Different types of temperature-sensitive mutants ofEscherichia coli requiring methionine

Путем обратных мутаций абсолютно зависимого метионинового мутанта Escherichia coli были получены З различных типа температурных мутантов. Температурные максимумы роста двух из них, по-видимому, очень близки друт к другу, но оба типа отличаются друт от друта но температурным максимумам эндотенното синтеза метионина, по зависимости от метионина в момент температурното максимума роста и по частоте случаев обратных мутаций. Третий тип отличается от двух других по температурному максимуму роста. Температурный максимум роста температурных мутантов не тождествен с температурным максимумом эндогенното синтеза метионина.     

Uptake and binding of ferric ions in S- and R-forms of yeasts

Было установлено, что часть железа, принимаемого клетками дрожжей из раствора хлорного железа, быстро выделяется из клеток после доведения pH среды до 1,6, в то время как остальная часть железа оказывается довольно прочно связанной с клеткой. Скорость принимания железа клетками в значительной степени зависит от pH реагирующей смеси, а, по-видимому, и от возраста клетки. Оптимум pH для включения Fe³⁺ и для его связывания в клетках и для гладких, и для складчатых форм дрожжей оказался одинаковым (6,0–6,2). При повышении pH по сравнению с оптимумом у складчатых форм наблюдалось гораздо более резкое понижение включения и связывания железа, чем у гладких форм. В щелочной области были отмечены гораздо более значительные различия между обеими формами дрожжей в отношении содержания прочно связанного железа— даже после длительной (26-часовой) инкубации с хлорным железом.     

Spores of microorganisms X. Interference of tetracycline antibiotics with sporogenesis of Bacilli

Спорообразующие клетки бацилл, характеризующиеся чрезвычайно сильным накоплением кальция, служили моделью для изучения сущности действия тетрациклиновых антибиотиков на цельные клетки. В период образования преспор наблюдается усиление связывания клетками кальция. В тот же период резко повышается способность клеток Bacillus cereus и Bacillus megaterium связывать хлортетрациклин. Повидимому, как кальций, так и тетрациклин адсорбируются в этот период на поверхность клеток и могут быть отмыты различными методами промывания. Культивирование спорообразующих клеток с лимонной кислотой в значительной степени усиливает связывание хлортетрациклина с клетками. Хлортетрациклин, окситетрациклин и тетрациклин (в концентрации 3 µг/мл), блокируя поверхность клетки, по-видимому, резко тормозят внедрение кальция в клетки и синтез дипиколиновой кислоты в спорангиях, влияя так на морфологию оюразуюшихся спор и на автолиз спорангиев. Это их действие в значительной степени зависит от стадии развития культуры в момент прибавления к ней антибиотика. Избыток кальция в среде несколько повыwает образование дипиколиновой кислоты как в присутствии хлортетрациклина, так и в контроле. Избыток магния, марганци илп глюкозы не меняет торможения внедрения кальция. — Действие тетрациклиновых антибиотиков на спорообразование и на автолиз спорангиев сравнивается с действием этилендиаминтетрау ксусной кислоты. Полученные результаты обсуждаются с точки зрения теории блокады макромолекул и структур тетрациклиновыми антибиотиками через посредство металлов.     

Protein turnover in resting bacteria

Инкдбируeмыe в фосфатном буфeрe клeтки колиобразнопо орпанизма обнаруживают «turnover» при скорости приблизитeлЬно 2%/чаА. В ходe этопо прeвращeния вклозeниe аминокислот в бeлки угнeтаeтся азидом натрия и влорамфeниколом. Однако на освобождeниe аминокислот из бeлков ни хлорамфeникол, ни азид натрия нe дeйствуют. В клeтках в стадии покоя аминокислоты освобождаются из рибосом и растворимы e бeлков, но вклочаются только в растворимыe бeлки. Из клeток в стадии покоя, выдeляющих аминокиАлоты бeлков во фракцию, eаствориму044E; в eолодной тритлорукАусной кислотe, были выдeлeны пeптиды, содeржайиe аминокислотK А такой жe спeцифичeской радиоактивноАтью, как аминокислоты в дeградирующих клeточных бeлоах. По-видимому, ати пeптиды являются промeжуточным продукРос дeг?адации бeлков in vivo. В стадии покоя бактeeии обладают протeолитичeскойак тивностью, которая, по-видимому, илeeт оРношeниe к рибосомам и проявлпeРся Родько посдe их разрушeния.     

