具有中等毒性的马氏钳蝎神经毒素的纯化和初步晶体学…

运用柱层析技术对产自淅川和常德的马氏钳蝎毒素进行分离纯化,得到８种哺乳动物神经毒素。运用制备型等电聚焦电泳技术,对常德样品中具有中等毒性的蝎神经毒素进一步纯化,获得了高纯度样品。两个产地的蝎毒素ＢｍＫ５均已经成功地获得了大晶体。空间群均为Ｐ２１２１２１,晶胞参数分别为：ａ＝３８．４６埃,ｂ＝３７．２８埃,ｃ＝３６．９７埃;ａ＝３８．４４埃,ｂ＝３７．５５埃,ｃ＝３６．８３埃。对两个产地的晶体分别收     

北京师范大学生命科学学院（系）励耘学苑 风采人物

张宗炳（1914—1988） 昆虫生态学家。1949—1953年任北京师范大学生物学系教授;发表180余篇论文,出版20余本专著,主要有《昆虫毒理学》、《昆虫毒理学的新进展》等;科研成果《昆虫神经毒素的研究》获1988年国家教委科技进步二等奖。     

具有中等毒性的马氏钳蝎神经毒素的纯化和初步晶体学研究

运用柱层析技术对产自淅川和常德的马氏钳蝎毒素进行分离纯化,得到８种哺乳动物神经毒素。运用制备型等电聚焦电泳技术,对常德样品中具有中等毒性的蝎神经毒素（ＢｍＫ５）进一步纯化,获得了高纯度样品。两个产地的蝎毒素ＢｍＫ５均已经成功地获得了大晶体。空间群均为Ｐ２１２１２１,晶胞参数分别为：ａ＝３８．４６埃,ｂ＝３７．２８埃,ｃ＝３６．９７埃（淅川）;ａ＝３８．４４埃,ｂ＝３７．５５埃,ｃ＝３６．８３埃（常德）。对两个产地的晶体分别收集了２．１埃（淅川）和１．６２埃（常德）分辨率的衍射数据。     

神经肽Y免疫反应神经和细胞在大鼠颌下腺的分布

本研究应用免疫组织化学ＡＢＣ技术,观察了含神经肽Ｙ神经和细胞在大鼠颌下腺内的分布特点。结果显示：含神经肽Ｙ神经纤维主要走行于腺泡、导管及血管周围。颌下腺内神经节细胞和颗粒曲管细胞亦呈神经肽Ｙ免疫反应阳性。提示：大鼠颌下腺的腺体分泌和血液供应可能受神经肽Ｙ能神经调控。     

电鳐电器官的蝮蛇突触前神经毒素结合蛋白的一些结合性质

电鳐（Ｔｏｒｐｅｄｏｃａｌｉｆｏｒｎｉｃａ）的电器官是一种富含突触的组织．将这种电器官的粗制膜悬液与同位素１２５Ｉ标记的β－蝮蛇神经毒素进行结合实验,结果表明这种电器官中存在相对含量较高的毒素结合位点,Ｂｍａｘ为１１５０ｆｍｏｌ／ｍｇ,ＫＤ为２．８×１０－８ｍｏｌ／Ｌ．响尾蛇神经毒素和β－银环蛇神经毒素对其结合作用的抑制实验显示,前者与β－蝮蛇神经毒素有共同的结合位点,后者的作用位点则不同．提示β－蝮蛇神经毒素结合位点可能涉及一种新的参与突触前递质释放机制的功能蛋白     

家蚕滞育激素-性信息素合成激活肽基因表达的调节

滞育激素和性信息素合成激活肽是两个重要的昆虫神经肽,这两个神经肽由一个基因编码．利用分子杂交和ＲＴ－ＰＣＲ技术,确定了滞育激素－性信息素合成激活肽基因表达的调节不属于转录后的调节,推定为翻译后形成一个大的前体多肽再剪接为几个成熟的神经肽分子．     

