标记信息联网技术实现病理信息规范化精细化管理

2010年6月18日,由赛默飞世尔科技提供的全球最新型组织盒书写仪（Print Mate 450）和玻片书写仪（Slide Mate）在首都医科大学附属北京安贞医院病理科安装联网成功。这两台机器与病理质控相关的资料管理网络联接后,实现了组织盒和玻片打号全流程自动化操作,不仅保持了以前型号所具有的快捷、     

Slidex Staph-kit和血浆凝固酶试验在金葡菌鉴定中的应用

金黄色葡萄球菌（SA）是一种重要的机会致病菌,常引起化脓性感染,也是医院感染的重要病原菌之一,准确鉴定SA具有重要的临床意义,为了解玻片法凝固酶试验在GPI（革兰阳性球菌鉴定卡）鉴定葡萄球菌中的影响,我们收集玻片法凝固酶试验阳性经VITEK32细菌仪鉴定为SA的59株菌,用Slidex Staph-kit（葡萄球菌凝聚鉴定试剂盒）、试管法凝固酶和玻片法凝固酶3种方法进行再鉴定,现将结果报告如下。     

新的In Situ PCR系统

Perkin-Eliner介绍了GeneAmp In Situ PCR System,声称这是第一个用于可重复in situ聚合酶链反应(PCR)的完整系统。该系统在玻璃载玻片上完成PCR,无需抽提DNA。GeneAmp System具有一个高输出热循环仪,循环仪上的垂直10-玻片样品盒很有创意。一个循环最多可扩增30个样品。该     

简讯

一种简易霉菌制片法在一张干净载玻片中央滴上一滴融化的霉菌琼脂培养基,倾斜玻片使其铺成一薄层。在培养基上滴一滴稀释的霉菌孢子悬液,然后把玻片放在湿盒中,或放在     

用冰冻玻片可分散细胞涂片

应用冰冻玻片制备细胞涂片操作如下:①让洗净的玻片基本干燥,排成一列平放在小塘瓷盘中的玻璃捧上。②放置在冰箱的冰盒中(-5℃——10℃), 20-30分钟后取出。③用吸管吸取细胞悬液,吸管口置于冰冻玻片上方5-10cm处,滴一滴样品,由于重力的作用,样品在玻片上均匀散开,涂片即制成。冰冻玻片较光滑,样品滴易散开,因液滴较小,冰冻     

猕猴血清B病毒抗体三种检测方法的比较

目的对B病毒（B virus）抗体检测的3种方法进行比较,寻求准确、可靠、经济的检疫方法。方法对以HSV-1为抗原的玻片酶免疫法、B病毒为抗原的玻片酶法（EIA）和酶联免疫吸附法（ELISA）的猕猴血清B病毒抗体检测结果进行比较。结果HSV-1为抗原的EIA与B病毒为抗原的EIA、ELISA检测结果符合率分别为97.7%和95.5%。结论HSV-1为抗原EIA的检测结果与B病毒抗原EIA和ELISA的检测结果一致性较好,可以做为初筛手段,且检测效果较好,投入资金相对最低,达到节约成本的目的。     

手工制作组织芯片方法的改良及其在肝细胞癌研究中的应用

组织芯片（tissue chip）,又称组织微阵列（Tissue microarray,TMA）,是指通过构建组织阵列蜡块将数十至数千个小组织排列在一张载玻片上而制成的组织阵列切片。作为生物芯片的新成员,具有体积小、信息量大、简便快捷的特点,并能将分子生物学和组织形态学相结合,满足基础和临床研究工作者的需要,具有广泛的应用前景。然而自动组织芯片制备仪价格昂贵,尚不能普及。[第一段]     

用基因表达谱芯片研究人正常肝和肝细胞癌中差异表达的基因

以基因表达谱芯片对人正常肝及肝癌组织基因表达的差异性进行了研究比较。奖４０９６条人ｃＤＮＡ用点样仪点在特制玻片上制备成表达谱芯片;利用肝和肝癌组织的ｍＲＮＡ通过逆转录方法,将Ｃｙ３和Ｃｙ５２种荧光分别标记到两种组织的ｃＤＮＡ上,制备成ｃＤＮＡ探针,并与表达谱芯片进行杂交及扫描,重复４次实验,通过计算机数据处理判定基因是否在上述２种组织中有表达差异,筛选出差异表达的基因共９０３条。基因芯片技术可同时     

体外诱导分化神经细胞的原位分子杂交方法

经１×１０－６ｍｏｌ／Ｌ视黄酸诱导的Ｐ１９细胞体外可向神经方向分化,接种于多聚赖氨酸（ｐｏｌｙＤｌｙｓｉｎｅ）和纤连蛋白（ｆｉｂｒｏｎｅｃｔｉｎ）包被的玻片后,细胞逐渐聚集成团,此时细胞的贴壁性较差,进行原位分子杂交时容易脱落。我们尝试在细胞表面覆盖一层明胶,减少了细胞的脱落,又比较了蛋白酶Ｋ和胃蛋白酶对细胞蛋白质的消化作用,确定胃蛋白酶可较温和地消化细胞蛋白质,使探针有效地透入结合,杂交后细胞亦能较完整地保留于玻片上。     

