载脂蛋白A-I结构及其功能

载脂蛋白A-I（apolipoprotein A-1,ApoA-I）是高密度脂蛋白的重要组成成分,高密度脂蛋白对于冠心病有重要的保护作用。盘状高密度脂蛋白或者ApoA-I是体内胆固醇逆向转运过程的关键因子,而游离的ApoA-I是胆固醇和磷脂的受体,因此,了解其结构对于研究其功能显得尤其重要。本文对ApoA-I单体的结构、未结合脂质,以及结合磷脂后的构象及其相关功能作了综述。     

载脂蛋白A-I抗动脉粥样硬化的研究进展

载脂蛋白A—I是HDL最主要的结构成分,是卵磷脂胆固醇酰基转移酶的主要激活剂。它决定了HDL的代谢和在血浆中的浓度。实验已经证明,载脂蛋白A—I具有抗动脉粥样硬化症的功能。在这里阐述了载脂蛋白A—I的结构和制备;载脂蛋白A—I和HDL的关系以及它在抗动脉粥样硬化方面的作用和可能的机理：胆固醇的逆向转运、抗氧化作用和调节炎症反应。     

载脂蛋白A-I基因的DNA多态性与高脂血症的关系

载脂蛋白A-I是高密度脂蛋白的主要成份。高密度脂蛋白在肪类代谢中起着极其重要的作用,A-I组分的异常或含量的减少都将影响正常的脂类代谢、与高血脂和动脉硬化的发生有相关性。本文利用apoA-I基因探针,在中国人中,对18例血脂正常的人和15例高甘油三酯病人进行了初步的RFLP分析,结果如下。 方法:分别取10ml正常人与高甘油三酯病人末稍血提取其基因组DNA;用限制性内切酶Sstl进行完全酶解;琼脂糖凝胶电泳;Southern印迹至硝酸纤维素膜上;用α-~32P dCTP通过缺口平移标记探针,然后进行分子杂交;放射性自显影;酶谱结果分析。     

人载脂蛋白A-I（Apo A-I）的高级结构模型和主要功能域的确定

载脂蛋白A-I(Apo A—I)是高密度脂蛋白(HDL)的主要蛋白质组分,在HDL介导的胆固醇逆向转运中发挥重要作用。Apo A—I三级结构仍不清。在新生盘状HDL分子中,Apo A—I主要存在两种结构模型：栅栏模型和带状模型。Apo A-I可通过其N末端及C末端结构域与磷脂结合,引发HDL形成。Apo A—I作为细胞胆固醇的受体,促进HDL对外周组织胆固醇的摄取。Apo A-I氨基酸残基144～186为卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)主要激活域,通过激活LCAT,促进胆固醇逆向转运。     

北京鸭血清LDL-apo A-I及其性质的初步研究

载脂蛋白(apo)A-I主要存在于血清高密度脂蛋白(HDL)组分中,少量存在于极低密度脂蛋白(VLDL)中。我们在研究北京鸭血清脂蛋白时偶然发现鸭低密度脂蛋白(LDL)     

糖尿病患者血清载脂蛋白分析

糖尿病能引起糖代谢紊乱,也有明显的脂代谢异常。我们自１９９２年６月～１９９３年３月测定了３２例糖尿病患者的载脂蛋白（Ａｐｅ）Ａ１、Ｂ以及Ａｐｏ—Ｂ：Ａｐｏ—Ａ１比值,以了解糖尿病载脂蛋白水平。     

慢性肝病患者血清载脂蛋白分析

我们检测９７例慢性肝病患者血清载脂蛋白,并与正常人着重分析ＡＰＯＢ与肝病的关系。结果发现慢性肝病患者随病情加重,由慢性肝炎演变成肝硬化,其ＡＰＯＡ１及ＡＰＯＢ含量随之下降。ＡＰＯＡ１下降不显著,而ＡＰＯＢ下降显著并与白蛋白含量降低呈正相关。认为血清ＡＰＯＢ检测对判断慢性肝病患者病情轻重有一定临床价值,边疆检测可作为慢性肝病预后指标之一。     

人血清载脂蛋白CII酶联免疫测定法的研究

 本文介绍一种特异、灵敏、简便人血清载脂蛋白CⅡ(apoCⅡ)竞争性酶兔疫测定法(Competitive Enzyme Immunoassay,CEIA)。单价特异抗体由免疫家兔获得。采用部分纯化的apoCs包被聚苯乙烯板。羊抗兔γ-球蛋白酶交联物用辣根过氧化物酶按简化过碘酸钠法制备。apoCⅠ、AⅠ、AⅡ以及LDL无交叉反应。本法最小检测量为25ng,标准曲线工作范围是1.5～30.0mg％,板内及板间变异系数分别为6.5～7.8％及6.6～11.0％,回收率为107.5％;185例正常人血清apoCⅡ含量,男5.1±1.9mg％(n=95),女4.8±1.7mg％(n=90)。     