神经毒素原性酪酸梭菌与E型肉毒梭菌毒素的精制及特性比较

对首次自Ｅ型肉毒中毒食品中分离到的一株神经毒素原性酪酸梭菌（ＬＣＬ１５５）所产生的神经毒素,同Ｅ型肉毒梭菌（Ｅ１５３）所产生的神经毒素进行了精制及特性比较,发现（１）两菌神经毒素的分子量,Ｎａｔｉｖｅ－ＰＡＧＥ测试均为３２０ｋＤａ;ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测试则均为１４７ｋＤａ,非毒性非血凝素部分均为１２８ｋＤａ;用胰蛋白酶激活神经毒素后发现两菌神经毒素均由分子量为１０３ｋＤａ的Ｈ链和４８ｋＤａ的Ｌ链组成。（２）两菌神经毒素柱层析图像基本一致,但在菌体毒素提取效果及精制效果诸方面,分离的酪酸梭菌却都较差。（３）胰蛋白酶激活试验表明：两菌神经毒素达到最大毒力所需激活时间不等。在相同温度下,分离的酪酸梭菌毒素只需５ｍｉｎ,而Ｅ型肉毒梭菌毒素却需３０ｍｉｎ,提示两菌神经毒素激活动力学上存在差异。（４）琼脂双扩散试验结果表明两菌神经毒素的抗原性是一致的,没有发现沉淀线呈交叉或部分交叉现象。     

雷氏大疣蛛毒素—Ⅱ的纯化与初步毒性研究

雷氏大疣蛛是我国最近鉴定的蜘蛛新种。雷氏大疣蛛毒素－Ⅱ就是以其粗毒为材料,利用阴、阳离子交换层析和反相HPLC分离得到并命名的一种新型神经毒素肽,根据质谱分析得知它的相对分子质量为3021．56;通过初步毒性研究,证明它是一个神经毒素。     

银环蛇神经毒素的分子克隆和功能表达(英文)

抽提银环蛇毒腺总ＲＮＡ,通过反转录ＰＣＲ技术扩增出其神经毒素ｃＤＮＡ,克隆并测定了全序列。银环蛇神经毒素的ｃＤＮＡ编码２１个氨基酸的信号肽和７４个氨基酸的成熟蛋白。该信号肽非常类似于短链神经毒素、κ－神经毒素和心脏毒素的信号肽。而成熟蛋白的氨基酸序列与从台湾产银环蛇中通过蛋白测序鉴定的α－ｂｕｎｇａｒｏｔｏｘｉｎ的氨基酸序列完全一样。此外,还克隆到该神经毒素缺失前体ｃＤＮＡ。利用麦芽糖结合蛋白融合     

肉毒神经毒素序列变异的研究进展

肉毒神经毒素是引起肉毒中毒的强烈毒素。肉毒梭状芽胞杆菌产生7种血清型的神经毒素(A~G)。随着分子生物学技术和计算机技术的发展和应用,对肉毒神经毒素的基因和蛋白序列变异的研究已经相当深入。基于这些变异,在各血清型中尚可被划分为不同的亚型。众多证据表明肉毒神经毒素亚型的变异可以影响单克隆抗体的亲和力和对毒素的中和能力。领会并应用这一理论对于肉毒神经毒素免疫学检测、临床治疗和疫苗研发是十分重要的。     

A型肉毒神经毒素理化及生物学特性研究

目的探究A型肉毒神经毒素的理化及生物学特性,为A型肉毒神经毒素制品的研制提供依据。方法采用SDS-PAGE、HPLC测定A型肉毒神经毒素的纯度;采用毛细管凝胶电泳分析其在非还原条件及还原条件下各组分的相对分子质量;采用等电点聚焦电泳测定其等电点;对其N-末端氨基酸序列进行测序,并将测序结果与NCBI blast数据库中A型肉毒梭菌Hall株的氨基酸序列作比对,确证其各组分的成分;对A型肉毒毒素复合物及A型肉毒神经毒素进行口服毒性分析,并对3批A型肉毒神经毒素原液和其半成品进行生物学稳定性研究。结果 A型肉毒神经毒素纯度99.00%;非还原条件下其相对分子质量约为152 000,N-末端氨基酸序列ALNDLQINVN,为完整的A型肉毒神经毒素;还原条件下,由相对分子质量约为101 000、N-末端氨基酸序列为ALNDLQINVN的重链和相对分子质量约为101 000、N-末端氨基酸序列为PFVNKQFNYK的轻链组成;等电点为4.91;口服A型肉毒神经毒素的小鼠LD50为1.50×107U/kg,是其复合物的7.9倍;3批A型肉毒神经毒素原液在2~8℃放置28 d生物学活性无下降,平均比活性为2.13×108U/mg,是其复合物的7.1倍;3批半成品在18~26℃放置28 d生物学活性无下降。结论 A型肉毒神经毒素纯度较高,非还原条件下为单链,还原条件下裂解为轻链和重链,其原液及其半成品的生物学稳定性较好。     