Uptake of inorganic sulphate by the yeast cell

Ъыло установлено, что для использования неорганического сульфата из среды дрожжи нуждаются в запасе азота и в источнике энергии. В необедненных дрожжаи или в дрожжах, бедных серой, включение сульфата в клетки протекает быстрее, чем в дрожжах, бедных азотом, у которых бросается в глазах задержка включения сульфата после прибавления сульфата к среде. Постоянные Михаэлиса при 22°C для N-дефицитных дрожжей составляют 2. 10^?4 и для S-дефицитных дрожжей—7,7. 10^?5. Сульфит и тиосульфат действуют как конкурентные ингибиторы. П ри анаэробных условиях сульфат используется так же быстро, как при аэробных. Динитрофенол, азид натрия и иодуксусная кислота тормозят включение сульфата, причем в N-дефицитных дрожжах больше, чем в S-дефицитных. У ретан тормозит в обоих типах одинаково. Хлорная ртуть действует, по-видимому, двумя механизмами: и как ингибитор энзимаииеских процессов, и в направлении повышения проницаемости клеточной оболочки. Динитрофенол тормозит включение сульфата в клетку и анаэробно, что доказывает различие между этой функцией и «отцеплением» окислительного фосфорилирования. В течение инкубации радиоактивный сульфат появляется раньше всего в фракциях нуклеотидного типа, потом в свободных аминокислотах (цистеин), а позднее всего в белковой фракции, в особенности в метионине. Обсуждаются вопросы различий между обоими использованными типами дрожжей и вопросы влияния ингибиторов.     

Glucose oxidase ofAspergillus niger

По методу Raper и Fennel (1953) приготовляли гетерока риотический мицелий двух различных по генотипу штаммов Aspergillus niger. Штаммы, изолированные из одного конидиофора в гетерока риотическом валике, не были однородными ни по своим морфологическим свойствам, ни способности к продукции. Повышенная продукция глюкозооксидазы была временной и в третьей генерации спор уже не наблюдалась. Причиной зтого явления было, по-видимомы, биохимическое взаимодействие между ядром и цитоплазмой двуя различных щтаммов, прекращающееся после восстановления равновесия в следущей генерасии спор.     

Antibody formation by different cell systems after transfer to new-born rabbits: a morphological study

или подкожно нормально го взрослого селезен ки, лимфатический уз ел, лимфы и костного м озга клетки для 2-5-день-старые кролики, вмес те с бактериальные а нтигены, приводит к а нтитела Формирован ие доноров клеток. Ли квидация в значител ьной части из лимфоци тов эти лимфатическ ой ткани, рассматрив ая донорами, с 6-меркап топурин не существе нно изменить это ант итела ответ. Небольшие количест ва антител также фор мируется путем легочн ой ткани в то время как антите ла производство кле ток и фрагменты из пе чени, вилочковой жел езы и других органов было продемонстрир овано изредка. из клеток селезенки и передача были неэф фектив ными. В этих эксперимента х, лимфоциты, как равн о как примитивный ре тикуляр или примити вных m кл етки, по-види мому вст упит Индукт ивный эт ап формиров ания ант ител, в то вре мя как п роизводител ьной фа зы связано с плазмой дифференцировки кле ток. Гистологический Анализ свидетельств ует о том что лимфоци ты может быть также п ромежуточным шагом ретикуляр между кле тками и незрелых пла зме клетки. Морфологические ре акции переданных кле ток систем, однако, не чисто реакции на бак териальные антигены, но из-за большой степ ени graftversus-хост реакция, и не являющимся конкр етным стимулирован ие переданы клеток. О пределенный артикл ьконкретным морфол огия реакция клетки и передаются из полу чателя органы описа на в деталях, и возмож ное влияние передав аемой лимфоидной клеток на созревани е получателя лимфои дной ткани и их потен ци ала обсуждается. Реакция принимающих против переданных к леток, что приводит к их морфологические деградации как на са йте раствор для инъе кций и в лимфатическ их органах деятельн ость на 20 день после п ередачи может быть вызвано не только по обычной форме сотов ые обороны, но и прост о инкапсуляции.     

