五唇兰珠被细胞的超微结构观察

应用透射电镜对五唇兰(Doritis pulcherrima)珠被细胞进行超微结构观察。结果表明,授粉38d后,五唇兰外珠被细胞尚保持完好,而内珠被细胞开始退化;线粒体内嵴减少或消失,内质网上的核糖体数量减少,液泡增加,在新形成的液泡内含有膜状结构和模糊的细胞器,但核膜完整,与细胞程序死亡的部分特征相似。     

五唇兰雌配子体发育和胚胎发生的研究

五唇兰的胚珠倒生型,具薄珠心,两层珠被。胚囊发育为双孢子葱型,成熟胚囊８核。从传粉到受精约５０ｄ,正常双受精。胚具５－６细胞的胚柄,种子成熟时胚柄及胚乳核消失,成熟种子只具单层细胞的种皮和一个未分化的珠珠形胚。     

五唇兰生物学特性及试管繁殖的研究

五唇兰为我国自有的亚热带附生兰,数量稀少,甚为罕见。本文叙述了它的生物学特性,野生幼苗驯化栽培和组织培养。五唇兰的组织培养国内外未见报道,五唇兰组织培养的成功有助我国稀有兰种资源的开发利用。     

野生五唇兰菌根显微结构观察

兰科菌根菌对兰花种子萌发和原球茎生长起了重要作用,在成年阶段也扮演着重要角色(即使该兰花含有叶绿素)。为了解东南亚特有种五唇兰的菌根形态和菌根真菌的动态侵染过程,对不同生境下两种变异类型叶背绿色和叶背紫色的成年植株菌根分三个时间段采样并进行显微观察。结果表明,成年的五唇兰植株与菌根真菌有着密切关系,菌丝的侵染、定殖和消解程度随着生长发育变化而变化;在营养生长阶段和生殖生长阶段都发现菌丝结,这两个阶段的菌丝特征有所不同;而在休眠阶段的菌根中观察不到菌丝结;不同生境和不同变异类型的菌根结构无明显区别。研究结果为附生兰、地生兰和腐生兰的菌根结构的比较提供了参考。     

花叶开唇兰（兰科）大小孢子发生和雌雄配子体发育

花叶开唇兰的胚珠倒生,双珠被,薄珠心．雌配子体发育属蓼型,成熟胚囊７细胞．大小孢子发生过程中壁上都有胼胝质出现．小孢子四分体为四面体形,左右对称形,交叉形,Ｔ形,它们聚集成花粉小块．花粉散出时为２细胞型．药室壁４层,绒毡层底分泌型．     

五唇兰种子离体培养的研究

授粉90d的五唇兰种子95%具球形胚,无菌条件下播种于培养基3个月后种子最高萌发率达到 90%。ABA和高浓度的NH4NO3抑制种子的萌发。NAA和BA促进种子的萌发,最适浓度为BA0.2mg· L 1+NAA0.5mg·L 1。400mg·L 1的谷氨酰胺可促进原球茎生长。2000mg·L 1的蛋白胨促进原球茎发 育成苗。     

中国附生舌唇兰一新记录植物——窄唇舌唇兰

报道了2017年发现于云南孟连县勐马镇腊福大黑山贺莫村附近海拔2 145m中山湿性常绿阔叶林的一种附生兰科植物——窄唇舌唇兰[Platanthera angustilabris Seidenf.]在中国的新分布记录,该物种过去记录仅分布在缅甸、泰国和越南。窄唇舌唇兰与长瓣舌唇兰相近,但前者的窄披针形叶片长度可以达到15cm,后者的披针形叶片仅可达7cm。凭证标本存放于中国科学院昆明植物研究所标本馆(KUN)。     

五唇兰精细胞的分离

五唇兰(Doritis pulcherrima)具二胞花粉,授粉后1 d即有花粉开始萌发,授粉后5 d开始有生殖细胞完成有丝分裂形成一对精细胞。通过人工授粉使花粉管在子房内发育,再利用花粉管直接爆破,成功分离出五唇兰的精细胞。成对的2个精细胞在直径大小、荧光强弱上均显示出较大差异,预示2个精细胞具有不同的前途。     

