中国三种柱锈菌在酶蛋白墓因水平上的群体遗传结构

从我国不同地区不同松树上采集代表茶生柱锈菌Cronartiumribicola、柔软柱锈菌Cflaccidum及栎柱锈菌C.quercuum的134个菌株的孢子,用多位点酶电泳法分析了其3种酶系统6个基因位点上的群体遗传结构。结果显示3种柱锈菌间酶蛋白基因的流动已绝少发生而表现为生殖隔离,从遗传背景上支持了这3个种的成立。我国东北地区的C.ribicola群体遗传性质高度均一（平均遗传杂合度He＝0．007）,暗示本菌侵入并扩散于该地区的历史很短。来自不同守主的C.flaccidum和C．quercuum菌株,均以樟子松上的菌株遗传变异水平最高（He分别为0．154和0.160）,据此推测它们可能最先起源于樟子松。上述随寄主而异的群体遗传差异可能是寄生专化性分化在基因水平上的反映。     

中国三种柱锈菌在酶蛋白基因水平上的群体遗传结构

从我国不同地区不同松树上采集代表茶藨生柱锈菌 Cronartium ribicola、柔软柱锈菌C. flaccidum 及栎柱锈菌 C. quercuum 的134个菌株的锈孢子,用多位点酶电泳法分析了其3种酶系统6个基因位点上的群体遗传结构。结果显示3种柱锈菌间酶蛋白基因的流动已绝少发生而表现为生殖隔离,从遗传背景上支持了这3个种的成立。我国东北地区的C. ribicola 群体遗传性质高度均一(平均遗传杂合度He=0.007),暗示本菌侵入并扩散于该地区的历史很短。来自不同寄主的C. flaccidum 和C. quercuum 菌株,均以樟子松上的菌株遗传变异水平最高(He分别为0.154和0.160),据此推测它们可能最先起源于棒子松。上述随寄主而异的群 体遗传差异可能是寄生专化性分化在基因水平上的反映。     

苔草属植物柄锈菌国产种的补充记载

苔草属植物柄锈菌３个新种和２个中国新记录种,它们是：寄生在点叶苔草ＣａｒｅｘｈａｎｃｏｃｋｉａｎａＭａｘｉｍ．上的点叶苔草柄锈菌（新种）Ｐｕｃｃｉｎｉａｃａｒｉｃｉｓ－ｈａｎｃｏｃｋｉａｎａｅＪ．Ｙ．Ｚｈａｎｇ＆Ｓ．Ｘ．Ｗｅｉｓｐ．ｎｏｖ,寄生在十字苔草ＣａｒｅｘｃｒｕｃｉａｔａＷａｈｌｅｎｂ．上的海南柄锈菌（新种）ＰｕｃｃｉｎｉａａｈａｉｎａｎｅｎｓｉｓＪ．Ｙ．Ｚｈｕａｎｇ＆Ｓ．ＸＷｅｉｓｐ．ｎ     

青藏高原东缘的锈菌资源VI.柄锈菌属二新种

采自四川西部的二个柄锈菌新种,即寄生在小檗属Ｂｅｒｂｅｒｉｓ ｓｐ．上的岷山柄锈菌Ｐｕｃｃｉｎｉａ ｍｉｎｓｈａｎｅｎｓｉｓ Ｊ．Ｙ．Ｚｈｕａｎｇ ＆ Ｓ．Ｘ． Ｗｅｉ和寄生在大箭竹Ｓｉｎａｒｕｎｄｉｎａｒｉａ ｃｈｕｎｇｉｉ（Ｋｅｎｇ）Ｋｅｎｇ ｆ．上的箭竹生柄锈菌Ｐｕｃｃｉｎｉａ ｓｉｎａｒｕｎｄｉｎａｒｉｉｃｏｌａ Ｊ．Ｙ．Ｚｈｕａｎｇ ＆ Ｓ．Ｘ． Ｗｅｉ。文中对新种进行了拉丁文描述并作了     

