基因工程

960001 用次级脉冲场凝胶电泳分离大分子DNA[英]/Lai,E.…∥Anal. Biochem. -1995,224(1).-68～74[译自DBA,1995,14(7),95-03698] 报道了用次级脉冲场凝胶(SPFG)电泳在不降低分辨率的情况下提高大分子DNA的分离速度。然而,重复SPFG条件的试验却没有成功。于是人们试图精确限定次级脉冲对分离大分子DNA的作用,以确定该技术用于分离分子量最大为1100kb     

DNA分析与扩增

931549利用毛细管系列电泳进~DNA.]II序[英3/Huang,X.C.…,Ahal.Chem.一1992,64(8)一.2149~2154[译自DBA,1992,11(23),92—12849] 一种DNA测序方法利用了毛细管系列电泳,双色荧光检测和双染料标记。在一系列毛细管上分离Sanger DNA测序片段,再用双色激光激发的confocal荧光扫描器进行桂上检测。在单个毛细管里分离出4套DNA测序片段,然后用双编码法进行区别,其中每套片段用两个有特定比率的染料标记的引物标记。这样就有可能筛选出电泳迁移率相同的染料l关键的是甩不同染料标记的DNA片段之间不应该出现电泳迁移的差异,而且染料具…     

动物遗传工程

860729 利用DNA处理过的精子对牛进行人工授精[英]/Schellander, K.…∥Anim. Biotechnol.-1995,6(1).-41～50[译自DBA,1995,14(14),95-08402] 研究了用DNA处理过的精子进行人工授精,以此用精细胞作载体将外源DNA导入牛基因组的     

用垂直凝胶脉冲电泳分离染色体DNA

脉冲电场凝胶电泳(PFGE)是近几年发展起来的一种分离高分子DNA片段(50—10000kb)的有效方法。包括正交场,六边形场,反向场和垂直胶脉冲电泳。本文改进了垂直胶脉冲电场(TAFE)的条件,使酵母DCo4染色体电泳核型从11条带提高到14条。利用TAFE鉴定了蛋白酶消化法和TLS法制备的人基因A,其分子长度主要分布在200—450kb。     

Shotgun法测序制备高纯度水稻基因组DNA的方法探讨(英)

在用散弹 (shotgun)法测定水稻 (OryzasativaL .ssp .indica)基因组全序列的过程中 ,叶绿体和线粒体DNA的污染问题非常严峻 .应用脉冲场电泳 (PFGE)技术对水稻基因组DNA进行纯化 ,结果表明它能够有效去除叶绿体和线粒体DNA ,使其污染率从 3%降低到 0 2 % .同时 ,比较了水稻绿苗和黄化苗的DNA得率 ,以及HB法和NIB法制备大分子质量(HMW)DNA的异同 .最后提出一套制备水稻基因组DNA的方法 ,包括黄化苗培养 ;细胞核的分离、包埋和裂解 ;脉冲场电泳纯化、回收聚集在低熔点 (LMP)胶中的水稻HMWDNA .用该方法所得的水稻基因组DNA ,纯度高 (无叶绿体和线粒体DNA污染 )、基因组完整 (机械剪切和降解少 )、回收率高 (操作过程中DNA损失少 ) .另外 ,首次报道在融化的低熔点(LMP)胶中对水稻HMWDNA于 38℃进行超声波处理 ,能够获得用于shotgun文库和梯度文库构建所需要的各种DNA片段(1 5～ 3kb ,3～ 12kb) ,并且效果优于在TE中进行操作     

疫苗

960999 禽痘病毒DNA复制及作图分析[英]/Zantinge, J. L.…//Can. J. Microbiol. -1995,41(4～5).-378～387[译自DBA,1995,14(17),95-10127] 产生了一种禽痘病毒Chick-N-Pox疫苗株DNA基因组的EcoRⅠ、BamHⅠ、NcoⅠ和PstⅠ限制性物理图谱。利用琼脂糖凝胶电泳和PAGE分析了EcoRⅠ、BamHⅠ、BglⅡ、NcoⅠ、StyⅠ、PstⅠ和PvuⅡ消化DNA的凝胶分布结果。从中估测禽痘病毒基因组的     

DNA分析与扩增

922029利用超薄报胶快速定序ONA〔会,英〕/Sm川1,L .M.…了Abstr.pap.Am.Chem.Soc一1991,202 Meet.,Pt.1一ANYL 33〔译自DBA,1992,10(23),91一13304〕 研究了用毛细管电泳提高荧光DNA白动测序仪的定序速度。用毛细管电泳比用常规电泳分离和测定DNA定序反应荧光标记产物的速度快25倍。为了增加多样本平行分析的分辨逮度,发明了一种进行超薄板(50林m)凝胶电泳的装置。这种凝胶电泳的电场高达300V/cm,利用自显影法经25分钟电泳可厕定多达320碱基的序列。设计并制造了一个用于检测多个在上述超薄凝胶上荧光定序的荧光团的检测系统。…     

用电注入质粒DNA转化完整酵母细胞的新方法

已经发现,用电场脉冲可以将质粒DNA(YEp13)引入完整的酵母细胞。电注入法的转化频率决定于起始电场强度、放电电容器的电容及应用的脉冲。用起始电场强度5kv/cm和电容/1μF的3个连续脉冲得到转化子数最多(90±20个/μgDNA)。电注入方法简单,且在转化处理后2-3天内即可得到转化子。     

DNA链断裂检测技术的进展

DNA链损伤特别是DNA双链段裂(dsb)的检测方法是研究DNA辐射损伤的一个关键因素.已发展的检测DNA dsb的方法很多,但各种检测法均有其一定的优越性和适用范围,近年来应用较多并日益受到重视的新方法有原位杂交法,彗星试验(单细胞电泳法)以及高效毛细管电泳法等等.     

