磷脂酶Dβ在拟南芥低温信号中的转导作用

磷脂酶D(PLD)不仅是植物中一类主要的磷脂水解酶,而且是一类重要的跨膜信号转导酶类.PLD的磷脂降解功能和信号转导功能均影响植物的抗冻性.本研究以PLDβ基因被敲除的拟南芥突变体及其野生型植株为材料,进行低温驯化和冻害胁迫处理,并分析其作用途径.结果表明,PLDβ基因介导低温信号转导作用,参与渗透调节途径中脯氨酸的调控和抗氧化系统中过氧化氢酶(CAT)活性的调控,并且与低温信号激素ABA不在同一条信号转导途径.本研究为探索通过调控PLD的活性提高植物抗冻性提供了新的途径,并为深入揭示植物的抗冻机理以及磷脂信号转导机制提供实验支持.     

磷脂酶Dα在拟南芥低温驯化过程中的作用途径分析

本研究对低温驯化和未经低温驯化的磷脂酶α基因敲除突变体与野生型拟南芥植株进行冻害胁迫处理后,通过观测植株表型和膜离子渗漏率的变化,鉴定两种基因型植株的抗冻性.结果发现,低温驯化后,PLDα敲除突变体的抗冻性明显低于野生型,表明PLDα参与植物的低温驯化过程.对其作用途径进行分析发现,PLDα不参与低温驯化过程中ABA信号转导作用,也没有参与SOD、CAT和POD等3种抗氧化酶活性的调节,但是参与低温驯化过程中膜稳定性调节和渗透调节过程.     

磷脂酶C-γ2与信号转导

细胞间信息传递及细胞外信号对靶细胞的调控,多年来一直是生物学和医学界研究的焦点。随着Ｃａ２＋和二酰基甘油（ｄｉａｃｙｌｇｌｙ－ｃｅｒｏｌ,ＤＡＧ）第二信使地位的确定,对磷脂酶Ｃ（ＰＬＣ）的研究引起了人们的关注。ＰＬＣ可水解磷脂酰肌醇４,５－二磷酸（ｐｈｏｓ－ｐｈａｔｉｄｙｌｉｎｏｓｉｔｏｌ４,５－ｂｉｓｐｈｏｓｐｈａｔｅ,ＰＩＰ２）产生肌醇１,４,５－三磷酸（ｉｎｏｓｉｔｏｌ１,４,５－ｔｒｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ,ＩＰ３）和ＤＡＧ。ＩＰ３可导致细胞内储存Ｃａ２＋的释放。因此,ＰＬＣ处于Ｃａ２＋和Ｄ…     

磷脂酶Dδ参与植物的低温驯化过程

对经低温驯化和未经低温驯化的磷脂酶Dδ（PLDδ）基因敲除突变体与野生型植株进行冻害胁迫处理后,比较2种基因型植株的抗冻性。结果发现,经低温驯化的PLDδ敲除突变体的抗冻性明显低于野生型,而未经低温驯化的PLD礅除突变体与野生型的抗冻性没有显著差异,表明PLDδ参与植物的低温驯化过程。对PLDδ的作用途径进行分析,发现PLDδ在低温驯化过程中不参与抗氧化酶活性的调节,对脯氨酸和可溶性糖的积累起负调节作用,但是参与低温信号转导物质ABA诱导抗冻性的过程。     

植物中的磷脂酶D信号转导

文章介绍磷脂酶D（PLD）跨膜信号转导作用的研究进展。     

磷脂酶Dδ参与植物的低温驯化过程

对经低温驯化和未经低温驯化的磷脂酶Dδ (PLDδ)基因敲除突变体与野生型植株进行冻害胁迫处理后, 比较2种基因型植株的抗冻性。结果发现, 经低温驯化的PLDδ敲除突变体的抗冻性明显低于野生型, 而未经低温驯化的PLDδ敲除突变体与野生型的抗冻性没有显著差异, 表明PLDδ参与植物的低温驯化过程。对PLDδ的作用途径进行分析, 发现PLDδ在低温驯化过程中不参与抗氧化酶活性的调节, 对脯氨酸和可溶性糖的积累起负调节作用, 但是参与低温信号转导物质ABA诱导抗冻性的过程。     

低温胁迫下脱落酸对线粒体膜磷脂酶D活性的影响

高山离子芥(Choraspora bungeana)是一种稀有高山冰缘植物,其生活环境具有低温、强紫外线等胁迫因子。PLD在膜磷脂降解及磷脂信号转导过程中发挥着重要作用,但其活性往往受到多种因素的影响。该研究以高山离子芥试管苗为材料,研究了4℃、0℃和-4℃胁迫下,ABA对高山离子芥试管苗叶中线粒体膜结合态PLD活性的影响。结果表明:10,50和100μmol·L~(-1)脱落酸(ABA)处理高山离子芥后,线粒体膜结合态PLD活性均较未添加ABA的处理组线粒体膜结合态PLD活性高,其中以50μmol·L~(-1) ABA对离子芥叶中线粒体膜结合态PLD活性的促进作用最为显著;外施0.3 mmol·L~(-1)的ABA合成抑制剂钨酸钠处理高山离子芥后,线粒体膜结合态PLD活性较对照组线粒体膜结合态PLD活性降低;在50μmol·L~(-1) ABA+5 mmol·L~(-1) EGTA处理组中,高山离子芥叶中线粒体膜结合态PLD活性低于未添加EGTA处理组线粒体膜结合态PLD活性;在0.3 mmol·L~(-1)钨酸钠+10 mmol·L~(-1)CaCl_2处理组中,高山离子芥叶中线粒体膜结合态PLD活性高于未添加CaCl_2处理组线粒体膜结合态PLD活性。由此推测,低温胁迫下ABA可能通过Ca~(2+)介导影响高山离子芥叶中线粒体膜结合态PLD的活性。     