牛血清白蛋白水溶液的闪光光解

本文用闪光光解方法测定了BSA原初光解瞬态产物在300～600nm波长范围较完整的吸收光谱。在N_2气饱和及激发光波长<370nm条件下,BSA光解瞬态产物有五个吸收峰,位置分别在270、310、390、410和460nm,而在有氧或激发闪光中含有370nm以上光时,色氨酸三线态在460nm附近的吸收峰消失了,表征色氮酸中性自由基的510nm吸收峰却显现出来。光解瞬态吸收谱的测量表明:BSA光解主要发生在酪氨酸和色氨酸残基上,原初光解瞬态产物有对位α-氨基丙酸苯氧自由基Tyr(λ_(max)=410、390nm),色氨酸中性自由基(λ_(max)=510、310nm),色氨酸三线态(λ_(max)=460nm)和另一种未鉴定的自由基(λ=270nm)。本工作还用闪光光解方法测定了BSA分子中酪氨酸残基光解产生Tyr的ΔO.D._(410)对pH的依赖关系,该pH曲线有两个转折点(pH4.2和pH11),通过BSA分子里的酪氨酸残基光易变程度随溶液pH的变化证明:在中性和弱酸性条件下,BSA分子中大部分酪氨酸残基埋藏在分子的内部,不能或不易光解,但随着pH改变,光易变的酪氨酸残基数也改变。这和其他方法所测BSA构象转变结果基本一致,说明闪光光解方法有可能为构象研究提供某种信息。     

人血清高密度脂蛋白主要载脂蛋白的分离纯化及其多态现象

本文报道人血清高密度脂蛋白(HDL)的主要载脂蛋白(apoHDL)的分离纯化和其多态型(Polymorphism,Isoform)的初步研究。首先用硫酸右旋糖酐沉淀,结合角度头密度梯度超速离心的方法,从人血清中提取高密度脂蛋白。分离纯化的高密度脂蛋白在0.5％琼脂糖和3.75％聚丙烯酰胺电泳中显示一条带,经0.1％SDS-10％聚丙烯酰胺电泳鉴定未发现有血清白蛋白的污染。纯的HDL在低温下用醇醚混合液脱脂获得载脂蛋白(apoHDL)。经过Sephadex G-200凝胶过滤柱,apoHDL被分为五个蛋白峰。0.1％SDS-10％聚丙烯酰胺凝胶电泳的鉴定表明峰Ⅰ、峰Ⅱ为载脂蛋白聚集体,主要含apoA-Ⅰ和apoE;峰Ⅲ为纯的apoA-Ⅰ;峰Ⅳ含有apoA-Ⅱ、apoC和apoA-Ⅰ;峰V主要为apoC。令人感兴趣的是,经聚丙烯酰胺等电聚焦电泳鉴定apoA-Ⅰ有八种多态型。这些结果对于深入研究载脂蛋白的结构、功能和代谢,对于研究高密度脂蛋白的亚类及其抗动脉粥样硬化的机理都是有益的。     

火箭电泳法测血清中载脂蛋白B含量

本文用纯化人血清低密度脂蛋白免疫家兔制得效价为1:256的特异抗血清,并用火箭电泳法检测116例正常人血清ApoB水平为68.51±1.22mg/dl,110例高脂血症病人血清ApoB水平为108.51±1.78mg/dl。两组比较有高度显著性(p＜0.01)。本法为临床检验和基础研究提供了新的途径。     

牛血清白蛋白对超氧化物歧化酶的化学修饰

目的：通过化学修饰提高超氧化歧化酶（SOD）的稳定性,考察金属离子在不同浓度下对SOD活性的影响。方法：用戊二醛作为交联剂,用牛血清白蛋白（BSA）将牛红细胞超氧化物歧化酶进行化学修饰,得到SOD的修饰酶。对比研究三种SOD：修饰酶,混合酶及天然酶的理化性质。结果：修饰酶等电点降低,对温度、pH的稳定性较天然酶有很大提高,对胰蛋白酶和胃蛋白酶也表现出很强的耐水解性。二价离子Mg^2 、Mn^2 对天种SOD活力均有不同程度的抵制作用,Ca^2 、Zn^2 、Cu^2 对修饰酶活力有激活作用,一价离子K^ 对三种OSD活力均无明显影响.结论:修饰酶较天然酶的稳定性有很大的提高,加入Ca^2 、Zn^2 、Cu^2 可提高修饰酶的活力。     

人血清载脂蛋白AⅡ的分离纯化及其抗血清的制备

本文应用超迷离心,盐酸胍处理、DEAE-Sepharose CL-6B离子交换柱层析分离纯化了人血清载脂蛋白AⅡ。经等电聚焦电泳、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫电泳等鉴定,其纯度达到电泳纯和免疫纯。以此载脂蛋白AⅡ纯品免疫家兔产生的抗血清,效价较高,特异性强,与载脂蛋白AⅠ、B、CⅠ、CⅡ、CⅢ、E和白蛋白没有交叉反应。     

载脂蛋白基因和功能研究

绝大部分载脂蛋白(Apo)一级结构已阐明,目前进入基因水平的研究。Apo 结构多态性和功能之间关系值得注意。Apo 是脂蛋白必要的结构蛋白,它们作为配体与相应受体相互作用,同时调节脂蛋白代谢三个关键酶:脂蛋白脂酶,肝性甘油三酯脂酶和卵磷脂胆固醇酰基转移酶的活性。Apo 可能作为一种代谢程序剂,编序和调节脂蛋白代谢和体内胆固醇平衡。     

载脂蛋白C3研究新进展

载脂蛋白C3(apolipoprotein C3,APOC3)是一种水溶性低分子蛋白质,主要分布在血浆高密度脂蛋白、极低密度脂蛋白、乳糜微粒和低密度脂蛋白中。新近研究表明,APOC3是一个多功能蛋白质,是脂质代谢的重要调控因子,与高甘油三酯血症和心血管疾病发病相关,是心血管疾病进展的重要预测因子。APOC3在动脉粥样硬化和糖尿病发展进程中起到重要的作用。因此,调控APOC3水平可能是控制患者脂质代谢异常和治疗心血管疾病的重要策略。