色葡萄球菌是一种常见的致病菌,可以产生多种毒素并具有广泛的耐药性。从特异性基因位点、抗药性基因和毒素基因3个方面列举了检测金黄色葡萄球菌的靶基因以及利用这些靶基因的PCR检测方法。详细说明了这些基因的发现、功能和实际应用情况。将金黄色葡萄球菌分子检测的思路和方法进行汇总、比较,并对未来的相关研究趋势和研究领域进行了展望。     

新分子增强HIV和前列腺癌的免疫应答

耶鲁大学的研究人员开发了一种分子，该分子能够加强机体对HIV和前列腺癌细胞的免疫应答，该研究将有助于开发一种治疗HIV和前列腺癌的全新方法。     

新分子增强HIV和前列腺癌的免疫应答

人体后天性免疫是阻止病原体入侵的重要防线,一旦病原体感染机体,免疫系统便会产生抗体并记忆。最新研究表明人们过去的流感感染很可能提供了抵抗当前甲型H1N1流感病毒大流行的一些免疫力。该发现有助于平息此前人们因为H1N1病毒蔓延而引起的担忧。     

分子对接技术在研究群体感应抑制剂中的进展

在大多数致病菌中都存在群体感应系统,而群体感应抑制剂就是以此系统作为靶点,在不影响细菌生长的情况下阻断细菌生物被膜形成或抑制毒力基因表达,不易导致耐药性的产生,是一种理想的抗菌增效剂。分子对接作为虚拟筛选技术之一,其目标具体、效率高、成本低,是药物研发的重要手段。本文重点介绍了分子对接的主要模块及其在研究群体感应抑制剂中的进展。     

甲基化寡聚核苷酸作为靶基因抑制剂的研究进展

反义RNA对靶基因的抑制作用近来越来越受到人们的重视,这是因为反义RNA能在分子水平上有效地抑制有害的靶基因表达,为发展新一代治疗药物提供了可靠的理论基础。当反义RNA和靶mRNA的起始编码区(initiation coding region)互补结合或和一个靶mRNA前体的拼接区(splicing junction)互补结合形成三螺旋结构(triple stranded complexes),则这个mRNA的翻译或mRNA前体的拼接加工将被抑制,最后阻断这些靶基因正常表达。故反义RNA既可作为遗传分析的强有力的工具又可促进发展新一代基因型治疗试剂。因此,     

无脊椎动物免疫分子的多态性

一般认为,非特异性免疫分子由于胚系基因种类有限而不具备多态性.但近年来人们发现,脊椎动物γ/δT细胞受体、B1细胞受体、某些固有免疫成分,以及无脊椎动物的某些免疫球蛋白超家族(immunoglobulin superfamily,IgSF)分子、抗菌肽和模式识别受体(pattern recognition receptors,PRR)等同样具有较高程度的多态性.与特异性免疫分子相似,其多态性形成机制主要为基因组水平的基因重排、单核苷酸多态性、DNA突变和mRNA水平的外显子可变剪接.该多态性的出现可能是无脊椎动物的一种适应性进化,其应为低等生物特异性识别和防御不同病原微生物感染的分子基础.本文就无脊椎动物免疫分子多态性的最新研究进展及其可能的形成机制与意义进行概述.     

SangStat投资研究器官移植的免疫抑制剂

SangStat医药公司(加州,门洛帕克)与Centre de Transplantation d'Organes(法国,南特)联合投资,共同研究与开发能提高器官移植成功率的药物.特别值得一提的是,此免疫抑制剂可望仅仅抑制那些对移植产生排异反应的细胞,而不是象目前所用的免疫抑制剂那样抑制整个免疫系统.作为协议中的一部分,SangStat已建立了一个法国子公司Lynatech,设在Centre de Transplantation d'Organes.     

新型免疫抑制剂brasilicardin A的研究进展

Brasilicardin A (BraA)是从致病性放线菌巴西诺卡菌(Nocardia brasiliensis) IFM 0406中发现的具有显著免疫抑制作用(IC50=0.057μg/mL)的二萜糖苷类化合物。BraA发挥免疫抑制活性的作用机制与现有临床常用的免疫抑制剂不同,BraA通过抑制氨基酸转运体L系统的转运进而影响T-淋巴细胞对氨基酸的摄入而发挥免疫抑制作用。相比目前已知的免疫抑制剂环孢菌素A、子囊霉素和他克莫司等,BraA在小鼠混合淋巴细胞反应中显示低毒、高效的优势。因此,BraA作为新型的免疫抑制剂,极具开发潜力,已成为全球免疫抑制剂发现新领域。但其结构复杂、合成困难,原菌种产率低且具有致病性,BraA及其类似物的获得已成为此类新型免疫抑制剂研究的瓶颈。本文综述了BraA的分子特征、药理活性、作用机制、目前获得的BraA类似物和衍生化方面的研究进展,以期为BraA及其类似物的高效生产提供参考。     

