湿地松体细胞胚胎发生和植株再生

以湿地松的未成熟合子胚为外植体,在附加８ｍｇ／Ｌ,２,４－Ｄ和４ｍｇ／Ｌ ＢＡ的ＬＰ培养基上诱导出胚性愈伤组织。在含１ｍｇ／Ｌ,２,４－Ｄ和０．５ｍｇ／Ｌ ＢＡ的培养基上保持并增殖。提高培养基的渗透压后,愈伤组织内大量的胚性胚柄细胞团和早期原胚。     

中药半夏单细胞悬浮培养、胚胎发生及植株再生

以悬浮细胞作为靶标材料,在COLC诱导获得多倍性细胞后,经诱导分化和再生形成纯合的多倍体植株,是一条可行且高效的多倍体诱导途径。但该途径的前提是成熟、高效的单细胞悬浮培养和植株再生体系建立。鉴于此,在获得优良胚性愈伤组织的基础上,对半夏细胞悬浮培养、细胞分化及再生植株所涉及的关键问题及其影响因素进行研究,结果获得了以近圆形细胞为主的高质量单细胞悬浮系,细胞生长曲线呈典型的"S"型,细胞密度可达2.0×106以上,活细胞率可达86.80%,近圆形细胞率可达82.64%;明确了其细胞胚胎发生的两种可能途径,并通过诱导细胞分化,成功获得了愈伤组织增殖,最终实现了高效的植株再生,愈伤分化率可达94.46%,丛生芽诱导率可达337.42%,幼芽成苗率可达90.75%,幼苗生根率可达95.40%,移栽成活率可达98.83%,从而建立了高效的半夏悬浮细胞培养和植株再生体系,为后续的基于单细胞水平的半夏多倍体诱导研究提供技术参考和科学依据。     

木薯体细胞胚胎发生及植株再生研究

对木薯体细胞胚胎发生的影响因素进行了优化研究。结果表明,基因型对木薯体细胞胚胎发生影响很大,在供试的六个品种中,“华南 8 号”的体细胞胚胎发生率和产胚量最高,分别为 65% 和19个;侧芽茎尖为最佳外植体,体细胞胚胎发生的最佳培养基为MS +0.5mg/L CuSO4 + 4 mg/L 2,4-D。同时,对木薯体细胞胚再生成完整植株的主要影响因素作了分析,建立了一个高效的植株再生体系。     

玉米芽尖培养中的高频率体细胞胚胎发生与植株再生(简报)

通过诱导玉米芽尖产生胚性愈伤组织,建立起高频率植株再生的玉米芽尖培养实验体系。在MS+1.0mg·L-16-BA+0.2mg·L-12,4-D+500mg·L-1CH的培养基上诱导愈伤组织并继代培养1次后,将愈伤组织转移到Ms+0.5mg·L-16-BA+0.4mg·L-1IBA+500mg·L-1CH的分化培养基上,可形成大量的体细胞胚胎。组织学观察表明,体细胞胚胎主要发生在胚性愈伤组织表面与表层下部。不同基因型的芽尖形成愈伤组织和再生植株的能力不同。     

水母雪莲体细胞胚胎发生及其植株再生

水母雪莲（Saussurea medusa Maxim.)茎和叶片的切段接种于MS＋2mg/L NAA 0.5mmg/L 6-BA的培养基上,20d后产生黄褐色的愈伤组织,经过几个月的继代培养,愈伤组织仍保持旺盛的增殖能力,但部分由黄褐色逐渐变为红色,将红色愈伤组织转到MS＋0．1mg/L NAA＋0．2mg/L 6-BA 5mg/L GA3的培养基上,30d后可分化出大量的体细胞胚,体细胞胚成熟后转到1／2MS＋0．2mg/L IAA 0.5%活性炭的培养基上,30d后可长出2－4cm的根,带根的小苗经锻炼后移栽到土壤中,成活率达76％,细胞组织学观察表明,发育成熟的体细胞胚具有胚根,胚轴和胚芽的完整结构,具有独立的维管系统。     

白Qian体细胞胚胎发生及其植株再生

白Ｑｉａｎ的成熟胚在４－６℃低温下保存１个月后,接种于改良ＬＰ＋２ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ＋１ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ的培养基上,黑暗条件下培养１个月便可产生白色半透明的胚性愈伤组织。整体染色封片观察表明,胚性愈伤组织由很多很长的胚柄细胞及其顶端胚细胞团组成,这种愈伤组织培养物称为胚性胚柄团。     