苍术（Atractybeslancea（Thunb．）DC．）种内遗传多样性分析

分析了苍术（Ａｔｒａｃｔｙｌｏｄｅｓｌａｎｄｅａ（Ｔｈｕｎｂ．）ＤＣ．）５种等位酶（ＭＤＨ,ＧＤＨ,ＰＰＯ,ＳＯＤ,ＰＥＲ）１２个位点上２５个等位基因的分化特征。结果表明：群体内多态位点比例平均为０．６１,每个位点的平均杂合率为０．２６,每个位点发现的平均等位基因数为１．７８。苍术种内基因多样性的８６％产生在群体内,群体间分化的明显效果为１４％。所有配对组合,群体间的平均遗传距离是０．１１,遗传同一性是０．９０。说明苍术种内变异很大。同时探讨茅苍术的分类位置,认为茅苍术不是苍术和白术的杂交种。     

大麦与纤毛鹅观草属间杂种F5和BC1F4的同工酶研究

对栽培大麦（ＨｏｒｄｅｕｍｖｕｌｇａｒｅＬ．品种“Ａｒｕｐｏ”）与纤毛鹅观草（Ｒｏｅｇｎｅｒｉａｃｉｌｉａｒｉｓ（Ｔｒｉｎ．）Ｎｅｖｓｋｉ）属间杂种后代Ｆ５和回交后代ＢＣ１Ｆ４（以“Ａｒｕｐｏ”作回交亲本）的不同类型株系与其双亲的幼根、幼芽、幼穗、幼嫩籽粒分别进行了酯酶、过氧化物酶同工酶分析。结果Ｆ５和ＢＣ１Ｆ４各株系的酯酶同工酶、过氧化物酶同工酶酶谱具有母本“Ａｒｕｐｏ”全部或绝大多数酶带,父本Ｒ．ｃｉｌｉａｒｉｓ的１～３条酶带和数量不等的双亲所没有的新酶带,也出现酶带的减少。结果表明,纤毛鹅观草的遗传物质已稳定地遗传给了其自交和回交后代。酶谱变异与植株习性出现一定程度的关联。由于在不同时期内结构基因的表达起不同作用,因此,在用同工酶分析法鉴定易位系时,最好不同的器官采用不同的酶类或一种同工酶多时期连续分析。     

板栗群体的遗传多样性及人工选择的影响

利用水平板淀粉凝胶电泳技术对板栗９个群体１１个种同工酶系统的１２个酶位点进行分析,结果表明板栗（Ｃａｓｔａｎｅａｍｏｌｉｓｉｎａ）为多态性物种,遗传变异水平较高,其多态位百分率为７１．３％,每个位点的等位基因平均数为２．２７,平均期望杂合值为０．３４６;总的基因多样性中,８９．３％发生于群体内,各群体之间的遗传距离为０．０１０～０．１７７;对各等位基因频率进行ＰＣＡ分析,筛选出较合适的基因标记位点及构建了板栗遗传结构的空间变异模式。在综合前人研究的基础上,初步探讨了人工选择对板栗遗传多样性的影响,初步推测出西南为板栗遗传多样性中心     

秦岭的锈菌（续Ⅱ）

采自秦岭林区的锈菌３４属２２８种,其中有６个新种：槭锈孢锈Ａｅｃｉｄｉｕｍ ａｃｅｒｉｓ、糙苏鞘锈Ｃｏｌｅｏｓｐｏｒｉｕｍ ｐｈｌｏｍｉｄｉｓ、秦岭栅锈Ｍｅｌａｍｐｓｏｒａ ｔｓｉｎｌｉｎｇｅｎｓｉｓ、荩草生柄锈Ｐｕｃｃｉｎｉａ ａｒｔｈｒａｘｏｎｉｃｏｌａ、冠毛草柄锈Ｐｕｃｃｉａｎｉａ ｓｔｅｐｈａｎａｃｈｎｅｓ和头状杜鹃夏孢锈Ｕｒｅｄｏ ｒｈｏｄｏｄｅｎｄｒｉ－ｃａｐｉａｔｉ;中国锈菌新记录１     

