基于质粒的轮状病毒反向遗传学研究进展

轮状病毒是全球范围内引起婴幼儿急性胃肠炎的最主要病原体，2016年导致的儿童死亡病例为228047例，每年导致的住院病例则高达200万例。轮状病毒属于呼肠孤病毒科，基因组由11条分节段的双链RNA (dsRNA)组成，被三层衣壳包裹。病毒反向遗传学技术的建立加快了病毒学的研究。2017年，完全依赖质粒的轮状病毒反向遗传学技术获得突破，随后在轮状病毒致病机制、疫苗研发、载体构建等方面取得重要进展。本文将就此技术的建立、发展和应用进行综述，供相关领域人员参考，以期加快我国轮状病毒的研究和应用，推动我国轮状病毒急性胃肠炎的预防和控制。     

轮状病毒性腹泻

<正>近年在发达国家和发展中国家中,轮状病毒可能是引起年幼儿童腹泻最重要的病原体。而且,该病渐趋严重,1～2岁儿童常住院治疗。 关于轮状病毒性腹泻的流行病学,人和动物对轮状病毒的被动抵抗力,特异性轮状病毒疫苗的研制和试用,于1984年2月在日内瓦病毒性腹泻(微生物学、流行病学、免     

接种疫苗对四年后马拉维儿童轮状病毒胃肠炎住院的直接影响以及可能的间接作用

尽管在常规免疫中其疫苗的使用有所增加,在低收入国家轮状病毒仍然是引起急性胃肠炎(AGE)的主要原因。作者描述了马拉维在疫苗引入前和引入后四年轮状病毒的流行和住院情况;提供最新的疫苗有效性评估并评估了轮状病毒疫苗的间接影响。在布兰泰尔招募了5岁以下因患急性胃肠炎而入院的儿童。粪便样本用酶免疫分析法检测轮状病毒。采用泊松回归法评价轮状病毒流行的变化。时间序列分析用于进一步调查随着时间推移的流行趋势。采用逻辑回归法评估抵抗任何严重程度的轮状病毒腹泻的有效性。通过评估未接种疫苗儿童的轮状病毒患病率,并将观察到的轮状病毒住院率降低与基于疫苗覆盖率和试验现场效果估计值进行比较,来估计疫苗的间接作用。     

促菌生对婴幼儿轮状病毒胃肠炎的疗效观察

促菌生对婴幼儿轮状病毒胃肠炎的疗效观察华西医科大学儿科四川成都吴炎兴,王增贵,蒋仕佐卫生部成都生物制品研究所成都周和平为探索治疗婴幼儿病毒性胃肠炎的有效药物,我们按照全国小儿腹泻会议制定的轮状病毒胃肠炎临床诊断标准［１］,予１９９２年１１月～１９９３...     

云南省昭通市婴幼儿急性胃肠炎中轮状病毒的研究

本文报道应用PACE、EM、ELISA检测技术,对1982年10月到1985年12月间采自云南省昭通市的婴幼儿急性胃肠炎患者大便标本中的A组轮状病毒(RV)和腺病毒(Adv)的研究结果。从309例标本中共检出169例含有RV,阳性率为54.7％。在不同性别间RV检出率没有显著差异。RV>6月～24月龄患儿组中的检出率(59.1％)显著高于(?)6月龄患儿组(33.3％)(P<0.01)。10月至1月是PV胃肠炎流行的高峰季节,在这一季节中RV的检出率(65.1％)显著高于其它季节(P<0.001)。对RV基因RNA的分子流行病学研究发现,1984年2月至1985年12月间在昭通市流行的RV全为第二亚组。Adv在婴幼儿急性胃肠炎中的检出率为16.7％。结果表明,RV是昭通市婴幼儿急性胃肠炎的主要病原体,它的流行具有明显的季节性。     

2010-2013年上海长宁地区成人轮状病毒急性胃肠炎的分子特征

为研究上海长宁地区成人轮状病毒急性胃肠炎的分子特征,收集2010年6月-2013年12月长宁区定点医院成人急性胃肠炎患者的粪便标本1 554份,采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbentassay,ELISA)进行A组轮状病毒检测,多重聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)进行B组和C组轮状病毒检测.结果显示,1 554例患者的平均年龄为(46.19±15.59)岁,其中男性691例、女性863例.共检出轮状病毒200株,检出率为12.87％.18～39岁组的轮状病毒检出率为9.15％,40～59岁组为15.58％,60～79岁组为15.16％,≥80岁组为18.57％.A组轮状病毒基因型检测结果显示,G型以G9亚型最多(29.82％),P型以P[8]亚型最多(77.19％),GP组合以G9P[8]最多(25.73％).结果提示,2010-2013年上海长宁地区成人轮状病毒急性胃肠炎在就诊患者中以中老年多见,基因型以G9P[8]最多.     