兰科带唇兰属一新异名

经过对标本馆馆藏标本的研究,确认原四川特有的峨眉带唇兰[Tainia emeiensis (K. Y. Lang) Z. H. Tsi]与大花带唇兰(T.macrantha Hook. f.)为同种植物,因此予以归并。     

五唇兰胚胎发生与几种同工酶变化的相关性研究

用聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法研究了五唇兰（Phaius tankervilliae Lindl.）授粉后合子形成过程中同工酶的变化情况。结果发现,有些位点在这一发育过程中始终表达,如Est-2、Est-4、AAT-3;球形胚形成时,Est-1、Est-3消失;Pgi-3只在合子形成时出现。同工酶位点的变化说明五唇兰受精后合子的形成是相关基因时序性表达的结果。     

五唇兰合子与原胚的分离

分离合子和原胚可以为植物受精和胚胎发生提供很好的研究材料, 因此具有重要意义。用酶解-振荡法分离出五唇兰(Doritis pulcherrima)受精后胚囊, 然后以显微解剖获得合子和原胚。酶解液组成为0.7%–1.3%纤维素酶、0.6%–1.0%果胶酶和10%甘露醇, pH值为5.8, 酶解时间0.5–3.0小时。在分离的早期原胚和接近成熟的球形胚中, 珠孔端均有较发达的胚柄吸器。实验获得了对五唇兰胚胎发育的新认识, 合子和原胚的成功分离也为进一步的细胞学和分子生物学研究打下基础。     

五唇兰未受精胚珠离体培养及雌配子体发育的研究

五唇兰(Doritispulcherrima Lindl.)的胚珠属于倒生型,具薄珠心,两层珠被.胚囊发育类型为双孢子葱型,授粉后约45 d形成七细胞八核的成熟胚囊.五唇兰未受精胚珠在离体培养初期对外源激素的依赖性很小,在没有外源激素的培养基上,大孢子母细胞也能经过减数分裂发育为二核胚囊.在培养后期,外源激素对胚囊发育的影响很大.在培养基无外源激素或仅含生长素或细胞分裂素时,雌配子体的发生过程不能顺利完成;在改良VW培养基上添加0.5 mg/L BA和0.1 mg/LNAA时,形成成熟胚囊.     

五唇兰未受精胚珠离体培养及雌配子体发育的研究

五唇兰(DoritispulcherrimaLindl.)的胚珠属于倒生型,具薄珠心,两层珠被。胚囊发育类型为双孢子葱型,授粉后约45d形成七细胞八核的成熟胚囊。五唇兰未受精胚珠在离体培养初期对外源激素的依赖性很小,在没有外源激素的培养基上,大孢子母细胞也能经过减数分裂发育为二核胚囊。在培养后期,外源激素对胚囊发育的影响很大。在培养基无外源激素或仅含生长素或细胞分裂素时,雌配子体的发生过程不能顺利完成;在改良VW培养基上添加0.5mg/LBA和0.1mg/LNAA时,形成成熟胚囊。     

野生五唇兰根部内生真菌多样性研究

兰科植物根部的内生真菌在兰科植物的整个生活史中起着重要的作用, 为了解不同生境不同类型的兰科植物内生真菌菌群的多样性, 作者于2004年7月至2005年10月, 以海南岛霸王岭自然保护区内的野生五唇兰(Doritis pulcherrima)作为实验材料, 对不同生境、不同形态的五唇兰植株根部的内生真菌群落多样性进行了研究。从附生于石上及生于杂木林或灌丛中、叶背绿色及叶背紫红色的五唇兰植株新鲜营养根段中共分离出83株内生真菌, 鉴定为19个属, 其中包括培养基筛选实验中分离出的30株14属。镰刀菌属(Fusarium)(24.1%)和丝核菌属 (Rhizocto-nia)(14.5%)为优势属。两种叶色的五唇兰内生真菌群落丰富度较为一致; 而两种不同生境中的五唇兰内生真菌群落丰富度则表现出较大的差异: 附生于灌木的五唇兰内生真菌群落Shannon多样性指数远高于附生岩石的。研究结果表明五唇兰内生真菌多样性更多地受生境的影响而不是受植株形态类型的影响。     

