微生物的保存方法(续四)

<正> 14 安瓶启封 首先,仔细检查菌株号码等标记,确保无误。 以酒精棉拭擦安瓶颈部。安瓶内封有棉塞者,用锉对准棉塞的中间部位将玻璃锉一小痕,然后用灭菌纱布或乙烯树脂软片把安瓶颈部裹起来折断。这样做是为了防止由外部吸入杂菌,同时也防止瓶内的干燥菌向外飞散。一般不要用酒精棉包裹折断,因为酒精可能被吸入瓶内。如果玻璃又厚又硬,可先把安瓶颈部在火焰上轻烧一下,立即用酒精棉冷炸,形成裂纹之后就能很容易折断。也可以用烧烫的玻璃棒热炸锉痕。产生裂纹之后,稍放一会儿(半分钟到1分钟),使空气慢慢渗入,以防干燥菌飞散。     

微生物的保存方法(续三)

<正> 10.干燥 (1)冷凝器的冷却或干燥剂的准备 予冻结束后,立即转入减压干燥。此时,必须事先予冷冷凝器,以备收集冻结菌液的升华水分,例如采用图(一)所示的那种最简单的装置,双层简型冷凝器的内筒盛装乙醇或丙酮等有机溶媒,加足够量的干冰,则温度可降至大约-70～-80℃,升华水分则可凝结在夹层内的表面上。为保持冷凝器温度不升高,须及时添加干冰。最近有几家制造厂产销一种浸没式的挠性冷却棒,放入上述有机溶媒中,可使冷凝器降至-60～-100℃,而且无需中途补加,便于长时间运转。如有特殊用途,也可用液氮冷却冷凝器,但对于一般菌种保存,并无如此需要。     

微生物的保存方法(续五)

<正> (九)非冻干的其他干燥保存法 如前所还,冻干法的基本特征是首先使试料冻结,继而使冰升华。所以,同液态干燥法相比,具有下列优点:(1)可防止发生气泡;(2)操作的全过程可在低温下进行;(3)在干燥过程中保持着多孔状态,不会形成皮膜或干燥不均匀;(4)能保持原形不变,加水后容易溶解。所以,冻干法可以说是微生物干燥保存的主要方法。 但是,冻干法并非在任何情况下总是最好的方法。例如,试料的予冻就有可能对于某种微生物具有极大的伤害。因此,人们又设计了几种不通过结冰进行干燥的方法。这一节就介绍此类干燥保存方法。 用土、砂等也是一种干燥方法,是一向应用甚广的主要的微生物保存方法,即前述的载体保存法。     

微生物的保存方法(续二)

<正> (11)冷冻干燥法: 1.冻干法的原理及适用范围 (1)冻干法的原理 冻干法的原理简单,即首先使微生物冻结,然后在负压下进行升华、除水。菌体的水分大部分被除掉之后,则细胞的生活反应事实上即将停止,从而得以长期保持其生活状态。冻干有各种方式,这里将包括水升华过程的干燥法统称冻干法。 做为除水的手段,冻干法是个缓和的方法,但对于敏感的生物细胞,如果不加以充分注意,大部分细菌都有可能因冻干处理而死亡。关于菌种保存,可能被认为只要有一点菌活存下来就行了,但这只能是在万不得已的情况下的说法,而要想保持菌株的性质不发生变化,就必须设法尽量使更多的细胞活存下来。特别脆弱的菌另当别论,一般说来都希望活存率能保持在10％以上。 (2)适用范围 冻干法适用于大多数细菌及放线菌,同时病毒、噬菌体、立克次体、霉菌、酵母等,大部分约可用此法保存。     

微生物的保存方法(续六) 病原性细菌的保存方法(医学领域)

<正> 一、前言(一)病原性细菌菌株保存的目的保存病原性细菌的目的,有的是为了验证从临床材料分离的病原性细菌的各种性状;也有的是为了研究或生产菌苗而保存菌株,等等。细菌不同于其它生物,其形态特性极为单纯,所以,主要要靠生理生化学、血清学和遗传学的特性进行分类,这就需要性状清楚的标准菌株(type strain)来做为参考对照。但是,生物却具有一种随着逐代相传而发生遗传变异的特性;当然也并不是所有的性质都按相同机率而发生变异的。细菌的世代期限特别短,所以,应考虑在传代培养中或保存中性质上发生变异的可能性,必须择择适合保存目的的保存方法。     

微生物的保存方法(续七)——病原性细菌的保存方法(兽医学领域)