Accumulation of pyruvate by changing the redox status in Escherichia coli

Pyruvate was produced from glucose by Escherichia coli BW25113 that contained formate dehydrogenase (FDH) from Mycobacterium vaccae. In aerobic shake-flask culture (K (L) a?=?4.9?min(-1)), the recombinant strain produced 6.7?g pyruvate?l(-1) after 24?h with 4?g sodium formate?l(-1) and a yield of 0.34?g pyruvate?g?glucose(-1). These values were higher than those of the original strain (0.2?g?l(-1) pyruvate and 0.02?g pyruvate?g?glucose(-1)). Based on the reaction mechanism of FDH, the introduction of FDH into E. coli enhances the accumulation of pyruvate by the regeneration of NADH from NAD(+) since NAD(+) is a shared cosubstrate with the pyruvate dehydrogenase complex, which decarboxylates pyruvate to acetyl-CoA and CO(2). The oxygenation level was enough high to inactivate lactate dehydrogenase, which was of benefit to pyruvate accumulation without lactate as a by-product.     

Structural insights of the MLF1/14-3-3 interaction

Myeloid leukaemia factor 1 (MLF1) binds to 14-3-3 adapter proteins by a sequence surrounding Ser34 with the functional consequences of this interaction largely unknown. We present here the high-resolution crystal structure of this binding motif [MLF1(29-42)pSer34] in complex with 14-3-3ε and analyse the interaction with isothermal titration calorimetry. Fragment-based ligand discovery employing crystals of the binary 14-3-3ε/MLF1(29-42)pSer34 complex was used to identify a molecule that binds to the interface rim of the two proteins, potentially representing the starting point for the development of a small molecule that stabilizes the MLF1/14-3-3 protein-protein interaction. Such a compound might be used as a chemical biology tool to further analyse the 14-3-3/MLF1 interaction without the use of genetic methods. Database Structural data are available in the Protein Data Bank under the accession number(s) 3UAL [14-3-3ε/MLF1(29-42)pSer34 complex] and 3UBW [14-3-3ε/MLF1(29-42)pSer34/3-pyrrolidinol complex] Structured digital abstract ? 14-3-3 epsilon?and?MLF1?bind?by?x-ray crystallography?(View interaction) ? 14-3-3 epsilon?and?MLF1?bind?by?isothermal titration calorimetry?(View Interaction:?1,?2).     

Theoretical studies on the kinetics and mechanism of the gas-phase reactions of CHF2OCHF2 with OH radicals

The mechanism, kinetics and thermochemistry of the gas-phase reactions between CHF(2)OCHF(2) (HFE-134) and OH radical are investigated using the high level ab initio G2(MP2) and hybrid density functional model MPWB1K quantum chemical methods. Two relatively close in energy conformers are found for CHF(2)OCHF(2) molecule; both of them are likely to be important in the temperature range (250-1000?K) of our study. The hydrogen abstraction pathway for both the conformers with OH radical is studied and the rate constants are determined for the first time in a wide temperature range of 250 - 1000?K. The G2(MP2) calculated total rate constant value of 2.9?×?10(-15)?cm(3)?molecule(-1)?s(-1) at 298?K is found to be in very good agreement with the reported experimental value of 2.4?×?10(-15)?cm(3)?molecule(-1)?s(-1) at 298?K. The heats of reaction for CHF(2)OCHF(2)?+?OH reaction is computed to be -13.2?kcal?mol(-1). The atmospheric lifetime of CHF(2)OCHF(2) is expected to be around 12?years.     