RhoB分子靶蛋白MHY9的鉴定

鉴定能与活性RhoB分子结合的靶蛋白。制备GST融合的活性RhoB蛋白(GST-RhoB),与LPS刺激的DC2.4细胞裂解物混合后实施pull-down实验,沉降复合物通过SDS-PAGE分析、金染色后,对与GST-RhoB结合的蛋白条带进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析。然后制备小鼠的树突状细胞,LPS刺激12 h后,进行荧光标记的抗体染色。激光共聚焦显微镜下观察RhoB与MYH9的细胞内定位。通过MALDI-TOF质谱分析,鉴定到一个新的可以与RhoB的活性形式结合的马达分子MYH9。激光共聚焦显微镜的结果表明,RhoB在LPS刺激前后均与MYH9在树突状细胞内共定位。该研究首次发现MYH9可与活性RhoB结合,可能是RhoB下游的一个靶蛋白。     

环二鸟苷酸信号分子抑制剂的研究进展

环二鸟苷酸(Bis-(3′-5′)cyclic diguanylic acid,c-di-GMP)是细菌所特有的一类核酸类第二信使,参与并调节细菌多种生理功能,包括细胞分化、生物被膜的形成以及致病因子的产生等。阻断c-di-GMP信号的传导对于发展新型抗菌药物具有重要的意义。现有研究结果表明,基于c-di-GMP调控的信号通路开发新型抗菌药物具有3类潜在的靶点,分别是c-di-GMP合成酶(DGCs)、c-di-GMP降解酶(PDEs)以及c-di-GMP受体。文中根据上述3类关键靶点,介绍了相关小分子抑制剂的研究进展,并展望了c-di-GMP信号分子抑制剂的发展方向。     

利用染色质免疫共沉淀技术确定转录因子RIN调控的靶基因

以粉红期番茄果实为材料,用含不同浓度甲醛的缓冲液交联DNA和蛋白质,利用超声波将其染色质随机断裂成大小为200-1 000 bp的片段,用RIN蛋白的特异性抗体免疫沉淀与RIN蛋白结合的DNA片段,然后解交联和纯化DNA片段,最终用普通PCR试验和测序验证与转录因子RIN结合的DNA序列.结果表明,适用于番茄果实的最佳ChIP试验条件为:用1％甲醛溶液交联DNA和蛋白质的复合物;用20％功率,工作6s,间隔10s,脉冲3次超声破碎该复合物,可以得到适当大小的片段,用于后续的试验.普通PCR和测序验证结果证明转录因子RIN与LeACS2和LeACS4启动子区域的CArG box序列结合.     

针对NFAT信号途径的新型免疫抑制剂

免疫抑制剂cyclosporin A和FK-506通过抑制依赖钙调蛋白的磷酸酶calcineurin(CaN)的活性,阻断了活化T细胞核因子(NFAT)的活化,最终抑制了机体的免疫应答.然而,这种直接对CaN酶活性的破坏,使得这类药物具有严重的临床毒副作用.随着对NFAT调节机制的研究深入,近年来,人们运用各种试验方法、手段筛选了一些天然的以及合成的抑制剂,它们针对NFAT信号通路的下游靶点发挥作用,从而选择性更强,毒性更小,为临床抗移植排斥反应、自身免疫性疾病的治疗奠定了基础.本文综述了这方面的进展,并就这些抑制剂的特点进行了简单的分析,另提出了一些新的有治疗潜力的靶点.     

抗病毒免疫分子IFITMs的研究进展

干扰素诱导跨膜转运蛋白(Interferon inducible transmembrane proteins,IFITMs)是细胞内具有广谱抗病毒作用的抑制因子。其属于dispanin蛋白家族中的一个亚族并具有多种功能,其中其抗病毒功能是主要的研究热点。由于IFITMs,尤其IFITM3,能抑制禽流感等病毒的早期复制因而近年来得到了广泛的关注。目前研究发现,IFITMs主要通过核内体途径阻止病毒的入侵,从而影响病毒的复制。然而,其具体的抗病毒机制还未完全阐释清楚。本文就近年来IFITMs蛋白抗病毒功能的研究进展对其结构特征、细胞亚定位及其抗病毒机制等方面作一综述。     

吗啡调节免疫的分子机理

吗啡是阿片类的天然生物碱,常用的镇痛药物,作用于神经细胞表达的阿片受体,致使疼痛缓解和痛觉缺失。其次,吗啡对免疫系统功能有广泛的影响,对固有免疫和适应性免疫均起调节作用。吗啡抑制T淋巴细胞增殖及迁移、自然杀伤细胞活性,抑制免疫细胞产生MIP-1β、IFN-γ、IL-4、IL-10、IL-12等分子,并诱导CCR5、IL-1β、IL-6、TNF-α等。而对长期使用吗啡镇痛的肾细胞癌病人,同时使用褪黑素,不仅不影响吗啡的镇痛效果,还克服了其免疫抑制作用。吗啡调节免疫功能除了与阿片受体有关,还涉及许多的信号途径。现就吗啡对免疫系统调节作用的分子机理作概述。     

