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乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)是一种嗜肝性DNA病毒.HBV慢性感染是导致肝炎、肝硬化以及肝癌的一个重要原因.早期抗HBV研究策略一般是靶向HBV自身进行干预,包括核酸药物、干扰素药物等.然而,由于病毒易突变,且易发生耐药,近年研究者将治疗靶点逐渐转向与HBV入侵、复制及组装等相关的宿主蛋白,这为抗慢性HBV感染治疗带来了新的视野和思路.因此,基于RNAi技术并靶向宿主蛋白抗HBV的策略受到研究者的青睐,并且取得良好的治疗效果.本文将对这一研究领域的最新进展作一综述. 相似文献
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RNAi技术研究进展 总被引:6,自引:2,他引:4
吴青 《中国生物工程杂志》2003,23(1):92-96
近年来的研究表明,一些小的双链RNA可以高效、特异地阻断体内特定基因表达,促使mRNA降解,诱使细胞表现出特定基因缺失的表型,称为RNA干扰(RNAinterference,RNAi,也译作RNA干预或者干涉)。研究表明它也是体内抵御外在感染的一种重要保护机制。由于可以作为一种简单、有效的代替基因敲除的遗传工具,可以毫不夸张地说,RNAi正在功能基因组学领域掀起一场真正的革命,并将彻底改变这个领域的研究步伐,为此被SCIENCE评为2002年最重要的科研成果之一。 相似文献
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深入研究HBV复制机理,筛选参与HBV复制的基因,可能为开发抗乙肝病毒新药提供新 的靶点.本文拟建立一种筛选HBV复制相关基因的方法: RNAi文库感染HepG2.2.15细胞后,利用免疫磁珠收集HBsAg表达降低的细胞,提取DNA,PCR扩增siRNA编码序列,将PCR产物克隆入T-easy载体,随机挑选克隆测序,发现DDB1基因可能参与HBV复制.本试验建立了一种筛选HBV复制相关基因的方法,为大规模全基因组筛选参与HBV复制的基因奠定了基础. 相似文献
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RNAi技术应用的研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
RNAi(RNA interference),即RNA干扰是由与靶基因同源的内源或外源双链RNA(double stranded RNA,dsRNA)所引发的一种在动植物中普遍存在的基因沉默现象.它最早在植物体中被发现,现在已发展成为一种生物技术,并成为了后基因时代的重要研究手段.对RNAi技术在生物基础、医学、药学和植物学等领域的研究成果进行综述. 相似文献
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将双链RNA导入细胞内会引起与其同源基因的沉默,这种现象称为RNA干扰(RNAinterference,RNAi)。就RNAi技术的定义、发现过程、作用机制、产生机理等方面的研究进展作一综述,同时对RNAi技术在医学领域中的应用和存在问题进行了展望。 相似文献
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昆虫RNAi技术及其应用 总被引:3,自引:0,他引:3
RNAi是近几年发展起来的抑制基因表达的新技术。部分昆虫存在RNAi信号的系统性传播现象,可以将dsRNA直接注射进昆虫的卵、血腔或局部组织,引发远距离靶基因的特异性沉默,建立起了Embryo RNAi,Larval RNAi,Adult RNAi,Parental RNAi,Feeding RNAi和基于转基因技术的可遗传RNAi等昆虫RNAi技术,使RNAi迅速成为了研究昆虫尤其是非模式昆虫基因功能的主要方法。文章拟就RNAi的系统性、昆虫RNAi技术及其应用进行综述。 相似文献