Effect of transport proteins on l-isoleucine production with the l-isoleucine-producing strain Corynebacterium glutamicum YILW

Previous studies have shown that the deletion of brnQ from the Corynebacterium glutamicum chromosome results in a significant reduction in L-isoleucine uptake rates, while overexpression of brnFE leads to enhanced L-isoleucine export rates. Given that net excretion rates would be an important factor for high titers of L-isoleucine accumulation, we have tested the notion that decreased L-isoleucine uptake combined with increased L-isoleucine excretion will further improve high-yield strains that are currently used for the industrial-scale production of L-isoleucine. To examine the effect of the two carriers on L-isoleucine accumulation in L-isoleucine producer C. glutamicum YILW, we constructed a brnQ deletion mutant (C. glutamicum YILW?brnQ) and two brnFE overexpressors (C. glutamicum YILWpXMJ19brnFE and C. glutamicum YILW?brnQpXMJ19brnFE). Compared to the original strain, the efflux rate of the brnQ mutant increased from 19.0 to 23.6?nmol?min(-1) mg (dry wt)(-1) and its L-isoleucine titer increased from 154.3?mM (20.2?g?l(-1)) to 170.3?mM (22.3?g?l(-1)). The efflux rates of C. glutamicum YILWpXMJ19brnFE and C. glutamicum YILW?brnQpXMJ19brnFE were 33.5 and 39.1?nmol?min(-1) mg (dry wt)(-1), and their L-isoleucine production titers were 197.2?mM (25.9?g?l(-1)) and 221.0?mM (29.0?g?l(-1)), respectively. Our results suggest that modifications of the transport system could provide a promising avenue for further increasing L-isoleucine yield in the L-isoleucine producer.     

Interleukin 6 promoter polymorphisms influence the outcome of chronic hepatitis C

Host genetic variation may affect the outcome of chronic viral hepatitides, favoring viral clearance and/or modulating the inflammatory response to persistent infection. Our aims were to assess whether interleukin 6 (IL-6) promoter polymorphisms are associated with chronic hepatitis C virus (HCV) infection and to clarify the role of IL-6 haplotypes in facilitating progressive disease. The study included 424 Italian patients (233 males, median age 53 years) affected by HCV chronic infection. IL6 -1363, -597, -572, -174, and +2954 polymorphic loci were assayed by means of restriction fragment length polymorphism. Three hundred forty-four healthy Italian blood donors (245 males, median age 50 years) served as controls. Comparing patients and controls analysis of molecular variance was highly significant (p?相似文献   

Dissociation of the vacuolar and macroautophagic cytopathology from the cytotoxicity induced by the lipophilic local anesthetic bupivacaine

Local anesthetics, like many other cationic drugs, induce a vacuolar and macroautophagic cytopathology that has been observed in vivo and in various cell types; some also induce cytotoxicity of mitochondrial origin (apoptosis and necrosis) and it is not known whether the 2 types of toxicity overlap or interact. We compared bupivacaine with a more hydrophilic agent, lidocaine, for morphological, functional, and toxicological responses in a previously exploited nonneuronal system, primary smooth muscle cells. Bupivacaine induced little vacuolization (≥2.5?mmol/L, 4?h), but elicited autophagic accumulation (≥0.5?mmol/L, 4?h) and was massively cytotoxic at 2.5-5?mmol/L (4-24?h), the latter effect being unabated by the V-ATPase inhibitor bafilomycin A1. Lidocaine exerted little cytotoxicity at and below 5?mmol/L for 24?h, but intensely induced the V-ATPase-dependent vacuolar and autophagic cytopathology. Bupivacaine was more potent than lidocaine in disrupting mitochondrial potential, as judged by Mitotracker staining (significant proportions of cells affected in the 1-5 and 5-10?mmol/L concentration ranges, respectively). The addition of mitochondrial-inactivating toxins antimycin A and oligomycin to lidocaine (2.5?mmol/L) reproduced the profile of bupivacaine action (low intensity of vacuolization and retained autophagic accumulation). The high potency of bupivacaine as a mitochondrial toxicant eclipses the benign vacuolar and autophagic response seen with more hydrophilic local anesthetics.     

