血清microRNA——一种非侵入性的肿瘤标志物

microRNA(miRNA)是一类自然形成的非编码小RNA,不少miRNA分子已被证实与癌症的生成有关联。近期的研究发现人血清中稳定存在一定水平的miRNA,并且血清miRNA表达谱的变化与多种肿瘤的发生、发展具有明确的相关性,说明血清miRNA可以作为肿瘤临床诊断和预后评估的分子标志物。因此,特定的血清miRNA表达谱可以构成识别癌症与其他疾病的"指纹",为癌症及其他疾病的诊断提供一种新的非侵入性的检测方法,同时,该技术还可用于肿瘤分类、预后判断、手术疗效监测及疾病复发预测等领域,并可能带来未来临床医学上的变革。     

血清／血浆microRNA及其应用

微小核糖核酸（microRNA,miRNA）在生物体的生长、发育及疾病的发生发展等过程中起着十分重要的作用。目前,人们关注的主要是miRNA在组织细胞内的功能。然而,最近的研究发现血清／血浆中存在一些循环的miRNA,血清／血浆miRNA在肿瘤、糖尿病等多种疾病中呈特异性表达,提示血清miRNA可作为潜在的生物标记物用于疾病的诊断和治疗。     

肾透明细胞癌相关微小RNA的研究进展

微小核糖核酸(miRNAs)是一类长约22个核苷酸的非编码单链小核糖核酸分子,miRNA通过与靶mRNA 3'端非翻译序列完全或部分互补结合,导致靶mRNA降解或转录后翻译抑制,从而调控靶基因的表达.最新研究显示人类血清/血浆中miRNA表达稳定,并在肿瘤患者血清中发现多种miRNA,其中的一些已经被证实与肾癌发生及发展相关,以往miRNA与肾癌的研究方.向多集中于肾癌组织,尽管发现很多有差异的miRNA,但不同研究者之间的结果常难以相互验证,而最近研究证实血清miRNA具有组织相关性和器官特异性,并对某些肿瘤具有高敏感性和特异性,因此其有望成为新的肿瘤标志物.肾癌是国内泌尿系统的第二常见恶性肿瘤,而且其近年来发病率和死亡率有逐年增高的趋势.由于肾透明细胞癌是肾癌的主要亚型,因此本文就血清miRNA在肾透明细胞癌的表达及其作用的研究进展作一综述.     

癌症的miRNA基因治疗

MiRNAs是一种内源非编码小RNA,具有进化上的保守性,在各物种中广泛分布.MiRNAs的作用是反向调节其靶基因的mRNA,研究发现在所有的人类癌症细胞中,miRNA的表达都有异常,即miRNA在肿瘤的形成、生长和扩散过程中发挥重要的作用.本文重点介绍了几种癌症的miRNA治疗方法,为将来的miRNA基因治疗奠定了基础.此外,还简要介绍了相关的基因传递系统及目前面临的挑战.     

细胞外微RNA:一种新型的肺癌分子生物标志物

尽管癌症的早期诊断和治疗在不断发展和进步,但寻找一种敏感、准确和微创的分子生物标志物,用于肿瘤的诊断仍是一项艰巨任务。微RNA(miRNA)是一类长约21～24个核甘酸的内源性非编码小分子RNA。细胞外miRNA作为一种新型的分子生物标志物,在癌症诊断方面具有微创、高灵敏度和高特异性等许多潜在特征。近年来,细胞外miRNA研究成果颇丰。文章就细胞外miRNA的来源、功能、检测以及作为分子标志物在肺癌诊断中的作用和目前存在的一些问题进行了综述。     

白血病microRNA的研究进展

microRNA（miRNA）是一种小分子非编码RNA,在细胞增殖、分化和凋亡等多种生理过程中发挥着重要的作用.近年来有关miRNA与多种癌症的关系已经得到证实,并且成为当前研究的热点.目前,已鉴定了miRNA在多种癌症中的表达谱,并报道了与白血病类型以及细胞遗传学相关的miRNA表达标签.越来越多的研究发现,部分miRNA在白血病等癌症中起着癌基因和抑癌基因的作用,而且某些miRNA跟诊断和预后有关,具有一定的临床意义和良好的应用前景.同时,运用新的技术手段发现和鉴定新的miRNA分子也为我们对白血病的发病机制的理解提供了新的视角.本文总结了近年来白血病相关miRNA的研究进展,并呈现了白血病中跟分化、增殖和凋亡有关的miRNA介导的调控网络,以期为深入了解白血病的发病机制提供借鉴作用.     