D.radiodurans CatB基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

通过生物信息学方法从耐辐射奇球菌（Ｄ．ｒａｄｉｏｄｕｒａｎｓ）全基因组居库中查鼠并克隆了编码过氧化氢酶（Ｃａｒｔａｌａｓｅ,Ｃａｔ）的１６１１ｂｐ长ＣａｔＢ基因,将ＣａｔＢ基因连人ｐＫＫ２２３－３表达载体,转化Ｃａｔ酶链陷型大肠杆菌（Ｅ．ｃｏｌｉ ＵＭ２）。转化菌裂解液ＰＡＧＥ酶活性染色分析实物具有Ｃａｔ酶活性,电泳过移位置与ＣａｔＢ位置相符。Ｄ．ｒａｄｉｏｄｕｒａｎｓ ＣａｔＢ基因的表达可使Ｅ．     

谷子核酮糖1,5—二磷酸羧化加氧酶大亚基基因的核苷酸序列

谷子（Ｓｅｔａｒｉａ ｉｔａｌｉｃａ）叶绿体ＤＮＡ 含有ｒｂｃＬ基因的３．０ ｋｂ Ｂｇｌ Ⅱ＋ ＸｂａⅠ酶切片段被克隆到ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ ＳＫ （－ ）质粒载体上,并构建了该基因的限制性酶切图谱,测定了该基因的１９９０ ｂｐ 全序列。其中基因的编码区长１４３１ ｂｐ,共编码４７６ 个氨基酸,推测其分子量为５２６７９ Ｄ。其３８９ ｂｐ 的５′上游区含有类似于原核生物的－ １０ ｂｏｘ、－ ３５ ｂｏｘ 和ＳＤ序列。其１７０ ｂｐ ３′下游区含有３ 个茎环结构。对Ｃ４ 植物和Ｃ３ 植物中的ｒｂｃＬ基因序列进行比较,表明在编码区、启动区和３′下游区没有差别。由此认为Ｃ４ 植物中ｒｂｃＬ基因的细胞特异性表达与其序列无关     

我国担子菌类热带种新知

近来在川、滇採 到和鉴定了担子菌的三个新种：金囊体刺管牛肝菌Ｔｕｂｏｓａｅｔａ ａｕｒｅｏｃｙｓｔｉｓ Ｍ．Ｚａｎｇ（牛肝菌科 Ｂｏｌｅｔａｃｅａｅ）、石栎假脐菇 Ｔｕｂａｒｉａ　ｌｉｔｈｏｃａｒｐｉｃｏｌａ　 Ｍ． Ｚａｎｇ（锈伞科 Ｃｒｅｐｉｄｏｔａｃｅａｅ）和竹生墨伞 Ｃｏｐｒｉｎｕｓ ｂａｍｂｕｓｉｃｏｌａ 　Ｍ． Ｚａｎｇ（伞菌科 Ａｇａｒｉｃａｃｅａｅ）。刺管牛肝菌属 Ｔｕｂｏｓａｅｔａ为典型热带属,为我国新记录。     

环状芽孢杆菌C-2几丁酶基因的克隆

环状芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｕｓｃｉｒｃｕｌａｎｓ）Ｃ２总ＤＮＡ经ＰｓｔＩ部分酶切后分离２～１０ｋｂ的片段,插入质粒ｐＵＣ１９的ＰｓｔＩ位点,转化大肠杆菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ）,利用几丁质平板从约８０００个重组子中筛选到一个几丁酶基因阳性克隆（命名为ｐＣＨＴ１）。用１２种限制酶对重组质粒进行的酶切分析表明,重组质粒中的插入片段长３０ｋｂ,其中各有一个ＫｐｎＩ,ＳａｃＩ和ＳｓｐＩ位点。把该克隆片段反向插入ｐＵＣ１９的ＰｓｔＩ位点所得到的重组子同样具有几丁酶基因表达活性,说明此片段含有一个完整的几丁酶基因,其自身的启动子能被大肠杆菌转录系统所识别。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交证实了该片段来自于Ｂ．ｃｉｒｃｕｌａｎｓＣ２基因组,且以单拷贝形式存在,它不能与来自于其它７株几丁酶产生菌的总ＤＮＡ杂交。     