白杄体细胞胚胎发生及其植株再生

白杄(Picea meyeri Rehd.et Wils.)的成熟胚在4～6℃低温下保存1个月后,接种于改良LP 2mg/L 2,4-D 1mg/L 6-BA的培养基上,黑暗条件下培养1个月便可产生白色半透明的胚性愈伤组织。整体染色封片观察表明,胚性愈伤组织由很多很长的胚柄细胞及其顶端的胚细胞团组成,这种愈伤组织培养物称为胚性胚柄团。胚性胚柄团在MS 1mg/L 2,4-D 1mg/L KT的继代培养基上黑暗条件下可保持旺盛的增殖能力和分化潜力。当胚性胚柄团转到MS 5mg/L ABA 5mg/L AgNO_3的分化培养基上,1个月后可产生大量正常的体细胞胚。体细胞胚成熟以后转到含0.5％活性炭的无激素1/2MS基本培养基上约40d后可长出1.5～2.5cm的根,约60d后可长出真叶。光、ABA、蔗糖及AgNO_3浓度是影响体细胞胚发生的主要因素。     

一品红体细胞胚胎发生与植株再生

一品红不同部位愈伤组织诱导能力存在差异,嫩茎>幼花序>嫩叶。愈伤组织的长势主要受生长素的影响,细胞分裂素对愈伤组织生长有促进作用;但在含6-BA和NAA的培养基中诱导出的愈伤组织,其胚性明显强于单独用NAA诱导出的愈伤组织。液体悬浮培养是一品红体细胞胚胎高频发生的中间步骤。不同浓度BA对一品红体细胞胚的萌发率影响不大,萌发培养基中KNO₃含量加倍可提高萌发率。     

火炬松细胞悬浮培养体细胞胚胎发生的研究

用火炬松成熟合子胚诱导产生的胚性愈伤组织建立了胚性细胞悬浮系。研究了细胞密度,继代时间和ＡＢＡ浓度等对悬浮条件下胚性柄细胞团及体细胞胚形成的影响。结果表明：当细胞密度为６×１０＾３个／ｍｌ,继代时间为２个月,ＡＢＡ浓度为５ｍｇ／Ｌ时,最有利于ＥＳＭ及ＳＥ发生。在悬浮培养条件下,还观察到裂生胚及子叶原基的分化。     

鱼腥草体细胞胚胎发生和植株再生

目的:利用鱼腥草的叶片和叶柄为材料,进行体细胞胚胎诱导及植株再生研究。方法:运用正交设计试验,考察在改良的MS固体培养基上添加不同种类、不同浓度的植物生长物质组合及其配比对鱼腥草愈伤组织诱导、体细胞胚胎发生及植株再生的影响。结果:鱼腥草无菌苗叶片在含有2,4-D 1.0 mg/L 6-BA 0.5 mg/L的改良MS培养基上能诱导出胚性愈伤组织;胚性愈伤组织在含有6-BA 1.0 mg/L的改良的MS培养基上诱导体细胞胚的发生;叶柄在含有6-BA 1.0 mg/L改良MS培养基上直接产生体细胞胚。体细胞胚在改良的MS NAA0.1 mg/L 6-BA 1.0 mg/L的培养基上能够快速繁殖,形成大量不定芽,在不加任何激素的MS培养基上就可以萌发出不定根,发育为成完整植株,在MS IBA 1.0 mg/L的固体培养基上能够形成大量的根。结论:建立了鱼腥草体细胞胚胎发生及植株再生的体系。     

三叶半夏叶片一步成苗离体培养技术

以药用植物三叶半夏叶片为材料,通过比较直接和间接器官发生两种途径,建立了半夏一步成苗的快速繁殖技术体系。结果表明,经过愈伤组织阶段的一步成苗培养基为MS+0.5mg/L2,4-D+1.0mg/LKT,90d左右方可得到再生植株,植株分化率为74%,每个外植体上分化的块茎数为5.61±1.04。附加NAA与BA两种激素对一步成苗培养基进行优化,筛选出一步成苗最佳培养基MS+0.5mg/LNAA+0.5mg/LBA,60d后就可直接发育成完整植株,植株分化率为76%,每个外植体上分化的块茎数高达9.97±0·81,对这种培养基上的再生小植株进行移栽,1个月后,移栽成活率达100%。     

不同培养条件对半夏悬浮培养细胞生长及总生物碱形成的影响

研究了半夏悬浮培养过程中细胞鲜重的变化和MS培养基组分中碳源、钙盐、Fe盐及肌醇变化对半夏悬浮培养细胞生长及总生物碱合成的影响。结果表明 ,半夏细胞的生长曲线呈“S”型 ,细胞的最佳收获时间为 2 1d。在两种碳源中 ,葡萄糖比蔗糖利于细胞的生长和总生物碱的合成 ,最适浓度为 2 0g L。最适合细胞生长和总生物碱形成的钙盐浓度为 1 8mmol L、Fe盐浓度为 0 0 6mmol L和肌醇浓度为 10 0mg L。     

华北蓝盆花的组织培养与植株再生

以华北蓝盆花（Scabiosa tschiliensis）无菌苗的叶片及叶柄为外植体,建立了华北蓝盆花的无性繁殖体系。结果表明,叶片外植体为诱导不定芽的适宜外植体,其不定芽诱导的适宜培养基为MS＋4.0 mg.L–16-BA,不定芽生根的最适培养基为MS＋2.0 mg.L–1IBA,幼苗移栽成活率可达70%以上。     