癌症相关microRNA与靶基因的生物信息学分析

MicroRNAs(miRNAs)是一类长度约为22nt的内源性非编码RNA,通过与靶基因转录本互补结合调控基因的表达。近年来,研究发现miRNA与癌症发生密切相关,miRNA可以直接充当癌基因或者抑癌基因而影响肿瘤的发生和生长。为更进一步揭示癌症相关miRNA的特征及靶基因的功能,文章通过数据库搜索及文献检索,在人类基因组中发现了475个癌症相关miRNA,系统地比较了癌症相关miRNA与非癌症miRNA以及基因内和基因间区癌症相关miRNA在保守性、SNP位点分布、癌谱及转录调控等特性。研究发现,癌症相关miRNA比非癌症miRNA保守性要强,发生SNP概率比较低,同时发现miRNA所涉及癌症数目与保守性成正相关。基因组定位分析发现,癌症相关miRNA比非癌症miRNA更倾向于成簇存在。进一步对宿主基因、癌症相关miRNA及作用的靶基因与癌症发生进行关联分析,发现一些非癌症miRNA的宿主基因倾向于被癌症miRNA作用。本研究结果为深入理解miRNA与癌症之间的关系,以及进一步为miRNA作为癌症诊断指示物提供理论依据。     

miRNA表达谱与上皮性卵巢癌

Micro RNA(miRNA)是近年来研究发现的一种高度保守,长度大约19-25个核苷酸的非编码小分子RNA,起着调控基因表达的作用。目前认为miRNA能调控细胞周期、凋亡、分化、发育和新陈代谢等,参与肿瘤的发生与发展,因此异常表达的miRNAs表达谱有可能成为一种全新的肿瘤分子标记物。相关研究表明,miRNA能够以一种被保护的状态存在于血清及血浆中,因此miRNA表达谱的发现具有易检测性、重现性以及非侵袭性。研究显示血清及血浆中miRNA表达谱可作为上皮性卵巢癌生物信号分子,在上皮性卵巢癌早期诊断、预后判断和化疗药物应用等方面具有不可替代的作用。本文将对miRNA表达谱与上皮性卵巢癌的关系进行一个简单总结。     

MicroRNA在肿瘤诊断、治疗中的应用

MieroRNA（miRNA）是真核生物中一类内源性、长约22个核苷酸的非编码小分子RNA,参与基因转录后水平调控。miRNA的突变或者异常表达,与大多数癌症的发生发展有关,且与某些抗肿瘤药物疗效密切相关。因此,miRNA在癌症的诊断、预后、治疗和指导肿瘤个体化用药方面具有一定的临床应用潜力,是肿瘤生物治疗领域的一个新亮点。本文即对miRNA在诊断和治疗肿瘤方面的应用现状作一综述。     

MicroRNA 在肿瘤诊断、治疗中的应用

MicroRNA(miRNA)是真核生物中一类内源性、长约22个核苷酸的非编码小分子RNA,参与基因转录后水平调控。miRNA的突变或者异常表达,与大多数癌症的发生发展有关,且与某些抗肿瘤药物疗效密切相关。因此,miRNA在癌症的诊断、预后、治疗和指导肿瘤个体化用药方面具有一定的临床应用潜力,是肿瘤生物治疗领域的一个新亮点。本文即对miRNA在诊断和治疗肿瘤方面的应用现状作一综述。     