反义磷脂酶Dγ基因转化小麦的研究

目的:获得抗寒、耐盐等能力增强的小麦新种质或新品种。方法:利用穗茎注射法将含有反义磷脂酶Dγ基因(PLDγ)的根癌农杆菌菌液注入到春小麦富硒乌麦旗叶鞘内,T1代经田间表型选择筛选到10株变异株,通过特异PCR扩增和Southern杂交技术对获得的变异株进行分子检测,并对转基因植株进行耐盐性鉴定。结果:变异株均扩增出大小为430bp的目的片段,Southern印迹结果与其一致,证实反义PLDγ基因已经整合到小麦的核基因组中;6株转基因植株的抗寒力比对照显著增强,4株的熟期提早3～4d;在室内耐盐性筛选中,2株变异植株耐NaCl的能力比对照有不同程度的提高。结论:反义PLDγ基因在提高小麦的抗寒、耐盐性上具有很大的应用价值。     

精子顶体反应期间磷脂酶A2的信号转导及其调节

磷脂酶A2是精子重要的脂解酶类,包括多种不同亚型。在精子顶体反应期间磷脂酶A2受天然激动剂卵透明带、孕酮和γ-氨基丁酸激活,引起胞外Ca2 内流,使磷脂水解为花生四烯酸和溶血磷脂酰胆碱,从而促进膜的融合即顶体反应。天然激动剂引起PLA2激活受Gi蛋白、甘油二酯、蛋白激酶A、蛋白激酶C、促分裂原蛋白激酶和活性氧等多条信号通路的调节,此外,磷脂酶A2与特异性磷酯酶C之间可以发生信号串话。研究PLA2的信号通路为了解受精机制、男性不育之病因和开发男性避孕药提供依据。     

磷脂酶D与病原微生物感染

磷脂酶D(phospholipase D,PLD)普遍存在于细菌,真菌以及哺乳动物中.在病原微生物中,PLD作为毒力决定因子在减数分裂、孢子形成等过程中起作用;在哺乳动物细胞中,PLD主要在胞膜转运、调节有丝分裂和细胞肌动蛋白骨架等一些信号转导中起作用.在病原菌感染宿主细胞的过程中,病原体和宿主细胞的PLD都被激活并发生级联反应,病原菌PLD可调节自身肌动蛋白丝的聚合和重排,并引起宿主细胞局部肌动蛋白丝的集聚,诱导宿主细胞对其吞噬.深入探讨PLD激活对感染发生的调控作用对透彻理解病原菌感染宿主细胞的分子机制具有重要意义.     

反义磷脂酶Dγ(Anti-PLDγ)基因转化美洲黑杨G2的研究

通过农杆菌介导法将反义磷脂酶DT(Anti-PLDγ)基因转入美洲黑杨G2中以提高其耐盐性。本研究建立了美洲黑杨G2组培再生体系,确立了美洲黑杨G2叶片分化最适宜培养基和生根培养基,进行了卡那霉素(选择性抗生素)敏感性试验,改良了传统的农杆菌介导转化法。经诱导不定芽及生根阶段卡那霉素(选择性抗生素)连续筛选,获得了21株卡那霉素抗性植株,抗性植株经PCR及PCR-Southern杂交检测,有13株均呈阳性,证明Anti-PLDγ基因成功整合到美洲黑杨G2基因组中。耐盐性实验表明,4株转基因植株抗NaCl能力比对照有不同程度提高。     

PPAR-γ作用及其相关信号转导途径

过氧化物酶增殖物激活受体(peroxisomeproliferater-activatedreceptor,PPAR)是一类配体激活的核转录因子超家族成员,包括PPAR-α、PPAR-β/δ和PPAR-γ三种表型,其中以PPAR-γ的研究最为深入。PPAR-γ通过JAK-STAT、激活蛋白-1(AP-1)、NF-κB、活化T细胞核因子信号通路(NFAT)来抑制炎症反应;通过抑制泡沫细胞(foamcell)的分化、炎症反应以及细胞增殖来抑制动脉粥样硬化的发生发展;通过磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)、瘦素、脂链素等信号通路来参与糖稳态的调节;通过细胞周期的调控来影响肿瘤生长;参与脂肪细胞分化并与肥胖密切相关。明确这些相关信号通路以及相关细胞因子的作用,可对相关疾病机制及防治进一步提供有力依据和干预途径。     