A Contribution to the question of the group-appurtenance of the virus proliferation of apples

Описаны признаки вируснй проли?ерации яблонь, ее губительность и распространенноств среди сортов яблок и груш в Чехословакии. Болезнь известна в Чехословакии. С 1953 г.В питомниках она встречалась редко. По некоторым признакам определенные сорта Наблюдалось его распространение в густых посадках, напр., кордонных, или у согнутых ?ором плодовых передачей вируса сеянцам яблонь и груш сокм, но с отрицательными результатами. Опыты полумеханического переноса ин?екции путем имплантации кусочков тканей листа или побегов растений, тяжело больных проли?ерацией, дали передачу заболевания в 2%случаев при инкубционном периоде 1 года у однолетних сеянцев яблонь. Перен?екцию зтим способом грушам не удавалось. На кордоне Ораневой Сох, тяжело болевшем проли?ерацией, в мае 1959 г. Наблюдались махровые цветы с тычинками переродившимися в лепестки венчика, а также отчасти или полностью ?иллодические цветы с вовсе не развившимися венчиками органами с лепестками и половыми органмн и с лепестками чашечки, превратившимися в листья почти нормальной величины. Эти ицветыы были привиты в теплице. В 3 случаях из них через 21-97 дней наблюдались типичные признаки заболевания. Сокращение периода инкубации вы объняем применявшимся методом и тяжестью ин?екции. В случаях сеянцев,     

Studies on the Formation and Characteristics of antibodies in frogs

Было установлсно, что — кроме темиературы — вторым решающим Фактором для осуществления образования антител является количестяо антигена и время его введения. Антитела, иолученные у лятушек, были с помощыо крахмалыюго элсктро?ореэа локалиэованы в гамма-и бетаглобулиновоо ?ракции сывороточных белков. Было установлено, что в сыворотке. лятушек и в гамма-глобулиновой ?ракции находятся приблиэиэительно те же тииы молекул, как и в сыворотке млекопитающих с приэнаками болышего количества типа 18S. Гетероагглютинины нины лягушки не теряют под влиянием меркаптоэтанола своэй активности. Было установлено также, что лягушечьи иммунные гетероагглютипины, что касаетсн агглютинации эритроцитов других яидов животных, являются совершенно специ?ическими.     

Severe urinary tract malformation in the course of a twin pregnancy. Apropos of its management

What do we do when one of two monozygotic twins is affected with a severe urinary malformation? - termination of the affected zygote? - termination of the two zygotes as wanted by the parents? - not any intervention? About a personal case, the authors described their experience.     

Bioavailability of Vanadium Extracted by EDTA, HCl, HOAC, and NaNO3 in Topsoil in the Panzhihua Urban Park, Located in Southwest China

Bioavailable vanadium was evaluated on the basis of soil vanadium single-extraction with ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA), hydrochloric acid (HCl), acetic acid (HOAc), and sodium nitrate (NaNO(3)) in Panzhihua urban park. The soil vanadium concentration extracted by HOAc was 0.01-2.07?mg?kg(-1), by EDTA 0.28-7.03?mg?kg(-1), by NaNO(3) 0.07-0.53?mg?kg(-1), and by HCl 0.19-1.36?mg?kg(-1). The bioavailable vanadium (bioavailable fraction) obtained with HOAc was 0.01-1.33%, with EDTA 0.27-4.09%, with NaNO(3) 0.13-0.72%, and with HCl 0.06-0.28%. In addition, the impact of soil properties, soil nutrients, and soil enzyme activities on bioavailability of vanadium is discussed in this study. Based on the characteristics of bioavailable vanadium in the soil, ecological and health risks should have been given more attention in the studied area.     

Linear,cyclic, and polypeptides having the sequence -Asp-ϵAhx-Ser-ϵAhx-His-ϵAhx- as catalysts in the ester hydrolytic reactions

Box-Asp-?Ahx-Ser-?Ahx-His-?Ahx-OEt(Linear-6), cyclo(-Asp-?Ahx-Ser-?Ahx-His-?Ahx-)(Cyclic-6) and poly(-Asp-?Ahx-Ser-?Ahx-His-?Ahx-)(Poly-6) were synthesized, and their catalytic actions in the hydrolysis of PNPA were investigated. Linear-6 was prepared by fragment condensations of three peptides having the sequence -Asp(OBzl)-?Ahx-, -Ser(Bzl)-?Ahx- and -His-?Ahx-, respectively, and subsequent debenzylation. Cyclic-6 and Poly-6 were obtained by cyclization and polymerization, respectively, of H-Asp(OBzl)-?Ahx-Ser(Bzl)-?Ahx-His-?Ahx-OH with DPPA, and subsequent deprotections. The reaction velocities in the hydrolysis of PNPA were all proportional to [E] or [S], and all peptides gave the bell-shaped pH-κ_cat profiles having optima around pH 8.2. The reaction velocity of Cyclic-6 was always larger than that of Linear-6 or Poly-6. The velocities of all reactions increased steadily with rise in temperature, and the Arrhenius' plots from T-k_cat relations suggested that the activation energy for the reaction catalysed by Poly-6 is larger than that by Linear- or Cyclic-6. Brief results for the hydrolysis of other substrates, the solvent isotope effect, and the conformational study with c.d. measurements are also reported.     