两类木蹄层孔菌在酶蛋白水平上的遗传分化

木蹄层孔菌（Ｆｊｏｍｅｓ　ｆｏｍｅｎｔａｒｉｕｓ）在中国东北和日本存在子实体形态不同、寄主范围明显有别的两个类型：小型和大型。用多位点分析方法研究了两者间的遗传分化状况。从两类４１个菌株的４种酶系统中检测出９个基因位点,其中８个位点上的绝大多数酶谱型都不为两者所共有,显示两个类型间的基因交流已极少发生。根据酶谱型频率得出两者间的遗传距离Ｄ＝０．９６５,属于典型的种间遗传分化。上述酶基因分化证据结合子实体形态的显著差异,提示两类木蹄层孔菌是各自独立的种。两个类型的群体在遗传多样性参数上无显著差异,可能暗示两者在起源演化上的同步性。酯酶系统有２个位点上的酶谱为不同类型所特有且稳定而清晰,可作为分子标记用于两类木蹄层孔菌的无子实体鉴定。     

巨大芽孢杆菌的青霉素酰化酶基因在大肠杆菌中的克隆 …

从巨大芽孢杆菌ＣＡ４０９８的基因组中,通过ＰＣＲ方法扩增青霉素酰化酶（ｐｇａ）基因,克隆到ｐＫＫ２２３－３质粒中,在Ｅ．ｃｏｌｉＨＢ１０１中得到表达。同时,测定了ｐｇａ基因的全部序列,推出氨基酸序列,再与不同菌种来源的青霉素酰化酶的氨基酸序列进行比较,表明它们的序列有一定的保守性,尤其是活性部位的保守性更强。     

GL—7—ACA酰化酶在大肠杆菌中的分泌表达

利用来自假单胞菌的ＧＬ－７－ＡＣＡ酰化酶的信号肽和表达元件基因片段构建了ＧＬ－０７－ＡＣＡ酰化酶的分泌型高表达质粒ｐＴｒｃＣＡ１Ｓ和ｐＫＫＣＡ１Ｓ,其中ｐＴｒｃＣＡ１Ｓ为ＩＰＴＧ诱导型质粒,ｐＫＫＣＡ１Ｓ为组成型质粒。ｐＴｒｃＣＡ１Ｓ和ｐＫＫＣＡ１Ｓ转入受体菌ＴＧ１中都可高表达ＧＬ－７－ＡＣＡ酰化酶基因并将表达产物转运到周质空间,完整细胞酰楷酶比活力分别为２３．９单位每克菌体和１８．３单位每克菌体     

巨大芽孢杆菌的青霉素酰化酶基因在大肠杆菌中的克隆和表达(英文)

从巨大芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｕｓｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）ＣＡ４０９８的基因组中,通过ＰＣＲ方法扩增青霉素酰化酶（ｐｇａ）基因,克隆到ｐＫＫ２２３－３质粒中,在Ｅ．ｃｏｌｉＨＢ１０１中得到表达。同时,测定了ｐｇａ基因的全部序列,推出氨基酸序列,再与不同菌种来源的青霉素酰化酶的氨基酸序列进行比较,表明它们的序列有一定的保守性,尤其是活性部位的保守性更强。     

螅状独缩虫(Cachesium polypinum)遗传多样性的RAPD分析

用随机扩增多态ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）技术对武汉的汉口（ＣＰ－１）、汉阳（ＣＰ－２）和武昌（ＣＰ－３）三个地区缘毛类的螅状独缩虫（Ｃａｃｈｅｓｉｕｍ ｐｏｌｙｐｉｎｕｍ）进行了遗传多样性分析。结果表明：这种动物存在广泛的变异,三个地域群体之间的遗传相似度为０．６５２２－０．７３８５（平均值为０．６９２１）,各群体之间遗传相似度大小依次为：ＣＰ－２－ＣＰ－３〉ＣＰ－１－ＣＰ－２〉ＣＰ－１－ＣＰ－３。本文对     