一、前言 病原性细菌保存最重要的问题是保持该菌的生物学及免疫学的各种特性,尤其要保持其病原性不变。 保存兽医学领域的病原性细菌,与一般细菌相同,主要采用传种培养方法、冰冻法及冻干法;其它,如Stamp氏明胶片干燥法也可试用。 传种培养保存法具有按需要随时接种,供做试验的方便,但其缺点是可能在传种过     

免疫诊断细胞方法(续一)

<正> 二,抗人的T和B淋巴细胞与其它白细胞抗血清的获得 各淋巴细胞群体和其他型白细胞特异性抗血清,首先必须与相应的细胞起反应。此外,这些抗血清应当除去非特异的抗淋巴细胞作用,从而加强其免疫抑制的特异性。用相应的材料通过免疫动物获得抗血清。因输血姙娠和某些疾病出现的抗淋巴细胞抗体也能用作试剂。 (一)抗T淋巴细胞血清(ATC) 的制备 1.免疫动物的材料。 可用胸腺细胞或无细胞的胸腺组织。作     

卡介苗标准化(续一)

<正> 4.菌苗接种后特定时间内在人和动物必须具备使结素反应阳转的能力:结素试验是测定结核杆菌感染最简便而又非常可靠的试验。但它是否是抗痨的一种确实指标,目前尚无定论;在更好的方法发现之前,可以被认为它是接种成功和增加抵抗力的标志。由于人和动物反应不同,每批菌苗应作人和动物的测定。 动物试验:实验表明豚鼠皮内注射少至11个可培养单位(活菌)即发生结素阳性反应。注射大约4000个活菌就能使结素产生最大阳性反应。虽将剂量增大几百倍,也不能引起对结素的更高反应。然而,人则不然。多数实验室的测定方法是以皮内剂量注射豚鼠,动物于4-6周后,应对10-50单位结素出现阳性反应(10mm以上)。 Rosenthal叙述了更敏感的试验方法,用对新生儿和婴儿大约1/36的剂量用单刺器接种豚鼠。试验用体重400～500 gm白色或浅色皮肤的豚鼠,大腿外侧脱毛滴标准菌苗     

未完成的回忆录(续一)

在美国三年一、留美公费考试及出国前准备1934年我考取了清华留美公费去美国学习三年（193－1938）。清华大学原名清华学堂，用我国给美国的庚子赔款于1911年在北京清华园建立的，相当于美国的初级大学（juniorcollege）。四年毕业可入正式大学（universitr）的三年级，所以被称为留美预备班。毕业后送去美国读书，并举办了多次。到20年代后期改为国立清华大学，与我国各大学～样，四年毕业，授予学士称号，不再保送出国。但是由于国家需要，而且清华还有外汇在美，以这笔庚予赔款办理公费留学生，到美国大学读研究院。向全国公开招考，每批…     

哺乳动物的基因工程(续一)

2.载体的遗传标志--选择系统动物细胞被外源病毒载体转染通常是一种低效率的过程,其频率与细胞突变的频率是相近的,两者之间有何内在的联系尚不得而知。     

血浆蛋白质的分级(续一)

<正> Ⅲ.明显特征的血浆蛋白质 具有明显特征的血浆蛋白质的性质,总结于表Ⅴ。 Ⅳ.乙醇和利凡诺-硫酸铵法各 级份中蛋白质的分布 图5和6说明了两个著名的大规模分级方法的原理。用这些方法得到的级份也已通过聚丙烯酰胺电泳进行了分析试验,结果见图7和8。 在《血浆蛋白质》的第一版中,Pennell(1960)曾报告过乙醇法各级份中已知血浆蛋白质定位的试验。我们已试推广这些实验应用于利凡诺-硫酸铵(RAS)法,过氯酸沉淀,DEAE-纤维素层折和葡聚糖凝胶过滤(SChultze和Heremans,1965)的级份分析。今天,应用特异抗血清和生物学方法能够有意义地检测更多的蛋白质。所以,我们已检测了乙醇和利凡诺-硫酸铵法的各个级份,再次证实所有58种蛋白质的存在。结果见表Ⅵ。一般来说,各种血浆蛋白质分布在几个级份中,如同早先已知的情况一样。     

实验室感染的预防(续一)

<正> 四、危险性的操作程序 1.吸量管 此种操作存在严重危险。用咀使用吸管吸取微生物培养物或悬液时,所胃明显危险是吸入液体。棉花塞头不能防止液体吸入口中。而当棉塞过紧时往往用力吸引,可能将棉塞和培养物一并吸入口中。用咀吸取菌液尚有导致气溶胶的危险性。棉花塞头只能阻挡在正常气压下进入吸管的空气携带微生物。在强正压或负压下并不是理想的滤菌装置,     