睾丸发育和精子生成相关miRNA研究进展

MicroRNA(miRNA)是一类长约22nt的非编码小RNA, 广泛存在于各种生物中, 调节生物体生长、发育和凋亡等过程。研究表明, miRNA在人和动物睾丸发育及精子生成等过程也起着重要的调控作用。但miRNA在不同种属的睾丸组织及其不同发育时间段均存在特异性表达。此外, miRNA在动物精子生成过程中也存在时空特异性。文章综述了睾丸发育和精子生成过程中miRNA的差异性表达、表达调控以及一些miRNA对精子生成的调节作用, 旨在为睾丸miRNA的进一步研究提供参考, 为利用miRNA调控和促进种公畜精液品质提供研究思路。     

miRNA在细胞因子表达调控中的作用

最新研究表明miRNA在免疫系统的精细调节中发挥重要作用,本综述则重点探讨miRNA如何调节细胞因子基因的机制。细胞因子转录后水平的调节主要是通过使富含腺嘌呤/尿嘧啶元件(AU-rich element,ARE)稳定性降低,然而miRNA表达具有空间和时间上的特异性,使得其在上述过程中发挥了重要作用。深入理解miRNA调节免疫反应的机制,不仅有助于鉴定调节免疫反应的新靶标,还有助于建立基于miRNA的有效新疗法。     

人工miRNA技术及其在植物抗病育种中的应用

内源miRNAs被认为是真核生物调控基因表达的重要调节因子,人工miRNA(amiRNA)是一种基于天然miRNA的结构用以沉默内源基因的有效策略。利用人工miRNA替换植物内源miRNA前体中miRNA/miRNA*序列,使产生的人工miRNA与靶基因配对,并特异性地抑制靶基因的表达。从天然miRNA的合成过程和作用机制,人工miRNA的设计基本原理及构建方法,人工miRNA技术在植物抗病育种上的应用等方面进行综述。     

乳腺发育及泌乳相关miRNA研究进展

MicroRNA(miRNA)是一种重要的转录后调控的非编码RNA, 参与调控哺乳动物乳腺发育和泌乳。文章总结了乳腺发育和泌乳过程中miRNA表达的时空特异性, 综述了个别miRNA对乳腺发育和泌乳的调节作用, 旨在为乳腺miRNA的研究提供指导, 为利用miRNA促进乳腺健康发育和调控高质高效产乳提供理论基础和研究思路。     

基于通用荧光标签的microRNA芯片检测平台

microRNA（miRNA）是一类生物内源性非编码小RNA分子,在细胞的生长、发育、增殖和细胞凋亡中具有重要的调控作用,并且与癌症的发生息息相关. miRNA表达谱是miRNA研究中的一个关键环节,使用芯片技术分析miRNA表达谱通常要求对miRNA样品进行耗时耗力的荧光标记,并且常规的芯片技术难以精确识别高度同源的miRNAs分子. 为了解决以上问题,本实验室建立了一个被命名为SHUT（Stacking-hybridized Universal Tag）的新型非标记miRNA芯片分析方法. 本文通过分别使用两步杂交法、一步杂交法对SHUT平台的miRNAs特异性检测进行优化. 研究结果表明,SHUT平台在48℃下杂交18 h,除了let-7b和P-let-7c,let-7c和P-let-7a分别存在超过32.5%和83.3%的假阳性信号之外,其它交叉杂交信号都低于10%,具有较好的特异性. 在该杂交条件下,靶标分子let-7d的最低检测浓度为20 fmol/L,并且在20 fmol/L至200 pmol/L之间具有较好的线性关系.     