The ontogeny of pollinia and elastoviscin in the anther of Doritis pulcherrima (Orchidaceae)

Wolter, M., Seuffert, C. & Schill, R. 1988. The ontogeny of pollinia and elastoviscin in the anther of Doritis pulscherrima (Orchidaceae). - Nord. J. Bot. 8: 77–88. Copenhagen. ISSN 0107–055X.
The ontogeny of pollinia of Doritis pulcherrima shows some features not commonly found in other angiosperms. The cell wails of the mature pollinium are almost identical with those of the pollen mother cells, and a callose envelope is lacking during the formation of sporopollenin. This fact may be related to the absence of a clear substructure of the exine and its low resistance to acetolysis. An exine is found only at the outer tetrads of the pollinium. The pollen grains in the tetrads possess irregularly spaced cell walls. The ontogeny of elastoviscin (specialized pollenkitt) begins in the ground cytoplasm of some tapetal cells, where small droplets are surrounded by myelin-like structures. Before anthesis the droplets fuse, flow into the loculus, and attach the pollinia to the stipe, thus forming a pollinarium. In the region in front of the elastoviscin-producing cells, some cells with specialized helical wall thickenings develop.     

毛竹茎秆纤维发育过程的超微结构观察

利用透射和扫描电镜观察了毛竹(Phyllostachys edulis(Carr.)H.De Lehaie)茎秆纤维发育过程中的超微结构变化.在纤维细胞初生壁形成期,细胞质中线粒体、内质网、高尔基体等细胞器数量有明显的增加,出现大量的由内质网与高尔基体分泌形成的运输小泡,周质微管平行分布于质膜内侧,出现环状片层结构,并在细胞壁与质膜之间出现壁旁体结构.随着次生壁的逐渐形成,细胞质中细胞器逐渐地解体并出现多泡小体;纤维细胞核出现染色质凝聚并边缘化,但在8年生的纤维中可以持续存在;在纤维次生壁形成的整个阶段都存在与周围细胞相联系的胞间连丝和运输小泡;次生壁在前4年加厚明显,以后加厚程度减缓,但可以持续很长一段时间,并随着加厚出现宽窄交替的多层结构.结果表明,线粒体、内质网、高尔基体和壁旁体等细胞器与周质微管一起参与了初生壁和次生壁早期的形成;纤维细胞次生壁的形成过程就是一个漫长的程序性细胞死亡(PCD),而PCD的产物与胞间连丝一起参与了次生壁的形成与加厚;染色质凝聚并边缘化的细胞核与胞间连丝的持续存在,证明毛竹茎秆纤维细胞是一种典型的长寿细胞.     

毛竹茎秆纤维细胞发育过程中的细胞程序性死亡

利用TUNEL检测、细胞学及细胞化学方法,对毛竹茎秆纤维细胞发育过程中的细胞程序性死亡进行了研究。在次生壁形成的早期,纤维细胞出现染色质凝聚、细胞器膨胀、液泡膜解体和细胞质泡状化等典型的细胞程序性死亡形态学特征;TUNEL检测反应呈阳性,显示此时的纤维细胞核DNA发生了片段化。此时,在纤维细胞裂解的液泡膜、降解的细胞质和凝聚的染色质上具有ATPase活性。纤维细胞质的Ca^2＋水平会随着次生壁的形成而逐渐升高,随后Ca^2＋聚集成块状。在初生壁形成后期,纤维细胞染色质上的酸性磷酸酶（APase）活性增强。随着纤维次生壁的持续增厚,ATPase、酸性磷酸酶和Ca^2＋将在裂解的细胞质和凝聚的染色质上持续存在多年。结果表明,毛竹茎秆纤维细胞的次生壁形成过程是一个主动自溶的细胞程序性死亡过程。初生壁形成后期染色质上酸性磷酸酶活性增强及次生壁形成期胞质Ca^2＋的聚集,与纤维细胞的程序性死亡密切相关。ATPase,Ca^2＋和APase参与了纤维细胞程序性死亡过程中原生质体的降解。