东亚钳蝎神经毒素在大肠杆菌中的表达

以山西风陵渡东亚钳蝎（ＢｕｔｈｕｓｍａｒｔｅｎｓｉＫａｒｓｃｈ）的尾腺总ＲＮＡ为模板,根据已知的蝎神经毒素保守氨基酸序列设计引物,利用ＰＣＲ技术,扩增并克隆了两个蝎神经毒素基因．序列分析表明,由两个基因导出的氨基酸序列（ＢｍＫＭｍ１和ＢｍＫＭｍ２）与已知的蝎神经毒素ＢｍＫⅠ、ＢｍＫⅡ、ＢｍＫⅢ、ＢｍＫＭ１、ＢｍＫＭ９有很高的同源性．将ＢｍＫＭｍ２基因重组到大肠杆菌分泌型表达载体ｐＥｘＳｅｃ１中进行表达．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ证明表达产物被分泌到细胞周间质及培养液中．经ＩｇＧ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ纯化后的蛋白质注射小白鼠表明表达产物有生物学活性     

神经肽拮抗剂

由于肽的分离纯化、结构分析、化学合成、放射免疫、组织化学定位以及重组DNA等技术的应用,已发现的神经肽的数目与日俱增;但其中多数神经肽的生理功能尚不清楚,原因之一是缺乏特异性的拮抗剂。在神经系统中,神经肽可能起神经递质或神经调节物的作用;在神经内分泌、旁分泌及内分泌系统,又可能起激素的作用。神经肽拮抗剂能在受体水平阻断神经肽的作用,因而可用来推测神经肽在生理及病理状态下的功能;它们又可用于神经肽受体性质的研究以及受体亚型的分型。它们可能发展成为新型的诊断药或治疗药。     

蛇神经毒素的研究进展

蛇毒是由许多种蛋白质、多肽、酶类以及其他小分子物质组成的混合物.在蛇毒中已经分离了许多种毒素分子,其中有一大类分子对哺乳动物的神经系统具有毒性效应,习惯上把这类分子成为蛇神经毒素.蛇神经毒素根据其作用位点的不同可以分为四大类:突触前蛇神经毒素、突触后蛇神经毒素、抗胆碱酯酶的蛇神经毒素和离子通道蛇神经毒素.许多蛇神经毒素已经分离纯化并进行了结构与功能的研究,几十近百种蛇神经毒素一级结构和空间结构已经得到测定.近几年来一些蛇神经毒素的基因文库以及cDNA文库已经构建出来,从中分离出的基因已经用于重组蛇神经毒素的生产研究.蛇神经毒素的分子结构与其功能具有较好的对应关系,即作用机制相同的毒素具有类似的空间结构.天然的蛇神经毒素以及重组的蛇神经毒素都已广泛应用于理论研究和一些临床应用.分离新的蛇神经毒素及其基因以及根据需要设计新的蛇神经毒素分子已成为该领域的热点,采用生物工程的方法规模生产蛇神经毒素也是当前及今后的研究方向.     