基于夹心免疫分析的抗体微阵列的构建

目的：建立一种基于夹心免疫分析的抗体微阵列构建的优化方法。方法：将MCP-1的捕获抗体点样于修饰后的玻片,标准抗原加样覆盖所点阵列,生物素标记抗体和链酶亲和素-cy3依次加样孵育, 激光共聚焦扫描仪获取图象并进行数据分析。对捕获抗体浓度、封闭液种类、系统可重复性和定量检测能力、两种因子平行性检测对信号分析的影响及点样后玻片稳定性进行分析和评价。结果：随着捕获抗体浓度的升高,信号强度逐渐增加;2℅ BSA/PBS和5℅ 酪蛋白可作为本系统的封闭液;所构建系统具有较好的可重复性（组内变异 1.3%,组间变异8.7%）和定量分析能力（所建立的抗原浓度-相对信号强度标准曲线相关系数达0.9995）;并实现了两因子的平行性分析和点样后玻片的稳定性。结论：确立了基于夹心免疫分析的抗体微阵列构建的优化方法,为进一步构建多因子定量检测抗体微阵列奠定了基础。     

基因枪法和农杆菌介导法对水稻转基因拷贝数的基因重排概率的影响

基因枪法和农杆菌介导法转化的外源DNA整合到植物梁色上是随机进行的,因此,它们可能会产生不同的转基因拷贝数,得到不同的基因表达盒完整率,这反过来会影响基因的表达,为证实这一假说,作首先将同一质粒pAcPG-CAM分别用基因枪法和农杆菌介导法转化到水稻（Oryza sativa L.cv.TNG67)愈伤组织,为了揭示不同质粒是否也出现类似结果,也用农杆菌介导法,基因枪法分别将pTOK233和pJPM44导入水稻愈伤组织,并获得一批转基因植株,Ｒ０代值转基因表达的分析用ＧＵＳ组织化学染色法,用质粒上的单切点酶酶切基因组DNA后的Southern杂交结果确定转基因拷贝数,总DNA髟双切点酶（分别位于表达盒两侧）酶切后的Southern杂交结果确定了完整转基因表达盒数目,结果表明,农杆菌介导转化法的转基因植株的转基因拷贝数相对少一些（平均为2．1和2．3）,而基因枪法转化产生的转基因植株的转基因撬贝数相对多一些（平均为4．2和5．6）,并且农杆菌介导转化法的转基因植株的基因表达盒DNA重排概率低于由基因枪法转化产生的转基因植株的基因表达盒DNA重排概率－农杆菌介导转化法的DNA重排概率为0．07和0．106,由基因枪法转化的DNA重排概率为0．57和0．66。研究还分析了基因表达情况与转基因的拷贝数或完整表达盒数之间的关系,GUS定量分析结果表明,为了准确揭示转基因的表达情况与转基因之间的关系,用完整基因表达盒数而不是转基因DNA拷贝数更准确,并于用不同转基因方法将同种质粒导入植物体分析基因表达盒DNA重排概率为首次报道。     

一种用于显微观察的蓟马标本的制片新方法

蓟马（昆虫纲：缨翅目）是昆虫纲中有重要经济意义的目之一,由于个体微小,因此需要制作成高质量的玻片在高倍显微镜下观察和研究。如果玻片标本质量欠佳,常常导致无法鉴定其种类。不同的研究中处理蓟马标本的技术和方法各异。本文介绍一种新的制片方法,这一方法需要更少的化学药品,且适合处理深颜色的标本。而且,用这个方法处理的标本清晰,保持其自然体色,这些特征在鉴定种类时是十分必要的。本方法处理标本包括4个步骤：氢氧化钾透明（一般5％一10％KOH溶液中,常温放置1～2d或者100℃水浴加热1～2h,处置时间随材料大小和颜色的深浅有所变化）、纯酒精脱水（材料透明后转移到纯酒精中浸泡4—5min）、Hoyer＇s介质装片（滴一滴Hoyer＇s介质于载玻片中央,而后将脱水后的材料转移至介质中,用细拨针小心整翅、足以及触角的姿态,盖上盖玻片）和干燥贴标签（装片后放置在35～45℃烘箱中2～3d或者室温下放置1星期,然后将采集信息、寄主信息以及鉴定表格制成标签,贴于玻片两侧）,与其它制片方法相比,此法最简洁。文末对不同的制片方法作了比较和讨论。     