多重RT-PCR用于临床检测三种胃肠炎病毒的研究

轮状病毒、诺瓦克病毒和星状病毒是引起病毒性胃肠炎的主要病原因子。研究采用JV12/JV13、P1/P2和Mon340/Mon348三对引物,建立了同时检测这3种病毒的多重RT-PCR技术,并应用于128份临床粪便样本的检测,检出轮状病毒62份(48.44%),诺瓦克病毒8份(6.25%),星状病毒11份(8.59%)。在灵敏度试验中,轮状病毒的检测灵敏度为5pg/mL、诺瓦克病毒和星状病毒的检测灵敏度均为50pg/mL。该研究所建立3种常见胃肠炎病毒的多重RT-PCR方法具有特异性强、灵敏度高的特点,可用于临床病原诊断和溯源。     

五、轮状病毒的细胞培养

<正>近10年来发现的与人急性胃肠炎有关的病毒的共同特征之一就是难于在细胞培养或器官培养中生长。这些病毒包括轮状病毒、副轮状病毒、Norwalk病毒群、腺病毒、冠状病毒及其它小圆病毒如星状病毒、萼状病毒等。ECHO病毒和Coxsackie病毒虽较容易分离培养,但它们与急性腹泻关系不大。因此,细胞培养法在腹泻病毒研究方面没有发挥更大的作用。腹泻病毒的分类鉴定主要是靠电镜法。     

中国轮状病毒疫苗的人群效应研究

正兰州羊源轮状病毒(LLR)疫苗是中国自主研发的全球第2支轮状病毒疫苗,2000年以来一直用于国内儿童轮状病毒感染性胃肠炎(RV-GE)的预防。评估LLR疫苗覆盖率与儿童RV-GE发病的关系。采用现况和生态学研究,分析广州市2007年5月1日至2016年4月30日期间可能免疫的人群(2月龄至3岁)和非免疫对象人群(4岁及以上)的     

中国轮状病毒疫苗的人群效应研究

正兰州羊源轮状病毒(LLR)疫苗是中国自主研发的全球第2支轮状病毒疫苗,2000年以来一直用于国内儿童轮状病毒感染性胃肠炎(RV-GE)的预防。评估LLR疫苗覆盖率与儿童RV-GE发病的关系:采用现况和生态学研究,分析广州市2007年5月1日至2016年4月30日期间可能免疫的人群(2月龄至3岁)和非免疫对象人群(4岁及以上)的     

轮状病毒在一个小群体中的传播

<正>轮状病毒感染被认为是少年儿童胃肠炎的主要病因。出现轮状病毒感染临床症状的暴发多见于冬季,但通常无明显流行。散发病例可见于夏季,表明此病毒在该群体中是地方性的。 婴幼儿感染轮状病毒常出现严重症状,需住院治疗,儿童和成年人也可发病。成年人受感染后多出现轻微的甚至不出现临床症状。无症状的成年人无意中可成为传染源,     

以色列南部轮状病毒疫苗引入国家免疫计划的快速影响

正轮状病毒疫苗在2007获准在以色列使用,而且在2011年五价疫苗(RV5)被引入以色列的国家免疫计划。确定轮状病毒疫苗对以色列南部5岁以下犹太和贝都因儿童因轮状病毒性胃肠炎(RVGE)和全因腹泻医院就诊发生率的影响。作者进行了一项以人群为基础,前瞻性,观察性研究。对2006到2013的数据进行了分析。作者的医院是该地区唯一的医疗中心,能够用年龄发病率进行计算。     

ELISA及IF测定细胞培养物中人轮状病毒

人轮状病毒是全世界婴幼儿急性胃肠炎的重要病原,近年来由于成功地使用了能够增强人轮状病毒对细胞感染性的胰蛋白酶,因而使人轮状病毒能在细胞中不断繁殖,并引起一定的细胞病变,与此同时,也建立和发展了敏感性及特异性较好     