辣根过氧化物酶同功酶C基因克隆及其在大肠杆菌中的表达

无论从应用还是从理论研究角度,辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）是一种非常重要的酶．ＨＲＰ基因克隆与表达将有利于更深入研究ＨＲＰ的结构与功能．利用反转录ＰＣＲ从天然植物辣根中分离和克隆编码辣根过氧化物酶同功酶Ｃ（ＨＲＰ－Ｃ）一个ｃＤＮＡ,并测定其序列．结果发现,从基因推导出的氨基酸序列与Ｗｅｌｉｎｄｅｒ报道的辣根过氧化物酶序列有９０．６％的同源性．将该基因连接到表达载体ｐＥＴ－２４ｂ上,利用抗ＨＲＰ多克隆抗体进行Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ,检测有少量目标产物表达．在诱导表达过程中,没有发现细菌生长受抑制或受明显的毒害     

CS3纤毛抗原表达调控机理的研究

ＣＳ３是某些肠毒素大肠杆菌菌体表面上的多聚物,它能使病原菌粘附于宿主的小肠上皮细胞上,是致病的重要因素．为了探索ＣＳ３菌毛抗原基因的表达调控机制,根据ＣＳ３亚基结构基因的核苷酸序列分析表明,在其翻译起始位点的上游存在着ｒｂｓ位点及原核启动子的－１０区和－３５区ＤＮＡ序列．采用基因重组技术将ＣＳ３结构基因上游１２０ｂｐ的ＤＮＡ片段亚克隆进缺乏启动子而只含报告基因ｌａｃＺ的质粒ｐＣＢ２６７中．凝胶滞留和启动报告基因表达的实验证明了ＣＳ３亚基结构基因具有自身的启动子（Ｐｓ）．将该启动子上游区域不同长度的核苷酸片段克隆进ｐＣＢ２６７中,报告基因表达结果表明ＣＳ３结构基因的表达受其上游区域的抑制．核苷酸序列分析发现,在Ｐｓ－３５区上游５５０ｂｐ和８４０ｂｐ处各存在一个富Ａ－Ｔ簇．结合原核启动子的一般作用规律推知,ＣＳ３的表达可能受ＤＮＡ结合蛋白型的正向调节因子的作用．用ＣＦＡ／１菌毛抗原基因的正向调节基因ｃｆａＤ对ＣＳ３基因进行的互补表达试验表明ｃｆａＤ基因不仅可消除上游区对Ｐｓ的抑制,而且可大幅度地提高Ｐｓ的启动能力．在分析表达调控的基础上获得ＣＳ３重组高效表达．同时提出了其表达调控模型．     

陇南地区不同海拔区域内小麦条锈菌群体遗传多样性的分析

小麦条锈病是世界范围内小麦上最重要的流行性病害之一,可造成严重的产量损失。陇南地区是我国小麦条锈菌主要越夏易变区和新小种发源地,了解该地区不同海拔高度区域内条锈菌遗传多样性有重要意义。本研究采用TP-M13-SSR荧光标记技术对11个种群330个小麦条锈菌分离株基因组DNA进行了SSR标记分析。不同海拔区域的条锈菌遗传多样性有明显的差异,高山区的遗传多样性比较丰富,半山区次之,川道区相对比较低。不同生态区域内,小麦条锈菌群体遗传分化程度不同,高山区和半山区遗传分化程度大,基因流小,川道区群体遗传分化程度比较小,基因流大。来自不同海拔区域的菌系具有相同的基因型,这一结果从分子水平证明了在陇南地区小麦条锈菌在山区与川地之间存在广泛的菌源交流,可就地完成周年循环。