血清miRNA-93、miRNA-223联合miRNA-324-3p可作为诊断PCOS的生物标记物

本研究拟基于最近的miRNA报道,结合前期关于肌肉生长抑素(myostatin, MSTN)的相关研究,探究多囊卵巢综合症(ploycystic ovary syndrome, PCOS)患者血清miRNA和生长抑素的表达及其相关临床病理特征。本研究选取160例在湘南学院附属医院妇科就诊的女性为研究对象,通过PCR、ELISA等方法比较PCOS患者血清miRNA和生长抑素的表达情况,并且分析其相关临床病理特征。结果显示,通过PCR的方法发现mi RNA-93、mi RNA-223在PCOS患者的血清中显著升高,而mi RNA-4522、mi RNA-6767-5p和mi RNA-324-3p则表达下降。本研究建立了3个miRNA的预测模型,并证实预测模型在筛选组和验证组中有很好的敏感性和特异性,可以有效区分PCOS患者和正常人群,但研究结果也发现,miRNA模型结合MSTN没有更好的诊断价值。     

微小RNA分析技术研究进展

微小RNA（miRNA）是一类起重要调控作用的非编码小分子RNA。准确分析组织或细胞中miRNA的表达水平是研究其生物学功能的基础。近年,研究者开发出多种方法检测不同生理、病理过程中miRNA的差异表达,发现miRNA的异常表达与癌症等多种疾病密切相关。目前,miRNA已逐渐成为重要的疾病诊断生物标志物乃至治疗靶点。miRNA的分析技术贯穿miRNA的研究和药物研发过程,并起到关键作用。我们针对miRNA的不同研究阶段所采用的定性和定量分析方法,着重阐述了用于初始miRNA研究的克隆测序类技术、分析miRNA表达谱的高通量芯片技术、研究具体目标miRNA及其前体表达的qPCR和改良Northern印迹技术,以及将修饰后miRNA作为药物的药代动力学评价技术。     

微小RNAs的3'端尿苷化和腺苷化

miRNA是转录后基因表达调节的重要分子,但目前对它们自身的调节机制还知之甚少.最近的研究发现,在很多生物中,miRNA的3'末端都可以无需模板的添加尿苷酸(尿苷化)或腺苷酸(腺苷化),这种修饰可以发生在miRNA的前体上,也可以发生在成熟的miRNA上,其作用不仅可以影响miRNA的生物合成,稳定性,靶向靶标mRNAs的效率,而且还可以作为损伤miRNA的质量控制机制,及其形成mRNAs的异构体,以提高miRNA的作用范围或更精细的发挥基因表达调节作用.越来越多的研究揭示:这种修饰具有miRNA、组织、生物发育阶段和疾病状况等特异性,而且还涉及很多人类的发病机制,如癌症.本文综述了miRNA的3'末端尿苷化或腺苷化的研究进展,并对这种机制的应用前景进行了展望.     

成骨不全症血清中骨相关microRNAs的初步筛查

旨在初步筛选出成骨不全症(Osteogenesis imperfecta,OI)患者血清中差异表达的骨相关microRNAs(miRNAs),通过探讨其在该疾病中的可能作用,为进一步研究成骨相关miRNA的功能及miRNA在成骨不全症诊断中的应用奠定基础。首先用geNorm和NormFinder等程序挑选出适于血清miRNAs定量检测的内参基因,然后利用实时荧光定量PCR技术对miRanda,Targetscan和Pictar软件以及文献报道筛选出的骨形成相关miRNAs进行定量检测,最后用配对t检验统计学方法筛查出差异表达的骨相关miRNAs。结果显示6个候选内参基因在不同年龄、性别和用药情况的成骨不全症患者和健康个体血清中的表达稳定性良好(表达稳定值M<1.5),后经标准化因子配对差异(Pairwise variations)分析确定最适内参数目为4个(配对差异值V4/5=0.133<0.15),分别是miR-16、Let-7a、snRNAU6、miR-92a。通过在16个成骨不全症患者以及8个健康对照个体的血清中进一步检测miR-16、Let-7a、snRNAU6和miR-92a,发现其表达稳定性依然良好(M<1.5)。对100余种骨相关miRNAs进行实时荧光定量检测,发现11种miRNAs在成骨不全症患者血清中有差异表达(P<0.05),并且生物信息学分析显示这些差异表达的miRNAs很可能在成骨不全症的发生发展中起重要作用。以上实验结果表明成骨不全症患者血清中存在多种差异表达的骨相关miRNAs,而且这些miRNAs很可能成为一种用于成骨不全症血清学检查及诊断的生物标志物。