用乳胶凝集试验测大便中的轮状病毒

<正>病人大便中的轮状病毒可以用高度敏感和特异的方法——乳胶凝集法(LA)检测。 材料和方法 患者 从急性胃肠炎或疱疹性咽峽炎患者收集大便标本。急性胃肠炎患者年令从3个月至3岁;后者从1岁至5岁。在发病后1～5天收集大便标本。     

轻度胃肠炎伴热性惊厥患儿肠道菌群失调与脑损伤的相关性

目的 探讨热性惊厥患儿肠道菌群失调与脑损伤的相关性，为该类患儿的治疗提供参考。方法 选取2020年10月至2021年10月我院收治的108例热性惊厥患儿为研究对象，根据患儿临床表现分为轻度胃肠炎伴热性惊厥组（57例）和单纯型高热惊厥组（51例）；根据是否发生脑损伤分为脑损伤组（27例）与无脑损伤组（81例）。入院时采集患儿粪便标本进行轮状病毒检测以及大肠埃希菌、肠球菌、乳杆菌和双歧杆菌培养。采集患儿空腹静脉血，采用酶联免疫双抗体夹心法检测血清S-100β蛋白、碱性髓鞘蛋白（myelin basic protein, MBP）、神经元特异性烯醇化酶（neuron-specific enolase, NSE）水平。采用多因素Logistic回归分析影响热性惊厥患儿脑损伤的危险因素，然后采用Pearson法分析肠道菌群与脑损伤的相关性。结果 轻度胃肠炎伴热性惊厥组患儿轮状病毒阳性28例（49.12%），单纯型高热惊厥组患儿轮状病毒阳性15例（29.41%），差异有统计学意义（χ2=4.364,P<0.05）。轻度胃肠炎伴热性惊厥组患儿粪便中大肠埃希菌、肠球菌、乳杆菌、双歧杆菌数量均低于...     

B组轮状病毒RT—PCR来源的cDNA探针核酸诊断方法的建立

近十年来,国内外学者相继报道在人以及牛、羊、猪、大鼠的腹泻粪样中检出Ｂ组轮状病毒〔１－３〕。洪涛等于１９８３年首次报道成人腹泻轮状病毒（ＡＤＲＶ）属于Ｂ组轮状病毒〔４〕。目前,轮状病毒Ｂ组已被公认为引起人及不同动物腹泻的流行病学的重要因素。由于Ｂ组轮...     

小儿轮状病毒胃肠炎腹泻的被动免疫防治

小儿轮状病毒胃肠炎腹泻的被动免疫防治龙中儿,杨宁生（江西—ＯＡＩ研究院,南昌３３００４７）轮状病毒遍及全球,是小儿腹泻病的重要病因,世界每年大约有９０万人死于该病［１］。经调查表明：我国每年五岁以下小儿腹泻病患达２．５亿人次。其中相当大的比例由轮状病...     

长春地区冬季流行的轮状病毒核酸电泳型的比较

轮状病毒是婴幼儿腹泻的主要病原,在我国亦广泛流行,根据病毒基因组的电泳分析,可以研究其分子流行病学的规律。文献报道该病毒在流行区往往以一个电泳型感染为主,我们对长春地区1984～1985年和1985～1986年两个冬季流行的婴幼儿腹泻轮状病毒基因组PAGE分析的结果,也表明两个冬季都是以电泳长型感染为主,其中优势株与本室     

儿童感染性腹泻病原学研究

目的 研究儿童感染性腹泻病原学组成与流行病学特征。方法 按《临床检验操作规程》定点逐月检测0～6岁腹泻患儿大便标本中轮状病毒、痢疾杆菌、致病性大肠埃希菌（EPEC）与沙门菌,并分析病历。结果 全年共检测693份标本,检出病原326份,检出率为47.0%;轮状病毒、EPEC、痢疾杆菌及沙门菌的检出率依次为30.2%,8.4%、7.2%与1.3%;轮状病毒与细菌性病原构成比为64.1：35.9;轮状病毒以秋冬季（10、11月与次年1、2月）、水样便标本、2岁以内年龄组以及人工和混合喂养婴儿检出率较高;细菌性病原以夏秋季（6～10月）与脓血便检出率较高;痢疾菌群中以福氏菌占优势（70%）,次为宋内杆菌（28.0%）;EPEC菌型复杂,共检出11个“O”群;检出的沙门菌有4种,即阿哥纳、德尔串、鼠伤寒与肠炎血清型。结论 开展儿童感染性腹泻病原学研究能即时发现病原,并为制定防治对策提供依据。