广西木论自然保护区铁榄群落主要乔木种群格局的分形特征

为了揭示种群空间分布特征随尺度的变化规律,探讨不同种群对空间资源的占据能力和生态适应能力及分形差异,采用计盒维数、信息维数和关联维数对木论自然保护区铁榄群落主要乔木种群格局特征进行了研究。结果表明,优势种铁榄（Sinosideroxylon pedunculatum）、东女贞（Ligustrum japonicum）、小栾树（Boniodendron minius）、稀有濒危种掌叶木（Handeliodendron bodinieri）、青檀（Pteroceltis tatarinowii）5个种群在相应的尺度具有明显的分形特征;计盒维数和信息维数大小顺序一致,均为：铁榄〉东女贞〉小栾树〉掌叶木〉青檀;在5个种群中,铁榄计盒维数为1．7763最大,接近2,对空间环境的占据能力最强,信息维数（1．7206）也最大,个体聚集强度强,在群落中处于绝对优势地位,青檀计盒维数（0．8316）和信息维数（0．8990）最小,对环境的占据利用能力弱,个体聚集程度整体较弱,在群落中处于伴生地位;在0．5～50m的尺度上,关联维数大小顺序为：铁榄（1．7314）〉东女贞（1．6688）〉小栾树（1．6050）〉青檀（0．7868）,而掌叶木只有在大的尺度上才出现关联,且关联较强。3个分形维数大小的不同组合,能够全面揭示不同种群格局特征和种群在群落中所处地位的差异。     

浅谈制玻片标本时固定液的使用

浅谈制玻片标本时固定液的使用李建英（河北省葶城市实验学校）我在制玻片标本过程中,配制固定剂时得出了以下一点体会１用１０％的福尔马林做固定剂时,材料强烈收缩,效果不好。２用７０—８０％的酒清做固定剂,不但材料变硬,而且收缩也很剧烈,效果也不好。３用５０...     

自制组织芯片穿刺工具及芯片手工制作技巧

组织芯片（tissue chip TC）技术是将数十个乃至上千个的组织样本,整齐有序地排列在同一张载玻片上,而形成的微缩组织切片;又称组织微阵列（tissue microarray TMA）技术。组织芯片的制作方式主要有石蜡切片法和冷冻切片法,目前以石蜡切片法为常用。现在还有商品化的组织芯片制作仪,如美国（Tissue Arrayer,Beecher Instrument,USA）生产的,但这套产品价格昂贵。所以,手工制作技术更经济、实用,其方法的改进层出不穷。我们采用一次性穿刺针手工制做穿刺工具,用普通石蜡包埋样本,制做组织芯片,收到了满意的效果,现将制做主要程序和技巧介绍如下。     

用玻片法培养观察菌类

用玻片法培养观察菌类吴如平，石碧沙（四川省江津师范学校６３２２００）菌类的实验教学，尽管近几年来作了些改进，但仍然存在以下问题：（１）细胞易失水干燥变形；（２）菌落被破坏；（３）孢子飞散；（４）杂菌多，重要种类供量不能满足多班次需要；（５）菌类自然生...     

明胶软糖的质构仪分析与感官评定研究

对4个明胶样品进行了储藏试验,在储藏的过程中,分别利用了质构仪的3种测试方法（TPA实验、穿刺实验、剪切实验）对其进行了组织感的测定,同时进行了感官评价,旨在找出一种能与感官评价完全匹配的质构仪测试方法,提高产品组织感评价的准确性。结果表明：明胶软糖储藏2w后质地趋于稳定,质构仪测试中的剪切实验与感官评价中的咬断性与粘牙性指标显著相关。     

蛋白质微阵列检测抗原-抗体相互作用

为了制备蛋白质微阵列和研究芯片表面抗原-抗体的相互作用,研究了如何在玻片表面固化蛋白质和用荧光染料（Cy3,Cy5）对蛋白质进行标记.结果表明,在醛基修饰的玻璃表面,通过共价偶联的方法将抗原或抗体固定到芯片表面,能使二者保持其特异性结合能力.同时,荧光标记后的抗原或抗体仍然具有特异性结合能力.蛋白质微阵列是通过机械手在玻片表面排阵制作的.芯片上的荧光信号获取采用了激光共焦荧光扫描系统.用不同浓度的抗原探针阵列,对其相应的抗体靶分子的特异性结合进行了分析和研究.此外,还通过在玻片表面固定兔IgG和固定鼠IgG,对羊抗兔和羊抗鼠抗体与其相应抗原的特异性相互作用进行了检测.     

清洁大量玻片的快速方法

在组织切片制作过程中,需用大量载玻片和盖玻片(统称玻片).按通常采用的清洁玻片方法,必须先入清洁液浸泡一天以上,然后经流水冲洗,再转入95%酒精中浸泡脱脂,用干净     

利用基因芯片技术筛选HIV-1F亚型基因限制性显示探针

为筛选限制性显示技术制备的HIV 1F亚型基因探针 ,应用基因芯片打印仪将其有序地打印在玻片上制备基因芯片 .在随机引物延伸的过程中进行HIV样品的荧光标记 ,然后与芯片进行杂交 .杂交后清洗玻片并干燥 ,对芯片进行扫描 ,分析各探针的杂交信号 .从中筛选了 14个基因片段作为芯片下一步研究的探针 .实验证明 ,限制性显示技术是一种制备基因芯片探针的实用方法