一些主要致病菌简介(续一)

<正> 芽胞杆菌科菌体杆状,其中有一个属为球形。不产生菌丝,形成内生芽胞。芽胞与菌体不同,光反射性强,着色力差,耐热和抗破坏力强,芽胞干重的5-15％为胞壁酸(Dipicolinic acid)。芽胞位于菌体中央(核心),由葡萄糖肽组成的外层包围着,有芽胞外套。多为革兰氏阳性,能运动(侧毛或周毛菌)或不能运动,需气或兼性嫌气。芽肠杆菌科中属的提要1、菌体杆状A.需气或兼性嫌气,常产生过氧化氢酶。Ⅰ属、需氧芽胞杆菌属B.微嗜气菌,不产生过氧化氢酶。Ⅱ属、乳状芽胞杆菌属C.嫌气性。1.硫酸不还原为亚硫酸Ⅲ属、梭状芽胞杆菌属2.硫酸还原为亚硫酸     

一些主要致病菌简介(续一)

<正> 弗兰西斯氏菌属 菌体非常小,为球形到椭圆形的多形性杆菌。用特殊的方法染色常呈两极浓染;多数能通过Berkefild滤器。不运动。革兰氏阴性。 在一些含糖培养基中产酸不产气。过氧化氢酶阴性,产生H_2S。在十二烷基硫酸钠和蓖酸钠中菌细胞易溶解。 在普通没有添加营养的培养基上不生长。 严格需氧,厌氧环境不生长,最适生长温度37℃。     

广西特有植物的研究(续一)

<正> 133.金虎尾科MALPIGHIACEAE白蜡叶风车藤 Hiptage fraxinifolia F.N.Wei in A. P.S.19(3):356,1981;横县(Hengxian County),陈照宙50482(Type,IBK).多花风车藤Hiptage multiflora F.N.Wei in A.P.S.19(3):356,1981;龙州县 (Longzhou County),科甲,石灰岩山,苏甲薰、李治基0046(Type,IEK).田阳风车藤 Hiptage tianyangensis F.N.Wei in A.P.S.9(3):358,1981;田阳县 (Tianyang County),六联,陈照宙53995(Type,IBK).     

肠道菌共同抗原ECA(续一)

<正> 五、ECA的遗传学测定 阻遏ECA的一种成份的生物合成的突变,可能会阻遏ECA的合成,结果在菌种中丧失ECA。相反,测定已知突变种的ECA含量可以帮助推断ECA的组成。不幸的是,没有已知的选择ECA阴性突变种的方法,所有我们现在知道的这样的突变种不是间接地选到就是偶然地发现的。 在UDP-葡萄糖,UDP-半乳糖,和GDP-甘露糖(pmi)生物合成中有缺陷的突变种干扰LPS的合成,此点在沙门氏菌和大肠艾希氏菌中易于利用。用它们来研究ECA是否存在,结果这些菌株全都是ECA阳性,提     

中国南部爵床科植物小志(续一)

大花老鸦咀是我国南部一种极常见的藤本植物,也栽培供观赏。Thunbergia chinensis Merr.的模式标本Levine & MeClure 6957采自广东东部罗浮山华首台。     

立克次体病的检疫和诊断(续一)

<正> (二)从节肢动物体内分离 (1)节肢动物标本的采集、保管和饲养: 携带立克次体的节肢动物(虱、蚤、婢、螨)皆营寄生生活。衣虱:喜在人们的衣服被褥缝隙排卵繁殖;蚤:喜居于动物毛发下及动物洞穴中,以及人们居室的多尘处。由于蚤全身有鬃(bristle)和刺(spine),用细白绒布易捕捉之;蜱:喜在动物(牛、羊等)腹股及肛门附近吸血,藏在杂草、干树叶下,吸血性强,易在动物体上发现;螨类:常在嚼齿动物的耳窝内或洞穴内,形体极小。     

卡介苗对癌症和白血病的应用(续一)

<正> 四、癌症和白血病的临床免疫疗法(一)、急性白血病Mathe’及其小组开始和最长时间的连续试验了,应用特异和非特异性抗原治疗急性淋巴性白血病(ALL)。这个小组在1976年蒙特利尔讨论会上报告了头100例急性淋巴样(未分型)白血病用化疗诱导缓解,辅以化疗放射疗法减少肿瘤细胞数,然后用照射过的同种异体混合白细胞及液体BCG划痕进行自动免疫治疗取得的成功经验。从1963年开始的首次对比试验中,3～13