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RNA干扰(RNA interference,RNAi)是一种由与靶基因同源的双链RNA引起的,具有序列特异性的转录后基因沉默技术。目前,RNAi已被广泛应用于基因功能的研究中。为了使基因沉默具有时空特异性,可以通过构建基于Cre重组酶的Cre/lox P系统、可被小分子药物诱导的Tet诱导系统以及两者组合形成的高级诱导RNAi系统来条件性的控制小发夹状RNA(sh RNA)的表达,使其靶基因的表达可受外界调控,在特定组织细胞中或者特定的生长发育时期被抑制,从而更好地进行基因功能研究。目前,条件性RNAi基因沉默策略具有多样化,精确性和组合式的特点。本文就条件性RNAi基因沉默技术的多元策略做一综述。 相似文献
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利用RNAi技术大规模分析基因功能的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
将双链RNA导入细胞内会干扰与之同源的基因的表达 ,使生物体产生相应的功能缺陷表型 ,这种作用称为RNAi(RNAinterference)。针对人类、植物、微生物等大规模基因组测序后所面临的功能鉴定难题 ,着重探讨了RNAi的机制及其研究进展。复合物RISC和酶Dicer的发现揭示了RNAi导致同源基因沉默的作用机理。通过使用RNAi这种反向遗传学工具可使生物体产生相应的功能缺陷表型 ,从而确定未知基因的功能。因此RNAi对大规模分析动、植物基因功能的研究具有重要的作用。 相似文献
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目的为优化RNA干扰研究方法,构建了针对乙肝病毒的串联序列amiRNA(artificial microRNA)质粒表达载体。方法设计针对乙型肝炎病毒S区的靶干扰序列,构建单一序列amiRNA质粒表达载体;将其中干扰效率好的两个序列串联起来,构建串联序列amiRNA质粒表达载体。结果经酶切及测序鉴定,插入序列与靶序列一致,载体构建正确。结论成功构建了新型针对乙肝病毒的串联序列amiRNA质粒表达载体,为进一步体外及体内实验奠定了基础。 相似文献
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将病毒逃避RNAi策略的最新进展做一综述.RNA干扰(RNAi)是一个有效的抗病毒系统,并且病毒特异性小干扰RNA(siRNA)是非常有希望的抗病毒抑制剂.然而,许多病毒已经进化出了高超的策略来干扰siRNA和微RNA(miRNA)介导的沉默通路.深入理解病毒利用的逃避策略将为开发避免病毒逃逸的有效RNAi疗法奠定基础. 相似文献
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RNA干扰(RNAi)文库研究进展 总被引:2,自引:0,他引:2
RNAi是由双链RNA(dsRNA)引发的转录后基因沉默现象,由dsRNA产生的小分子siRNA会导致生物体内同源转录产物特异性降解,是基因表达调控的重要方式之一。目前RNAi技术已发展成为遗传分析强有力的工具,在基因功能分析鉴定方面发挥越来越大的作用。构建大规模的RNAi文库进而转变成RNAi突变体库是功能基因组学研究的重要手段,因此如何利用简单经济的方法构建特定物种的高效RNAi文库就成为关键问题。综述了目前构建RNAi文库的不同方法以及每种构建方法的优点和存在的不足,为不同研究目的的RNAi文库的构建提供参考。 相似文献
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为探究乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)感染后肝细胞基因表达和信号通路的改变情况,从Gene Expression Omnibus(GEO)数据库中下载了HBV感染者肝细胞样本制作的基因表达谱数据集GSE83148,进行质量检测、数据标准化后筛选出差异表达基因,进一步做GO和KEGG富集分析以及基因网络相互作用分析,筛选关键基因和信号通路。从HBV感染样本中筛选出fold change≥2,p-value0. 05的上调差异表达基因44个,GO分析获得关键基因BAK1和TP63,差异表达基因网络互作获得5个位于枢纽位置的基因:NDUFS1、NDUFS2、COX7B、ATP5B、OPA1。KEGG分析获得关键信号通路有:乙型肝炎信号通路、病毒癌变信号通路、Fox O信号通路、PI3K-Akt信号通路。本研究筛选出的多数基因与线粒体和氧化呼吸链有关,造成这一现象的具体机制还需进一步探究。 相似文献