半夏细胞悬浮培养中生理生化指标的测定

目的：了解半夏细胞悬浮培养中生理生化指标的变化以及它们之间的关系。方法：以半夏幼嫩叶片和叶柄为材料,诱导和筛选愈伤组织,在光照和黑暗条件下进行细胞悬浮培养。每3d取样,冰浴匀浆,于4℃、10000g离心20min,取上清液进行测定。结果：光照条件利于半夏悬浮细胞的生长,其最佳收获期为24d,细胞的生长曲线呈“S”形;在不同的条件下,其培养液pH都呈先上升后下降趋势;培养细胞中可溶性蛋白质和过氧化物酶的活性均出现两个峰值,但出现的时间不同;MDA(丙二醛)的含量先升高后下降随后又上升。结论：光照有利于半夏细胞的生长并且蛋白质含量和酶活性呈正相关性,MDA含量和细胞的生长、分化呈负相关性。     

安菜的组织培养与植株再生

通过对安菜组织培养的培养基种类、激素配比、碳源的研究,得出适于安菜侧芽分化生长的最佳培养基为MS＋6-BA0．5mg／L＋NAA0．2mg／L。诱导愈伤组织以2,4-D浓度在0．2mg／L～0．5mg／L之间最佳。碳源以蔗糖,浓度3％最佳。以IBA0．5mg／L～1．5mg／L浓度诱导生根效果最好。     

毛脉酸模的组织培养及植株再生

以毛脉酸模下胚轴和幼苗根茎为外植体,以MS为基本培养基,与不同浓度比例的6-BA和2,4-D等植物生长调节剂进行毛脉酸模组织培养的研究。结果表明,毛脉酸模幼苗根茎是诱导丛生芽的最佳材料,诱导丛生芽产生的最佳培养基为MS+6-BA 3.0 mg·L^-1+2,4-D 0.1 mg·L^-1,诱导率为81.2%;生根培养基为无激素的MS培养基,生根率可达92%,在此条件下生根迅速,可获得完整植株;组培苗经过炼苗移栽后成活率可达80%。     

树莓组织培养及植株再生

以黑莓沙泥芽为外植体,筛选培养基,建立黑莓离体再生体系。结果表明,诱导树莓侧芽的最适起始培养基为MS 6-BA1.0 mg/L NAA0.02 mg/L GA6 mg/L;芽的增殖的最适培养基为MS GA6 mg/L NAA0.02 mg/L 6-BA1.0 mg/L;最适生根培养基为MS NAA 0.5 mg/L IBA 0.1 mg/L;试管苗移栽的最适基质为蛭石:珍珠岩:营养土(1∶1∶1)。     

极东锦鸡儿幼胚子叶的体细胞胚胎发生和植株再生

以极东锦鸡儿未成熟合子胚子叶为外植体进行其体细胞胚胎发生和植株再生研究。在添加不同BA与NAA或2,4-D,外加500mg·L~（-1）水解酪蛋白、30g·L~（-1）蔗糖和8g·L~（-1）琼脂的MS培养基上诱导产生了体细胞胚。在5mg·L~（-1）NAA＋5mg·L~（-1）BA和5mg·L~（-1）2,4-D＋1mg·L~（-1）BA处理中体胚诱导率分别为14%和10%;NAA处理每外植体上诱导出的体胚数量最多为4.3个,而2,4-D为10.5个。体细胞胚经成熟培养后,在添加0.01mg·L~（-1）NAA、20g·L~（-1）蔗糖和6g·L~（-1）琼脂的MS培养基上萌发率达到58.94%。萌发的体胚在MS培养基上长成正常小植株,再生率为87%。经炼苗后的体胚苗移植到草炭土：蛭石：珍珠岩=5：4：1（V/V/V）的栽培基质中,可以正常生长,移栽成活率为40%。     

结球白菜下胚轴原生质体培养及其体细胞胚植株再生

结球白菜（Brassica campestris ssp．pekinensis）的原生质体培养由于基因型依赖性强,细胞易褐化,愈伤组织的芽诱导率低等而难于再生植株。本实验以结球白菜的下胚轴原生质体为试材,研究了影响其细胞分裂及愈伤组织形成的因素,探索了经过体细胞胚发生途径获得再生植株的技术。结果表明,试材的基因型及培养基组成影响细胞分裂及褐化;KM8P是结球白菜原生质体培养更适宜的培养基,能显著减轻细胞的褐化;液体培养基中一定浓度的活性炭能在一定程度上减轻细胞褐化进程,并有利于星状细胞团的形成;基因型Asko中,愈伤组织形成体细胞胚的结构,其发生的频率约为5％,该类体细胞胚能全部顺利地发育成完整植株。本技术具有再生植株形成容易、频率较高且通过体细胞胚发生途径等优点。