《海洋药物》：研究发现鱼翅藏“毒”或致痴呆

据美国《赫芬顿邮报》今晨报道，一项美国最新研究显示，制作鱼翅不仅让大量鲨鱼濒临绝种。而且还因为含有高浓度神经毒素。可能会导致痴呆。     

血清1-磷酸鞘氨醇、神经肽Y与冠状动脉临界病变的关系及对功能性心肌缺血的预测研究

摘要 目的：分析血清1-磷酸鞘氨醇、神经肽Y与冠状动脉（以下简称冠脉）临界病变的关系及对功能性心肌缺血的预测价值。方法：选择我院自2020年1月至2022年6月接诊的148例冠脉临界病变患者作为观察组,根据冠脉粥样硬化斑块易损性,分为易损斑块组（68例）和稳定斑块组（80例）;另选同期的148例非冠脉临界病变的体检者作为对照组。检测所有受试者血清1-磷酸鞘氨醇、神经肽Y水平,比较观察组与对照组、易损斑块组与稳定斑块组血清1-磷酸鞘氨醇、神经肽Y水平,使用Pearson相关性分析血清1-磷酸鞘氨醇、神经肽Y与Gensini评分的关系,通过受试者工作特征曲线（ROC）下面积（AUC）评价血清1-磷酸鞘氨醇联合神经肽Y对功能性心肌缺血的预测效能。结果：观察组血清1-磷酸鞘氨醇、神经肽Y水平均高于对照组（P＜0.05）;易损斑块组血清1-磷酸鞘氨醇、神经肽Y水平均高于稳定斑块组（P＜0.05）;经Pearson相关性分析,冠脉临界病变患者血清1-磷酸鞘氨醇、神经肽Y水平均与Gensini评分呈正相关（P＜0.05）;在148例冠脉临界病变患者中,发生功能性心肌缺血45例;功能性心肌缺血组血清1-磷酸鞘氨醇、神经肽Y水平均高于非功能性心肌缺血组（P＜0.05）;经ROC曲线分析,血清1-磷酸鞘氨醇联合神经肽Y预测冠状动脉临界病变患者发生功能性心肌缺血的AUC为0.928。结论：冠状动脉临界病变患者血清1-磷酸鞘氨醇、神经肽Y水平均明显升高,两者与病情严重程度密切相关,联合预测功能性心肌缺血的准确性较高,值得临床予以重视应用。     

中国对虾3种Ⅱ型CHH家族神经肽基因的克隆及序列分析

根据中国对虾蜕皮抑制激素的全长cDNA序列设计引物,以中国对虾基因组DNA为模板,采用PCR等技术分别得到3个扩增产物：NP1、NP2和NP3,长度分别是540bp、601bp和826bp。NP1和NP2均由2个外显子和1个内含子组成,NP3由3个外显子和2个内含子组成。序列分析表明,NP1、NP2和NP3是中国对虾Ⅱ型CHH家族神经肽的基因片段。NP1、NP2和NP3的外显子分别与斑节对虾的神经肽Pem-SGP-C2、Pem-SGP-C1及中国对虾FenchMIH的mRNA相似性最高,同源性分别为91．5％、92．8％、88．9％。由此可以推测NP3是中国对虾MIH的基因序列,NP1和NP2为新发现的两种中国对虾Ⅱ型CHH家族神经肽的基因片段。     

用快速蛋白液相色谱法(FPLC)精制肉毒毒素

<正> 在液体培养基中,肉毒梭菌神经毒素(NT)蛋白与非神经毒素蛋白紧密结合。在神经毒素精制中,分几步来精制这种稳定的复合物。人们早已熟知的结晶肉毒毒素就是该复合物,含有约20％(w/w)神经毒素。1965年到1970年间,我们相继用色谱精制法收获了>90％纯度的神经毒素。为了提高纯度,减少流速,洗脱,梯度斜率的变动性,并且得到我们已经使用的快速蛋白液相色谱法更具重复性的结果,对神经毒素的三种血清型进行了检查,将A、B、E型复合物交连在Momo Q柱上, pH值为7.5-8.0,0.02m(摩尔) Tris-HC1或 0.05M Tris-HC1缓冲液。将已交连的A、B和E型神经毒素用0.12,0.13,0.08MC1-线性梯度洗     

蝎神经毒素分子生物学研究的若干进展

从蝎粗毒中分离纯化得到的蝎神经毒素是一类具有特异生物活性的多肽物质。它们作为重要的工具物已被广泛地应用在神经生物科学相关靶离子通道受体的基础研究中。个别蝎神经毒素的分子作为未来新药研制和开发的模板和探针,已受到生物医学界的高度关注。本文综述了近几年来应用分子生物学的技术和概念研究蝎神经毒素的若干结果和进展。     

神经肽对体外培养人胚神经组织细胞生长发育的影响

本文成功地体外培养了人胚背根神经节和大脑皮层神经细胞,并首次通过它们研究了神经肽对种经组织细胞生长发育的影响。结果看出,培养液中加入神经肽后,背根神经节突起长度和密度增加;大脑皮层神经细胞存活数增加,分化神经元增多,胞体增大,突起增长,细胞生长加快,衰老减慢。超微结构观察表明,种经肽可增加细胞内的合成代谢和细胞间的相互连接,减少细胞变性损伤．本实验证实神经肽对神经组织具有种经营养作用,这为神经肽在临床上推广应用提供了实验依据。