肾移植的免疫抑制剂应用及常用方案

自从1954年在美国进行首例肾移植病例以来,肾移植术已经成为治疗肾衰的重要手段。据统计,全世界每年进行约4万例肾移植,我国每年进行约5千例。但由于器官移植术后机体对外来的器官有强烈的排斥作用,使移植器官无法适应和生存于新的环境,临床上需要应用免疫抑制剂来帮助新器官适     

免疫抑制剂霉酚酸的研究及产业化进展

霉酚酸是世界上应用最广泛的免疫抑制剂之一,市场需求巨大。目前为止,主要是通过真菌发酵的方式进行霉酚酸的工业生产,而用于生产的菌株多是经过诱变的高产短密青霉菌。本文从霉酚酸的研究应用现状、化学合成以及生物合成途径、遗传调控、发酵生产以及市场分析等方面对霉酚酸的研究及产业化进展进行了系统综述。为该药物的新颖衍生物开发、提高产率以及应用先进生物技术智能化创制提供重要参考和依据。     

用物理学技术研究细胞的分子力学特征

运动对于细胞生命活动的重要性是不言而喻的。有运动就需要有推动运动的力。长期以来,由于缺少对大分子间作用力的研究手段,生物学家们对生物学过程中分子力学现象的了解极为有限。近年来,多种物理学技术迅速发展,并应用于生物学领域,尤其是细胞骨架系统,有力地推动了从力学角度对很多生命现象和机理的研究。本文将简单介绍几种目前常用于测定细胞分子力学特征的物理学技术及一些它们在这方面的研究实例;着重介绍光学测力技术中目前最为成熟的一种技术-光钳,以及它在研究细胞骨架分子力学特征方面的应用。     

用虹鳟鱼苗确认IHN用重组疫苗的效果

日本水产公司开发出抗传染性造血器官环死病毒(IHNV)的重组疫苗。虹鳟鱼苗容易感染这种病毒。所以用虹鳟进行预防感染实验。实验结果,实验组比对照组生存率高。于9月25日～26日在三重县伊势市召开的日本鱼病学会上发表了该成果。     

大剂量激光与免疫抑制剂对大鼠免疫功能的影响

应用不同剂量的He—Ne激光连续14天照射健康大鼠,分别于照射后7、14,17、21、28、35天监测大鼠白细胞总数各类白细胞数目的变化。照射大鼠内眼角激光日剂量为13.2415J/cm~2以上,照射大鼠耳后凹陷部的激光日剂量为18.5381J/cm~2以上,照射大鼠脊背正中线皮肤的激光日剂量为23.8347J/cm~2以上,均可在照射后一定时期对大鼠上述指标产生不同程度的抑制作用。实验结果表明,各类白细胞对激光抑制效应的敏感性不一,敏感顺序是:嗜酸性白细胞-杆状核白细胞-分叶核白细胞淋巴细胞。作为有效大剂量町选择日剂量18.5318J/cm~2作内眼角照射,26.4830J/cm~2作耳后凹陷照射,39.7245J/cm~2作脊背正中线皮肤照射。 应用日剂量为39.7245J/cm~2的He—Ne激光照射大鼠脊背正中线皮肤,并与环孢霉素A(CsA)和硫唑嘌呤(Aza)两种免疫抑制剂配合应用,以研究大剂量激光和免疫抑制剂两者配合对大鼠白细胞总数、各类白细胞数、T、B淋巴细胞数、淋巴细胞转化刺激指数(S、I)、10~6个淋巴细胞CPM数的影响,大剂量激光和免疫抑制剂(CsA、Aza)及其配合均可在试验后一定时期对大鼠白细胞总数和各类白细胞数具有明显的抑制作用。大剂量激光和Aza可降低大鼠B淋巴细胞数。大剂量激光、CsA、Aza及激光与二者配合均可使淋巴细胞转化刺激指数(S、I)在     

微生物流行病学和传染病诊断的新分子技术

<正>新兴的方法学改变了快速诊断传染病的方法,并能从事微生物流行病学的研究。这两方面的关键因素是要能够鉴定微生物和确定与疾病发生或爆发相关的病原。 用任何一种方法鉴定微生物都需要有足够的关于此微生物独特性质的知识,以便将其与大量非病原菌或非流行菌株区别开来。例如,尽管大肠埃希氏菌中有一些菌株能够引起种种严重的疾病,其实此种细菌通常是胃肠道的一种正常居住菌。