Diagnostic accuracy of heart-rate recovery after exercise in the assessment of diabetic cardiac autonomic neuropathy

Diabet. Med. 29, e312-e320 (2012) ABSTRACT: Aims Poor prognosis associated with blunted post-exercise heart-rate recovery may reflect autonomic dysfunction. This study sought the accuracy of post-exercise heart-rate recovery in the diagnosis of cardiac autonomic neuropathy, which represents a serious, but often unrecognized complication of Type?2 diabetes. Methods Clinical assessment of cardiac autonomic neuropathy and maximal treadmill exercise testing for heart-rate recovery were performed in 135 patients with Type?2 diabetes and negative exercise echocardiograms. Cardiac autonomic neuropathy was defined by abnormalities in ≥?2 of 7 autonomic function markers, including four cardiac reflex tests and three indices of short-term (5-min) heart-rate variability. Heart-rate recovery was defined at 1-, 2- and 3-min post-exercise. Results Patients with cardiac autonomic neuropathy (n?=?27; 20%) had lower heart-rate recovery at 1-, 2- and 3-min post-exercise (P?相似文献   

Initial studies on the contributions of body size and gastrointestinal passage rates to dietary flexibility among gorillas

Large body size has been traditionally seen as the primary dietary adaptation of gorillas, facilitating their consumption of fibrous foods (Schaller ?1963 The Mountain Gorilla; Watts ?1990 Int. J. Primatol. 11:21-45). Nevertheless, recent research has emphasized frugivory among western lowland gorillas, as well as the influence of habitat and seasonality on gorilla diet and behavior across subspecies (Watts ?1990 Int. J. Primatol. 11:21-45; Tutin et al. ?1991 Philos. R. Soc. Trans. Lond. Biol. 334:179-186; Remis ?1994 Ph.D. Thesis, ?1997a Am. J. Primatol. 43:87-109, ?1997b Am. J. Primatol. 43:111-133, ?1998 Primate Locomotion: Recent Advances, p 95-(1)108, ?1999 Primates 40:383-396; Nishihara ?1995 Primates 36:151-168; Goldsmith ?1999a Int. J. Primatol. 20:1-23, Goldsmith [1999b] Nonhuman Primates, p 58-63). This study provides preliminary data to address the physiological underpinnings of dietary flexibility among gorillas, and their consumption of a broad range of fibrous and tannin-rich foods. To date, little is known about the digestive physiology of the African apes (but see Milton ?1984 Adaptations for Foraging in Nonhuman Primates, p 249-279, Milton [1984] ?1999Evol. Anthropol. 8:11-20; Milton and Demment ?1988 J. Nutr. 118:1082-1088; Lambert ?1997 Ph.D. Dissertation), although gastrointestinal morphology and proportions are roughly similar among species ( Chivers and Hladik ?1980 J. Morphol. 166:337-386). This study provides additional experimental data on the gastrointestinal passage times of gorillas (Gorilla gorilla gorilla) fed a captive diet in a zoological park setting and discusses results in relation to field research on gorilla feeding ecology. In this study, 480 small plastic markers were fed to six captive gorillas. The mean gut retention time (MRT) of the adult gorillas in this study was 50 hr, longer than the 31 hr reported for chimpanzees fed a similar diet (Lambert ?1997 Ph.D. Dissertation). These data suggest that gorillas may retain foods in their gastrointestinal tracts longer than smaller hominoids, and that the large body size likely forms the primary basis for consumption of fiber. This research provides additional data to contribute to our understanding of the relationships of body size and morphology to ecology, and the evolution of body size, foraging strategy and social organization among the African apes.