小麦蓝矮植原体染色体DNA的分离

[目的]分离小麦蓝矮(WBD)植原体染色体DNA,并建立WBD植原体染色体分离纯化体系.[方法]采用差速离心和脉冲电泳(PFGE)方法富集纯化WBD植原体染色体DNA,并通过PCR和Southern blot进行检测验证,实时荧光定量PCR方法对分离纯化效果进行定量检测.[结果]脉冲电泳凝胶中出现一条大小约为650 kb的条带,经PCR检测和Southern blot分析表明该条带为WBD植原体的染色体DNA.实时荧光定量PCR检测结果表明采用差速离心与脉冲电泳结合的方法可以将WBD植原体基因组的相对拷贝数提高436.5倍.[结论]采用差速离心与脉冲电泳法结合可以有效地从感染WBD长春花中分离到纯的WBD植原体染色体DNA,WBD植原体染色体DNA大小约为650 kb.     

基因库构建

922472 从人21染色体构建并鉴定酵母人工染色体部分文库[英]/Bellis,M.…∥DNA Cell Biol.-1991,10(4).-301～310[译自DBA,1992,11(1),92-00024] 构建酵母人工染色体(YAC)的一般方法是:琼脂糖制备DNA、EcoRI部分酶切、脉冲电场凝胶电泳(PFGE)对片段大小的筛选、反向电场电洗脱(field-inversion electroelution)、连接、用PFGE选择大小并消除未连接载体、洗脱、转化酿酒酵母、铺板于ura~-、trp~-培养基上、复印到尼尤膜上、筛选人源克隆。以体细胞杂交系WA-17(人源部分只有21染色体)在质粒pYAC4中     

激素和活性多肽

<正> 854997 编码人胰岛素原的 DNA 合成[英]/Ovchinnikov,Y.A.…//Gene.-1984,31(1～3).-65～78[译自 DBA,1985,4(4),85-01704]使用化学-酶方法合成271bp 和286bp 的双链 DNA,每个 DNA 含有为胰岛素原编码     

基因工程

910674 通过向小样品高效热转移法减少DNA扩增过程所需时间[英]/Witter,C.T.…//Anal.Biochem.-1990,186(2).-328～331[译自DBA,1990,9(15),90-08579]讨论了在PCR过程中利用空气循环体系对变性、退火及延伸阶段进行快速(几秒种)温度循环.由样品区出来的空气     

生物防治

962195 开发用于防治昆虫的重组杆状病毒[英]/Bonning,B.C.…//Annu.Rev.Entomol.-1996.41.-191～210[译自DBA,1996,15(7),96-03938] 随着重组DNA技术的进步及快反应重组杆状病毒的开发,人们对这些病毒在田间防治昆虫的潜力的兴趣大大增加。本编综述提供了重组杆状病毒目前状况的总体情况,包括:(1)利用遗传工程开发     

在污染环境下带时滞和脉冲输入两种营养液和一种微生物模型性质的研究

提出并研究污染环境下带时滞和脉冲输入的恒化器模型,利用脉冲方程比较定理得到微生物灭绝周期解全局吸引和系统持续生存的充分条件,最后给出一个简单讨论.     

来自海南等地的17个Bt分离株质粒多样性分析

本研究采用琼脂糖凝胶电泳对分离白海南岛的12个Bt菌株与分离自广西、黑龙江的5株Bt菌株及2株Bt模式菌株进行质粒数量、大小等特征分析.19个供试菌株可区分为16种独特的质粒电泳图谱,充分显示出不同来源bt菌株的质粒多样性.进一步选择了其中的10个菌株,利用包埋法制备琼脂块进行脉冲场凝胶电泳(PFGE),结果表明苏云金芽孢杆菌大质粒组成特征也具有丰富多样性.但是供试菌株的质粒电泳图谱并未体现与地理和生态特征相关联的特征差异.研究结果初步证实海南分离株S3078-1是一株无内生质粒的Bt菌株,而S3031-1和S3073-1两个分离株仅有一个大质粒存在,这三个分离株将为进一步研究质粒功能提供初始菌株.本研究进一步暗示将琼脂糖凝胶电泳和脉冲场凝胶电泳结合起来研究质粒特征提高了结果的可靠性.     

脑膜炎奈瑟菌分子分型方法的进展

目前,脑膜炎奈瑟菌(Neisseria meningitidis,Nm)分型方法可分为免疫学为基础的传统分型方法和分子生物学分型方法,前者包括血清分群和单克隆分型,后者包括脉冲场凝胶电泳(pulsed-field gel electrophoresis,PFGE)、多位点测序分型(multi locus sequence typing,MLST),核糖体分型(ribotyping),随机扩增多态性DNA分型(randomly amplified polymorphic DNA,RAPD)等.     

基因工程

<正>851741DNA在酵母和动物细胞的寄主一载体系统中的分子克隆和表达[会,英]/ScottJF//Abstr.Pap.Am.Cliem.Soe-1984,287 Meet一CHED 76[译自DBA1984 ,3(19)-08940] 分子克隆技术及其应用的许多迅速进展是利用细菌系统实现的,但是将类似的方法用于真核寄主-载体系统是既定的目标。已研究出的这类系统(作为寄主细胞)使用各种低     

一类具饱和传染力和常数输入的SIRS脉冲接种模型研究

利用Floquet乘子理论,研究了一类具饱和传染力和常数输入的SIRS脉冲接种模型,得到了无病周期解全局渐近稳定和系统持久的充分条件.