农杆菌介导法获得转反义磷脂酶Dγ基因大麦

在含有反义磷脂酶Dγ基因（PLDγ）的根癌农杆菌介导下,以自然状态下生长的大麦作受体进行转基因实验。对获得的T1代种子进行抗生素筛选、PCR和PCR—Southern杂交鉴定,证实反义PLDγ基因已整合到大麦基因组中。通过对转基因植株的耐盐性鉴定,获得了一批可耐0．7％NaCl的植株。     

磷脂酶D(PLD)基因的结构、表达及其表达产物在信号转导中的作用

磷脂酶D(PLDEC 3 .1 .4.4)水解磷脂 (PL) ,磷脂构成生物膜的骨架 ,磷脂酶的激活不仅对细胞的结构和稳定性有很重要的作用 ,而且调控许多重要的细胞生理功能 ,例如PLD在信号转导、小泡运输、有丝分裂、激素作用的发挥、细胞骨架组装、防御反应以及种子萌发和衰老过程中都起重要作用。近年来它在跨膜信号转导中的重要作用 ,越来越引起人们的重视 ,成为新的研究热点。介绍了磷脂酶基因的结构特点、亚细胞定位、表达的激活抑制以及其表达产物作为胞内信号分子在植物信号转导中的重要作用。     

磷脂酶D（PLD）基因的结构、表达及其表达产物在信号转导中的作用

磷脂酶D(PLD EC 3.1.4.4)水解磷脂(PL),磷脂构成生物膜的骨架, 磷脂酶的激活不仅对细胞的结构和稳定性有很重要的作用,而且调控许多重要的细胞生理功能,例如PLD在信号转导、小泡运输、有丝分裂 、激素作用的发挥、细胞骨架组装、防御反应以及种子萌发和衰老过程中都起重要作用。近年来它在跨膜信号转导中的重要作用，越来越引起人们的重视，成为新的研究热点。介绍了磷脂酶基因的结构特点、亚细胞定位、表达的激活抑制以及其表达产物作为胞内信号分子在植物信号转导中的重要作用。     

拟南芥LTP2参与乙烯信号转导调控的初步研究

以野生型拟南芥(Col-0)与脂质转运蛋白(LTP2)突变体ltp2为试验材料,初步研究了LTP2对乙烯信号转导的影响.采用乙烯前体1-氨基环丙烷羧酸(ACC)处理野生型与突变体材料,结果表明,LTP2基因的表达受乙烯诱导,"三重反应"的表型显示突变体ltp2对乙烯的敏感性弱于野生型.采用荧光定量PCR(Real-ti...     

磷脂酶C-γ2在鼠成纤维细胞株克隆形成中的作用

通过对敲除磷脂酶C-γ1基因的细胞株及其转染磷脂酶C-γ2基因后克隆形成能力的统计学分析揭示出磷脂酶C-γ2有显著的促克隆形成作用,磷脂酶C-γ1作用微小,但与磷脂酶C-γ2有协同作用,提示磷脂酶C-γ2与γ1在功能上有一定的交互性、冗余性,但不可相互取代.     

磷脂酶C—γ2在鼠成纤维细胞株克隆形成中的作用

通过对敲除磷脂酶C－γ1基因的细胞株及其转染磷脂酶C－γ2基因后克隆形成能力的统计学分析揭示出磷脂酶C－γ2有显著的促克隆形成作用,磷脂酶C－γ1作用微小,但与磷脂酶C－γ2有协同作用,提示磷脂酶C－γ2与γ1有功能上有一定的交互性、冗余性,但不可相互取代。     

磷脂酶C-γ_2对鼠成纤维细胞株迁移能力的影响

通过对敲除磷脂酶 C-γ1 基因的鼠成纤维细胞株及其转染磷脂酶 C-γ2 基因后的迁移指标的统计学分析 ,揭示出磷脂酶 C-γ1 和γ2 在 PDGF引起的细胞迁移信号传导中均有正调控作用 ,前者作用显著而后者作用微小 ,并且仅在磷脂酶 C-γ1 功能缺失的条件下方可发挥出来 ;同时进一步证明敲除磷脂酶 C-γ1 基因的细胞株中 ,未见出现磷脂酶 C-γ2 的代偿 ,说明磷脂酶 C-γ2 与 γ1 在功能上不可相互取代 ,反映了一种信号可由多种途径传导即细胞信号传导的交互性、冗余性     

磷脂酶D的细胞信号转导作用

磷脂酶D(PLD)是一类重要的跨膜信号转导酶类.分别由一个基因家族的不同成员编码.植物PLD的总体域结构相似,只是不同类型之间在某些单元上有重要差异.它们各具独特的生物化学特性.不同的PLD在不同的胁迫类型启动的特定的细胞过程中执行独特的细胞信号转导功能.PLD与其它磷脂酶及Ca2 信使之间有交互作用,形成复杂的信号转导网络.这一网络在不同植物种类、器官、组织和细胞类型中表现出特异性.文章最后讨论了PLD研究中有待揭示的问题并展望了今后的发展方向.